全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 11 期 2011 年 11 月
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醉香含笑树皮挥发性成分GC-MS分析及其对HepG2细胞体外生长抑制作用
宋晓凯 1*，陆春良 2，胡 堃 1，翁晓艳 1，金海洋 1，陈赛娟 1
1. 淮海工学院化工学院，江苏 连云港 222005
2. 扬州大学 测试中心，江苏 扬州 225009
摘 要：目的 分析醉香含笑树皮乙醇总提取物（EBMM）的挥发性成分，并考察其对人肝肿瘤 HepG2 细胞的体外生长抑
制作用。方法 水蒸气蒸馏法提取 EBMM 的挥发性成分，采用 GC-MS 分析，并用峰面积归一化法测定各成分相对质量分
数。采用 MTT 方法检测 75、100、200、300、400 μg/mL EBMM 对 HepG2 细胞体外生长抑制作用。结果 共检出 54 个色
谱峰，确定了其中 34 种化合物，占挥发性成分总量的 67.73%。EBMM 对 HepG2 细胞的抑制率呈浓度依赖关系。结论 EBMM
的挥发性成分以棕榈酸及其衍生物、各种烯、不饱和醇、不饱和酸、不饱和酮、不饱和酯类为主，EBMM 能明显抑制 HepG2
细胞的生长。
关键词：醉香含笑树皮；挥发性成分；GC-MS 分析；HepG2 细胞；生长抑制
中图分类号：R284.14 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)11 - 2213 - 03
GC-MS analysis of volatile components from barks of Michelia macclurei and
their inhibition on in vitro growth of HepG2 cells
SONG Xiao-kai1, LU Chun-liang2, HU Kun1, WENG Xiao-yan1, JIN Hai-yang1, CHEN Sai-juan1
1. College of Chemical Technology, Huaihai Institute of Technology, Lianyungang 222005, China
2. Analysis Center, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
Key words: barks of Michelia macclurei Dandy; volatile components; GC-MS analysis; HepG-2 cell; growth inhibition
醉香含笑 Michelia macclurei Dandy，又称火力
楠，是木兰科含笑属的常绿乔木。分布于我国福建、
广西、广东及贵州等省。其花可提炼芳香油，树皮、
根、叶可药用，有清热解毒之功效，种子可榨油，
作燃料用油[1-2]。目前，有关醉香含笑的化学成分及
生理活性研究，除黄儒珠等[3]关于醉香含笑叶挥发
油化学成分的报道外，尚未见其他报道。为系统研
究醉香含笑化学成分，探讨其药用物质基础，本实
验采用水蒸气蒸馏法提取醉香含笑树皮的乙醇总提
物（extract in the bark of Michelia macclurei Dandy，
EBMM）的挥发性成分，并采用 GC-MS 对其进行
成分分析。共鉴定出 34 种成分，用峰面积归一化法
分析测定质量分数，采用 MTT 法[4]测定 EBMM 对体
外人肝肿瘤细胞 HepG2 的生长抑制情况，为合理开
发醉香含笑植物资源的药用价值提供了科学依据。
1 仪器与材料
Trace DSQ II 气质联用仪，TR—5 MS 石英毛细
管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；甲醇（分析纯）。
醉香含笑于2009年6月采自浙江省金华市金西
花木场，经淮海工学院宋晓凯教授鉴定为木兰科含
笑属植物醉香含笑 Michelia macclurei Dandy。
2 方法
2.1 色谱条件
初始柱温 50 ℃，保持 2 min；以 5 ℃/min 升
至 280 ℃，保持 15 min。进样量 1.0 μL，进样口温
度 250 ℃，接口温度 280 ℃。载气 He（质量分数＞
99.99%），体积流量 1.0 mL/min，分流比 20∶1。
2.2 质谱条件
EI 离子源，电子能量 70 eV，电子倍增器电压
1 140 V，质量数范围 50～500 amu。
2.3 挥发性成分提取
取醉香含笑树皮 1.5 kg，自然晾干后，剪碎，过
20 目筛，分批于挥发油提取器中，按《中国药典》
2010 年版一部附录 XD 挥发油测定法，进行水蒸气
收稿日期：2011-01-08
基金项目：国家自然科学基金资助项目（20872110）
*通讯作者 宋晓凯 Tel: 13338983657 E-mail: sxk581214@163.com
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蒸馏，得到2.33 g淡黄色油状液体，提取率为0.16%。
2.4 EBMM 细胞毒活性测试
人肝肿瘤细胞 HepG2 培养于 RPMI 1640 培养
基（含有 10% L-谷氨酰胺的胎牛血清，100 U/mL
青霉素，100 U/mL 链霉素）中。细胞清洗后重新悬
浮于上述介质中，浓度为 5×104个/mL；96 孔板中
每孔加入 100 μL 细胞悬液（每孔 5×103个细胞）；
5% CO2、37 ℃条件下培养 24 h。设立各 EBMM 浓
度组（75、100、200、300、400 μg/mL）、阴性对照
组，完全培养基稀释 EBMM 至所需浓度，每孔加
入 100 μL 相应的含药培养基。分别将含有 EBMM
的 20 μL 乙醇-水(1∶9)溶液加入平板中。阴性对照
组中加入 20 μL 的乙醇-水(1∶9)溶液。细胞再培
养 72 h 后，采用改良的 MTT 法[4]测定细胞的生
长情况。计算各浓度 EBMM 对 HepG2 细胞的生
长抑制率。
3 结果与讨论
3.1 EBMM 挥发性成分的 GC-MS 分析结果
按照上述色谱条件进行分析，得到醉香含笑树
皮挥发性成分的总离子流图（图 1）。可知，在所用的
GC 条件下共分离 54 个色谱峰，通过对总离子流图
进行质谱扫描并在 NIST 02 谱库中检索，对基峰、
0 10 20 30 40
t / min
图 1 醉香含笑地上部位的挥发性成分总离子流色谱图
Fig. 1 Total ions current chromatogram of volatile com-
ponents from aerial parts of M. macclurei
质荷比、相对丰度等方面进行比较，用色谱峰面积
归一化法计算各组分的相对质量分数，初步鉴定出
34 个化合物（表 1），其量占挥发油总量的 67.73%。
由表 1 可知，质量分数较高的是 N, N′-二苯甲酰基-
庚二胺（9.55%）、全反式鲨烯（5.81%）、棕榈酸
（5.62%）、亚油酸乙酯（5.25%）、Z-5-甲基-6-二十
一烯-11-酮（4.54%）等。棕榈酸及其一系列衍生物
占 16.83%，其他各种烯、烯醇、烯酸、烯酮、烯酯
类占 22.9%。
3.2 EBMM 对 HepG2 细胞生长抑制作用
由表 2 可见，EBMM 在一定质量浓度范围内对
HepG2 细胞的体外生长抑制率呈质量浓度依赖关
表 1 醉香含笑树皮的挥发性化学成分
Table 1 Volatile components in barks of M. macclurei
t / 质量分数/ t / 质量分数/编号 名称
min %
编号 名称
min %
1 N, N′-二苯甲酰基-庚二胺 10.24 9.55 18 全反式-鲨烯 26.67 5.81
2 棕榈油酸十六烷基酯 13.48 0.66 19 4, 6-二烯胆甾-3-醇 27.51 0.92
3 叔-十六烷硫醇 13.77 0.34 20 1, 54-二溴-五十四烷 28.44 0.37
4 17-三十五碳烯 15.84 0.71 21 9-甲基-Z-10-十四烯-1-醇-乙酸酯 28.59 0.67
5 细辛脑 16.50 1.05 22 14-二十七酮 28.81 1.09
6 肉豆蔻酸 17.70 2.41 23 9-十六烯酸十八酯 29.38 0.97
7 邻苯二甲酸二丁酯 18.50 1.82 24 1, 1′-(2-十三烷基-1, 3-丙二基)-二环己烷 29.58 1.49
8 十五烷酸 18.74 0.79 25 棕榈酸乙烯基酯 29.83 0.98
9 N-十五烷腈 19.14 0.51 26 1, 1′-十二烷基-二-4-甲基-二环己烷 30.45 0.79
10 11-十六烯酸 19.60 2.78 27 Z-5-甲基-6-二十一烯-11-酮 30.75 4.54
11 棕榈酸 19.79 5.62 28 双十五基酮 31.04 2.91
12 棕榈酸乙酯 19.94 3.08 29 3-乙基-5-(2′-乙基丁基)-十八烷 32.48 0.43
13 亚油酸乙酯 21.55 5.25 30 E, E, Z-1, 3, 12-十九碳三烯-5, 14-二醇 33.42 0.72
14 亚麻酸乙酯 21.62 1.45 31 18-三十五烷基酮 34.24 1.20
15 异香橙烯氧化物 23.24 1.12 32 棕榈酸十八烷醇酯 35.78 0.71
16 己二酸二-(2-乙基己基)酯 23.49 3.79 33 2-顺-9-十八烯基-氧代乙醇 38.92 0.76
17 双-(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯 24.73 2.09 34 棕榈酸环己基酯 41.17 0.35
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表 2 EBMM 对 HepG2 细胞的体外生长抑制率
Table 2 Inhibitiory rates of EBMM on growth
of HepG2 cell lines in vitro
组别 ρ/(μg·mL−1) A 值 抑制率/%
400 0.214±0.010** 69.31
300 0.288±0.035** 58.71
200 0.346±0.024** 50.49
100 0.613±0.043** 12.21
EBMMD
75 0.673±0.029 3.52
空白对照 — 0.698±0.026 0.00
与对照组比较：**P＜0.01
**P < 0.01vs control group
系。与阴性对照组比较，100～400 μg/mL EBMM 对
HepG2 细胞的体外生长均产生明显抑制作用。在倒
置显微镜下可见，阴性对照组 HepG2 细胞多且饱
满，呈圆形，透光性好，结构清晰，说明增殖能力
强。而当 EBMM 质量浓度为 75 μg/mL 时，HepG2
细胞的形态既已发生损伤性变化，细胞结构模糊，
许多细胞胞膜破裂、萎缩并发生崩解，形成碎片。
实验结果表明，在质量浓度 75 μg/mL 下，BEMM 明
显抑制 HepG2 细胞的生长。
EBMM 的挥发性成分以棕榈酸及其衍生物、其
他各种烯、不饱和醇、不饱和酸、不饱和酮、不饱
和酯类为主。采用 MTT 方法检测 75、100、200、300、
400 μg/mL EBMM 对 HepG2 细胞体外生长抑制作
用。EBMM 能明显抑制 HepG2 细胞的生长，且呈质
量浓度依赖关系。醉香含笑树皮乙醇总提物抑制
HepG2 细胞生长的作用机制正在研究中。本实验为
进一步合理开发醉香含笑植物资源的药用价值提供
了科学依据。
参考文献
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