全 文 ：长春新碱新型给药系统的研究进展
王奇巍,杨国红* ,林梦感,朱文君, 杨义芳¹
(上海医药工业研究院 中药研究室,上海 200040)
摘 要:长春新碱是治疗急性淋巴细胞白血病、何杰金及非何杰金淋巴瘤等肿瘤疾病的重要抗癌药物,但具有较大
的神经系统毒性和局部刺激性, 为降低其不良反应和提高药物生物利用度, 目前研究了许多新型给药系统。综述
了近 10年来有关长春新碱新型给药系统的研究进展。
关键词:长春新碱;新型给药系统;抗肿瘤
中图分类号: R2831 6 文献标识码: A 文章编号: 0253- 2670(2010) 01- 0154- 03
Advances in studies on new type drug delivery system of vincristine
WANG Qi2wei, YANG Guo2hong, LIN Meng2gan, ZHU Wen2jun, YANG Yi2fang
( Depar tment of Chinese Mater ia Medica, Shanghai Inst itute of Pharmaceutical Indust ry, Shanghai 200040, China)
Key wor ds: vincrist ine; new type drug delivery system; ant itumor
长春新碱( vincrist ine, VCR)是从长春花叶中提取出来
的具有强抗肿瘤活性的二聚吲哚类生物碱, 自 1962 年问世
以来, 一直是重要的一线抗癌药物[ 1]。VCR 通过作用于肿
瘤细胞微管蛋白而干扰肿瘤细胞代谢, 临床上可用于治疗急
性淋巴细胞白血病、何杰金及非何杰金淋巴瘤, 也用于乳腺
癌、支气管肺癌、软组织肉瘤、脑瘤及神经母细胞瘤等。但
VCR的神经毒性以及其不良反应如骨髓抑制、白细胞减少、
贫血等限制了其在临床上的使用[ 2]。近年来人们进行了一
系列针对降低 VCR 不良反应、增强药物生物利用度的新型
给药系统( drug delivery system, DDS)的研究。本文针对
VCR新型给药系统的研究查找了近 10 年来的相关文献, 并
对此进行综述。
1 脂质体
赵妍等[ 3~ 5]采用主动载药方法制备了 VCR 脂质体。实
验采用 pH 梯度法,以氢化大豆卵磷脂2胆甾醇(H SPC2Chol,
2B1)为脂质体膜成分, 60 e 为孵化温度制备了 VCR 脂质
体。以阳离子交换树脂分离脂质体和游离药物, 采用 RP2
H PLC测定脂质体的包封率, 结果均在 85% 以上, 明显优于
被动载药法制得的脂质体的包封率。实验还考察了药脂比、
包衣材料、pH 调节剂对包封率的影响, 最终确定最优条件
为药脂比 1B 10,包衣材料中加入长循环辅料聚乙二醇单甲
醚 20002胆固醇琥珀酸酯 ( PEG 20002CH S) ,以 Na2HPO4 为
pH 调节剂。另外, 小鼠腹腔肿瘤抑制药效学实验表明,
VCR溶液组的抑瘤率为 41. 5%、VCR 脂质体组的抑瘤率为
56. 0%、VCR长循环脂质体组的抑瘤率为 64. 1%。
张立等[ 6]采用薄膜蒸发超声分散法制备 VCR 脂质体,
并用 PDP2PEG 20002DSPE 对脂质体膜进行修饰。应用激
光电位粒度仪,以去离子水为分散介质测定样品的体积平均
粒径,结果 VCR脂质体的体积平均粒径大约 150 nm。以高
效液相色谱法测得包封率为 40%。
陈彤等[7, 8]采用 pH 梯度法合并逆相蒸发制备同时包结
VCR 和盐酸米托蒽醌的复方脂质体,用 Sephadex G250 葡聚
糖凝胶柱分离, H PLC测定包封率, 所制备复方脂质体 VCR
的包封率为 95. 77%。体外释放结果显示复方脂质体中
VCR 的 t1/ 2为 6. 82 h, 对照溶液中 VCR 的 t1/ 2为 1. 70 h。小
鼠体内药动学结果表明,复方脂质体在血浆中 VCR 的 AUC
是对照溶液的 1. 70 倍, t1/ 2( Ke)为对照溶液的 1. 14 倍。
于滨[9]对长循环 VCR 脂质体进行了研究,采用 VCR与
油酸(OA)的复合物,以聚乙二醇2二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
( PEG2DSPE)为保护剂制备长循环脂质体, 其包封率可达
97. 8%。静脉注射后 ,长循环脂质体显著提高了 VCR 的抗
癌效能,同时显著降低了其急性毒性。
Tokudome等[10]采用棕榈酰葡萄糖醛酸苷( PGlcU A)修
饰 VCR 脂质体, 从而达到靶向长循环的效果, 降低了 VCR
的急性毒性,有效抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长, 延长荷瘤小鼠
的存活时间, PGlcU A 修饰 VCR 脂质体对荷瘤小鼠的完全
治愈率达 33%。
Johnston 等[ 11]的研究表明, 提高脂质体的药脂比(D/ L)
可以降低药物的释放率。以 H SPC2Chol为脂质体膜成分制
得的 VCR 脂质体进行体内释放度试验, D/ L 为 0. 025 时,
t1/ 2= 6. 1 h, D/ L 为 0. 6 时, t1/ 2= 117 h。但是 D/ L 的变化不
能影响脂质体在体内的循环时间,实验以MX21 人类乳房肿
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¹ 收稿日期: 2009206218
基金项目:国家/ 重大新药创制0科技重大专项资助( 2009ZX093012007)
作者简介:王奇巍( 1984 ) ) ,男,硕士研究生,研究方向为天然药物活性成分与制剂研究。
Tel: 13671848136 E2mail : aaronwang84@gmail. com。
* 通讯作者 杨国红 Tel: ( 021) 624798082217 E2mail: yan gguohong2001@yahoo. com. cn
瘤模型考察了药物释放率与抗肿瘤活性之间的关系。当 D/
L 从 0. 025 增加到 0. 1 时( t/ 1/ 2= 6. 1~ 15. 6 h) , VCR脂质
体抗肿瘤活性逐渐增强, 但 D/ L= 0. 6 时( t/ 1/ 2= 117 h) , 抗
肿瘤活性反而下降。实验证明可以通过改变 D/ L 来达到治
疗上最佳的药物释放率。 Johnston 等[ 12]又采用二氢鞘氨醇
( DHSM)替代了常用于制备脂质体的卵磷脂( ESM)构成新
的 DH SM2Chol复合物。在体内外药物释放实验中, DH SM2
Chol VCR纳米脂质体的 t1/ 2是 ESM2Chol VCR 纳米脂质体
的 3 倍;而且 DHSM2Chol纳米脂质体在体内的半数清除时
间( Tc1/ 2)为 6 h,而 ESM2Chol纳米脂质体的 Tc1/2为 3. 8 h。
Webb 等[13]以聚乙二醇2神经酰胺(PEG2CER)修饰脂质
体,其在体内循环时间明显长于 EPG2DSPE 修饰的脂质体,
而且泄漏率低。实验还证明了神经酰胺酰基链越长 ,脂质体
在体内循环时间越长, 血浆中 VCR浓度越高。
Liang 等[14]采用硫酸铵梯度法制备了抗耐药性的隐性
VCR脂质体, 其包封率在 90% 以上。实验还考察了隐性
VCR脂质体在小鼠体内的药动学相应参数, t1/2= (15. 26 ?
5. 04) h, AUC0- 24h与 Cmax均高于 VCR 溶液对照组, 总体清
除率为( 0. 17 ? 0. 03) L/ h, 低于 VCR 溶液对照组( 4. 92 ?
1. 02) L/ h;与 VCR 溶液相比,注射隐性 VCR脂质体可以使
小鼠体内平均血药浓度明显增加。
Zhigalt sev 等[15]研究了长春碱、VCR、长春瑞滨 3 种脂
质体的差异, 在体内外实验中,长春碱、长春瑞滨的释放速度
要比 VCR的速度快, 这与药物的亲油性有关,药物疏水性越
强, 释放越快。而且, 当运用离子载体机制装载药物, 提高
D/ L 可以明显提高药物的保留率,但药物保留率不依赖于最
初的 D/ L。
2 传递体
卢懿等[ 16~ 18]采用薄膜超声法以大豆卵磷脂、去氧胆酸
钠、维生素 E 制备传递体,并且优化处方工艺:大豆卵磷脂2
去氧胆酸钠为 70B 20, 载体2VCR 为 45 B 10, pH 7. 3, 水合
30 min,最终所得传递体其包封率为 90% , 24 h 累积透皮吸
收率为 63. 8%。另外, 实验还比较了含不同表面活性剂的
载长春新碱传递体 ( VCR2T) 和载长春新碱壳聚糖纳米粒
( VCR2CS2NPs)的体外透皮效果。结果含表面活性剂 Brij78
的 VCR2T 为最佳的 VCR透皮给药系统;另外, 采用 H PLC
法测定 VCR在大鼠体内的药动学及组织分布, 以 VCR 注射
液为对照, VCR2T 使 VCR在血液中滞留时间延长了 12 倍,
大鼠淋巴中靶向指数增加了 2. 75 倍,并且具有更好的抑瘤
效果。
3 载药红细胞
吴江等[ 19, 20]采用改良低渗预膨胀法制备 VCR 载体红
细胞, 使预膨胀红细胞与 VCR 的 0. 6% NaCl水溶液作用
后,单位数量( 1@109 mL)红细胞载药量达 49. 59 Lg。红细
胞总载药率为 ( 61. 42 ? 3. 69)% , 载体红细胞回收率为
( 90. 61 ? 4. 95)% , 载体红细胞药物释放缓慢, 4 h 连续释放
率( 11. 35 ? 1. 65)% , 可稳定贮存 5 d。另外还有实验表明
VCR载体红细胞可明显抑制 K562 细胞增殖并促其凋亡, 且
该作用随剂量增高而加强。与载体红细胞混合培养 24 h
后, S+ G2 / M期 K562 细胞明显增多, G0 / G1 期细胞减少。
施莹等[21]分别给荷瘤小鼠注射 VCR 和 VCR载药红细
胞,结果发现 VCR t1/2= 1. 53 h, 而 VCR 载药红细胞 t1/ 2=
4. 1 h,且在肝脏及肿瘤中的浓度和稳定性均高于游离药物,
增强了药物向肝脏及肿瘤的靶向聚集。
王莉莉等[22]在红细胞载药基础上研究了在 VCR 中加
入磁流体对系统血液免疫功能的影响。结果 VCR(0. 2 g/
mL)和纳米级 Fe3O4 磁流体对血细胞的免疫功能都没有不
良影响,甚至磁流体还可以提高血液免疫反应中白细胞的免
疫功能,为红细胞包载磁流体和抗癌药物治疗肿瘤提供实验
依据。
4 微球
陈红丽等[23, 24]采用W/O/ O 溶剂挥发法制备 VCR聚乳
酸2羟基乙酸(PLGA)微球,并且证明在微球制备过程中添加
碳酸锌可明显增加微球中药物的稳定性, 36 d 的体外释放测
定结果显示,添加碳酸锌的微球累积释药量均达到 70%以
上,而未添加碳酸锌的微球释药量仅为( 54. 2 ? 1. 1) %。实
验又采用二次冻干法制备载 VCR微球的胶原2壳聚糖药膜,
该药膜可明显减少药物突释, 延缓药物释放;体外释放实验
表明,微球突释率为( 27. 2 ? 1. 2)% , 而胶原药膜的突释率为
( 20. 4 ? 1. 9% ) ,胶原与壳聚糖比例为 9B 1、4B 1、3B 2 的药
膜突释率分别为 ( 20. 2 ? 2. 1) %、( 18. 0 ? 1. 1) %、( 16. 3 ?
1. 8)%。陈汉等[ 25]对载 VCR 微球的胶原2壳聚糖药膜的稳
定性进行研究,该药膜在 40 e 条件下放置 3 个月,药物质量
分数下降到 ( 97. 9 ? 0. 1) % , 而高湿度或光照环境下放置
10 d药物质量分数下降到( 91. 4 ? 0. 3)% 和( 91. 2 ? 0. 4) %。
孙勇等[ 26, 27]采用减压干燥法制得 VCR微球,与 7%的胶
原溶胀液混合制得 VCR控释药膜,并且考察药膜在荷瘤小鼠
体内外对 K562细胞的抑制作用, 结果表明 VCR 控释药膜在
体内外均显著抑制肿瘤细胞的生长, 增加 SOD 活性, 并可诱
导肿瘤细胞凋亡的发生,且毒性较静脉给药明显降低。
5 微乳
Wang 等[28] 采用 PEG2类脂、Chol为表面活性剂, 油酸
维生素 E 溶液和 VCR为油相制备 VCR微乳( M2VCR)。该
微乳在 7 e 避光保存 1 年后, 其平均直径、载药率从
( 138. 1? 1. 2) nm、( 94. 6 ? 4. 7) %变为( 127. 1 ? 2. 4) nm、
( 91. 3 ? 4. 8)%。在荷瘤小鼠 C57BL/ 6 体内的药动学参数
表明, M2VCR的血清 AUC要明显高于 VCR 单体溶液 ( F2
VCR) ;在心脏、脾脏、肝脏中, M2VCR 的 AUC0. 08212 h要明显
小于 F2VCR的, 而在肾脏中 M2VCR 的 AUC0. 08~ 12 h要高于
F2VCR 的; 而肿瘤部位 M2VCR 的 AUC0. 08212 h 要高于 F2
VCR 的,证明M2VCR是很好的肿瘤靶向给药系统。
6 胶束
林宏英等[29]利用聚乙二醇衍生化磷脂酰乙醇胺 ( PEG2
PE)聚合物胶束作为载体制备了包载 VCR 的 PEG2PE 胶束
( VCR胶束) , 所得 VCR胶束呈不规则的球状结构,粒度分
布窄而均一,平均粒径在 ( 11. 1 ? 0. 1) nm, 当 VCR 与 PEG2
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PE 的物质的量比在 1B 2~ 1B 10 内, 包载量均大于 95% ;
体外释放度和耐稀释试验结果表明, VCR 胶束在 HBS和血
清( pH 7. 0)两种释放介质中稳定, 释放符合一级动力学释
药模型。体外细胞毒试验表明, VCR胶束能显著提高 VCR
对MCF27细胞生长的抑制作用。
7 结语
新型给药系统无疑是解决 VCR 不良反应大 ,生物利用
度低的最好方法, 目前 VCR 脂质体已经进入了临床研究, 与
常规 VCR 注射剂相比, VCR脂质体毒性较低、体内分布时
间更长并且组织浓度也有所提高, 但是仍然需要密切关注其
临床耐受性及药物累积毒性。而如何更好地利用这些新型
给药系统使 VCR达到更加精确的靶向治疗,进一步降低其
不良反应, 延长其作用时间,将是 VCR新型给药系统继续研
究的方向。
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白木香结香机制研究进展及其防御反应诱导结香假说
张 争1 ,杨 云2, 3 ,魏建和1* , 孟 慧2, 3 , 隋 春1 ,陈怀琼1¹
( 11 中国医学科学院北京协和医学院 药用植物研究所 ,北京 100193; 21 中国医学科学院北京协和医学院药用
植物研究所海南分所, 海南 万宁 571533; 31 海南省南药资源保护与开发重点实验室 ,海南 万宁 571533)
摘 要: 白木香是我国生产名贵芳香类药材沉香的唯一植物来源, 健康的树体不能产生沉香类物质,必须受到真
菌侵染或物理、化学伤害后才能够产生。目前有真菌侵染、物理伤害、化学伤害及激发子诱导白木香结香的研究报
#156# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
¹ 收稿日期: 2009206211
基金项目:国家科技支撑计划项目( 2007BAI27B01) ;新世纪优秀人才支持计划项目( 2008) ;濒危药材繁育国家工程实验室项目
作者简介:张 争( 1979 ) ) ,男,助研,博士,主要从事药用植物次生代谢分子机制研究。 E2mail: zhangzheng321@126. com
* 通讯作者 魏建和 Tel: ( 010) 62818841 E2mail: wijanh@263. net