全 文 ：*-没食子酸
*- gall ic acid
图 1 没食子酸对照品( A)和余甘子膏( B)的
高效液相色谱图
Fig1 1 HPLCChromatograms of gallic acid reference sub-
stance ( A) and Phy llanthi Fructus Cream (B)
得其 RSD为 01 2%。
21 7 稳定性试验:取批号 20090924余甘子膏样品,
制备供试品溶液, 分别在 0、4、9、13、17、21 h测定,
结果没食子酸峰面积的 RSD 为 01 2%。表明样品
溶液在 21 h内稳定性良好。
21 8 重现性试验:取批号 20090924 余甘子膏样品
6份,制备供试品溶液, 测定峰面积,计算得供试品
中没食子酸平均质量分数为 91 6%, RSD 为 01 4%
( n= 6)。
21 9 回收率试验:采用加样回收法。精密称取批号
20090924余甘子膏(含没食子酸 91 6% )约 80 mg,
共 9份, 精密称定, 分为低、中、高 3组, 分别精密加
入 11 0 mg / g 没食子酸对照品溶液 61 0、71 5、91 0
mL,制备供试品溶液并测定,计算加样回收率, 结果
平均回收率为 1011 8%, RSD为 11 6。
21 10 样品测定:取样品 3批余甘子膏和原药材 1
批,制备供试品溶液,按上述色谱条件测定,计算其
中没食子酸的质量分数,结果见表 1。
表 1 样品中没食子酸的测定结果( n= 6)
Table 1 Determination of gallic acid in samples ( n= 6)
批 号 名 称 没食子酸/ %
20090908 余甘子膏 91 9
20090914 余甘子膏 101 8
20090924 余甘子膏 91 6
20090824 余甘子原药材 21 2
3 讨论
根据参考文献,比较不同比例的甲醇-01 04%磷
酸溶液( 5B 95、8B 92、10B 90)流动相系统对没食子
酸峰与杂质峰的分离度、保留时间、理论板数等的影
响,发现流动相甲醇-01 04%磷酸溶液( 10 B 90)能保
证没食子酸峰与杂质峰的分离度、理论板数均达到
较好。比较了没食子酸于 274 nm 及 280 nm 处的
吸光度值,结果在 274 nm 处有较高的吸收。
本实验采用 HPLC 法测定藏药余甘子膏中没
食子酸,方法线性关系良好,精密度、重现性、回收率
均符合要求,稳定性好,以此法制订的质量标准能有
效控制其质量。
参考文献:
[ 1] 宇 妥,元丹贡布 1 四部医典 [ M ]1 北京: 人民卫生出版社,
19831
[ 2] 罗干明, 徐纪文 1 余甘子的生药鉴定[ J ]1 中草药, 2000, 31
( 6) : 461-4631
[ 3] 中国药典[ S]1 一部1 20051
[ 4] 郑 虹1 高效液相色谱测定七味红花殊胜丸中没食子酸的含
量[ J]1 时珍国医国药, 2009, 20( 3) : 667-6681
[ 5] 李晓梅,赵琪钟,罗松1 HPLC法测定藏药余甘子中没食子酸
的含量[ J]1 中国民族医药杂志, 2006, 5: 70-711
HPLC法测定雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇
林 绥* ,邓思珊,阙慧卿,钱丽萍,郭舜民,齐一萍
(福建省医学科学研究所, 福建 福州 350001)
摘 要:目的 建立雷公藤内酯醇生物贴的质量标准, 雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇的定量测定方法。方
法 雷公藤内酯醇生物贴经甲醇超声提取。色谱柱为 Ag ilent Zo rbax SB-C18色谱柱( 250 mm @ 41 6 mm, 5 Lm) , 流
动相为乙腈-水( 3 B 7) ,检测波长为 220 nm。结果 雷公藤内酯醇在 5~ 120 Lg / mL , 线性关系良好 ( r= 01 9981)。
平均回收率 961 5% ( n= 9)。RSD< 3%。结论 本方法重现性好,灵敏度高。
关键词:雷公藤内酯醇生物贴; 雷公藤内酯醇;高效液相色谱
中图分类号: R2861 02 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 09-1478-03
#1478# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
* 收稿日期: 2009- 12-12 基金项目:福建省科技计划重点项目( 2008Y0083) ;福建省科技重大专项( 2009YZ0001- 1-3)
* 通讯作者 林 绥( 1961 ) ) ,研究员,主要从事中药与天然药物化学的研究。
T el: 13605948318 E-mail: lin sui_syy@ sin a1 com1 cn
雷公藤 Tr ip teryg ium w ill f or di i Hook1 f1 系
卫矛科雷公藤属植物, 临床应用于治疗类风湿性关
节炎等自身免疫性疾病[ 1-2]。雷公藤内酯醇是雷公
藤中具有抗炎、免疫抑制等作用的活性成分, 但因它
的有效剂量与中毒剂量接近, 使其应用受到毒性大
的限制[ 3-4]。经皮给药系统是药剂学中一个新兴的
领域, 它在新技术、新剂型、新工艺中处于前沿位
置[ 5-6]。笔者设计的雷公藤内酯醇生物贴含有镇痛
作用的药物,同时可避开因口服雷公藤内酯醇而产
生毒性,而药物又能直达病灶,同时具有镇痛作用,
达到高效、速效、安全而几乎无不良反应的要求。因
此本实验是对该剂型中质控指标进行了研究。
1 仪器与试药
美国 H P 1100型高效液相色谱仪。雷公藤内
酯醇对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号
111567-200502) , 质量分数在 991 5% 以上, 由本所
药物室提供。甲醇、乙腈为色谱纯,其余试剂均为分
析纯,水为超纯水。雷公藤内酯醇生物贴,每贴 41 2
cm @ 31 2 cm,由本所药物室提供。
2 方法与结果
21 1 色谱条件: Agilent Zorbax SB-C18色谱柱( 250
mm @ 41 6 mm, 5 Lm) ;流动相: 乙腈-水( 3B7) ;检测
波长: 220 nm;体积流量: 1 mL/ min;进样量: 20 LL;
柱温:室温。
21 2 对照品溶液的制备:精密称定雷公藤内酯醇对
照品 21 0 mg, 置10 mL 量瓶中,加流动相至刻度, 摇
匀,用微孔滤膜( 01 45 Lm)滤过,即得。
21 3 供试品溶液的制备:精密量取雷公藤内酯醇生
物贴,将每个贴片剪成 10条, 放入具塞三角烧瓶中,
加入适量 CHCl3 溶解,用 3 g 硅胶干法拌样, 5 g 硅
胶分离, 300 mL 乙腈洗脱,样品用乙腈定容振摇,用
01 45 Lm 微孔滤膜滤过,即得。
21 4 线性关系考察:精密吸取雷公藤内酯醇对照品
溶液 01 20、01 40、01 80、11 60、21 40、31 60、41 80 mL,
以流动相溶液分别定容于 10 mL 量瓶中,精密进样
20 LL,按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积为纵
坐标, 质量浓度为横坐标,计算得线性回归方程 A =
351 8 C- 161 8, r= 01 998 8, 结果表明雷公藤内酯醇
质量浓度在 4~ 96 Lg / mL 线性关系良好。
21 5 精密度试验:分别取 20 Lg/ mL 雷公藤内酯醇
对照品溶液,在上述色谱条件下重复进样 6次,测定
峰面积,结果其 RSD为 11 09%。
21 6 稳定性试验: 取雷公藤内酯醇生物贴(批号
20100117)制成供试品溶液, 于 0、4、8、12、16、20、24
h进行测定, 结果雷公藤内酯醇的质量分数均未发
生明显改变, RSD为 21 78%。
21 7 重现性试验: 取雷公藤内酯醇生物贴 (批号
20100117) , 平行 6份,制备供试品溶液, 进行测定,
计算雷公藤内酯醇的质量分数, 结果其 RSD 为
21 85%。
21 8 加样回收率试验: 取批号 20100119雷公藤内
酯醇生物贴适量, 精密加入雷公藤内酯醇对照品溶
液 1 mL,按供试品溶液的制备方法进行处理和测
定,计算回收率,结果平均回收率为 961 9%, RSD为
21 33% ( n= 9)。
21 9 样品测定:取样品,制备供试品溶液,按外标法
进行雷公藤内酯醇的测定, 结果见表 1、图 1。
表 1 雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇的测定结果( n= 3)
Table 1 Determination of triptolide in triptolide patches ( n= 3)
批 号 雷公藤内酯醇/ ( Lg # 贴- 1)
20100117 (小剂量) 25. 42
20100128 (小剂量) 25. 80
20100219 (小剂量) 251 23
20100117 (中剂量) 351 28
20100128 (中剂量) 351 16
20100119 (中剂量) 361 31
*-雷公藤内酯醇
*-t riptolide
图 1 雷公藤内酯醇(A)、雷公藤内酯醇生物贴( B)的
HPLC色谱图
Fig1 1 HPLC Chromatograms of triptolide ( A)
and triptolide patches ( B)
3 讨论
曾对雷公藤药材中雷公藤内酯醇和雷公藤乙素
进行测定,经方法学考查该方法稳定可行[ 7] ,可以以
雷公藤内酯醇作为衡量雷公藤内酯醇生物贴质量标
准的依据。
#1479#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
参考文献:
[ 1] 刘为萍,刘素香,唐慧珠,等1 雷公藤研究新进展 [ J]1 中草药,
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藤内酯醇的耐药特征和机制的研究[ J ]1 中草药, 2009, 40( 4) :
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药的研究[ J]1 中草药, 2010, 41( 6) : 892-8961
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素的测定[ J]1 中草药, 2008, 39( 9) : 1409-14111
赤芍中芍药苷的大孔吸附树脂纯化研究
刘帅英1 ,徐文峥2 ,李水福1*
( 11 丽水市食品药品检验所, 浙江 丽水 323000; 21 丽水市中医院 药剂科, 浙江 丽水 323000)
摘 要:目的 考察不同型号大孔吸附树脂对赤芍中芍药苷的纯化效果, 为树脂药用技术应用和赤芍相关产品开
发提供参考。方法 HPLC 法测定芍药苷;采用动态吸附法, 考察大孔树脂的吸附、解吸附性能和纯化效果。结果
D-101A 树脂综合性能最佳。结论 D-101A 树脂纯化赤芍中芍药苷效果较好, 可用于工业化生产。
关键词:赤芍; 芍药苷;大孔吸附树脂
中图分类号: R2861 02 文献标识码: B 文章编号: 0253-2670( 2010) 09-1480-03
大孔树脂是一类不带离子交换基团的多孔性交
联聚合物, 具有大孔结构的高分子吸附剂。物理化
学性质稳定,比表面积大,吸附容量大, 选择性好, 吸
附速度快,解吸条件温和; 对有机物选择性好, 不受
无机盐类及其他强离子、低分子存在的影响, 有利于
吸附;品种多,不同品种可吸附多种有机化合物; 流
体阻力较小;脱色能力高; 再生处理方便、使用周期
长、宜于构成闭路循环、节省费用。同时还可减少产
品的吸潮性,有效去除重金属,解决中药重金属超标
的难题[ 1-2]。目前主要用于中草药的分离纯化,如对
药材样品的预处理、对单味中药提取物的分离纯化
及对中药复方提取物的分离纯化,其中对中药提取
物中苷类[ 3] 、黄酮[ 4] 、生物碱 [ 5] 的分离效果良好, 有
的已实现工业化生产, 具有广阔的发展前景。近年
来,赤芍在心血管及肝病治疗领域的广泛药理活性
引起了普遍关注 [ 6]。虽有以芍药苷为指标, 采用大
孔树脂吸附法富集纯化赤芍总苷的报道[ 7] , 但未见
用不同型号大孔树脂吸附法比较纯化效果的研究。
本实验以 HP-20、HPD-100、LS-45、D-101、D-101A
大孔吸附树脂对赤芍中有效成分进行富集纯化, 为
树脂药用技术应用提供一定的参考。
1 仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱系统( G1311A 四元
泵、G1313A 自动进样器、G1316A 柱温箱、G1315A
二极管矩阵检测器)。LXJ ) Ò 型离心机(上海医用
分析仪器厂) ; AE ) 50 电子天平(瑞士) ; 玻璃色谱
柱( 15 cm @ 1 cm、30 cm @ 5 cm )。
芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所, 批号
110836-200520) ;赤芍饮片由亳州京皖中药饮片厂
提供,经丽水市食品药品检验所李水福主任中药师
鉴定为毛茛科植物川赤芍 Paeonia vei tchi i Lynch
的干燥根;重蒸馏水(自制) , 甲醇(色谱纯) ,其他试
剂均为分析纯。大孔树脂: HP-20(上海摩速科学器
材有限公司) , HPD-100(沧州宝恩化工有限公司) ,
D-101、D-101A(安徽三星树脂科技有限公司) , LS-
45(天津农药厂)。
2 方法与结果
21 1 大孔吸附树脂的预处理及含水率的测定: 分别
取大孔树脂,加乙醇溶胀 24 h, 索氏提取器提取 12
h以除去树脂中残留的致孔剂等杂质。95%乙醇湿
法装柱,然后用 95%乙醇以 2 BV/ h 通过树脂层,洗
至流出液加等量水不出现白色混浊为止。再用水以
2 BV/ h洗至无醇味。改用 5%盐酸溶液以 4 BV/ h
通过树脂层,用水洗至中性,换用 2%氢氧化钠溶液
以 4 BV/ h洗涤, 最后用水洗至 pH 值中性即可,测
定含水率, 结果 D-101、HP-20、HPD-100、LS-45、D-
101A 树脂的含水率分别为 691 85%、611 01%、
661 29%、681 24%、691 34%。
#1480# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
* 收稿日期: 2010- 02-10 作者简介:刘帅英( 1982 ) ) ,女,浙江丽水,药师,硕士,从事药品检验和药物研究工作。
T el : (0578) 2155869 E-mail: lus@ conbagr ou p1 com