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Changes of lignans′ content in stems of Schisandra chinensis

五味子藤茎木脂素含量变化规律的研究



全 文 :五味子藤茎木脂素含量变化规律的研究
于俊林,孙仁爽,胡彦武,周静
(通化师范学院 制药与食品科学系,吉林 通化 134002)
[摘要] 目的:考察五味子藤茎中木脂素含量在12个月内的变化规律,为确定适宜的采收期、合理开发利用其植物资源
提供科学依据。方法:以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素为对照品,采用反相HPLC测定。结果:不同月份五味子藤茎中
3种木脂素成分的含量各不相同:五味子醇甲含量在12月份最高,为23mg·g-1生药;4月份最低,为14mg·g-1生药。五
味子甲素在11月份含量最高,为08mg·g-1生药;3月份最低,为04mg·g-1生药。五味子乙素在1月份含量最高,为30
mg·g-1生药;4月份最低,为11mg·g-1生药。结论:以秋、冬季采收为佳。
[关键词] 五味子藤茎;木脂素;采收期;含量;HPLC
[收稿日期] 20090821
[通信作者] 于俊林,男,教授。1982年毕业于吉林农业大学中
药材学院药用植物专业,主要从事药用植物学教学与长白山药用植
物资源研究工作。Tel:(0435)3976161Email:yujunlin1962@
163com
  五味子藤茎来源于木兰科植物五味子 Schisan
drachinensis(Turcz)Bail的木质藤本茎,其果实
入药称为北五味子,是著名的长白山道地药材,具有
益气生津、补肾养心、收敛固涩等作用[1],北五味子
的主要有效成分为木脂素类成分,有明显地促进肝
糖元生成、降低肝炎患者血清谷丙转氨酶水平、保护
肝细胞等作用,是预防和治疗肝炎的要药[2]。
有关五味子果实中木脂素含量的报道较多[3],
也有文献报道五味子藤茎中含有木脂素成分[4],但
尚未见五味子藤茎中木脂素含量随季节变化规律的
报道。为了考察五味子藤茎中木脂素含量随季节变
化的规律,为确定科学的采收期和合理地开发利用
其植物资源提供科学依据,本实验以五味子醇甲
(schisandrin,SCH)、五味子甲素(deoxyschizandrin,
DSCH)、五味子乙素(schisandrinB,SCHB)为代表,
用高效液相色谱(HPLC)法对不同月份五味子藤茎
木脂素的含量进行测定,现将结果报道如下。
1 材料
Agilent1100HPLC(美国安捷伦仪器有限公
司);甲醇、乙腈(色谱纯);SCH (批号 110857
200406),DSCH(批号 110764200407),SCHB(批
号110765200407)等对照品分别购于中国药品生
物制品检定所;流动相用乙腈、甲醇为色谱纯,其他
试剂为分析纯。
不同月份的五味子藤茎药材均采自吉林省通化
市郊佐安村,由通化师范学院制药与食品科学系于
俊林教授鉴定为五味子Schinensis的干燥藤茎。
2 方法与结果
21 色谱条件 AgilentEclipseXDBC18色谱柱
(46mm×150mm,5μm);流动相甲醇乙腈水
(43∶28∶29);流速1mL·min-1;检测波长250nm;
进样量10μL;柱温为室温。在此条件下,色谱峰的
理论板数均不小于2000,分离度均大于15,色谱
峰的拖尾因子均为 105。SCH,DSCH,SCHB对照
品HPLC图见图1,3月份采收的五味子藤茎 HPLC
图见图2,12月份采收的五味子藤茎 HPLC图见图
3。
22 对照品溶液制备[5] 分别取对照品 SCH615
mg、DSCH586mg、SCHB558mg,精密称定,同置
25mL量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,备
用。
23 供试品溶液制备 精密称取12个月五味子药
材藤茎粗粉约1g,分别置25mL量瓶中,加入甲醇
20mL,超声提取40min,放至室温,用甲醇定容至刻
度,摇匀,取续滤液作为供试品溶液,在 HPLC测定
时用045μm微孔滤膜滤过。
24 线性关系考察 精密称取对照品 SCH615
mg、DSCH586mg、SCHB558mg,同置50mL量瓶
中加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,配成含 SCH123
mg·L-1、DSCH117mg·L-1、SCHB112mg·L-1
的对照品储备液。分别取上述3种溶液各2,6,10,
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图1 SCH(1),DSCH(2),SCHB(3)对照品HPLC图
图2 3月份五味子藤茎SCH(1),DSCH(2),
SCHB(3)HPLC图
图3 12月份五味子藤茎SCH(1),DSCH(2),
SCHB(3)HPLC图
14,18μL进样 HPLC仪,记录峰面积,以峰面积为
纵坐标,取样量为横坐标,进行线性回归。SCH的
回归方程为Y=385453X34996(r=09998),在
0246~2241μg线性关系良好;DSCH的回归方程
为Y=281671X28850(r=09991),在0234~
2109μg线性关系良好;SCHB的回归方程为 Y=
214626X33500(r=09998),在 0223~2009
μg线性关系良好。
25 精密度试验 取同一对照品溶液,在上述色谱
条件下重复进样5次,记录色谱峰面积,SCH,DSCH
和SCHB峰面积 RSD值分别为021%,019%和
016%。
26 重复性试验 精密称取同一月份的藤茎药材
粉末5份,每份1g,按23项目方法制备供试品溶
液,在上述色谱条件下进行 RPHPLC分析,SCH,
DSCH和 SCHB含量 RSD分别为 19%,14%,
23%。
27 稳定性试验 取供试品溶液,分别在0,2,4,
8,12,24h测定,记录色谱峰面积,SCH,DSCH与
SCHB含量 RSD分别为 20%,18%,23%,表明
供试品溶液24h内稳定。
28 回收率试验 精密称取已知含量的五味子藤
茎药材粗粉6份,每份约05g,分别精密加入一定
量的对照品溶液,按23项下操作,在上述色谱条件
下进行RPHPLC分析,由测得量与加入量计算回收
率,SCH的平均回收率为 10043%,RSD18%;
DSCH平均回收率为10105%,RSD24%,SCHB平
均回收率为10022%,RSD15%。
29样品测定 精密称取不同月份的五味子藤茎粗
粉约1g,精密称定。按23项下操作,在上述色谱
条件下进行 RPHPLC分析,采用外标法分别计算
SCH、DSCH与SCHB含量的百分含量,测定结果见
表1。
表1 不同月份五味子藤茎中SCH,DSCH,SCHB
的质量分数 mg·g-1
月份 SCH DSCH SCHB 合计
1 2.1968 0.5909 3.0527 5.8404
2 1.7798 0.4946 2.0218 4.2962
3 1.7733 0.4203 2.5342 4.7277
4 1.3685 0.4353 1.1415 2.9453
5 1.4924 0.4515 1.4017 3.3456
6 2.0853 0.7008 2.3690 5.1551
7 2.1082 0.6480 2.3157 5.0719
8 2.0985 0.6110 2.0374 4.7469
9 2.2705 0.6607 2.9033 5.8345
10 2.1022 0.6424 2.8171 5.5617
11 1.9227 0.7509 2.2409 4.9145
12 2.3443 0.5626 2.7470 5.6539
3 结论与讨论
五味子藤茎中3种成分的含量在不同月份有一
定变化,其中SCH含量在12月份最高 3月份最低;
DSCH含量在11月份最高,3月份最低;SCHB含量
在1月份最高,4月份最低,SCHB与 SCH含量的变
化情况基本相似。
从3种成分的总和比较发现,1月份的含量最
高,其次为9月份,4月份的含量最低。
综上,五味子藤茎中木脂素含量在秋、冬季节较
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高,在春季较低。因此,五味子藤茎的最佳采收期应
该为秋、冬季节。
《中国药典》规定五味子的用药部位是果实,经
测试,五味子藤茎中的木脂素(SCH,DSCH,SCHB)
含量也较高,五味子藤茎完全可以作为五味子木脂
素新的植物资源加以开发利用。
五味子广泛分布东北长白山区,尽管野生条件
下五味子的果实产量较少,但是其藤茎的产量较大,
而且在人工栽培的条件下还要对藤茎进行人工修
剪,所以说五味子藤茎的资源十分丰富,完全可以利
用五味子藤茎中的木脂素成分开发治疗肝炎的药
物。
[参考文献]
[1] 中国药典一部[S]2005
[2] 国家中医药管理局中华本草编委会中华本草[M]上海:上
海科学技术出版社,1999,38(6):902
[3] 刘继永五味子木脂素研究及其HPLC指纹图谱的建立[D]
长春:吉林农业大学,2005,7
[4] 于俊林,秦蠫,胡彦武,等HPLC法测定五味子茎藤中木脂素
的含量[J]中草药,2003,34(10):9
[5] 杨春娟,熊志立,杨晶,等RPHPLC法同时测定五味子甲素
与乙素含量[J]沈阳药科大学学报,2006,23(10):660
Changesoflignans′contentinstemsofSchisandrachinensis
YUJunlin,SUNRenshuang,HUYanwu,ZHOUJing
(DepartmentofPharmaceuticsandFoodScience,TonghuaNormalUniversity,Tonghua134002,China)
[Abstract] Objective:TodeterminelignancontentinthevinestemofSchisandrachinensisduring12monthsandprovidethe
scientificbasisforthedevelopmentandutilizationoftheresourcesMethod:AnalysiswascariedoutonanEclipseXDBC18column
elutedwithamixtureofmethanolactonitrilewater(43∶28∶29)asthemobilephase.Theflowratewas1.0mL·min-1,andthedetec
tionwavelengthwassetat250nm.Schisandrin,deoxyschizandrinandschisandrinBwereusedasreferencesubstance,andtheexter
nalstandardmethodwasusedResult:ThecontentofthreeconstituentsinthestemchangesunderdiferentmonthsSchisandrin's
maximumis23mg·g-1inDecember,minimumis14mg·g-1inAprilADeoxyschizandrin'smaximumis08mg·g-1inNovem
ber,minimumis04mg·g-1inMarch;SchisandrinB'smaximumis30mg·g-1inJanuary,minimumis11mg·g-1inApril
Conclusion:ThecolectionseasonsforthevinestemofS.chinensisareautumnandwinter.
[Keywords] Schisandrachinensis;stem;lignansseason;content;HPLC
[责任编辑 王亚君]
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