全 文 ：大黄不同饮片中２个蒽醌苷类成分的比较研究
张村，李丽，肖永庆，林娜，刘春芳，田国芳，陈东东
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：对大黄５种不同饮片中２个蒽醌苷类成分的含量进行比较研究。方法：ＨＰＬＣ同时测定芦荟大黄素８
ＯβＤ葡萄糖苷和大黄酸８ＯβＤ葡萄糖苷的含量，ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（２）柱，流动相 乙腈１％冰醋酸溶液（２０∶８０），检测波长
４１０ｎｍ，流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温 ３５℃。结果：２个成分的线性关系较好（ｒ＞０９９９８），测定范围分别为 ００１７４４～
０３４８８，００８４～１６８μｇ，平均回收率分别为９７８２％，９７８７％。结论：大黄炮制过程中２个蒽醌苷类成分含量发生了明显
变化，生片、酒片、醋片的含量没有显著性差异，熟片、炭片含量较生品下降明显，大黄不同饮片蒽醌苷类成分含量变化呈现
一定的规律性。
［关键词］ 大黄；饮片；大黄素８ＯβＤ葡萄糖苷；大黄酸８ＯβＤ葡萄糖苷；高效液相色谱法；含量测定
［收稿日期］ ２００９０５２７
［基金项目］ 国家自然科学基金重点项目（３０７３０１１１）
［通信作者］ 肖永庆，研究员，博士生导师，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，
Ｅｍａｉｌ：ｘ．ｈｅｑｉ＠１６３．ｃｏｍ
［作者简介］ 张村，博士，副研究员，研究方向为中药化学成分、质
量评价以及中药炮制研究
蒽醌类衍生物为大黄的主要成分，含量为
３％～５％，其中蒽醌苷类成分为大黄泻下的主要药
效成分之一［１２］。大黄以不同方法炮制后，其泻下作
用发生了不同程度的变化，该类成分在炮制过程中
的变化与大黄不同炮制品的功效密切相关。目前文
献报道多以游离蒽醌苷元的含量对大黄炮制前后的
化学成分变化进行分析，少有涉及蒽醌苷类成分的
研究。作者在对大黄系统的化学成分研究的基础
上，分离得到了芦荟大黄素８ＯβＤ葡萄糖苷、大黄
酸８ＯβＤ葡萄糖苷等２个蒽醌苷类成分，在对大
黄不同饮片中５种游离蒽醌类成分比较研究的同
时，以ＨＰＬＣ法首次建立并比较分析了大黄不同炮
制品（生片、酒片、醋片、熟片、炭片）中２个成分的
含量，为探讨该类成分在大黄炮制过程中的变化规
律进而为揭示大黄不同炮制品的科学内涵提供实验
依据。
１ 材料
Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ１５１５ｐｕｍｐ，
Ｗａｔｅｒｓ２４８７检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ数据处理软件）；超声
清洗器ＫＱ１００ＤＥ（昆山市超声仪器有限公司）；乙
腈为色谱纯，水为纯净水，使用前均经０４５μｍ滤
膜滤过；其他试剂均为分析纯。
跺刀式切药机（ＱＹＪ１２００Ｃ型），ＺＹＧ型可倾式
蒸煮锅，ＤＷ带式干燥机（台州春江制药有限公司出
品）；旋转炒药机（ＤＹ６４０型，河南省周口制药机械
厂出品）；ＤＺ５００双室真空包装机（上海惠河实业有
限公司）。
黄酒（批号 ５００１０６０３２７，天津）；米醋（批号
５００２０６０４２０，北京）。
对照品芦荟大黄素８ＯβＤ葡萄糖苷、大黄
酸８ＯβＤ葡萄糖苷（ａｌｅｏｅｍｏｄｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏ
ｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ａ），ｒｈｅｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ｂ），
以下简称 ａ，ｂ）为本研究室从大黄中提取、分离鉴
定，纯度达９８％以上。
实验用药材采自青海玉树，经中国中医科学院
中药研究所胡世林研究员鉴定为掌叶大黄 Ｒｈｅｕｍ
ｐａｌａｍａｔｕｍＬ．的根及根茎；供试饮片以掌叶大黄药
材为原料，按照《中国药典》、《全国中药炮制规范》
相关项下的炮制方法，由北京人卫饮片厂制备成大
黄生片，大黄酒炙片，大黄醋炙片，熟大黄片以及大
黄炭片各１０批供试样品，临用前分别粉碎过４０目
筛后备用。
２ 方法与结果
２．１ 饮片制备
２．１．１ 大黄生片 取大黄药材，大小分档，以清水
淋洗后，闷润，切厚片（约 ５５ｍｍ），干燥，筛去碎
屑，即得。
２．１．２ 大黄酒炙片 取大黄生片，加入约１０％的
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黄酒拌匀后，闷润约４～５ｈ，至已加热的炒药机中炒
干，快速出锅，摊开，晾凉，筛去碎屑，包装即得。以
生片计，得率约为９１２％。
２．１．３ 大黄醋炙片 取大黄生片，加入约１５％的
米醋拌匀后，闷润约４～５ｈ，至已加热的炒药机中炒
干，快速出锅，摊开，晾凉，筛去碎屑，包装即得。以
生片计，得率约为９１４％。
２．１．４ 大黄熟片 取大黄生片，加入约５０％的黄
酒拌匀，闷润至酒被吸尽后，放入蒸锅中隔水炖至饮
片表面黑褐色，内外颜色一致时，出锅，摊开，晒干，
筛去碎屑，包装即得。以生片计，得率约为８７１％。
２．１．５ 大黄炭片 取大黄生片，投入已加热的转筒
式炒药机中，炒至冒浓黄烟（淡青烟冒出黄烟浓黄
烟）时，喷少许清水灭去火星，快速出锅，摊开，晾
凉，筛去碎屑，包装即得。以生片计，得率约为
７００％。
２．２ 色谱条件
ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（２）柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）；流动相乙腈１％冰醋酸溶液（２０∶８０）；检测波
长４１０ｎｍ；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温３５℃。在此
条件下大黄样品中ａ，ｂ对照品与其他组分均能达到
基线分离，见图１。
２．３ 对照品溶液的制备
取 ａ，ｂ对照品各适量，精密称定，分别加甲
醇制成１７４４，８４００ｍｇ·Ｌ－１的溶液，作为对照
品溶液。
Ａ．对照品；Ｂ样品；１ａ；２ｂ。
图１ 大黄样品ＨＰＬＣ图
２．４ 供试品溶液的制备
取大黄不同样品粉末（过４０目筛）各０２ｇ，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇２５ｍＬ，密
塞，称重，回流提取１ｈ，放冷，密塞，再称定质量，用
甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，以微孔
滤膜（０４５μｍ）滤过，即得。
２．５ 线性关系考察
取上述２个对照品溶液分别进样１，５，１０，１５，
２０μＬ，按上述色谱条件测定，以进样量（μｇ）为横坐
标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，并计算回归方程
得 ａＹ＝１５２１７９１４２５５Ｘ＋５６９７７６６９，ｒ＝
０９９９８；ｂＹ＝１４６６４０９４８６７Ｘ－１８２５２６４８２，
ｒ＝０９９９９；结果表明２个对照品分别在００１７４４～
０３４８８，００８４～１６８μｇ线性关系较好。
２．６ 精密度试验
精密吸取供试品溶液１０μＬ，重复进样６次，按
上述色谱条件测定，结果各对照品峰面积积分值的
ＲＳＤ均小于１０％。
２．７ 稳定性试验
精密吸取供试液溶液１０μＬ，分别在０，２，４，８，
１２，２４ｈ，按上述色谱条件测定，由峰面积值统计结
果可见样品溶液在 ２４ｈ内保持稳定，ＲＳＤ分别为
１２％，２０％。
２．８ 重复性试验
取大黄样品粉末６份，各约０２ｇ，精密称定，制
备成供试品溶液，按上述色谱条件测定并计算含量，
结果各对照品 ６次测定的 ＲＳＤ分别为 １８％，
１５％。
２．９ 加样回收试验
精密称定已知含量的大黄样品粉末适量，共６
份，分别精密加入各对照品适量，按供试品溶液制备
及测定法操作，进行色谱分析，结果见表１。
２．１０ 大黄不同饮片含量测定
取大黄不同饮片，依法制备成供试品溶液。精
密吸取对照品溶液和供试品溶液各１０μＬ，注入液
相色谱仪分析测定，结果见表２。
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表１ 大黄饮片加样回收率
对照品 Ｎｏ． 样品中量／ｍｇ 加入量／ｍｇ 测得量／ｍｇ 回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ／％
ａ １ ０１８７５ ０１９７５ ０３７５７ ９５３０ ９７８２ ２２
２ ０１８７６ ０１９７５ ０３７９４ ９７０９
３ ０１８８６ ０１９７５ ０３７７５ ９５６７
４ ０１８９０ ０１５８０ ０３４３５ ９７７９
５ ０１９０１ ０１５８０ ０３４９２ １００７２
６ ０１８９７ ０１５８０ ０３４８３ １００３８
ｂ １ １０９７１ １０７５０ ２１３３４ ９６４０ ９７８７ １５
２ １０９８２ １０７５０ ２１６１８ ９８９４
３ １１０３７ １０７５０ ２１４１５ ９６５４
４ １１０５９ ０８６００ １９３４８ ９６３８
５ １１１２５ ０８６００ １９７２６ １０００１
６ １１１０３ ０８６００ １９６１４ ９８９６
表２ 大黄不同饮片中２个成分的质量分数及其比例关系（ｎ＝１０） ％
检测指标 生片 酒片 醋片 熟片 炭片
ａ ０１９３６ ０１８７６ ０２０２０ ００８３９ ０００７９
ｂ １１３８５ １１３７２ １１４７０ ０５９１１ ００４７１
总量（ａ＋ｂ） １３３２１ １３２４８ １３４９０ ０６７４９ ００５５０
相对比例ｂ／ａ ５８８ ６０６ ５６８ ７０５ ５９６
ａ／生片 １００ ０９７ １０４ ０４３ ００４
ｂ／生片 １００ １００ １０１ ０５２ ００４
总量／生片 １００ ０９９ １０１ ０５１ ００４
３ 结果与讨论
本研究中以ＨＰＬＣ法首次建立了同时测定大黄
不同饮片中２个蒽醌苷的含量，经对提取溶剂以及
超声、回流和冷浸等提取方法比较分析，样品以甲醇
回流提取１ｈ含量最高。同时对检测波长、色谱流
动相等进行了考察，结果表明该方法灵敏可靠、重复
性好，可用于大黄不同饮片的含量比较测定。
通过对大黄生片、酒片、醋片、熟片以及炭片等
５种饮片各１０批次的含量测定，并以平均含量进行
比较，结果各饮片中２个蒽醌苷类成分的含量及其
比例关系呈现一定的变化规律：①２种成分的比例
关系：从不同饮片的测定结果分析，各饮片中均检测
出该 ２个成分，且均以大黄酸８ＯβＤ葡萄糖苷
（ｂ）含量最高，约为 ａ的６倍，２个成分的比例关系
（ｂ／ａ）由生片、酒片、醋片、熟片至炭片，分别为
５８８，６０６，５６８，７０５，５９６，除熟片大于７外，其余
４种饮片中２个成分之间的比例（ｂ／ａ）约为６，说明
不同炮制方法对２个成分的影响基本一致。②单一
成分ａ（ｂ）的含量变化分析：以生片中 ａ（ｂ）的含量
为１进行计算，结果酒片、醋片、熟片、炭片分别为
０９７（１００），１０４（１０１），０４３（０５２），００４
（００４），由此看出２个成分从生片、酒片至熟片含
量差别不大，醋片略高，生片、酒片含量相近；而熟片
变化较大，２个成分分别为生品的４３％和５２％，炭
片降低更多，仅为生片的４％，说明长时间的加热蒸
制和高温制炭对该类成分影响较大。③２种成分的
总量分析：２个成分总量的变化趋势与 ａ，ｂ单一成
分的变化规律一致，大黄醋片、生片、酒片总量含量
差别不大，至熟片总量下降近５０％，炭片２个成分
的下降更为显著，仅为生片的４％。
中药发挥疗效依赖于所含物质基础———多种化
学成分按一定比例在多靶点上的整体协同作用，不
同结构类型的蒽醌苷和苷元是大黄的主要药效成
分，从化学结构上分析，在加热等条件下，蒽醌苷类
成分在被破坏的同时，也有向蒽醌苷元转化的趋势，
与炮制工艺条件密切相关。酒片、醋片加热炒制时
间短，因此２个蒽醌苷类成分含量与生品相比，无论
是单一成分还是总量含量变化不大，且成分间比例
关系较为接近，只是醋片略有升高，可能与醋酸有助
于破坏细胞壁，使有效成分易于溶出有关；熟片加热
蒸制时间长，因此２个成分含量下降明显，炭片的高
温炒制使２个成分仅余４％作为“存性”药效物质基
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础的组成部分。前文报道［３］了大黄５种饮片中原生
（未水解）游离蒽醌苷元的含量以熟片最高，炭片次
之，酒片、醋片含量较生片略有降低；由此推测大黄
不同饮片的炮制工艺使２个苷类成分发生了不同程
度的分解、转化（苷元）或破坏，此与大黄不同饮片
的药性及其临床功效密切相关；后续工作将继续开
展大黄不同饮片的药效物质研究，为揭示炮制改变
大黄药性的物质基础内涵提供实验依据。
［参考文献］
［１］ 徐翔，郦柏平，徐慧芬．大黄的研究进展［Ｊ］．上海中医药杂志，
２００３，３７（４）：５６．
［２］ 丁玉玲．大黄蒽醌类的研究概况［Ｊ］．时珍国医国药，２００５，１６
（１１）：１１６０．
［３］ 张村，李丽，肖永庆，等．大黄５种饮片中游离蒽醌类成分比较
研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００９，３４（１５）：１９１４．
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｏａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅＯｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｉｎ
ｆｉｖｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｉｅｃｅｓｆｒｏｍＲｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ
ＺＨＡＮＧＣｕｎ，ＬＩＬｉ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ，ＬＩＮＮａ，ＬＩＵＣｈｕｎｆａｎｇ，ＴＩＡＮＧｕｏｆａｎｇ，ＣＨＥＮＤｏｎｇｄｏｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭａｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｗｏａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅＯｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｉｎｆｉｖｅｄｉｆｅｒｅｎｔｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍ
Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆａｌｅｏｅｍｏｄｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｒｈｅｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏｓｉｄｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ
ｂｙＨＰＬＣｏｎａａｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（２）ｃｏｌｕｍｎａｔ３５℃ ｗｉｔｈｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ１％ ｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（２０∶８０）．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ４１０ｎｍａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓｆｏｒｔｗｏｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｅｒｅｌｉｎｅａｒ
ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ００１７４４０３４８８μｇ（ｒ＝０９９９８，ｎ＝５），００８４１６８６μｇ（ｒ＝０９９９９，ｎ＝５），ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ
ｗｅｒｅ９７８２％，９７８７％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗｅｒｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆｇｌｕｃｏ
ｓｉｄｅｓｃｏｎｔｅｎｔｓａｍｏｎｇｔｈｅｆｉｖｅｄｉｆｅｒｅｎｔｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｉｅｃｅｓ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｈｅｃｒｕｄｅｐｉｅｃｅｓ，ｐｉｅｃｅｓｒｏａｓｔｅｄｗｉｔｈｍｉｌｅｔｗｉｎｅａｎｄｐｉｅｃｅｓ
ｒｏａｓｔｅｄｗｉｔｈｖｉｎｅｇａｒｗｅｒｅａｌｍｏｓｔｔｈｅｓａｍｅ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｐｒｅｐａｒｅｄｐｉｅｃｅｓａｎｄｃｈａｒｉｎｇｐｉｅｃｅｓｈａｄｅｖｉｄｅｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｎｔｅｎｔｓ．Ｔｈｅａｒｅｃｅｒ
ｔａｉｎｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｉｎｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ；ｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｉｅｃｅｓ；ａｌｅｏｅｍｏｄｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ；ｒｈｅｉｎ８ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ；
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