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Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
冬凌草甲素水溶液稳定性研究
许 洁，赵继会，王 菊 ，冯年平*，谭 蓉，刘 颖
（上海中医药大学 中药学院，上海 201203）
[摘要] 目的：考察冬凌草甲素（ORI）水溶液的稳定性，为ORI新型给药系统的研究奠定基础。方法：在室温下将 ORI
水溶液分别用 1 mol·L-1的 NaOH或 HCl调节 pH至设定值，放置 60 h，考察 pH对 ORI水溶液稳定性的影响；采用经典恒
温法预测ORI水溶液在室温下和 4 ℃条件下的稳定性。结果：ORI降解的 pH-速率曲线呈 V型，最稳定的 pH（pHm）为 5。
ORI的水溶液在室温下有效期（t90）为 53.2 h，4 ℃下为 91.5 h。结论：ORI水溶液不稳定，其降解反应速度受溶液 pH的
影响，属于酸碱专属催化反应。
[关键词] 冬凌草甲素；稳定性；pH；恒温

7冬凌草甲素（oridonin，ORI）是冬凌草 Rabdosia
rubescens（Henmsl.） Hara 的主要抗癌成分，属于
贝壳杉烯二萜类化合物，极微溶于水。研究[1-3]表明，
ORI 对体外培养的人体食管癌 109 细胞、肝癌
BEL-7402细胞及白血病细胞等多种人体癌细胞有明
显的细胞毒作用，近年来得到广大药物研究者的广
泛关注，已有 β-环糊精包合物[4]、固态类脂纳米粒[5]、
PCL-PEO-PCL 载药纳米粒[6]和聚乳酸纳米粒[7]的研
究报道。徐文[8]等在研究 ORI 平衡溶解度时发现，
其在碱性下不稳定，但 ORI水溶液稳定性的系统研
究未见报道。药物的稳定性考察是处方前研究的重
要组成部分，对选择合理的剂型和制剂工艺具有重
要的指导意义。作者目的是考察 ORI水溶液的稳定
性，为 ORI的新型给药系统的研究奠定基础。
1 仪器与试药
Agilent 1100高效液相色谱仪（美国 Agilent公
司）；pHS-2F型 pH计（上海精密科学仪器有限公
司），DKB-50 型超级恒温水槽（上海精密实验设
备有限公司）。
ORI对照品（含量>98%，中药固体制剂制造技
术国家工程研究中心，批号 1046-050512）；ORI
原料药（97.3%，杭州华东医药集团康润制药有限

[收稿日期] 2008-07-03
[基金项目] 上海市博士点基金(2006B02)；上海市教委重点学科项目
(J50302)；上海市科委(0852nm05300)
[通信作者]
*
冯年平，教授，从事中药制剂和药物新型给药系统研究，
Tel/Fax：（021）51322197，E-mail：npfeng@hotmail.com

公司，批号 200705）。甲醇为色谱纯，水为重蒸水，
其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 ORI含量测定方法
2.1.1 色谱条件 ODS-Kromasil C18 色谱柱（4.6
mm×250 mm，5 µm），流动相甲醇-水（60∶40），
检测波长 238 nm，流速 1.0 mL·min-1；柱温 30 °C。
ORI对照品、原料药和 60 h后 ORI在 pH 1，pH 13
和 80 °C溶液中的典型色谱图见图 1。

A. 对照品；B. 原料药；C. 60 h后pH1溶液；
D. 60 h后pH 13溶液；E. 60 h后80 °C溶液；1. 冬凌草素。
图1 ORI专属性和典型图谱

2.1.2 标准曲线 ORI标准溶液配制精密称取 ORI
对照品 7.68 mg置 10 mL量瓶中，加流动相溶解并
稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 768 mg·L-1的 ORI
储备溶液。再分别精密量取 10，50，100，400，1 000，
2 500 µL储备溶液，置 10 mL量瓶中，流动相稀释
至刻度，制成浓度分别为 0.768，3.84，7.68，30.72，
76.8，192 mg·L-1 的 ORI标准溶液。


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分别取 20 μL标准溶液进 HPLC分析，以 ORI
的峰面积（A）对浓度（C）进行回归，得 A=
22.982 3C+2.263 8（r=0.999 8）结果表明，ORI质
量浓度在 0.768～192 mg·L-1，A与 C线性关系良好。
2.2 ORI水溶液稳定性考察
2.2.1 ORI样品溶液的制备 精密称取ORI原料药
24.22 mg，置 100 mL量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释
至刻度，得 242.2 mg·L-1的 ORI样品溶液。
2.2.2 pH对 ORI稳定性的影响 精密量取 ORI样
品溶液 5 mL，分别用 1 mol·L-1的 HCL或 1 mol·L-1
的 NaOH溶液调节溶液 pH为 1.0，3.0，5.0，7.0，
9.0，11.0，13.0，再用同样 pH 的空白溶液定容至
10 mL，摇匀密封，在室温下避光放置 60 h，分别
于 0，1，4，8，12，24，36，60 h各取样 0.5 mL，
于 HPLC仪上，进样 20 μL，测定 ORI的含量。
分别计算各 pH下 ORI的降解速率常数 K，以
logK 对 pH作图，绘制 pH-速率曲线，考察 pH对
ORI稳定性的影响，结果见图 2。

图2 ORI水溶液降解的pH-速率曲线
由图2可见，ORI水溶液降解的pH-速率曲线呈
V型，pHm为5。因此判断ORI水溶液的降解反应速率
受溶液的pH影响，属于专属酸碱催化反应。
2.2.3 经典恒温法预测 ORI 水溶液在室温下的稳
定性 精密量取 ORI样品溶液 5 mL，用重蒸水稀
释至 10 mL，摇匀，密封。分别在 40，50，60，70，
80 °C恒温水浴中避光保存 60 h，分别于 0，1，4，
8，12，24，36，60 h时各取样 0.5 mL，于 HPLC
仪上，进样 20 μL，测定 ORI的含量，计算降解百
分率，以未降，见图 3。


图 3 不同温度下 ORI水溶液的降解曲线

ORI在水中的降解随温度的升高而加快，在 80
°C时，60 h的降解百分率为（31.89 ± 2.17） %。
将 ORI在不同温度下的降解数据分别带入零级、一
级和二级反应方程进行拟合，结果见表 1。
由表 1可见，零、一、二级反应方程拟合结果
都可接受，其中二级反应方程拟合效果最佳，但各
方程拟合的相似系数差别不大。鉴于一级反应的速
率常数 K与药物浓度无关，适用范围广，因此采用
一级方程计算 ORI水溶液降解的速率常数。
表 1 ORI在不同温度下降解方程拟合（n=3）
温度/°C 零级反应 一级反应 二级反应
40 C=–0.324 8t+119.69，r=–0.967 8 lnC=–0.002 9t+4.785 6，r =–0.972 1 1/C=2.618×10–5t+0.008 34，r=0.976 2
50 C=–0.349 6t+115.59，r=–0.966 6 lnC=–0.003 3t+4.750 9，r = –0.973 8 1/C = 3.08×10–5t+0.008 64，r = 0.980 1
60 C=–0.434 1t+114.04，r=–0.966 4 lnC=–0.004 2t+4.737 9，r=–0.975 4 1/C=4.11×10–5t+0.008 74，r=0.983 1
70 C=–0.507 8t+115.12，r=–0.977 9 logC=–0.0050 1t+4.748 5，r=–0.985 8 1/C=4.963×10–5t+0.008 64，r=0.991 6
80 C=–0.613 5t+114.49，r=–0.964 0 logC=–0.006 2t+4.743 7，r=–0.977 0 1/C=–6.406×10–5t+0.008 67，r=0.986 6
根据各温度下的降解速度常数 K和温度 T，得
到回归方程 logK=–926.37×1/T+0.406（r=–0.994 4）。
依据经典恒温法 Arrhenius定律，利用该方程，求
A
TR
EK log1
303.2
log +´-=
出ORI的降解活化能E、频率因子A和25 ℃和4 ℃
下 ORI的降解速度常数 K，并计算其在常温下的有
效期 t90，见表 2。
冬凌草甲素水溶液在 25 ℃下的 t90为 53.2 h；
在 4 ℃条件下的为 91.5 h。


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表2 ORI在室温下和冷藏时的有效期和半衰期（n =3）

3 讨论
ORI水溶液降解的 pH-速率曲线呈 V型，属于专
属酸碱催化降解反应。ORI在中性和偏酸性环境中较
稳定，在碱性和强酸性环境中不稳定，容易降解，pHm
为 5。固定 pH 7时，ORI水溶液降解反应以二级动力
学方程拟合结果最好，属于二级反应。ORI在水中的
降解随温度的升高而加快，在 80 ℃时，60 h的降解
百分率为（31.89±2.17）%。ORI水溶液（pH 5.5）不
稳定，25 ℃下的 t90为 53.2 h；在 4 ℃条件下的为 91.5
h。因此，对于 ORI的血管外给药制剂适宜选用固体
剂型；对于静脉给药制剂适宜制成注射用冻干粉针，
并且在制备过程中应注意控制溶液的 pH，尽量避免
或缩短高温加热的时间。
[参考文献]
[1] Zhang Junfeng，Liu Jiajun，Liu Peiqing，et al. Oridonin inhibits cell
growth by induction of apoptosis on human hepatocelluar carcinoma
BEL-7402 cells[J]. Hepatol Res，2006，35（2）：104.
[2] Ikezoe T，Chen S S，Tong X J，et al. Oridonin induces growth
inhibition and apoptosis of a variety of human cancer cells[J]. Int J
Oncol，2003，23（4）：1187.
[3] 刘加军，潘祥林，伍新尧，等. 冬凌草甲素诱导白血病 K562 细
胞凋亡的机制[J]．肿瘤研究与临床，2003，15（4）：222.
[4] 张雁冰，薛华珍. 信阳冬凌草甲素和乙素 β-环糊精包合物的研究
[J].中药材，2001，24（2）：131.
[5] 张典瑞，任天池，娄红祥，等. 冬凌草甲素硬脂酸固态类脂纳米
粒的实验研究[J]. 中国药学杂志，2004，39（2）：123.
[6] 施水萍，冯年平，余 婧，等. 冬凌草素载药纳米粒的制备与表征
[J]. 中国天然药物，2005，3（5）：291.
[7] Xing Jie ， Zhang Dianrui， Tan Tianwei. Studies on the
oridonin- loaded poly（D，L-lactic acid） nanoparticles in vitro and in
vivo[J]. Int J Biol Macromol，2007，40（2）：153.
[8] 徐 文，孙 进，张婷婷，等. HPLC法测定冬凌草甲素的平衡溶
解度和表观油水分配系数[J]．沈阳药科大学学报，2007，22（4）：
220.


Study on stability of oridonin solution

XU Jie，ZHAO Jihui，WANG Ju，FENG Nianping*，TAN Rong，LIU Ying
（Department of Pharmaceutics，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China）

[Abstract] Objective：To investigate the stability of oridonin（ORI） solution for research and development of novel ORI
prepartions. Method：The effect of pH on the degradation rate of ORI was evaluated，the pH values of the oridonin solutions were
adjusted to the setting pH， with 1 mol·L-1 HCl or NaOH， respectively，and stored at room temperature for 60 h. The constant
temperature method was applied to evaluate the stability of ORI solution at room temperature and at 4 ℃. Result：The pH-rate
profile of ORI was V-shaped，and the pHm was 5. The t90 of ORI solution at room temperature was 53.2 h and 91.5 h at 4 ℃
Conclusion：The ORI solution is not stable. The pH-dependent degradation of ORI solution confirms to specific acid-base catalysis
reaction.
[Key words] oridonin; stability; pH; constant temperature method
[责任编辑 鲍 雷]


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温度/°C E/J·mol-1 A K /h-1 t90/h
25 1.98×10-3 53.2
4
17 737.4 2.55
1.15×10-3 91.5