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Vol.34，Issue 4
February，2009
第 34 卷第 4 期
2009 年 2 月
青藤碱在 Beagle 犬体内的药动学和绝对
生物利用度研究
陈万一 1，周远大 1*，康纪平 2，李秋波 2，冯晓科 2
(1.重庆医科大学附属 第一医院 临床药理研究室, 重庆 400016；
2.四川省养麝研究所，四川 都江堰 611830)
[摘要] 目的：研究青藤碱在 Beagle 犬体内药动学和口服绝对生物利用度。方法：采用双周期自身交叉设计, 在 10 只
Beagle 犬中研究单次口服或静脉注射青藤碱 10 mg·kg-1的药动学参数和绝对生物利用度，用高效液相色谱法测定血药浓度，
利用 3p97 软件计算药动学参数。结果：口服青藤碱后犬体内药-时曲线呈一室模型，主要药动学参数 Tmax（82.5±13.9） min，
Cmax（0.15±0.027） mg·L-1，t1/2（87.6±28.3） min，AUC0～T（28.43±3.48）mg·min·L-1，静注青藤碱后犬体内药-时曲线呈
二室模型，主要药动学参数 t1/2β（106.7±120.2） min，AUC0～T（93.32±82.08） mg·min·L-1，青藤碱的口服绝对生物利用
度为（30.46±4.24）%。结论：青藤碱口服绝对生物利用度较低，且在犬体内消除较快。
[关键词] 青藤碱；药动学；绝对生物利用度；高效液相色谱法

青藤碱(sinomenine)是从传统治疗风湿性疾病
中药清风藤中提取的一种单体成分，具有抗炎抗风
湿、免疫抑制、镇静、镇痛的作用，广泛应用于临
床。青藤碱制剂主要有片剂、注射剂，其缓释制剂
也已上市[1]。青藤碱的药动学已有文献报道[2-5]，但
其口服绝对生物利用度研究尚未见文献报道。为帮
助临床医生了解其绝对生物利用度以避免用量不
足或过量中毒，本研究建立了青藤碱血药浓度的
HPLC 法，测定 Beagle 犬灌服和静注给予青藤碱后
的血药浓度，研究青藤碱在 Beagle 犬体内的绝对生
物利用度。
1 材料
1.1 仪器
Angilent 1100 高效液相色谱仪，Phenomenex
Gemini C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；
PHS-3C 酸度计(上海精密科学仪器有限公司)；
VXH-3 型快速混合器(上海跃进医疗器械厂)；
B160A 型医用低速离心机(河北省安新县白洋离心
机厂)；BP61 型电子天平(德国 Sartorius 公司)。

[收稿日期] 2008-09-22
[通信作者] *周远大，Tel：(023)68898185，E-mail：zhouyuanda001@
163.com
[作者简介] 陈万一，在读硕士，从事中药药理与新药开发研究，
Tel:15823826967，E-mail：chenwanyi1005@163.com
1.2 药品和试剂
青藤碱肠溶片(商品名为正清风痛宁片，西安利
君制药有限责任公司，规格：20 mg／片，白色，
批号 0707291)。去水吗啡(内标，沈阳第一制药厂，
规格每毫升 5 mg，批号 20020613)。青藤碱标准品
(西安赛邦医药科技有限公司，白色结晶粉末，无臭，
味苦，易溶于水，溶解于乙醇，纯度 98％ ，批号
20070402)。二氯甲烷为色谱纯，其余试剂均为分析
纯。重蒸水(重庆医科大学附属医院药剂科)。
1.3 动物
健康 Beagle 犬 10 只，体重（10±0.8） kg，
雌雄各半，四川养麝研究所提供，质量合格证号和
环境设施合格证号分别为川实动管第 63，64 号。
2 方法
2.1 给药方案与血样采集
采用双周期自身交叉设计，10 只 Beagle 犬，
雌雄各半，随机分为 2 组，一组口服给药，另一组
静注给药，1 周后交叉给药。试验前禁食 12 h 后，
根据人用剂量，于次日晨 8 时分别空腹灌服或静注
10.0 mg·kg-1 青藤碱，分别于给药后 0，1，3，5，
10，20，40，60，120，240，480 min 和 0，15，30，
60，90，120，240，480 min，从前肢静脉取血 2 mL，
分离血浆，低温保存（-20 ℃）待测。


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2.2 血药浓度测定方法
2.2.1 色谱条件 Phenomenex Gemini C18 色谱柱
(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相甲醇-0.01 mol·L-1
磷酸二氢钠-三乙胺(55﹕45﹕0.1，pH 7)，流速 0.8
mL·min-1；内标去水吗啡；检测波长 262 nm；柱温
30 ℃；进样量 50 μL。
2.2.2 青藤碱标准溶液的配制 精密称取青藤碱
对照品适量，用甲醇溶解并定容，配成 300 mg·L-1
的储备液,于 4 ℃保存。临用前，用犬空白血浆按倍
数稀释法稀释至所需浓度，即得青藤碱标准工作
液。
2.2.3 内标液的配制 取 1 支去水吗啡液（5 mg，
1 mL），加甲醇配成 200 mg·L-1 的储备液，于 4 ℃
保存。临用前，加水稀释成 40 mg·L-1 ，即得内标
工作液。
2.2.4 样品处理 取血浆样品 0.4 mL，加入内标去
水吗啡 50 μL（40 mg·L-1 ），混合均匀，并加入二
氯甲烷 4 mL，漩涡混匀 1 min 后置 3 500 r·min-1 离
心 5 min，静置分层。取二氯甲烷层清液，50 ℃水
浴中氮气吹干，流动相复溶 100 μL，每次进样 50
μL。
2.3 数据处理
采用 3p97 计算机软件选择最佳药代动力学模
型，计算药动学参数。口服给药的 Cmax，Tmax用实
测值表示；AUC0～T 用梯形法计算，口服给药的绝
对生物利用度 F= 0~
0~
(AUC )
(AUC )
T po
T iv
×100%， 0~(AUC )T iv ，
0~(AUC )T po 分别为静注、口服给药药-时曲线下面积。
3 结果
3.1 特异性
在选定的色谱条件下，青藤碱和内标物质峰形
好，与血浆中内源性物质及其他杂质分离良好(图
1)。

A.青藤碱+去水吗啡对照品溶液；B.空白血浆；C.空白血浆+青藤碱+去水吗啡对照品；
D.Beagle 犬给药 1 h 后血浆样品；1.青藤碱 2.去水吗啡（内标）。
图 1 青藤碱 HPLC 图

3.2 标准曲线、线性范围和最低定量浓度
分别取青藤碱储备液适量及犬空白血浆，制成
质量浓度为 90，45，22.5，4.5，0.45，0.045，0.007
5 mg·L-1 的青藤碱血浆样品，按 2.2.4 项下方法处理
进样，所得数据以血浆中青藤碱的浓度 X 对青藤碱
与内标的峰面积比值 Y 进行线性回归，得血浆中青
藤碱的标准曲线为 Y=0.392 0X＋ 0.705 2（ r=
0.999 1）。结果表明，青藤碱在 0.007 5～90 mg·L-1
线性关系良好，最低定量为 0.007 5 mg·L-1（n=5，
RSD 9.2%）。
3.3 回收率和精密度
取青藤碱储备液适量及犬空白血浆，制成高、
中、低 3 种不同（45，4.5，0.045 mg·L-1）样品，
按 2.2.4 项下方法处理，评价本法的方法回收率与
萃取回收率（含药血浆经样品处理所得测定值与同
时用流动相配制的同浓度对照溶液测定值计算萃
取回收率）及日内、日间精密度，见表 1。
3.4 稳定性
室温稳定性试验 取 4.5 mg·L-1 血浆样品，室温
放置,于 24 h 内测定 3 次，结果表明，室温放置


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表 1 回收率及精密度测定( ±sx ，n=5)
精密度RSD/% 质量浓度
/mg·L-1
方法回收率
/%
萃取回收率
/% 日内 日间
45 99.6±3.3 - 1.50 5.71
4.5 105.8±4.0 72.51±2.02 4.44 6.44
0.045 100.8±2.0 - 7.37 7.40

24 h 内稳定性良好[青藤碱（4.42±0.20）mg·L-1，
RSD 4.52%]。
冷藏稳定性试验 取中浓度（4.5 mg·L-1）血浆
样品，冷藏（4 ℃）放置,于 6 d 内测定 5 次，结果
表明冷藏放置 6 d 内稳定性良好[青藤碱(4.68±0.23)
mg·L-1，RSD 4.91 %]。
冻融稳定性试验 将含药血浆反复冷冻(-20
℃)、溶解，按样品处理后测定,3 d 内测定 3 次，测
得青藤碱质量浓度分别为 0.12，0.13，0.12 mg·L-1，
结果表明血浆样品 3 d 内反复冻融测定稳定性良好
[(0.12±0.005 8) mg·L-1，RSD 4.8%]。
3.5 血药浓度
10 只Beagle犬按 10.0 mg·kg-1量单次口服及静
注青藤碱后的血浆按 2.2.4 项下方法处理后，以青
藤碱峰面积与内标峰面积之比值代入标准曲线计
算血药浓度，作平均药-时曲线（图 2）。

A. 青藤碱静注；B. 青藤碱灌服。
图 2 10 只 Beagle 犬单次静注及口服 10 mg·kg-1 青藤碱后
的平均血药浓度-时间曲线

3.6 药动学参数
Beagle 犬按 10.0 mg·kg-1 量口服青藤碱肠溶片
在体内的药-时数据拟合后为一室开放模型，而静注
给药的药-时数据拟合后为二室开放模型，其各自的
药动学参数见表 2。结果显示，口服给药的
AUC0～T 显著小于静注给药，口服给药的绝对生物
利用度为（30.46±4.24）%。
表2 静注青藤碱后在犬体内的主要药动学参数
( ±sx ，n=10)
参数 平均值
t1/2α/min 1.45±1.02
t1/2β/min 106.68±120.23
α/min-1 0.67±0.36
β/min-1 0.028±0.035
CL(s)/L·min-1 0.25±0.22
V(c)/L·kg-1 8.80±18.96
AUC0～T/mg·min-1·L-1 93.32±82.08
AUC0～∞/mg·min-1·L-1 123.42±99.02

表3 口服青藤碱后在犬体内的主要药动学参数
( ±sx ，n=10)
参数 平均值
t1/2Ka/min 31.52±12.52
t1/2Ke/min 87.62±28.26
Tmax/min 82.50±13.89
Cmax/μg·mL-1 0.15±0.027
CL/F(s)/L·min-1 0.36±0.12
V/F(c)/L·kg-1 42.85±10.08
AUC0～T/mg·min-1·L-1 28.43±3.48
AUC0～∞/mg·min-1·L-1 32.14±9.38
F/% 30.46±4.24
注：Cmax，Tmax为实测值。

4 讨论
已有文献报道的青藤碱的高效液相色谱法检
测中，采用三唑仑[4]、氨基比林[6]或者氯霉素[7]作为
内标，但在本实验室条件下，效果均不理想，经多
次预试验并继续改进本实验室之前采用的色谱条
件和方法[2]，采用去水吗啡作内标，将流动相甲醇
-0.01 mol·L-1磷酸二氢钠的比例调整为 55∶45，取
得了良好的分离分析效果，完全满足本研究条件，
可供临床检测血药浓度所需。
本研究首次报道了 Beagle 犬静脉给药的药动
学特征及口服给药的绝对生物利用度,研究结果表
明，Beagle 犬静注青藤碱后，药-时曲线呈二室模型，
其CL(s)（0.25±0.22） L·min-1，t1/2β（106.68±120.23）
min，提示其消除较快，个体差异较大。灌服给药


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青藤碱后，药 -时曲线呈一室模型，其 CL/F(s)
（0.36±0.12） L·min-1，t1/2（87.62±28.26） min，
Tmax（69.66±16.41） min，已有文献报道[2]的在家
兔体内与本实验所得到的青藤碱在 Beagle 犬体内
的药动学参数之间有一定差异，这可能是给药剂
量、种族差异等造成的。本品口服生物利用度低，
为 (30.46±4.24)%。
[参考文献]
[1] 孔庆峰，李 军．青藤碱研究新进展[J]．中国中药杂志，2005，
30(20)：1575．
[2] 张斯汉，周远大，何海霞．正清风痛宁肠溶片的生物等效性研究
[J]．中国中药杂志，2008，33(6)：684．
[3] 刘启德，梁美蓉，欧卫平，等．青藤碱时辰药代动力学研究[J]．中
药新药与临床药理，1995，6(1)：24.
[4] 杨广德，刘军保，王志军，等．高效液相色谱法测定人血清和尿
中盐酸青藤碱浓度及药代动力学研究[J]．药学学报，1997，32(8)：
620．
[5] 罗顺德，蔡鸿生，张先州，等．高效液相色谱法测定青藤碱血药
浓度及药物动力学研究[J]．中国中药杂志，1992，17(7)：425．
[6] 杨广德，刘军保，王志军，等．反相高效液相法测定血浆中青藤
碱的含量[J]．中国药学杂志，1993，28(3)：152．
[7] 张先洲，周延安，罗顺德，等．青藤碱凝胶剂的质量标准研究[J]．医
药导报，2003，22(8)：571．


Study on pharmacokinetics and absolute bioavailability of sinomenine
in beagle dogs

CHEN Wanyi1, ZHOU Yuanda1*, KANG Jiping2, LI Qiubo2, FENG Xiaoke2
(1. Department of Clinical Pharmacology, First Affiliated Hospital of Chongqing University of Medical Sciences,
Chongqing 400016, China ;2. Sichuan Institute of Research Deer, Dujiangyan 611830, China)

[Abstract] Objective: To study pharmacokinetic parameters and absolute bioavailability for oral use of sinomenine tablet
in beagle dogs. Method: Applying to double cycle self crossover design, a single oral or intra- venous dose of 10 mg·kg-1 sinomenine
was given to 10 beagle dogs. Drug concentrations in plasma were determined by HPLC. The pharmacokinetic parameters were
calculated by 3P97 pharmacokinetic program. Result: The concentration-time curves of oral administration fitted to one
compartment model in the beagle dogs. The Tmax, Cmax, t1/2 and AUC0～T was (82.5±13.9) min, (0.15±0.027) mg·L-1, (87.6±28.3 )min
and(28.43±3.48) mg·min·L-1, respectively. The concentration -time curves of iv fitted to two compartment model in the beagle dogs.
The t1/2β and AUC0～T was (106.7±120.2) min and (93.32±82.08) mg·min·L-1. The absolute bioavailability for oral use was
（30.46±4.24）%. Conclusion: The absolute bioavailability of sinomenine is low, and the elimination of sinomenine tablet is fast.
[Key words] sinomenine; pharmacokinetics; absolute bioavailability; HPLC
[责任编辑 刘 ]