全 文 ：EFG<测定黑骨藤中槲皮素5)!!

!#!
吡喃阿拉伯糖苷含量
陈华国!+! 周欣!+!! 曹桂红!+! 甘秀海!+
d贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心! 贵州 贵阳 $$$%
+d贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室! 贵州 贵阳 $$$#
摘要#!目的$建立黑骨藤中槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的含测定方法) 方法$ 采用反相高效液相色谱法$E6AMCUNS
<
(
!&d# 00i+$ 00$

0柱$甲醇5水!))o#%为流动相$流速为 0G*0N2f$检测波长 )%$ 20$柱温 + h) 结果$槲皮素5
)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷在 $d+$&& g+d$&&

D线性关系良好$/j$d*** *$平均回收率为 *%d%(e$>8X$d(e !)j*) 黑骨藤
药材中槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的平均含量 $d*e) 结论$该方法分离效果好$简便准确$可用于黑骨藤中槲皮素5)!
!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的含量测定$以控制黑骨藤药材质量)
关键词#!黑骨藤+ 槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷+EFG<+ 含量测定
稿件编号#!+$$*$*$$$
基金项目#!贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目.黔科
合社字!+$$*$+ 号/+ 贵州省发展和改革委员会项目!黔发改高
技.+$$(/#$$+贵阳市科学技术计划项目!.+$$*/筑科农合同字第
(5$$) 号+贵州省中药材现代产业技术体系专项经费 !黔农计
.+$$*/+)# 号
通信作者#!!周欣$教授$主要从事中药%民族药质量控制%中药指
纹图谱以及中药新药研发$I50BNS# BSN.M*($$3UN2Bd./0
作者简介#!陈华国$硕士$讲师$主要从事中药%民族药质量控制
以及中药新药研发$I50BNS#.?M2?LBDL/*(3#)d./0
!!黑骨藤为萝雐科杠柳属植物黑龙骨 $9/-;&%A7
.%/9?,-8.?S@Cd的干燥根或全株) 黑骨藤全株入药$
具有通经%活血%解毒%祛风的功效$主治风湿关节
痛%跌打损伤%月经不调等症$是民间广泛应用于治
疗闭合性软组织损伤%风湿与类风湿等疾病的民族
药) 主要分布于我国西南地区及青海%广西%西藏
等地./ )
贵州省中药材%民族药材质量标准( !+$$) 年
版中收录了黑骨藤.+/ $但在该标准中仅有黑骨藤的
性状%显微以及部分理化鉴别试验$缺乏控制黑骨藤
药材质量的有效方法) 目前国内外鲜有黑骨藤质量
控制方面的研究报道$本试验在黑骨藤化学成分研究
的基础上$采用液相色谱法建立黑骨藤药材中指标性
成分槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的含量测定方
法$为
#
骨藤药材的质量控制提供科学依据.)/ )
!仪器与试药
4DSNM2@$$ 高效液相色谱仪!四元泵$X4X检
测器$自动进样器$=$ 万天平!梅特勒 托利多+
色谱甲醇!美国 PIX:4+水!重蒸水$临用前制备+
槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷对照品!自制$通
过波谱解析技术!:>$E5;9>$)<5;9>$98分析$
鉴定其结构$通过 X4X检测器检测其纯度为
*(d#%e$合符含量测定要求+黑骨藤药材产地分别
为贵州花溪%香纸沟%贵州高坡等地$于 +$$( 年 $
月共收集了 ( 批样品$经贵阳中医学院何顺志研究
员鉴定为$C.%/9?,-$阴干备用)
(!方法和结果
(_!色谱条件!E6AMCUNS<
(
色谱柱!&d# 00i+$
00$

0$甲醇5水!))o#%为流动相$流速为
0G*0N2
f
$检测波长 )%$ 20$柱温 + h$进样量
+$

G) 在上述色谱条件下槲皮素5)!!

!#5吡喃阿
拉伯糖苷与其他组分分离度良好$见图 )
4d对照品+Rd样品+d槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷)
图 !黑骨藤样品及对照品EFG<图
(_(!对照品溶液的制备 !精密称取槲皮素5)!!

!
*&(+*
第 ) 卷第 $ 期
+$$ 年 月
!!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! !
[/Sd)$ :UULM!$
9B6$ +$$
#5吡喃阿拉伯糖苷对照品 $d# 0D$置 $ 0G量瓶
中$加甲醇溶解并定容至刻度$摇匀+精密吸取该对
照品液 0G至 $ 0G量瓶中$加甲醇制成每 0G
含 $d$+ 0D的溶液$即得)
(_&!供试品溶液的制备 取本品中粉 + D$精密称定$
置具塞锥形瓶中$精密加入甲醇溶液 $ 0G$称定$加
热回流提取 + ?$放冷$用甲醇补足减失质量$摇匀$滤
过$取续滤液过 $d&

0的微孔滤膜$即得)
(_Q!线性关系考察!精密称取经减压干燥至恒重
的槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷对照品 $d++
0D置 $ 0G量瓶中$加甲醇溶解并稀释至刻度$摇
匀$制成每 0G含槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷
$d+$& & 0D的对照品液) 精密吸取该对照品溶液
$+$&$#$($$

G$注入高效液相色谱仪$按上述色
谱条件测定$并以对照品的进样量 4!

D为横坐
标$峰面积值3为纵坐标$绘制标准曲线$回归方程
3j+ ##(d*+4f)%d($ /j$d*** *$结果表明$槲
皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷在 $d+$& & g+d$&&

D线性关系良好)
(_$!精密度试验!精密吸取上述槲皮素5)!!

!
#5吡喃阿拉伯糖苷对照品液 +$

G$按上述色谱
条件$连续进样 # 次$测定峰面积$计算平均相对
标准偏差$>8X$de$说明该方法具有良好的精
密度)
(_Y!稳定性试验!取同一批号样品!贵州 黔陶
乡$按供试品溶液的制备方法操作$分别于 $$+$&$
($$$+ ?精密吸取 +$

G进样$测得槲皮素5)!!

!
#5吡喃阿拉伯糖苷峰面积的 >8Xd&e$样品至少
在 + ?内稳定)
(_%!重复性试验 取同一批号样品!贵州 黔陶乡#
份$分别制备供试液$测得槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉
伯糖苷平均质量分数 $d*e$ >8Xd$e) 该试验
重复性良好)
(_`!回收率试验!采用加样回收法$取已知含量的
样品!贵州 黔陶乡$精密称定$分别精密加入一定
量的槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷$按供试品溶
液的制备方法制备供试品溶液$按上述测定方法进
行测定$计算回收率$结果见表 )
表 !槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷回收率试验!)j)
称样量=D 样品中量=0D 加入量=0D 测得量=0D 回收率=e 平均值=e >8X=e
d$$+ d*$+ ) d+ )d)#* ) *#d *%d# d$
d$*% +d$(& d+ )d(+ # *(d#
d$$+ & d*$& # d+ )d)*$ # *%d%#
d$$# ( d*+ * d*$ )d%*) *(d*# *%d# d*
d$& * d*+( ) d*$ )d%(# * *%d(+
d$)+ # d*# * d*$ )d%() ( *d(*
d$(& + +d$* * +d&$ &d&+ ( *(d( *(d% d+%
d$#* # +d$)+ + +d&$ &d&+ **d#
d$)) % d*#& $ +d&$ &d+(# & *#d%%
(_#!样品测定!取 ( 批药材样品$按照上述含量
测定方法测定$测定结果见表 +)
表 +!黑骨藤中槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷
质量分数!)j+ e
样品 质量分数 样品 质量分数
贵阳药市 $d*( ) 四川 + $d% +
黔陶 $d* ) 安徽 $d%& $
黔陶!向阳 $d(& % 四川崇州 $d( +
黔陶!背阴 $d*+ + 六枝那玉 $d() *
高坡!向阳 $d+$+ 鱼洞峡!左岸 $d* #
高坡!背阴 $d+$ # 鱼洞峡!右岸 $d( (
高坡 $d*( ) 情人谷!向阳 $d++ )
高坡 + $d*# % 情人谷!背阴 $d+#& %
四川 $d%& ) 香纸沟 $d+$) +
&!讨论
黑骨藤中含有多种化学成分$如黄酮类%生物碱
类%内酯类%三萜类等多种活性成分$成分较为复
杂.&/ $为色谱条件的筛选增加了难度) 本实验研究
中考查了甲醇5水%乙腈5水不同比例的流动相$以甲
醇5水!))o#%作为流动相得到了较为满意的结果)
根据文献及用二极管阵列检测器从 *$ g&$$
20进行光谱扫描$ 槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖
苷对照品在 )%$ 20处有最大吸收$故选择 )%$ 20
为检测波长)
方法学考察过程中发现$对超声处理%加热回流
及冷浸的提取方法进行了比较试验$结果表明加热
回流提取法测得的槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷
*(+*
第 ) 卷第 $ 期
+$$ 年 月
!!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! !
[/Sd)$ :UULM!$
9B6$ +$$
含量高于其他 + 种方法) 故选用加热回流法制备本
实验用样品溶液)
根据槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的溶解性
选用甲醇%乙醇作为提取溶媒$进行选择$并对 )$e
甲醇%$e甲醇%甲醇%无水乙醇%$e乙醇进行了比
较试验$结果表明提取溶媒为甲醇时测得的槲皮素5
)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷含量最高$故选用提取溶
媒为甲醇)
确定选用回流提取法$甲醇为提取溶媒后$分别
又对回流 $d$+$+d$) ? 进行了比较试验$结果
表明回流提取 + ? 即能完全提取出黑骨藤中的槲皮
素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷$故选用回流提取 + ?
为样品提取时间)
采用本试验所建立的方法测定了 ( 批不同产
地黑骨藤药材中槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的
含量$结果平均含量为 $d*& #e$最低为四川崇州
产只有 $d( +e$最高为贵州贵阳市郊情人谷产含
量为 $d+#& %e$不同产地黑骨藤药材中槲皮素5)!
!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的含量有明显差异$说明黑
骨藤中槲皮素5)!!

!#5吡喃阿拉伯糖苷的含量受产
地$环境$气候$光照等的影响)
参考文献#
./!包俊$冉懋雄d贵州苗药医药研究与开发.9/d贵阳#贵州科
技出版社$ **(#+#d
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科技出版社$ +$$)#)(d
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地农业生物学报$+$$($+%!###$d
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!#5BCB\N2/A6CB2/UNJM+ EFG<+ ./2@M2@JM@MC0N2B@N/2
E?-# bQ(Y`NT\T++(Q
责任编辑!王亚君#
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第 ) 卷第 $ 期
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