目的:研究兴化莳萝地上部分的化学成分。方法:应用色谱方法分离,通过波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从该植物地上部分的乙醇提取物中分离并鉴定了9个化合物,结构分别为:3β acetyloxy 16 hydroxyolean 12 en 28 oic acid(1),9(11),12 dieneoleana 3β ol(2),9,19 cyclolanaost 24 en 3 one(3),9,19 cycloergost 23 en 3,25 diol(4),豆甾醇(5),falcarindiol(6),邻苯二甲酸二异辛酯(7),β 谷甾醇(8),β 胡萝卜苷(9)。结论:化合物1为新天然产物,化合物2~9为首次从该种植物中得到。
Objective: To investigate the chemical constituents in Cicuta virosa var. latisecta. Method: Many kinds of column chromatography were used to isolate the compounds from the EtOH ext. of C. virosa var. latisecta. The chemical constituents of the plant were identified by means of IR, MS, 1H NMR, 13C NMR, respectively, in some case by direct comparison with authentic samples. Result: Nine compounds were isolated from the aerial part and were identified as: 3β acetyloxy 16 hydroxy olean 12 en 28 oic acid (1), 9 (11), 12 dieneoleana 3β ol (2), 9, 19 cyclolanaost 24 en 3 one (3), 9, 19 cycloergost 23 en 3, 25 diol (4), stigmasterol (5), falcarindiol (6), 1, 2 benzenedicarboxylic acid, bis (2 ethylhexyl) ester (7), stigmast 5 en 3β ol (8), β daucosterol (9). Conclusion: Compound 1 is a new natural product, and compounds 2 to 9 were firstly isolated from this plant.
全 文 :兴化莳萝化学成分研究
李振麟1,2,钱士辉2,濮社班1
(1.中国药科大学 生药学研究室,江苏 南京 210038;
2.江苏省中医药研究院 中药资源研究室,江苏 南京 210028)
[摘要] 目的:研究兴化莳萝地上部分的化学成分。方法:应用色谱方法分离,通过波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从
该植物地上部分的乙醇提取物中分离并鉴定了9个化合物,结构分别为:3βacetyloxy16hydroxyolean12en28oicacid(1),9
(11),12dieneoleana3βol(2),9,19cyclolanaost24en3one(3),9,19cycloergost23en3,25diol(4),豆甾醇(5),falcarindiol(6),
邻苯二甲酸二异辛酯(7),β谷甾醇(8),β胡萝卜苷(9)。结论:化合物1为新天然产物,化合物2~9为首次从该种植物中得到。
[关键词] 兴化莳萝;地上部分;化学成分
[收稿日期] 20080925
[基金项目] 江苏省公益项目研究(BM2006104)
[通信作者] 濮社班,Tel:(025)83314212,Email:pusheban@126.
com;钱士辉,Tel:(025)85639644,Email:njqsh2005@126.com
兴化莳萝系伞形科毒芹属植物毒芹的变种宽叶
毒芹 CicutavirosaL.var.latisectaCelak,主产于江
苏兴化[1]。兴化莳萝果实可供药用或作食用香料,
据《兴化县志》记载“性温味辛,具温脾散寒,行气开
胃之功。”民间验方多用以治腹部冷痛,呕逆,痞
满[2]。至今只有鲁安中等[34]对兴化莳萝果实的显
微鉴定和脂肪酸的鉴定进行了研究。为了更加全面
深入地开发利用兴化莳萝,作者对其地上部分化学
成分进行了初步研究。从该植物的地上部分乙醇提
取物中分离鉴定了 9个化合物,3βacetyloxy16
hydroxyolean12en28oicacid为新天然产物,化合
物2~9为首次从该种植物中得到。
1 材料
XT4数字显示显微熔点测定仪(温度未校正);
BruckerACF300,500型核磁共振仪(TMS内标);
MicromassQautromicroESCi质谱仪;SephadexLH
20和RPC18(20~45μm)为Merck公司产品,MDS
反相柱色谱填料为北京麦迪生新技术开发中心产
品,薄层色谱及柱色谱硅胶均为青岛海洋化工厂产
品,其他试剂均为分析纯。
兴化莳萝地上部分采自江苏省兴化市陶庄镇,
经中国药科大学濮社班副研究员鉴定为 C.virosa
var.latisecta。凭证标本及原植物照片存于中国药
科大学生药学研究室。
2 提取与分离
兴化莳萝地上部分干燥药材65kg,90%乙醇
回流提取3次(每次2h),合并提取液减压浓缩至
无醇味,得浸膏660g。浸膏混悬于适量水中,依次
用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到萃取物
916,127,669g。醋酸乙酯萃取部分和石油醚萃
取部分合并经硅胶柱色谱,以石油醚醋酸乙酯
(100∶1~1∶1)梯度洗脱得到 18个部分(Fr.1~
18),再经过反复硅胶柱色谱分离、SephadexLH20
柱纯化、RPC18反相柱及MDS反相柱色谱分离,从
Fr.2中分离得到化合物3(34mg),从 Fr.8中分离
得到化合物5(15g),8(800mg),从 Fr.10中分离
得到化合物 1(74mg),4(90mg),6(150mg),从
Fr.13中分离得到化合物2(197mg),7(355mg),从
Fr.17中分离到化合物9(650mg)。
3 结构鉴定
化合物1 白色针状结晶(甲醇),mp>300℃。
ESIMSm/z5134[M-H]-。1HNMR(CDCl3,500
MHz)δ:079(3H,s),086(3H,s),088(3H,s),093
(3H,s),095(3H,s),097(3H,s),121(3H,s)提示
为齐墩果烷型三萜;δ205(3H,s)及 13CNMR
(CDCl3,125MHz)δ1711,212信号示COCH3取代;δ
424(1H,q)连氧叔碳质子信号及δ809提示3OAc
取代;δ535(1H,brs)及δ1233,1418示1组双键
信号;13CNMRδ1820为COOH取代;参考已知化合
物3乙酰齐墩果烯文献数据[5],D环数据显示差异,δ
449(1H,t)说明有15OH或16OH取代,由HSQC,
HMBC数据(图1)分析,H18,H22与δ647信号相
·507·
第34卷第6期
2009年3月
Vol.34,Issue 6
March,2009
关,确定为16OH取代,化合物1为3βacetyloxy16
hydroxyolean12en28oicacid。经相关文献查阅,有
学者曾[6]利用16β羟基齐墩果酸与等摩尔醋酐在室
温下反应24h获得该化合物,作者运用柱色谱等方
法首次从植物中分离得到该化合物,并首次对 NMR
数据进行归属(表1)。
图1 化合物1的HMBC主要相关数据
表1 化合物1~5的13CNMR数据(CDCl3)
No. 1 2 3 4 5
1 381 388 334 319 373
2 234 279 374 304 318
3 809 787 2165 788 718
4 377 389 502 405 423
5 553 512 484 471 1408
6 181 184 215 211 1216
7 332 322 258 281 319
8 394 371 479 479 315
9 467 1543 211 200 502
10 369 407 260 261 365
11 234 1158 267 260 212
12 1233 1207 328 328 397
13 1418 1471 453 453 422
14 439 428 487 488 569
15 327 257 356 356 243
16 647 273 281 264 288
17 503 322 523 520 560
18 430 456 182 193 122
19 455 469 295 299 193
20 305 313 359 364 404
21 267 346 181 180 211
22 373 372 364 390 1382
23 280 287 250 1256 1293
24 166 156 1253 1394 512
25 153 201 1309 707 317
26 172 210 176 300 210
27 267 253 257 299 189
28 1820 282 222 183 253
29 329 237 207 140 120
30 238 332 193 254
COCH3 212
COCH3 1711
化合物2 白色针状结晶(甲醇),LibermanBur
chard反应阳性,Molish反应阴性,香草醛硫酸反应
105℃加热 5min显紫红色。ESIMSm/z4255
[M+H]+。1HNMR(CDCl3,75MHz)δ:081(3H,s,
CH3),086(3H,s,CH3),088(3H,s,CH3),089(3H,
s,CH3),099(3H,s,CH3),102(3H,s,CH3),113
(3H,s,CH3),119(3H,s,CH3),323(1H,q,H3),
550(1H,d,H11),557(1H,d,H12)。13CNMR
(CDCl3,300MHz)数据(表1)与文献[7]对照基本一
致,确定化合物2为9(11),12dieneoleana3βol。
化合物 3 白色片状结晶(甲醇),Libenman
Burchard反应阳性,Molish反应阴性,香草醛硫酸
反应105℃加热5min显洋红色,久置逐渐变成紫
色。ESIMS m/z4476[M +Na]+。 1HNMR
(CDCl3,125MHz)δ:056(1H,d,H19α),078
(1H,d,H19β);089(3H,d,CH321);090(3H,s,
CH3),109(3H,s,CH3),105(3H,s,CH3),110
(3H,s,CH3);161(3H,s,CH3),169(3H,s,CH3);
511(1H,t,H24)。13CNMR(CDCl3,125MHz)数据
(表1)与文献[89]对照基本一致,故鉴定化合物3
为9,19cyclolanaost24en3one。
化合物 4 白色针状结晶(甲醇),Libenman
Burchard反应阳性,Molish反应阴性,香草醛硫酸
反应105℃加热5min显红色。ESIMSm/z4654
[M+Na]+。1HNMR(CDCl3,125MHz)δ:034(1H,
d,H19α),058(1H,d,H19β);083(3H,s,CH3),
088(3H,d,CH3),091(3H,s,CH3),099(3H,d,
CH3),099(3H,s,CH3),133(6H,s,CH3×2),
330(1H,m,CH3),562(2H,m)。该化合物在溶
剂中易发生结构变化,将同一样品(溶于三氯甲烷)
间隔10d做NMR谱,发现在后者的DEPT中多出1
组双键碳信号(1个端基碳信号和1个季碳信号),
佐证了25OH的存在。13CNMR(CDCl3,125MHz)
数据(表1)与文献[10]对照基本一致,鉴定化合物
4为9,19cycloergost23en3,25diol。
化合物5 无色针簇状结晶(甲醇),mp168~
171℃;LiebermanBurchard反应阳性,香草醛硫酸
反应105℃加热显紫红色。ESIMSm/z4133[M+
H]+。1HNMR(CDCl3,75MHz)
13CNMR(CDCl3,75
MHz)数据(表1)与文献[11]对照一致,确定化合物
5的结构为豆甾醇。
化合物 6 浅黄色油,久置颜色加深,硅胶
GF254薄层色谱展开,紫外灯下显棕色暗斑,香草
醛硫酸反应室温下显黑褐色斑点,105℃加热显褐
·607·
第34卷第6期
2009年3月
Vol.34,Issue 6
March,2009
绿色。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:545(1H,ddd,
H1α),525(1H,ddd,H1β),595(1H,ddd,H2),
493(1H,ddd,H3),520(1H,ddd,H8),551
(1H,ddd,H9),560(1H,ddt,H10),262(2H,
brs,H3andH8),210(2H,dq,H11),088(3H,t,
H17)。13CNMR(CDCl3,125MHz)数据与文献[12]
对照一致,确定化合物6为化合物falcarindiol。
化合物7 无色油,硅胶 GF254薄层色谱展开,
TLC紫外灯下显棕色暗斑,365nm下蓝色荧光斑点,
香草醛硫酸反应105℃加热不显色,碘缸中显棕色
斑点。ESIMSm/z3911[M+H]+。1HNMR(CDCl3,
300MHz)与文献[13]对照基本一致,与文献[14]对
照一致,确定化合物7为邻苯二甲酸二异辛酯。
化合物8 白色针状结晶(甲醇),mp136~137
℃,与对照品对照,混合熔点不降,TLC检查,与对照
品混合点样,多种展开剂展开,斑点颜色与比移值均
指示为同一化合物,故鉴定化合物8为β谷甾醇。
化合物 9 白色粉末(甲醇),LibenmanBur
chard反应阳性,Molish反应阳性。香草醛硫酸反
应105℃加热显紫红色。与对照品对照及13CNMR
谱数据与β胡萝卜苷碳谱数据[15]对照结果均一致,
因此鉴定化合物9为β胡萝卜苷。
[参考文献]
[1] 江苏植物研究所.江苏植物志.下册[M].南京:江苏科学技
术出版社,1982:573.
[2] 王铁僧,姚 淦.江苏省伞形科药用植物种类整理[J].中药
材,1990,13(1):15.
[3] 朱文英,鲁安中.兴化莳萝的生药学研究[J].江苏药学与临
床研究,1998,6(2):38.
[4] 鲁安中.兴化莳萝果实油脂中脂肪酸的鉴定[J].江苏药学与
临床研究,1999,7(4):45.
[5] 都姣姣,武冰峰,杨 娟,等.白马骨中三萜类成分研究[J].
时珍国医国药,2008,19(2):341.
[6] SegalR,ReicherF,YoussefyehRD.Configurationofechino
cysticandcochalicacid[J].JChemSoc,ChemCommu,1974,
(12):481.
[7] ShashiBM,AsishPK.13CNMRspectraofpentacyclictriterpe
noids,acomplicationandsomesalientfeatures[J].Phytochem
istry,1994,37(6):1517.
[8] KappiahPM,TanKHB,DaiwenY.Cycloartanetypetriterpe
noidsfromtherhizomesofPolygonumbistorta[J].Phytochemis
try,2005,66(8):2304.
[9] RadicsL,MKajtarP,CorsanoS,etal.Carbon13NMRspectra
ofsomepolycyclictriterpenoids[J].TetraLet,1975,48(20):
4287.
[10] JunichiK,KaoruK,YasukoT.Newsterolsandtriterpenoidsof
Ficuspumilafruit[J].ChemPharmBul,1998,46(9):1408.
[11] 任东春,钱士辉,杨念云,等.明党参化学成分研究[J].中药
材,2008,31(1):47.
[12] YukitakaN,HisashiM,TetsuyaS,etal.Antiproliferativecon
stituentsinUmbeliferaeplantI,screeningforpolyacetylenesin
someUmbeliferaeplantsandisolationofpanaxynolandfalcarin
diolfromtherootofHeracleummoelendorfi[J].BiolPharm
Bul,1998,61(5):439.
[13] 刘 霞,陈志玲,张 琳.邻苯二甲酸二异辛酯合成新工艺
[J].北京石油化工学院学报,2004,12(1):8.
[14] 于德泉,杨俊山.分析化学手册.第7分册[M].北京:化学工
业出版社,1999:594.
[15] 周大颖,杨小生,杨 波,等.黔产毛子草化学成分研究[J].
天然产物研究与开发,2007,19(5):807.
StudyonchemicalconstituentsfromCicutavirosavar.latisecta
LIZhenlin1,2,QIANShihui2,PUSheban1
(1.DepartmentofPharmacognosy,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210038,China;
2.LaboratoryofNaturalMedicinalResources,JiangsuProvinceInstituteofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210028,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatethechemicalconstituentsinCicutavirosavar.latisecta.Method:Manykindsofcolumn
chromatographywereusedtoisolatethecompoundsfromtheEtOHext.ofC.virosavar.latisecta.Thechemicalconstituentsofthe
plantwereidentifiedbymeansofIR,MS,1HNMR,13CNMR,respectively,insomecasebydirectcomparisonwithauthenticsam
ples.Result:Ninecompoundswereisolatedfromtheaerialpartandwereidentifiedas:3βacetyloxy16hydroxyolean12en28oic
acid(1),9(11),12dieneoleana3βol(2),9,19cyclolanaost24en3one(3),9,19cycloergost23en3,25diol(4),stig
masterol(5),falcarindiol(6),1,2benzenedicarboxylicacid,bis(2ethylhexyl)ester(7),stigmast5en3βol(8),βdaucosterol
(9).Conclusion:Compound1isanewnaturalproduct,andcompounds2to9werefirstlyisolatedfromthisplant.
[Keywords] Cicutavirosavar.latisecta;aerialparts;chemicalconstituents
[责任编辑 王亚君]
·707·
第34卷第6期
2009年3月
Vol.34,Issue 6
March,2009