全 文 ：雷公藤制剂中雷公藤红素的含量研究
吴　霞１，２，黄文华１，郭宝林１，斯金平３，张　晶２
（１．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４；
２．吉林农业大学 中药材学院，吉林 长春 １３００５６；
３．浙江林学院 林业与生物技术学院，浙江 临安 ３１１３００）
［摘要］　目的：建立雷公藤制剂中雷公藤红素含量的ＨＰＬＣ测定方法，并对市售雷公藤制剂样品中雷公藤红素含量进行
比较研究。方法：ＨＰＬＣ外标法。ＨａｎｂｏｎＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８色谱柱，流动相 甲醇１％酸水（８３∶１７），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ
－１，检测波长
４２５ｎｍ。结果：雷公藤片中雷公藤红素含量最高，在每片８９０４～３４４０μｇ；雷公藤多苷片中雷公藤红素含量在每片１４９８～
２１７８０μｇ；昆明山海棠片中雷公藤红素的含量是每片２２３２μｇ，含量相对较低些。结论：不同的雷公藤制剂中雷公藤红素有
很大差异。雷公藤片中雷公藤红素的含量明显高于雷公藤多苷片和昆明山海棠片。不同厂家生产的、不同批次的雷公藤制
剂中雷公藤红素存在着显著差异。因此，对其进行质量监控和制定合理的质量控制标准势在必行。
［关键词］　雷公藤制剂；雷公藤红素；高效液相色谱
［收稿日期］　２００８０９２２
［基金项目］　国家自然科学基金项目（３０７７０２１８）
［通信作者］　黄文华，女，副研究员，Ｔｅｌ：（０１０）６２８９９７２８，Ｅｍａｉｌ：
ｈｗｈｚｈ６９＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
　　雷公藤ＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．系卫矛科
雷公藤属植物，具有抗炎、免疫调节、抗肿瘤、抗ＨＩＶ
及抗生育等多种药理作用，对类风湿性关节炎、慢性
肾炎、红斑狼疮等自身免疫性疾病具有显著疗效。
目前，雷公藤制剂是我国治疗各种免疫亢进性疾病
使用频率最高的首选药物。临床主要的制剂有雷公
藤多苷片、雷公藤片、昆明山海棠片等，其中雷公藤
多苷片作为免疫抑制药被列入《国家基本药物：西
药》，昆明山海棠片被《中国药典》２０００，２００５年版所
收载。由于雷公藤类药材毒性大，由此生产的雷公
藤类制剂的毒副作用也是一直以来颇为关注的问
题，各种不同雷公藤制剂的质量差异是其主要原因
之一。
雷公藤红素（ｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅ）是从雷公藤根中提取分
离到的第一个单体成分，是雷公藤类中药的主要活
性成分（抗炎、免疫抑制及抗癌）和毒性成分［１］。随
着其现代药理研究的深入，微摩尔级浓度的雷公藤
红素对多种细胞呈现毒性作用，而纳摩尔级浓度则
对细胞无毒性，进而显示出不同浓度级别具有不同
生物活性［２］。因此，准确测定雷公藤红素对控制雷
公藤制剂的质量及使其减毒增效具有重要意义。本
实验建立了雷公藤制剂中雷公藤红素的ＨＰＬＣ含量
测定方法，并对市售的雷公藤制剂中雷公藤红素含
量进行比较研究。
１　仪器与试药
１．１　仪器　Ｗａｔｅｒｓ２６９０型高效液相色谱仪，Ｗａｔｅｒｓ
９９６检测器，自动进样器，Ｅｍｐｏｗｅｒ工作站（Ｗａｔｅｒｓ
公司）。
１．２　试药　雷公藤红素对照品（上海融合医药科
技发展有限公司，批号０８０３０６，纯度大于９８０％）。
ＨＰＬＣ流动相中甲醇为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水
为娃哈哈纯净水，其他分析用试剂均为分析纯。试
验用样品购于各大药店市售的药品。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　ＨａｎｂｏｎＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８色谱柱（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇１％醋酸溶液（８３
∶１７）；检测波长４２５ｎｍ；柱温２５℃；流量１０ｍＬ·
ｍｉｎ－１，雷公藤红素对照品和制剂的色谱图见图１。
２．２　对照品溶液的制备　精密称取雷公藤红素对
照品约３３２ｍｇ，置１０ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并稀
释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
２．３　供试品溶液的制备　参考文献［３］方法，将各
制剂样品粉碎，精密称取１ｇ，准确量取氯仿５０ｍＬ
超声提取３０ｍｉｎ，静置，滤取上清液，样品残渣继续
用氯仿超声提取２次，每次５０ｍＬ，合并滤液，减压
浓缩至干。称４０ｇ硅胶装柱（１５ｃｍ×１０ｃｍ），以
１ｍＬ氯仿溶解样品，上柱，先用５０ｍＬ氯仿洗脱，弃
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１．雷公藤红素。
图１　雷公藤红素对照品与雷公藤片ＨＰＬＣ图
去；再用氯仿甲醇（９５∶５）１００ｍＬ洗脱，收集洗脱液
并回收溶剂浓缩至干。残渣用甲醇溶解，分次转入
１０ｍＬ量瓶中，并定容至刻度，摇匀，过 ０４５μｍ微
孔滤膜，取续滤液，备用。
２．４　线性关系考察　用移液管精密吸取雷公藤红
素对照品溶液０５，１，２，３，５ｍＬ于５ｍＬ量瓶，加甲
醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取２０μＬ进样。以峰
面积为纵坐标，对照品溶液质量浓度为横坐标作图，
得雷公藤红素的回归方程 Ｙ＝３８６×１０５Ｘ－２４２×
１０４，ｒ＝０９９９９，线性范围００３３２～０３３２ｇ·Ｌ－１。
２．５　精密度试验　取０１９９２ｍｇ·ｍＬ－１雷公藤红
素对照品溶液，连续重复进样５次，测定雷公藤红素
峰面积，ＲＳＤ０４４％。
２．６　重复性试验　取三九黄石制药厂生产的雷公
藤片批号为 ０７１１０４制备供试品溶液，平行操作 ６
份，测定雷公藤红素峰面积，ＲＳＤ０６４％。
２．７　稳定性试验　取三九黄石制药厂生产的雷公
藤片批号为０７１１０４制备供试品溶液，分别于０，２，
４，６，８ｈ测定峰面积，计算得雷公藤红素的质量分
数为每片３４４４７μｇ，ＲＳＤ０７５％。
２．８　回收率试验　取三九黄石制药厂生产的雷公
藤片批号为 ０７１１０４约 ０２５ｇ（含雷公藤红素约
０８５ｍｇ），分别按低、中、高３个水平精密加入０５，
１０，１５ｍｇ雷公藤红素对照品，制备供试品溶液，
进样测定雷公藤红素的峰面积，计算其平均回收率
为９９０％，ＲＳＤ１７％（ｎ＝９）。
样品测定：吸取供试品溶液和对照品溶液分别
进样，以外标法进行测定，结果见表１。
表１　不同制剂中雷公藤红素的含量
药品名 药品生产厂家 生产批号 雷公藤红素／μｇ／片
雷公藤多苷片 上海复旦复华制药有限公司 ０４０５０２ ４２４１
　 上海复旦复华制药有限公司 ０５０２０２ ４００４
　 湖南协力药业有限公司 ２００７０４０１ ２１７８０
　 江苏美通制药有限公司 ０５０６０２ １４９８
　 浙江普洛康裕天然药物有限公司 ０５０６０１ ３３５７
　 浙江得恩德制药有限公司 ０４０２１０１ ３７１８
雷公藤片　　 三九医药 ０７１１０４ ３４４４７
　 三九医药 ０４０８０９ １３１０４
　 三九医药 ０５０１０２ ８９０４
昆明山海棠片 云南省玉溪市维和制药有限公司 ２００７０９５１ ２２３２
３　讨论
本实验的雷公藤红素的线性范围 ３３２～３３２
ｍｇ·Ｌ－１（ｒ＝０９９９９），平均回收率 ９９０％，ＲＳＤ
１７％（ｎ＝９），稳定性好，线性范围宽，可作为雷公
藤红素的定量分析方法。
目前临床上最常用的雷公藤制剂是片剂，多为
原药材的乙醇、水、醋酸乙酯粗提取物，仅有雷公藤
多苷片是经过水氯仿及硅胶柱色谱的初步提纯，因
此，所含化学成分极其复杂。经氯仿超声提取后，颜
色较深，杂质含量较高，直接进样易污染色谱柱，且
分离效果差。故在前处理过程中采用硅胶柱分离提
纯后，使雷公藤红素色谱峰分离无干扰，与其他峰分
离度更好。
试验结果表明，不同雷公藤制剂中雷公藤红素
的差异较大，雷公藤片中雷公藤红素最高，在每片
８９０４～３４４０μｇ；雷公藤多苷片中雷公藤红素在
每片１４９８～２１７８０μｇ；昆明山海棠片中雷公藤红
素的是每片 ２２３２μｇ，含量相对较低些。文献报
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道中不同雷公藤类制剂的临床用药所反映的毒副作
用发生率不同，一般而言，雷公藤多苷片和昆明山
海棠片的临床毒副作用发生率要小于雷公藤片，这
与其制剂中雷公藤红素含量差异不同是否有关，则
有待于进一步研究。
试验结果显示，不同公司生产的、不同批次的雷
公藤制剂中雷公藤红素存在着很大差异。例如三九
医药生产的雷公藤片中，批号为０７１１０４产品中雷公
藤红素高达每片３４４０μｇ，而批号为０５０１０２产品中
雷公藤红素为每片８９０４μｇ，２者相差近４倍；不同
生产厂家生产的雷公藤多苷片中雷公藤红素差异也
较大，湖南协力药业有限公司生产的雷公藤多苷片
（批号２００７０４０１）中雷公藤红素的最高，达到了每片
２１７８０μｇ，而江苏美通制药有限公司生产的雷公藤
多苷片（０５０６０２）中雷公藤红素的只有每片 １４９８
μｇ，它们之间也相差１４倍以上。另外３个生产厂家
的药品的雷公藤红素的比较相近，在每片３３５７～
４２４１μｇ。结合已有的雷公藤甲素含量测定和
ＨＰＬＣ图谱研究结果，进一步说明雷公藤制剂不够
规范，各家药厂所生产的药物组分及有效成分含量
差异也很大，从而直接影响了其副作用的发生率。
从目前雷公藤制剂的质量控制状况来看，作为
雷公藤类制剂主要活性成分和毒性成分雷公藤红素
既没有进行质量监控也没有进行质量标准控制，这
势必会影响其临床的安全用药。因此，对其进行质
量监控和制定合理的质量控制标准势在必行。本实
验测定了不同厂家生产的雷公藤制剂中雷公藤红素
的含量，为合理的雷公藤红素限量标准提供理论依
据，为雷公藤类药物能达到疗效稳定、不良反应小的
现代化中药的质量要求奠定基础。
［参考文献］
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［２］　张登海，杨春欣，秦万章，等．雷公藤红素研究２０年回顾［Ｃ］．
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Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅｉｎｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ
ＷＵＸｉａ１，２，ＨＵＡＮＧＷｅｎｈｕａ１，ＧＵＯＢａｏｌｉｎ１，ＳＩＪｉｎｐｉｎｇ３，ＺＨＡＮＧＪｉｎｇ２
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ＆ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎａｌＭａｔｅｒｉａｌｓ，ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３０１１８，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｃｈｏｏｌｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＺｈｅｊｉａｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｅｇｅ，Ｌｉｎ′ａｎ３１１３００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅｉｎＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｐｕｒ
ｃｈａｓｅｄｆｒｏｍｄｒｕｇｓｔｏｒｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＡｎｅｘｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄｂｙＨＰＬＣｗｉｔｈＨａｎｂｏｎＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８ｃｏｌｕｍｎａｓｆｉｘｅｄｐｈａｓｅａｎｄｍｅｔｈａ
ｎｏｌ１％ＨＡｃ（８３∶１７）ａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓａｄｏｐｔｅｄ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ４２５ｎｍａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｒｅ
ｓｕｌｔ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅｉｎＴＷＨＦ．ｔａｂｌｅｔｓｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ８９０４ａｎｄ３４４０μｇ／ｔａｂｌｅｔ，ａｎｄｉｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎＴＷＨＦ．
ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｉｕｍ（１４９８２１７８０μｇ／ｔａｂｌｅｔ）ａｎｄＫｕｎｍｉｎｇｓｈａｎｈａｉｔａｎｇｔａｂｌｅｔｓ（２２３２μｇ／ｔａｂｌｅｔ）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｒｉｐｔｅｒ
ｉｎｅ，ｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｖａｒｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ａｎｄｉｎＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓａｎｄｄｉｆｅｒ
ｅｎｔｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｌｏｔｓａｒｅｂｅｉｎｇｒｅｍａｒｋａｂｌｅｄｉｓｃｒｅｐａｎｃｙ．Ｓｏｉｔｉｓｎｅｃｅｓｓａｒｙｔｏｅｎｈａｎｃｅｑｕａｌｉｔｙｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇａｎｄｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｒａｔｉｏｎａｌｑｕａｌ
ｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ；ｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅ；ＨＰＬＣ
［责任编辑　周　驰］
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