全 文 :栀子果实不同部位中环烯醚萜苷类成分的比较研究
张村,肖永庆,李丽,李文,殷小杰
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 目的:对栀子果实、果仁、果皮中环烯醚萜苷类成分进行比较研究。方法:HPLC法同时测定2个主要成分(geni
pingentiobioside,geniposide)含量,KromasilC18柱,流动相为乙腈03%甲酸水溶液12∶88,检测波长238nm,流速10mL·
min-1,柱温35℃。结果:4个成分在测定范围内线性关系较好(r>09994),平均回收率分别为9911%,9847%。栀子果实
不同部位中均含有这2种环烯醚萜苷类成分,且含量有较大差异。结论:2种成分以栀子果仁中含量最高,为揭示栀子果仁、
果皮的不同临床功效提供了实验依据。
[关键词] 栀子果实;果仁;果皮;HPLC;含量测定
[收稿日期] 20081222
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30672666)
[通信作者] 肖永庆,研究员,博士生导师,Tel:(010)84040221,
Email:x.heqi@163.com
栀子为临床常用中药,来源于茜草科植物栀子
GardeniajasminoidesElis的干燥成熟果实,具有泻
火除烦,清热利尿,凉血解毒的功效。
栀子果实较大,果皮、果仁容易分离,且在质地、
外观上差异较大。栀子很早就有栀子皮、栀子仁分
别使用的记载,《本经》中有“栀子仁功善清心除烦,
栀子皮则兼清表热”的记载,以后还有“中焦连壳
用,下焦去壳、沉去黄浆炒用,治血病炒黑用”;《汤
液本草》中提到“用仁去心胃中热,去皮去肌表热”;
明清以后均认为栀子“内热用仁,表热用皮”[12]。
而现某些省市如北京、湖南、云南、河南等地方炮制
规范中都收录了栀仁、栀皮分别炮制的方法。目前,
有关栀子果仁与果皮成分鲜有报道,作者在栀子不
同炮制品的化学成分变化规律研究过程中,以2种
环烯醚萜苷类成分的含量对栀子果实不同部位进行
了比较研究,以期为栀子皮、栀子仁分开使用的科学
性及其临床合理应用提供实验依据。
1 仪器与试药
Agilent1100series,包括四元泵(QuataPump),
自动进样器(ALS),DAD检测器,在线脱气机(De
gasser)和柱温箱。水为重蒸馏水,甲醇、乙腈为色谱
纯,其他试剂均为分析纯。
对照品京尼平苷(geniposide)、京尼平龙胆二糖
苷(genipingentiobioside)为本研究室从栀子中分离
鉴定,经 HPLC面积归一化法测定纯度达 98%以
上,可供含量测定用。
栀子购自主产地江西金溪、泰和等,经本所胡世
林研究员鉴定为茜草科植物栀子G.jasminoids的干
燥成熟果实;分别取不同产地栀子数10枚,将栀子
果实的果仁、果皮分离,分别粉碎过40目筛,备用。
2 方法与结果
2.1 色谱条件[3] kromasilC18色谱柱(46mm×
250mm,5μm),流动相乙腈03%甲酸水溶液(12∶
88),检测波长238nm,流速10mL·min-1,柱温
35℃。在此色谱条件下栀子样品中geniposide等对
照品与其他组分均能达到基线分离(图1)。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取 genipingentio
bioside,geniposide对照品各适量,分别加甲醇制成
0164,0518g·L-1的对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取栀子及分离后果仁、果
皮样品粉末各约05g,精密称定,置具塞锥形瓶中,
精密加入甲醇25mL,密塞,称定质量,超声提取10
min,放冷,密塞,再称定质量,用甲醇补足减失重,摇
匀,滤过,取续滤液,以微孔滤膜(045μm)滤过,即得。
2.4 线性关系考察 取0164g·L-1对照品genipin
gentiobioside溶液,进样1,3,5,7,9mL;0518g·L-1
geniposide溶液,进样1,3,6,9,12,15μL,以进样量
(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,并计
算回归方程。genipingentiobiosideY=-174634+
5665841X,线性范围0164~1476μg,r=09999;
geniposideY=1791442+13166210X,r=09994;
线性范围0518~7770μg。
·9491·
第34卷第15期
2009年8月
Vol.34,Issue 15
August,2009
1.genipingentiobioside;2.geniposide(图2同)。
图1 对照品及样品HPLC图
2.5 精密度试验 精密吸取上述供试品溶液 5
μL,重复进样5次,依法测定,对照品genipingentio
bioside,geniposide峰面积平均值分别为 221785,
4007937,RSD分别为13%,014%。
2.6 稳定性试验 精密吸取上述供试液溶液 5
μL,间隔一定时间进样共6次,对照品 genipingen
tiobioside,geniposide峰面积平均值分别为220168,
4015509,RSD分别为12%,049%,说明样品溶
液在24h内保持稳定。
2.7 重复性试验 取泰和栀子果实粉末5份,各约
05g,精密称定,制备成供试品溶液,依法测定并计
算含量,结果对照品 genipingentiobioside,geniposide
5次测定值的RSD分别为15%,13%。
2.8 加样回收试验 精密称定已知含量的泰和栀
子果实粉末适量,共5份,分别精密加入各对照品适
量,按供试品溶液制备及测定法操作,结果对照品
genipingentiobioside的平均回收率为9911%,RSD
14%,对照品geniposide的平均回收率为9847%,
RSD15%。
2.9 样品测定 取栀子不同样品,依法制备成供试
品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~
10μL,依法分析测定,结果见表1,图2。
表1 栀子果实不同部位环烯醚萜苷类成分质量分数
(n=2) %
产地 检测指标 果实 果仁 果皮
江西金溪 genipingentiobioside 1535 1896 0364
geniposide 3266 4873 1819
江西泰和 genipingentiobioside 1017 1294 -
geniposide 2816 4448 1162
江西水栀子 genipingentiobioside 0658 1056 -
geniposide 3518 4663 1172
福建福鼎 genipingentiobioside 1494 1987 0300
geniposide 4507 6299 4271
3 结果与讨论
从4个产地栀子果实不同部位的含量测定结果
A.果实;B.果仁;C.果皮。
图2 江西金溪栀子果实不同部位中
环烯醚萜苷类成分HPLC图
可以明显看出,各产地栀子均以果仁中2个成分含
量最高,果实次之,果皮最低,其中江西泰和和水栀
子果皮中已基本测不到 genipingentiobioside。这与
果仁在栀子果实中所占的比重较大相一致,果仁约
为栀子果实质量的70%,果皮约占30%。各产地栀
子果实中均以 geniposide含量最高,且以福建福鼎
栀子中geniposide含量最高,而 genipingentiobioside
的含量以江西金溪栀子最高。同时果仁、果皮与果
实的2种环烯醚萜苷主成分含量与果实相比基本一
致,3个部位含量以福建福鼎最高,江西金溪栀子次
之,江西泰和与水栀子最低。
由图 2可以看出,栀子果实、果仁、果皮的
HPLC图相差不大,说明栀子果实3个部位在此检
测波长下的成分分布基本类似,差别在于成分的量
比关系不同;与果实、果仁相比,除genipingentiobio
side和geniposide在果皮中的含量降低外,图中虚线
箭头所指的色谱峰在果皮中含量最高。
环烯醚萜苷类成分为栀子中的主要成分和有效
成分,以 geniposide含量最高,该类成分具有解热、
抗炎、镇痛、镇静、抗菌等药理作用。栀子果实不同
部位在成分组成和量比关系的变化与栀子“内热用
仁,表热用皮”的临床应用密切相关,尚需对栀子进
·0591·
第34卷第15期
2009年8月
Vol.34,Issue 15
August,2009
行深入的药效物质基础研究。以上研究结果为进一
步揭示栀子果仁、果皮的不同临床功效提供了可靠
线索。
[参考文献]
[1] 徐楚江.中药炮制学[M].上海:上海科学技术出版社,1985.
[2] 张炳鑫.中药炮制品古今演变评述[M].北京:人民卫生出版
社,1991:387.
[3] 张村,肖永庆,李丽,等.栀子不同饮片环烯醚萜苷类成分比较
研究[J].中国中药杂志,2008,33(10):1138.
Comparativestudiesoncontentsofiridoidindidifferentpartsof
fruitfromGardeniajasminoides
ZHANGCun,XIAOYongqing,LILi,LIWen,YINXiaojie
(InstituteofChineseMateriaMadica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700,China)
[Abstract] Objective:Tocomparethecontentsofiridoidamongthefruit,seed,andpericarpfromGardeniajasminoides.
Method:ThecontentsofgeniposideandgenipingentiobiosideweredeterminedsimultaneouslybyHPLC.AKromasilC18columnat35
℃ wasusedwiththeacetonitrile03% formicacidanhydrous(12∶88)asthemobilephases.Thedetectionwavelengthwassetat238
nmandtheflowratewas10mL·min-1.Result:Theobtainedlinearityofthetwocomponentswasbeterover09994andtheaver
agerecoverieswere9911%,9847%,respectively.Theresultsexhibitedtheremarkablevariationamongthediferentpartsofthe
fruit.Conclusion:Thecontentsofthetwoconstituentsinseedwerehigherthaninpericarp.
[Keywords] Gardeniajasminoides;seed;pericarp;HPLC;contentdetermination
[责任编辑 王亚君]
欢迎订阅和投稿中国药学会系列期刊《今日药学》杂志
《今日药学》杂志由广东省食品药品监督管理局主管,月刊,大16开,64页码,国内外公开发行,2009年每期定价10元,邮
发代号46170,国内统一刊号CN441650/R,国际标准刊号ISSN1674229X,是面向全体药学工作者的综合性药学期刊。创刊
17年来,一直秉“科学、规范、创新、求精”的办刊方针,为广大医务人员服务,为药学事业服务。经新闻出版局批准,自2009年
第5期起由中国药学会和广东省药学会共同主办,成功跻身中国药学会系列期刊中的一员。杂志辟有实验药理、继续教育、药
学进展、临床药学、药品检验、中药分析、药品监管、综述与专论、药学服务、药学资讯等栏目。杂志自2008年开始承办省级刊
授继续教育项目,可为广大药师、医师学术交流和继续教育提供更好的服务。本刊为鼓励高水平科研论文的发表:凡省级以
上科研课题的研究论文免收版面费,全日制高校研究生的课题研究论文酌收版面费,并优先安排发表。衷心希望广大医务、
科研工作者踊跃来稿和订阅。
投稿邮箱:gdpharm@tom.com;
投稿地址:广东省广州市东风东路7532之1019室;邮编:510080
编辑部电话:02037886325;传真:02037886326。
·1591·
第34卷第15期
2009年8月
Vol.34,Issue 15
August,2009