全 文 ：盐关黄柏质量研究
何伟珍１，毛淑杰２
（１．浙江省丽水中心医院，浙江 丽水 ３２３０００；
２．中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［收稿日期］　２００９０２２３
［通信作者］　毛淑杰，Ｔｅｌ：（０１０）８４０３６５５２，Ｅｍａｉｌ：ｍａｏｓｈｕｊｉｅ＠
１６３．ｃｏｍ
　　本品为芸香科植物黄檗 Ｐｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎａｍｕｒｅｎｓｅ
Ｒｕｐｒ．的干燥树皮。为清热泻火常用中药，中医除用
生品外，还用炮制品。中药黄柏传统炮制方法虽然
有几种，但主要以盐炙为主，全国各省市临床应用也
基本是盐炙黄柏最多。２００５年版《中国药典》及《全
国中药炮制规范》均将盐炙黄柏作为法定的黄柏炮
制方法。目前对盐炙黄柏的炮制工艺研究报道较
多［１３］，对其质量标准研究较少。２００５年版药典收
载了关黄柏药材的各项质量评价标准，并采用高效
液相法测定药材中小檗碱的含量，但对盐炙关黄柏
的质量标准没有具体规定［４］。因此，笔者对盐炙关
黄柏饮片的质量进行了研究，并针对其评价质量的
各项指标进行了分析。
１　材料
高效液相色谱仪，惠普１１００，紫外检测器，惠普
软件管理工作站，色谱柱 ＬｕｎａＣ１８（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ，ＳＧＥ公司）。盐酸小檗碱对照品（中国药
品生物制品检定所，批号 ０８３１９５０１）。试剂：乙晴
为色谱纯（美国 Ｆｉｓｅｒ公司），甲醇为分析纯，水为纯
水，其他试剂均为分析纯。金茸牌洗药机（河南周
口制药机械厂）；ＣＹＪ７００滚筒式炒药机，插杆式热
电偶（上海娄山热工仪表厂）。９０２℃液晶温度显示
器（深圳华仪实验与测量仪表公司）。食盐为市售。
原药材来源：３个主产地：①辽宁康平；②辽宁
三江口；③辽宁铁岭。
本研究用炮制品（１０批）制备：取净关黄柏先开
条约为３ｃｍ，再用抢水洗３遍，放大桶中加适量水
浸３～５ｍｉｎ，（水浸过药），捞出，放筐中，闷１夜，第
２天横切２～３ｍｍ丝，４０℃以下烘干备用。盐炙工
艺具体操作：将以上３个产地切好丝的样品，分成每
份５ｋｇ，分别加食盐０１ｋｇ（盐先用水溶解，药盐
水的比例为１００∶２∶１０）拌匀，闷７～１０ｍｉｎ，每批均
将炒药机底锅温度升至１８０℃左右投药，炒１０ｍｉｎ
左右，出锅，阴凉处晾干。共计炒制１０批。以上每
批炒制品均经饮片厂老师傅检验认为外观符合传统
要求。
２　方法与结果
２．１　检查
２．１．１　水分测定　按２００５年版药典一部附录 ＩＸ
Ｈ４７页方法进行。称取过２号筛的供试品粉末５ｇ，
平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过 ５
ｍｍ，精密称定，打开瓶盖在１００～１０５℃干燥５ｈ，将
瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却３０ｍｉｎ，精密称重，再
在上述温度干燥１ｈ，冷却，称重，至连续２次的差异
不超过５ｍｇ为止。根据减失的质量，计算供试品中
含水量（％）。结果见表１。
表１　盐关黄柏中总灰分、酸不溶性灰分、水分、
浸出物含量测定 ％　
样品 总灰分 酸不溶性灰分 水分 浸出物
关黄柏　１（铁岭） ９８５ ０１４ ４０５ １９５０
　　　　２（铁岭） １０３９６ ０１３ ４２０ １９２９
　　　　３（三江口） ８６１ ０１６０ ３８４ １８６３
　　　　４（三江口） １０２９ ０１４０ ３８７ １９００
　　　　５（三江口） １００５ ０１１０ ３７２ １８９３
　　　　６（康平） １０３１ ０１７０ ４０３ １９３１
　　　　７（康平） １００９ ０１３０ ４０８ ２００２
　　　　８（康平） １０２４ ００９５ ４１５ １９２６
　　　　９（康平） ９９６ ００９５ ４１０ １９５１
　　　　１０（康平） ９７２ ００８０ ４０９ １９００
　　　　平均值 １０１４ ０１４５ ４０１ １９２５
２．１．２　总灰分测定　按２００５年版药典一部附录
ＩＸＫ４８页进行。取过二号筛的供试品粉末３～５ｇ，
置炽灼至恒重的坩埚中，缓缓炽热，注意避免燃烧，
至完全炭化时，逐渐升高温度至５００～６００℃，使完
全灰化并至恒重。根据残渣质量，计算供试品中总
灰分的质量（％）。结果见表１。
２．１．３　酸不溶性灰分测定　取总灰分测定项下所
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得的灰分，在坩埚中注意加入稀盐酸约１０ｍＬ，用表
面皿覆盖坩埚，置水浴上加热１０ｍｉｎ，表面皿用热水
５ｍＬ冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚
内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化
物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，
炽灼至恒重。根据残渣质量，计算供试品中酸不溶
性灰分的质量（％）。结果见表１。
２．２　浸出物
按２００５年版药典一部附录 ＸＡ５６页中热浸法
进行。称取过二号筛的供试粉末品约 ２～４ｇ，置
１００ｍＬ锥形瓶，加入５０ｍＬ蒸馏水，塞紧，静置１ｈ
后，称重，加热至沸腾回流提取１ｈ，放冷，称重，用水
补足减失的质量，摇匀，用干燥滤器滤过，再取 ２５
ｍＬ滤液置水浴蒸干，于１０５℃烘箱干燥３ｈ，移至干
燥器中，冷却３０ｍｉｎ，迅速精密称重，以干燥品计算
供试品中水溶性浸出物的质量分数（％），结果见表
１。
２．３　含量测定
２．３．１　 色 谱 分 析 条 件 　 ＬｕｎａＣ１８色 谱 柱
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙晴０１ｍｏｌ·
Ｌ－１磷酸二氢钠溶液（３０∶７０），用磷酸调ｐＨ２６。检
测波长３４５ｎｍ。流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。柱温３０℃。
理论板数，按盐酸小檗碱峰计算应不低于３０００。分
离度（Ｒ）盐酸小檗碱与相邻杂质峰分离度大于１５。
在此色谱条件下，色谱峰分离效果好，小檗碱与相临
峰能达到了基线分离。见图１。
图１　盐酸小檗碱（Ａ）盐黄柏（Ｂ）高效液相色谱图
２．３．２　提取溶媒的选择　取样品数份，分别加入甲
醇、乙醇、５０％甲醇，回流提取２ｈ，以上述方法测定，
试验表明甲醇、乙醇、５０％乙醇提取小檗碱质量分数
分别为 ０７７７％，０７４４％，０６２８％，可见采用甲醇
提取含量最高，故采用甲醇作为提取溶媒。
２．３．３　提取方法的选择　取样品数份，加入甲醇，
分别以冷浸过夜，超声处理３０ｍｉｎ、回流提取２ｈ及
索氏回流提取各 ２ｈ，试验表明冷浸过夜、超声 ３０
ｍｉｎ、回流提取２ｈ，索氏提取２ｈ，小檗碱质量分数分
别为 ０７２６％，０７３８％，０７６８％，０７９９％，可见采
用索氏提取２ｈ含量最高，故选择索氏回流提取。
２．３．４　索氏回流提取时间选择　取样品数份，加入
甲醇，分别回流提取１，２，３ｈ，小檗碱质量分数分别
为０８０７％，０８０８％，０８０９％，可见３种提取时间小
檗碱质量分数差异不大，为保险起见，采用回流提取
２ｈ作为提取时间。
２．３．５　对照品溶液的制备　精密称取盐酸小檗碱
对照品４ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，加甲醇使溶解，并稀
释至刻度，摇匀；精密量取４ｍＬ，置１０ｍＬ量瓶中，
加甲醇至刻度，摇匀，即得（每１ｍＬ含盐酸小檗碱
３２μｇ。
２．３．６　供试品溶液的制备　取本品粉末（６０目）
０１ｇ，精密称定，置索氏提取器中，精密加入甲醇４０
ｍＬ，回流提取２ｈ，回收甲醇至１０ｍＬ，转移至２５ｍＬ
量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（０４５
μｍ）滤过，即得。
２．３．７　线性关系考察　精密吸取小檗碱对照品甲
醇溶液（００４４ｇ·Ｌ－１）２５，５，７５，１０，１２５μＬ，注
入液相色谱仪，测定峰面积，以盐酸小檗碱进样量
（μｇ）为横坐标，峰面积为纵坐标，其回归方程 Ｙ＝
４０５６８６Ｘ－３９２４５，ｒ＝０９９９９。结果表明，小檗碱
在０１１～０５５μｇ有良好的线性关系。
２．３．８　精密度试验　精密称取本品０１ｇ，制成供
试品溶液，重复进样５次，测定峰面积，平均峰面积
为１１５６０，ＲＳＤ２８％。
２．３．９　稳定性试验　精密称取本品０１ｇ，制成供
试品溶液，分别于制备后０，３，６，９，１２，２４ｈ，进样测
定，平均峰面积为１１７７２，ＲＳＤ２７％，结果表明，供
试品溶液在２４ｈ内基本稳定。
２．３．１０　重复性试验　按含量测定方法，精密称取
本品５份，进行测定，求得相对平均质量分数８０３
ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ１５％。
２．３．１１　回收率试验　采用加样回收法，精密称取
已知含量的样品约５０ｍｇ，分别精密加入盐酸小檗
碱对照品甲醇溶液（０２０３２ｇ·ｍＬ－１）２ｍＬ，按供试
品溶液的制备方法制备及上述色谱条件，测定，结果
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见表２。
表２　小檗碱加样回收率
样品量
／ｍｇ
样品中量
／ｍｇ
测出量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
５１９０ ０４２ ０８２ ９９３ 　 　
５２２２ ０４２ ０８１ ９７２ 　 　
５２３６ ０４２ ０８２ ９８１ ９７８ １０
５１０４ ０４１ ０８０ ９６９ 　 　
５１１８ ０４１ ０８１ ９７４ 　 　
　　注：样品加入量均为０４１ｍｇ。
２．３．１２　样品测定　分别称取１０批盐黄柏饮片样
品，制备样品溶液，测定，结果见表３。
表３　样品测定 ％　
产地 批号 小檗碱
三江口 １ ０７４６
　 ２ ０７３８
　 ３ ０７１９
铁岭　 ４ ０７９６
　 ５ ０６４９
康平　 ６ ０８９８
　 ７ ０７５７
　 ８ ０８７６
　 ９ ０８０７
　 １０ ０６９４
平均值 　 ０７６８
　　根据以上测定结果，按干燥品计算，建议盐关黄
柏含盐酸小檗碱（Ｃ２０Ｈ１７ＮＯ４·ＨＣｌ）计，不少于
０７％。
３　讨论
关于黄柏中小檗碱的含量测定方法主要有薄层
扫描法［５］，一阶导数紫外比色法［６］，薄层色谱比色
法［７］等。就不同测定方法比较而言，目前主要还是
高效液相法应用广泛，原因还是本法测定方便，数据
准确。其选用测定流动相随色谱柱不同，其有不同
变化，但都是要将小檗碱峰前面的一个生物碱峰达
到基线分离的目的，测定的数据结果才能可靠准确，
重复性好。本实验曾以乙腈水（４７∶５３）１００ｍＬ中
含磷酸二氢钾３４ｇ，十二烷基磺酸钠流动相，其小
檗碱的相临峰难于基线分离，并且整个流动相不能
完全在澄明状态。后经反复试验以乙晴０１ｍｏｌ·
Ｌ－１磷酸二氢钠溶液（３０∶７０），用磷酸调 ｐＨ２６，以
此为流动相分离效果好，且经实验证明调节 ｐＨ非
常重要。
关黄柏的主要药效成分为小檗碱，对其有效成
分含量测定已有一些报道，但对盐制关黄柏质量评
价指标未见报道。笔者经对３个主产地１０批盐制
关黄柏样品的各项指标分析表明，建议含量控制指
标：盐关黄柏按干燥品计算，含盐酸小檗碱
（Ｃ２０Ｈ１７ＮＯ４·ＨＣｌ）计，不少于 ０７％；水分不超过
５０％；总灰分不超过１２２％；酸不溶性灰分不超过
０１６％；浸出物不少于１５５％。由于以上盐关黄柏
制备工艺是通过实验室研究得到，又将其工艺放大
到大生产验证并制备１０批供试品，又有有经验的老
师傅把关，有一定的可行性、科学性及代表性。
［参考文献］
［１］　时维静，陈文成，谭志静．ＨＰＬＣ测定黄柏不同炮制品中小檗碱
的含量［Ｊ］．中国药事，２００９，２３（２）：１３４．
［２］　张晓华．黄柏盐制的合理炮制工艺研究［Ｊ］．长春中医药大学
学报，２００８，２４（６）：６６１．
［３］　杨骏，刘翠兰，李亚吉．黄柏胶囊制备工艺及质量研究［Ｊ］．中
成药，２００７，２９（１０）：１５２４．
［４］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：９９．
［５］　王坤．双波长薄层法测定黄柏中盐酸小檗碱的含量［Ｊ］．中国
中药杂志１９９４，１９（１２）：７１２．
［６］　李爱华，李雪梅，高光思．一阶导数紫外光谱法测定三妙丸中
小檗碱的含量［Ｊ］．沈阳药学院学报，１９９４，１１（３）：１６５．
［７］　冯淑英，白明，谢庆海．黄柏测定方法的研究［Ｊ］．沈阳药学院
学报，１９９２，９（３）：２１２．
［责任编辑　周　驰］
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