免费文献传递   相关文献

Feasibility study for whole plant medicinal use of Tribulus terrestris

蒺藜全草入药的可行性分析



全 文 :蒺藜全草入药的可行性分析
杨莉,王春雨,韩梅,杨利民
(吉林农业大学 中药材学院,吉林 长春 130118)
[摘要] 目的:比较蒺藜叶子、全草与入药部位果实之间含量的差异,探讨蒺藜全草入药的可行性。方法:选择了蒺藜生
长的3种典型生境和6个产区采集样品,以蒺藜体内2类主要药用成分总皂苷和总黄酮物质为检测指标,测定了其在采收期
内在根、茎、叶、果中的动态分布变化。结果:在采收期内3种生境、6个产区的蒺藜样品中的总黄酮和总皂苷类物质均主要分
布在叶中,其含量分别为同期根、茎、果中含量的261倍以上。多重比较的结果显示,蒺藜全草中2类有效物质的含量与果实
中的没有差异,有些甚至显著的高于后者。结论:在采收和加工的过程中应当重视蒺藜叶子的采集、保存与利用。另外从含
量上来讲,蒺藜是可以全草入药的。
[关键词] 黄酮;皂苷;含量;生境;产区;果实;全草
[收稿日期] 20090113
[基金项目] 国家科技支撑计划项目(2006BAI06A05205);吉林省
科技发展计划项目(20040901202205)
[通信作者] 韩梅,Tel:(0431)84556087,Email:ylmh777@126.
com
  中药蒺藜是我国最早应用的中药之一,最早见
于《神农本草经》,并列为上品。现代药理学的研究
认为蒺藜有对癌细胞的体外抑制作用[1]、抗衰
老[2]、防治性功能减退[3]等作用,尤其是蒺藜在心
脑血管系统方面良好的药理活性作用,主要用于心
脑血管疾病的治疗并在临床上显示了良好的疗
效[45]。
传统的中药蒺藜、临床使用的蒺藜以及《中国
药典》收录的蒺藜均指的是蒺藜科植物蒺藜Tribulus
terestrisL.的干燥成熟果实,其主要有效成分为皂
苷和黄酮类物质[67]。除此之外蒺藜的叶中也含有
大量的皂苷和黄酮类化合物,但是在传统的采收期
内,蒺藜的叶子已经大量的枯萎,同时由于蒺藜是匍
匐生长的,与周围杂草纠缠难以分开,采收时往往采
用暴力拉扯导致其叶子大量脱落,不仅造成了资源
的严重浪费,同时也忽视了对蒺藜原料的综合开发
利用。另外蒺藜果实由5个分果瓣组成,成熟时即
分离,采收时的暴力拉扯同样造成了成熟果实的大
量脱落,而实际采收到的果实成熟度的不一致,有效
成分含量的不稳定,将会直接影响到药品的质量。
本研究从资源合理利用的角度出发,采集了3种不
同生境、6个不同产区的蒺藜,分别测定了采收期内
其主要药用成分总皂苷和总黄酮物质在根、茎、叶、
果中的动态积累变化,比较了叶与果实、全草与果实
之间主要有效成分含量的差异,探讨了蒺藜全草入
药的可行性。
1 材料与方法
1.1 不同产区的选择
根据野生蒺藜的分布,选择了河南(黄土)、陕
西(黄土)、内蒙古(沙土)、新疆(沙土)、吉林洮南
(盐碱土)、吉林长春(典型黑土)等较典型产区采集
蒺藜样品。样品采集时间均为8月下旬。植物样品
阴干后分别测定全草以及根、茎、叶、果各部位总黄
酮、总皂苷含量。
1.2 不同生境样地的选择
选择了蒺藜生长的3种典型生境进行研究,包
括栽培过玉米土壤肥力较好的农田(田地)、含沙量
中等的弃耕沙土地(沙地)和没有人为耕种过的沙
丘(野生)。前2种生境为仿生栽培,人为播种,施
加同等底肥,播种时灌水,出苗后除1次草,以后不
再追肥水和进行人工田间管理,任其自由生长,收获
时设样地,采样。野生蒺藜样品为收获期在吉林洮
南二龙乡远离人群居住地的沙丘上随机设样地,3
次取样重复得来。
实验从8月中旬蒺藜进入成熟期开始,每隔5d
取1次样,共取样5次,样品阴干后留出部分全草,
其余分根、茎、叶、果4个部位分别粉碎备用。
1.3 蒺藜样品
蒺藜样品均由吉林农业大学野生植物资源教研
室韩梅教授鉴定为蒺藜科植物蒺藜T.terestris。
·3612·
第34卷第17期
2009年9月
                           
Vol.34,Issue 17
 September,2009
1.4 仪器与试剂
UV1700型紫外可见分光光度计(日本岛津);
DL1000E型超声波清洗器(上海之信仪器公司);
MARS5型微波反应器(CEM公司);AUY220型电
子天平(日本岛津);
薯蓣皂苷、芦丁(中国药品生物制品检定所):
其余所用药品、试剂均为分析纯。
1.5 线性关系与方法学考察
1.5.1 黄酮类成分标准曲线 精密称取芦丁对照
品104mg,置50mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,
摇匀。精密吸取此溶液0,1,2,3,4,5,6mL分别置
于25mL量瓶中,加4%NaNO2溶液1mL,摇匀,放
置 6min后加入10%AlNO3溶液1mL,摇匀,放置6
min后加入10%NaOH溶液10mL,最后各用水稀释
至刻度,摇匀放置 15min后,用第 1瓶作空白,在
510nm处测吸收度,以吸收度(Y)作纵坐标,芦丁质
量浓度(X)作横坐标绘制标准曲线,回归方程为
Y=1544X-00144,R2 =09997,线性范围
7629~45777mg·L-1。
1.5.2 精密度试验 精密吸取同一样品液5份,按
照151项下方法显色测定,计算得 RSD19%,表
示方法精密度良好。
1.5.3 稳定性试验 取样品1mL,按照151项
下方法显色测定,每隔10min测定1次,结果显示
60min内样品吸收度基本稳定,RSD10%。
1.5.4 重复性试验 取同一样品5份,每份1g,依
法提取,显色,结果RSD26%,方法重复性良好。
1.5.5 加样回收率试验 取已知含量样品5份,分
别加入芦丁对照品溶液1mL(0208mg·L-1),依
法制定样品溶液,显色测定,结果显示平均回收率为
10006%,RSD07%。
1.5.6 皂苷类成分的标准曲线 精密称取薯蓣皂
苷92mg,置50mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇
匀。精密吸取此液 000,020,040,060,080,
100,120mL于 6支塞试管中,水浴加热挥去溶
剂,在每支试管中分别精密加入高氯酸5mL,密塞,
于25℃ 水浴30min,取出后立即放入冰水中冷却,
以第1管作空白,于409nm处测吸收度,以吸收度
(Y)为纵坐标,薯蓣皂苷质量浓度(X)为横坐标,得
标准曲线Y=27242X-00503,R2=09996,线性
范围736~4416mg·L-1。
1.5.7 精密度试验 对同一样品溶液按照153
项下方法显色测定5次,RSD075%,精密度较高。
1.5.8 稳定性试验 将样品显色后放置在冰水中,
每隔10min中测定1次,结果显示,吸光度读数在
40min内基本稳定,RSD13%。
1.5.9 重复性试验 取同一样品5份,每份1g,依
法提取显色,计算RSD10%,方法重复性良好。
1.5.10 加样回收率试验 取已知含量样品5份,
分别加入薯蓣皂苷对照品溶液 1mL(0184mg·
L-1),依法制定样品溶液,显色测定,结果显示平均
回收率为9842%,RSD15%。
1.6 提取方法
精密称定一定量粗粉(60目)后蒺藜样品,石油
醚热回流3h除去叶绿素等杂质后,将原料中溶剂
挥干并干燥至恒重;精密称取一定量原料,放入微波
反应罐中加入一定量乙醇溶液,微波提取,过滤,滤
液减压回收至干,以甲醇冲洗并定容至50mL量瓶,
过滤,得供试品溶液,测定吸光度。
2 结果与分析
2.1 不同产区蒺藜各部位总黄酮和总皂苷含量的
对比
测定了6个不同产区蒺藜根、茎、叶、果中总黄
酮和总皂苷类物质的含量变化,结果见表1。在采
收期内6个产区蒺藜的总黄酮和总皂苷2类有效物
质均主要分布在叶中。其中,叶中总皂苷含量平均
为果实中的 397倍,总黄酮含量平均为果实的
355倍。新疆和洮南地区的叶与果中总皂苷含量
差异最大,其差异达到271517,244231mg·g-1,
叶与果中总黄酮含量差异最大的是内蒙古和洮南地
区,差异分别为95588,84305mg·g-1。
2.2 3种生境中总黄酮和总皂苷在各个部位分布
的变化
分别测定3种生境中根、茎、叶、果4个部位
总黄酮和总皂苷在采收期内的含量,结果见图1。
通过比较总皂苷含量的动态变化可知,蒺藜4
个部位中总皂苷含量达到峰值的时间几乎同步,均
在8月21-26日到达峰值后回落,与传统的采收
时间较为一致,为8月的下旬。另外,蒺藜果实是
传统的入药部位,总皂苷是其主要的药用成分,但
比较图1可以看出,整个采收期内3种生境中均是
以叶中的总皂苷含量最高,其含量分别为根、茎、
果的 297,315,286倍,最 高 时 超 过 30
mg·g-1。
·4612·
第34卷第17期
2009年9月
                           
Vol.34,Issue 17
 September,2009
表1 不同产区根、茎、叶、果中总黄酮与总皂苷含量测定 mg·g-1
产地
总皂苷
根 茎 叶 果
总黄酮
根 茎 叶 果
河南  6387 4154 17986 4202 1437 1815 6138 1496
陕西  5707 4086 25548 7531 1313 2435 6861 3158
内蒙古 4852 4424 26490 6393 1308 2403 11908 2349
新疆  5591 3952 32260 5108 1394 2559 10450 2845
洮南  13373 9800 33092 8669 2311 2705 11308 2878
长春  8379 8179 20556 10926 1789 3563 8620 3633
图1 3种生境中总黄酮、总皂苷在根、茎、叶、果中分布的动态变化
  在采收期内,3种生境中各个部位总黄酮含量
达到其高峰期的时间并不一致。叶中总黄酮的含量
在8月20日左右即达到高峰期,分别为同期根、茎、
果的477,342,261倍,随后叶的含量开始降低而
果实中的含量开始剧增,到8月末果中的含量甚至
超过叶的含量。另外总黄酮含量在各个部位的分布
较有规律,8月26日以前,沙地、野地、田地3种生
境中总黄酮的含量均表现为叶 >果 >茎 >根,至8
月26日以后,其含量顺序变为果>叶>茎>根。
2.3 全草与各部位总黄酮、总皂苷含量的对比
将不同生境与不同产区蒺藜样品的各个部位与
全草的总黄酮和总皂苷含量进行方差分析,结果显
示,组间差异显著的大于组内(P<005)。进一步进
行多重比较,结果表明不同生境中生长的蒺藜除野生
的蒺藜其全草总皂苷含量大于果实,且差异达到显著
外,其余生境中的全草与果实总黄酮、总皂苷含量均
无显著差异,但多为全草含量高于果实。不同产区采
集的蒺藜样品其全草的总黄酮和总皂苷含量均大于
·5612·
第34卷第17期
2009年9月
                           
Vol.34,Issue 17
 September,2009
果实的含量,除河南与陕西全草与果实总皂苷含量没
有显著差异外,其余部分均达到差异显著的地步。
3 结论与讨论
蒺藜叶子中含有丰富的总黄酮和总皂苷类物
质,其含量约为传统的入药部位果实中含量的261
倍以上。因此,为了实现资源的合理利用,在采收和
加工的过程中应当重视蒺藜叶子的采集、保存与
利用。
通过全草与各个部分含量的比较可以看出,蒺
藜全草中的总黄酮和总皂苷类物质的含量与果实中
的没有显著差异,有些甚至显著的高于果实含量,因
此,从含量上来讲,蒺藜是可以全草入药的。但是全
草入药是否会造成药理药效的差异则需要进一步的
实验研究来证明。
根据对果实中皂苷的动态积累研究结果显示,
在传统的采收期内果实中的总皂苷达到了积累的高
峰期,因此对皂苷类物质而言,传统采收期的时间确
定是合理的。但是对蒺藜中另一类主要物质黄酮类
物质而言,在此期间果实中的总黄酮类物质含量还
在剧烈上升,因此,对黄酮类物质而言其最适采收期
还值得进一步的研究。
[参考文献]
[1] 孙斌,瞿伟菁,柏忠江.蒺藜皂苷对乳腺癌细胞Bcap37的体外
抑制作用[J].中药材,2003,26(2):104.
[2] 张秀芹,王钰玫,金春花.蒺藜茎叶总皂甙抗衰老作用研究
[J].中药材,1990,13(2):34.
[3] AdimoeljaA.Phytochemicalsandthebreakthroughoftraditional
herbsinthemanagementofsexualdysfunctions[J].IntJAndr,
2002,23(2):82.
[4] 李君玲,杨松松.蒺藜皂苷化学及药理研究概况[J].中医学
刊,2006,24(8):1509.
[5] 宿燕岗,杨学义.心脑舒通的临床应用现状[J].中国临床医学
杂志,1998,5(4):239.
[6] 张健,李芳,李俊,等.蒺藜甾体皂苷的测试[J].中医药研究,
2000,16(4):48.
[7] 蔡振利,李永国,段金廒.蒺藜提取物中黄酮类成分的高效液
相色谱分析[J].药物分析杂志,1995,15(增刊):548.
FeasibilitystudyforwholeplantmedicinaluseofTribulusterrestris
YANGLi,WANGChunyu,HANMei,YANGLimin
(ColegeofChineseMedicinalMaterials,JilinAgriculturalUniversity,Changchun130118,China)
[Abstract] Objective:Thecontentdiferencesofleaf,plantandfruitofTribulusterestriswascomparedtostudythefeasibility
ofwholeplantmedicinaluse.Method:ThesampleswerecolectedinthreetypicalhabitatsandsixdiferentproductionareasofT.ter
restris.Themainmedicinalingredientssaponinsandflavonoidsweredeterminedinroot,stem,leafandfruitduringtheharvesttime.
Result:Thetwoingredientswereaboundedinleafandmorethan2.61timesasinotherpartsoftheplant.Theresultsshowedthat
therewerenodiferencesbetweenthewholeplantandthefruit.Conclusion:Itshouldpaymoreatentionsonthecolection,preserva
tionandutilizationoftheleafofT.terestrisintheharvestingandprocessingstage.Thewholeplantformedicalusewasfeasibility
basedonthecontentoftheingredients.
[Keywords] saponin;flavonoid;content;habitat;productionarea;fruit;wholeplant
[责任编辑 吕冬梅]
·6612·
第34卷第17期
2009年9月
                           
Vol.34,Issue 17
 September,2009