全 文 ：Ｅｆｅｃｔｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｏｎａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎ
ｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５
ＬＩＵＹｕｍｅｉ１，２，ＯＵＹＡＮＧＷｕｑｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧＺｉｑｉａｎｇ２，ＭＡＳｈｕｙａｎ１，ＹＡＮＧＢａｏｐｉｎｇ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｌｕｏｙａｎｇ４７１００３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｓｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐｒａｔｉｃｌｅｓａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎ
ｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｅｍｕｌｓｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓａｎｄｕｓｉｎｇｄｅｘｔｒａｎａｓａ
ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇａｇｅｎｔ．Ｉｔｗａｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｓｉｚｅ，ｄｒｕｇｅｎｔｒａｐｍｅｎｔｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｌｏａｄｉｎｇｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａ
ｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒ４８ｈ，Ａｎｔｉｐｒｏ
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｎｖｅｒｔｅｄｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉ
ｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄｓｃａｎｎｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＭｅａｎｄｉａｍｅｔｅｒｏｆＶＬＢＰＢＣＡＮＰｗａｓａｂｏｕｔ７４４ｎｍ，ａｎｄｄｒｕｇｅｎｔｒａｐｍｅｎｔｅｆｉ
ｃｉｅｎｃｙａｎｄｌｏａｄｉｎｇｅｆｉｃｉｅｎｃｙｗａｓ７８４７％ ａｎｄ３９２４％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｅｌｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｇｒｏｕｐ
ａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｇｒｏｕｐｉｎａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅ（５５０００ｇ·Ｌ－１）ｆｏｒ４８ｈｗａｓ４１％，４９％，７３％，８３％ ａｎｄ２８％，
３３％，５４％，６０％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＥｎｔｒａｐｍｅｎｔｏｆＶＬＢｉｎＮＰＳｍａｙｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙｄｅｇｒａｄｅａｂｓｏｒｂｅｎｃｙａｓｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｆｒｅｅｄｒｕｇｓ．Ｇｌｉｏｍａｃｅｌ
ＢＴ３２５ｗｈｉｃｈｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＶＬＢｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｗｅｒｅｉｎｉｔｉａｌｓｔａｇｅｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｏｄｙｗｅｒｅｆｏｒｍｉｎｇ．ＢｕｔＶＬＢＮＰＳｔｒｅａｔｅｄ
ＢＴ３２５ｃｅｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｏｒｅｎｄｓｔａｇｅ，ａｎｄｍｉｓｓｅｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎｔｅｇｒａｌｉｔｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＶＬＢＰＢＣＡＮＰａｎｄＶＬＢｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ
ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５，ａｎｄＶＬＢｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｈａｖｅｓｔｒｏｎｇｅｒｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｅｃｔｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＶＬＢ
ｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｉｎｔｈｅｓａｍｅｄｏｓｅ．ＰＢＣＡｍａｙｂｅｅｆｅｃｔｉｖｅａｓｐｒｏｍｉｓｉｎｇｃａｒｉｅｒｆｏｒｔｈｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｉｎｔｏｔｈｅｇｌｉｏｍａｃｅｌｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ；ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ；ｇｌｉｏｍａ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００８０３２０
［通讯作者］ 武洁，Ｔｅｌ：（０２５）８５６０８６７５，Ｅｍａｉｌ：ｗｕｊｉｅ６１３＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ测定大鼠血浆中的芍药苷及
其药动学研究
武 洁，姚 楠，王大为
（江苏省中医药研究院，江苏 南京 ２１００２８）
［摘要］ 目的：建立ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效
成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式：多反应离子监测，选择监测的离子为ｍ／ｚ４５０～ｍ／ｚ３２７（芍药苷）
和ｍ／ｚ３８８～ｍ／ｚ２２５（栀子苷）。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为２９４７８ｍｇ·ｋｇ－１。
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药
动学参数分别为Ｃｍａｘ（１５５±０５３）ｍｇ·Ｌ
－１，Ｔｍａｘ（０９±０３）ｈ，ｔ１／２（１５１±０６３）ｈ，ＭＲＴ（３０８±０７４）ｈ，ＡＵＣ０→τ
（４６８±０８５）ｍｇ·ｈ－１·Ｌ－１。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的 Ｃｍａｘ，Ｔｍａｘ，ｔ１／２，ＭＲＴ，ＡＵＣ０→τ分别为
（０９３±０４２）ｍｇ·Ｌ－１，（１５±０８）ｈ，（３０８±１７９）ｈ，（５１９±１９５）ｈ，（３３６±０５６）ｍｇ·ｈ－１·Ｌ－１。两组药
动学参数中，ＭＲＴ，Ｃｍａｘ和ＡＵＣ０→τ具有显著性差异（Ｐ＜００５）。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
药动学。
［关键词］ 芍药苷；ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ；药动学；当归
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２０２３６９０４
当归和芍药是著名药对，许多中成药复方是在
此基础上加减而成的。芍药苷（ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ）是赤芍
的主要活性成分之一，具有活血化瘀、扩张冠脉血
管、对抗急性心肌缺血、治疗缺血性脑血管疾病、保
肝、抗肿瘤及增强免疫力等药理作用［１］。本研究建
立了简便、快速的ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ分析血浆中的芍药
苷，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的
药动学影响，首次发现了赤芍和当归联用后芍药苷
的药动学发生显著性变化。
１ 材料
Ｗａｔｅｒｓ２６９５－ＭｉｃｒｏｍａｓｓＱｕａｔｒｏｍｉｃｒｏ液相色谱
质谱联用仪；Ｍａｓｓｌｙｎｘ４０数据处理系统；ＭＥＴＴＬＥＲ
１／１０万电子天平；Ｍｉｃｒｏｍａｘ台式高速离心机（Ｔｈｅｒ
ｍｏ）；涡旋混合器（上海沪西分析仪器厂）；Ｍｉｌｉ－Ｑ
纯水器（美国）；ＳＰＤ２０１０真空离心浓缩仪（Ｔｈｅｒｍｏ）。
芍药苷对照品（纯度 ９７９％，批号 １１０７３６
２００７３１）和栀子苷（内标，纯度 ＞９９５％，批号
１１０７４９２００６１３）对照品购自中国药品生物制品检定
所。赤芍 ＰａｅｏｎｉａｌａｃｔｉｆｌｏｒａＰａｌ和当归 Ａｎｇｅｌｉｃａ
ｓｉｎｅｎｓｉｓ（ｏｌｉｖ）Ｄｉｅｌｓ经本院资源化学室钱士辉研究
员鉴定。赤芍煎液的制备：赤芍饮片（安徽井泉集
团中药饮片有限公司）２００ｇ于１０００ｍＬ蒸馏水中浸
泡３０ｍｉｎ，加热煮沸１０ｍｉｎ，转小火煮１ｈ，趁热过
滤。药渣继续加蒸馏水１０００ｍＬ加热煮沸１０ｍｉｎ，
转小火煮 １ｈ。合并 ２次煎出液，加热浓缩至 ２００
ｍＬ。当归饮片购自南京药业股份有限公司中药饮
片厂，当归煎液的制备方法同赤芍煎液，加热浓缩至
１２０ｍＬ。用ＨＰＬＣ测定赤芍煎液中芍药苷２９４７８ｇ
·Ｌ－１，当归煎液中阿魏酸０４９８ｇ·Ｌ－１。甲醇为色
谱纯（美国Ｔｅｄｉａ），冰醋酸为分析纯（南京化学试剂
一厂），水经 Ｍｉｌｉ－Ｑ纯水器净化。ＳＤ大鼠（上海
斯莱克实验动物有限责任公司）１２只，雌雄各半，体
重（２６０±１０）ｇ，合格证号ＳＣＳＫ（沪）２００７０００５。
２ 方法
２．１ 溶液配制 精密称取芍药苷对照品１００ｍｇ，
甲醇溶解，制成芍药苷１００ｇ·Ｌ－１的储备液，并用
甲醇稀释成系列对照品溶液供分析用。
精密称取栀子苷对照品３６ｍｇ，甲醇溶解，制
成栀子苷０３６ｇ·Ｌ－１的储备液，并用甲醇稀释至
３６ｍｇ·Ｌ－１。
２．２ 分析条件 色谱柱为 ＳｈｉｍａｄｚｕＯＤＳ柱（４６
ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇水（含０１％冰醋
酸）（３５∶６５），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱后分流，０２
ｍＬ·ｍｉｎ－１进入质谱检测器，柱温３５℃。离子极性
为负离子，电喷雾离子化，毛细管电压３ｋＶ，取样锥
孔电压２０Ｖ，离子源温度１２０℃，干燥气温度 ４００
℃，干燥气流速４００Ｌ·ｈ－１，芍药苷和栀子苷的碰撞
电压分别为１５ｅＶ和２０ｅＶ，碰撞室（Ａｒ）压力０３５
Ｐａ。检测方式为多反应离子监测（ＭＲＭ），用于定量
分析监测的离子反应为：ｍ／ｚ４５０～ｍ／ｚ３２７（芍药
苷）和ｍ／ｚ３８８～ｍ／ｚ２２５（栀子苷）。
２．３ 血浆样品的处理 取待测血浆１００μＬ于１５
ｍＬｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，加入内标栀子苷溶液（３６ｍｇ·
Ｌ－１）１０μＬ，振荡１０ｓ，加甲醇４００μＬ，振荡３ｍｉｎ，
１５０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液４００μＬ，于
４５℃真空浓缩至干，残渣加１００μＬ流动相溶解，振
荡２ｍｉｎ，１５０００ｒ·ｍｉｎ－１高速离心５ｍｉｎ，上清液１０
μＬ进入ＬＣＭＳ／ＭＳ分析。
２．４ 受试大鼠给药方案 大鼠禁食过夜至少１０ｈ
（不禁水），于次日早晨随机分为２组，每组雌雄各
半，一组灌胃赤芍煎液（芍药苷剂量 ２９４７８ｍｇ·
ｋｇ－１），另一组灌胃赤芍煎液（剂量同上）和当归煎
液（阿魏酸剂量４７８ｍｇ·ｋｇ－１）。分别于给药前及
给药后０３３３，０６６７，１，１５，２，３，４，６，８ｈ眼底静脉
丛取血３００μＬ，于肝素化试管中，４０００ｒ·ｍｉｎ－１离
心５ｍｉｎ，分离出血浆冷冻至分析，每次取血后给大
鼠补充等量的生理盐水。
３ 结果
３．１ 方法专属性 上述色谱条件下，芍药苷和内标
栀子苷峰形良好，保留时间分别为 ４１ｍｉｎ和 ３５
ｍｉｎ（图１），血浆中的杂质不干扰样品测定。
３．２ 线性关系及检测限 取１５ｍＬｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管
数支，分别精密加入不同量的芍药苷对照品溶液，加
入大鼠空白血浆１００μＬ，振荡１０ｓ，配成含芍药苷
分别为００２５，００５，０１，０２５，０５，１，２５，５ｍｇ·
Ｌ－１的标准血浆，按２．３项下操作，记录峰面积。以
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１．芍药苷；２．栀子苷；Ａ．空白血浆；Ｂ．大鼠给药后２ｈ的血浆；Ｃ．空白血浆中加入芍药苷及内标栀子苷对照品
图１ 芍药苷及栀子苷色谱图
芍药苷面积（Ａｓ）与内标面积（Ａｉｓ）的比值（ｆ）对浓度
（Ｃ）作直线回归。得回归方程：ｆ＝０９８３１Ｃ＋０００９
４（ｒ＝０９９９７）。血浆中芍药苷的检测限为１０μｇ·
Ｌ－１（Ｓ／Ｎ＞３）。
３．３ 回收率试验 配制含芍药苷低、中、高浓度分
别为０１，０５，２５ｍｇ·Ｌ－１的血浆１００μＬ，加入甲
醇４００μＬ振荡、离心后，吸取上清液４００μＬ于另一
ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，加入内标溶液１０μＬ，混合后于 ４５
℃真空浓缩至干。残渣用１００μＬ流动相溶解，１０
μＬ进样分析，得到芍药苷和内标的峰面积比值
（ｆｘ）。另外，取空白血浆１００μＬ，加入甲醇４００μＬ
振荡、离心后，吸取上清液４００μＬ于另一 ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ
管中，加入相应浓度的芍药苷对照液和内标溶液，于
４５℃真空浓缩至干，用１００μＬ流动相溶解残渣，１０
μＬ进样分析，得到对照样品中芍药苷和内标的峰面
积比值（ｆｓ）。
血浆中芍药苷的回收率（Ｒ）按Ｒ＝ｆｘ／ｆｓ×１００％
计算，低、中、高３种浓度的提取回收率分别为９６３
％，８４５％和９５５％；ＲＳＤ分别为７８％，４９％和
２３％。
３．４ 精密度试验 配制含芍药苷分别为０１，０５，
２５ｍｇ·Ｌ－１的血浆，按２．３项下操作，每种浓度各
做１５份样品，每一浓度在１ｄ内测定５次，考察批
内精密度，连续３ｄ测定考察批间精密度。将峰面
积比值代入当天标准曲线计算浓度，并求得批内和
批间精密度。低、中、高３种浓度的批内精密度ＲＳＤ
分别为１０１％，７２％和３５％；批间精密度ＲＳＤ分
别为１３１％，５７％和６９％。
３．５ 稳定性考察 配制含芍药苷浓度分别为０１，
０５，２５ｍｇ·Ｌ－１的血浆，按２．３项下操作，分别进
行血浆室温放置、提取物冰箱中保存、冷冻和冻融稳
定性考察。结果表明，血浆室温放置１０ｈ含量没有
下降；血浆经过沉淀、干燥后于４℃冰箱中保存２４ｈ
含量未发生变化；血浆在－２０℃冰箱中储存５ｄ和
在５ｄ内反复冻融３次芍药苷未出现降解。
３．６ 药代动力学研究 用矩量法求算相应的药动
学参数，Ｃｍａｘ与 Ｔｍａｘ均为实测值，ＡＵＣ用梯形面积
法，ｔ１／２＝０６９３／λｎ，对血药浓度的常用对数时间数
据的末端进行直线回归，所得斜率的绝对值乘以
２３０３即为λｎ。
分别计算单用赤芍及联用赤芍和当归后芍药苷
的药动学参数，平均血药浓度时间曲线见图２，估
算的主要药动学参数见表１。对比单用及联用后的
药动学参数，其中对 Ｔｍａｘ进行非参数检验，对 Ｃｍａｘ，
ＡＵＣ０→τ，ＡＵＣ０→∞，ｔ１／２，ＭＲＴ进行平均值ｔ检验（显著
性水平 α＝００５）。结果表明，同时服用赤芍和当
归，与单独服用赤芍相比，芍药苷的达峰时间（Ｔｍａｘ）
推迟，ｔ１／２和ＭＲＴ升高，Ｃｍａｘ，ＡＵＣ０→τ和ＡＵＣ０→∞下降，
其中ＭＲＴ，Ｃｍａｘ和 ＡＵＣ０→τ的变化具有显著性差异
（Ｐ＜００５）。
图２ 大鼠灌胃芍药苷（２９４７８ｍｇ·ｋｇ－１）的平均
血药浓度时间曲线
４ 讨论
由于芍药苷极性较强，血浆中很多成分对芍药
苷的检测有干扰，用 ＨＰＬＣ紫外法测定时为了达到
满意的检测灵敏度，需要经过多次提取［２３］或者加大
血样体积［３５］，不仅操作繁琐、费时，而且不适用于动
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表１ 芍药苷的主要药动学参数
药动学参数 赤芍煎液 当归赤芍煎液
ｔ１／２／ｈ １５１±０６３ ３０８±１７９
Ｃｍａｘ／ｍｇ·Ｌ－１ １５５±０５３ ０９３±０４２
Ｔｍａｘ／ｈ ０９０±０３０ １５０±０８０
ＭＲＴ／ｈ ３０８±０７４ ５１９±１９５
ＡＵＣ０→τ／ｍｇ·ｈ
－１·Ｌ－１ ４６８±０８５ ３３６±０５６
ＡＵＣ０→∞ ／ｍｇ·ｈ
－１·Ｌ－１ ４８８±０８２ ４２１±１２８
物药动学的研究。近年来，质谱技术在中药研究中
广泛应用，使分析并鉴定中药复杂体系中的化学成
分更加简便、快速。ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ法选择性强，由
于生物样本中的其他杂质不被检测，使得空白本底
明显降低，提高了对芍药苷的检测灵敏度。ＨＰＬＣ
ＭＳ／ＭＳ法操作简便，样本量仅需１００μＬ，检测限达
１０μｇ·Ｌ－１，每个样本的分析时间仅为５２ｍｉｎ，适
用于芍药苷的药动学研究。
由于芍药苷是双环单萜类，栀子苷是环烯醚萜
类，极性都很大，在醋酸乙酯中溶解度较低，因而提
取率低。选用甲醇沉淀蛋白、提取后挥干溶剂的方
法，可获得较高的提取率。
文献报道，胡椒、肉桂、小茴香、吴茱萸、花椒［６］
和青藤碱［７］能提高芍药苷的生物利用度，四逆散［８］
和桃红四物汤［９］可显著降低芍药苷的生物利用度。
本试验结果表明，赤芍与当归配伍后，药物间存在着
代谢性相互作用：芍药苷的生物利用度显著降低
（２８％），在体内的消除速度减慢，而半衰期延长能
够有效增加药物的持续作用时间。由文献［１０］可
知芍药苷经肠道菌代谢，复方配伍后其他化学成分
可能促进了芍药苷的代谢转化，从而降低了血浆中
原形药物的浓度。
本研究发现，赤芍和当归配伍后其有效成分芍
药苷的体内药动学发生变化，认为从单味药材中提
取有效成分进行药动学研究可能并不是研究中药药
动学的最佳方法，利用先进手段研究代谢性药物相
互作用，才能更好阐述中药复方的作用机制。
［参考文献］
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（５）：３１０．
［２］ ＣｈｅｎＬＣ，ＬｅｅＭＨ，ＣｈｏｕＭＨ，ｅｔａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｔｕｄｙｏｆ
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ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢ，１９９９，７３５（１）：３３．
［３］ ＹａｎｇＸＧ，ＰｅｎｇＢ，ＺｈａｎｇＧＨ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓｏｆｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏ
ｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｔｗｏＪｉｎｇＺｈｉＧｕａｎＸｉｎｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓａｆ
ｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｔｏｂｅａｇｌｅｄｏｇｓ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌ，
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ｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｏｎｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｆａｔｅｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎａｆｔｅｒ
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［６］ 杨祖贻，裴 瑾，刘荣敏，等．温里药配伍提高赤芍效应成分
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［１０］ ＨｅＪＸ，ＧｏｔｏＥ，ＡｋａｏＴ，ｅｔａｌ．ＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＳｈａｏｙａｏ
ＧａｎｃａｏＴａｎｇａｎｄａｌａｘａｔｉｖｅｗｉｔｈｒｅｓｐｅｃｔｔｏａｌｔｅｒａｔｉｏｎｏｆｐａｅｏｎｉ
ｆｌｏｒｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｂｙｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｂａｃｔｅｒｉａｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉ
ｃｉｎｅ，２００７，１４（７／８）：４５２．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｒａｔｐｌａｓｍａｂｙＨＰＬＣＭＳ／ＭＳａｎｄ
ｉｔｓｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ
ＷＵＪｉｅ，ＹＡＯＮａｎ，ＷＡＮＧＤａｗｅｉ
（ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｉｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００２８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＡｎＨＰＬＣＭＳ／ＭＳａｓｓａｙｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｒａｔｐｌａｓｍａａｎｄｂｅｕｓｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉ
ｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｗｈｅｎｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓａｎｄＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｉｎｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ（ＭＲＭ）ｍｏｄｅｕｓｉｎｇｔａｒｇｅｔｉｏｎｓａｔｍ／ｚ４５０→ｍ／ｚ３２７ｆｏｒｐａｅｏｎｉ
ｆｌｏｒｉｎａｎｄｍ／ｚ３８８→ｍ／ｚ２２５ｆｏｒｊａｓｍｉｎｏｉｄｉｎ．ＡｓｉｎｇｌｅｄｏｓｅｏｆＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａａｌｏｎｅａｎｄｗｉｔｈＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓｗａｓｇｉｖ
·２７３２·
第３３卷第２０期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
ｅｎｔｏｒａｔｓｂｙｉｇ，ｔｈｅｄｏｓａｇｅｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｗａｓ２９４７８ｍｇ·ｋｇ－１．Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｒａｔｐｌａｓｍａｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳａｓｓａｙａｎｄｍａｉｎｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅｅｓｔｉｍａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｍａｉｎｌｙｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｐａｅｏｎｉ
ｆｌｏｒｉｎｗｈｅｎａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａｏｎｌｙｗｅｒｅａｓｆｏｌｏｗｓ：Ｃｍａｘ（１５５±０５３）ｍｇ·Ｌ
－１，Ｔｍａｘ（０９±０３）ｈ，ｔ１／２（１５１±
０６３）ｈ，ＭＲＴ（３０８±０７４）ｈ，ＡＵＣ０→τ（４６８±０８５）ｍｇ·ｈ
－１·Ｌ－１．Ｗｈｅｎｔｈｅｔｗｏｄｒｕｇｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｔｏｇｅｔｈｅｒ，ｔｈｅｃｏｒｅ
ｓｐｏｎｄｉｎｇｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅ（０９３±０４２）ｍｇ·Ｌ－１，（１５±０８）ｈ，（３０８±１７９）ｈ，（５１９±１９５）ｈ，（３３６±０５６）ｍｇ·ｈ－１
·Ｌ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆＣｍａｘ，ＡＵＣ０→τａｎｄＭＲＴｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｈａｎｇｅｄ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉ
ｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｅｃｔｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ，ｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ；ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ；ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００８０４１２
［基金项目］ 北京大学“十五”“２１１工程”教育振兴计划；国家
高技术领域研究“８６３”计划（２００２ＡＡ２Ｚ３４３Ｃ，２００４ＡＡ２Ｚ３７８３）；北京
市科委科技专项（Ｚ０００４１０５０４０３１１）和天然药物及仿生药物国家重
点实验室开放课题项目
［通讯作者］ 杨秀伟，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０５１０６，Ｅｍａｉｌ：ｘｗｙａｎｇ＠
ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
利用 Ｃａｃｏ２细胞单层模型预测柯楠碱、育亨宾、
阿马碱、萝芙木碱的人肠吸收
马 莲，杨秀伟
（北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室 天然药物学系，北京 １０００８３）
［摘要］ 目的：研究中药化学成分柯楠碱（ｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ，ＣＯＲ）、育亨宾（ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ，ＹＯＨ）、阿马碱（ａｊｍａｌｉｃｉｎｅ，
ＡＭＣ）和萝芙木碱（ａｊｍａｌｉｎｅ，ＡＭＬ）在人肠 Ｃａｃｏ２细胞单层模型的转运吸收。方法：利用人源结肠腺癌细胞系
Ｃａｃｏ２细胞单层模型研究ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ由绒毛面（ＡＰ侧）到基底面（ＢＬ侧），ＢＬ侧到 ＡＰ侧两个方向的
转运吸收过程。应用高效液相色谱法分离、紫外检测法检测对上述４个生物碱进行定量分析，计算转运参数和表
观渗透系数（Ｐａｐｐ），并与在Ｃａｃｏ２细胞单层模型上呈易吸收的阳性对照药普萘洛尔和难吸收的阳性对照药阿替洛
尔的进行比较。用药物的ＡＤＭＥＴ预测软件，考察４个化合物的Ｐａｐｐ值与其ｌｏｇＤ值之间的关系。结果：ＣＯＲ，ＹＯＨ，
ＡＭＣ和ＡＭＬ由ＡＰ侧到ＢＬ侧的Ｐａｐｐ值分别为（１８６３±００５５）×１０
－５，（１５４０±００８２）×１０－５，（２５２２±０２４６）×
１０－５，（１１５５±００９９）×１０－５ｃｍ·ｓ－１；由 ＢＬ侧到 ＡＰ侧的 Ｐａｐｐ值分别为（２３９０±００１７）×１０
－５，（１９８７±
０１５４）×１０－５，（１３７４±０２６０）×１０－５，（２４１８±０１２４）×１０－５ｃｍ·ｓ－１，与普萘洛尔的 ＰａｐｐＡ→Ｂ值［（２２３±
０１０）×１０－５ｃｍ·ｓ－１］基本一致。ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ的 ＰａｐｐＢ→Ａ／ＰａｐｐＡ→Ｂ分别为 １２８，１２９，０５４和 ２０９；
ＡＭＬ外流是摄取的２０９倍。结论：ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ能够通过Ｃａｃｏ２细胞单层被动吸收，属于良好吸收的
化合物。其中，ＡＭＬ在Ｃａｃｏ２细胞单层模型的转运可能存在外流机制。在４个生物碱的转运吸收过程中，油／水分
配系数起着关键性的作用。
［关键词］ Ｃａｃｏ２细胞单层；柯楠碱；育亨宾；阿马碱；萝芙木碱；肠吸收；表观渗透系数
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２０２３７３０６
传统中药用药绝大多数为口服。药物分子进入
血液循环、到达靶器官、达到药效浓度、产生生物学
效应，足够量的药物分子从胃肠道吸收是一个关键
性环节。因此，在口服创新药物或先导化合物［１］、
中药有效成分［２］和有毒成分［３］研究过程中，其肠吸
收研究显得非常重要。由于人源 Ｃａｃｏ２细胞（ｔｈｅ
ｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｉｃａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓ）体外模型［４］
研究药物的吸收、吸收过程及其吸收机制等比较简
单、重复性好，已被广泛应用于药物研究与开发中，
在药物开发早期对药物或先导化合物的肠道吸收性
质所作出的科学评价大大推动了制药业创新药物开
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第３３卷第２０期
２００８年１０月
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Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８