全 文 ：作炮制辅料用姜汁的 ＨＰＬＣ指纹图谱比较
张 丽１，２，王智民１，王维皓１，高慧敏１
（１．中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００；
２．河南中医学院 药学院，河南 郑州 ４５０００８）
［摘要］ 目的：对３种不同制法所得炮制辅料用姜汁进行 ＲＰＨＰＬＣ指纹图谱的比较研究。方法：ＡｌｔｅｃｈＣ１８
色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），乙腈水梯度洗脱，检测波长２８０ｎｍ，柱温２５℃，流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１。结果：相
同品种不同批次姜汁间的化学成分差别小，榨汁与煮汁间的成分差异显著。３种制法所得姜汁及生姜、干姜中共有
成分为色氨酸和６姜辣素，其中煎煮的姜汁（生姜煎汁、干姜煎汁）中又有６姜酚出现。结论：利用 ＲＰＨＰＬＣ指纹
图谱分析法可较全面的反映不同制法的姜汁间的差异；生姜榨汁较全面的保留了生姜的指纹特征且各成分含量较
高。
［关键词］ 姜汁；６姜辣素；色氨酸；６姜酚；ＨＰＬＣ指纹图谱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）０９１０１００４
［收稿日期］ ２００７１２２６
［基金项目］ 国家科技部科研院所社会公益研究专项
（２００５ＤＩＢ１Ｊ１６９）
［通讯作者］ 王智民，Ｔｅｌ：（０１０）８４０１４１２８，Ｆａｘ（０１０）
８４０１４１２８，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｍｗ１２３＠２６３．ｎｅｔ
中药材姜制是中医临床的常用方法，姜汁炮制
的目的主要是减轻或消除药物的毒性或副作用，引
药归经、协同增效。姜为姜科植物姜 Ｚｉｎｇｉｂｅｒｏｆｉｃｉ
ｎａｌｅＲｏｓｃ．的新鲜根茎［１］，全国大部分地区有产，《中
国药典》将其列为干姜和生姜２个品种。干姜史载
于《神农本草经》，而《本草经集注》将生姜单列，生
姜与干姜虽同出一物，因鲜品干品成分之差异而功
效亦别。生姜为解表药，长于发散风寒、又能温中止
呕、解毒；干姜温里，常用于治疗中焦虚寒、阳衰欲脱
与寒饮犯肺喘咳等证。鉴于生姜与干姜功效不同，
由二者制备的姜汁作为炮制辅料临床应用时功效亦
应有差异［２］。目前生姜或干姜加水煎汁、生姜捣碎
加水压榨取汁三者均有应用。作者拟通过指纹图谱
比较３种姜汁间化学成分的异同。
１ 仪器与试药
ＷａｔｅｒｓＡｌｉａｎｃｅ高效液相色谱仪（包括 ２６９５
ＳｅｐａｒａｔｉｏｎｓＭｏｄｕｌｅ四元泵、在线真空脱气机、自动进
样器、柱温箱，２９９６型光电二极管阵列检测，Ｅｍｐｏｗ
ｅｒ色谱工作站）。ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０分析天平；ＫＱ
－１００型超声波清洗器。
对照品６姜辣素、６姜酚、色氨酸由本实验室制
备，纯度为９８％。乙腈（色谱纯，美国 Ｆｉｓｈｅｒ），高纯
水（自制），其他试剂均为分析纯。生姜购买于北京
６个不同菜市场或超市，产地山东。
２ 方法及结果
２．１ 色谱条件
ＡｌｔｅｃｈＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），柱温
２５℃，流动相Ａ乙腈Ｂ水，其线型梯度程序（Ａ∶Ｂ）
为０ｍｉｎ，５∶９５；１０ｍｉｎ，２５∶７５；２０ｍｉｎ，５０∶５０；３０
ｍｉｎ，５０∶５０；６０ｍｉｎ，６０∶４０；７０ｍｉｎ，７５∶２５；８０ｍｉｎ，
１００∶０），流速 ０８ｍＬ·ｍｉｎ－１，紫外光谱采集范围
１９０～４００ｎｍ，检测波长２８０ｎｍ，进样量２０μＬ，分析
时间９５ｍｉｎ。
２．２ 供试品溶液的制备
精密吸取姜汁１０ｍＬ，加甲醇２０ｍＬ，超声处理
１０ｍｉｎ，摇匀，放置待稍澄清，滤过，取续滤液，过
０２２μｍ微孔滤膜，即得。
２．３ 对照品溶液的制备
精密称取６姜辣素对照品适量，甲醇定容于２５
ｍＬ量瓶中，得６姜辣素对照品；精密称取６姜酚、
色氨酸对照品适量，分别以甲醇定容于１０ｍＬ量瓶
中，得６姜酚、色氨酸对照品溶液。
２．４ 方法学考察
２．４．１ 专属性考察 精密吸取提取溶剂２０μＬ注
入液相色谱仪，记录色谱图，表明提取溶剂无干扰。
２．４．２ 精密度、重复性和稳定性试验 取同一供试
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品溶液，在２．１条件下，连续进样６次，记录色谱图，
进行精密度考察；取同一供试品溶液在２４ｈ内，依
２．１条件每４ｈ测定一次，记录色谱图，进行稳定性
考察；另取同一供试品６份，按２．２项下方法制备样
品溶液，并在２．１条件下测定，记录色谱图，进行重
复性考察。以姜辣素色谱峰的保留时间和峰面积为
参比，计算各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰
面积的比值。结果表明，各主要色谱峰的相对保留
时间和相对峰面积比值的 ＲＳＤ均小于３０％，符合
指纹图谱研究技术要求。
２．５ 样品测定及色谱峰指认
分别精密吸取对照品溶液和各供试品溶液，依次
进样，在２．２条件下测定，记录色谱图。见图１～７。
图１ 生姜ＨＰＬＣ图谱
１．６姜辣素（图２～７同）
图２ 生姜榨汁ＨＰＬＣ图谱
图３ 生姜煎汁ＨＰＬＣ图谱
３ 讨论
姜汁的３种制备方法，参阅１０余个省市炮制规
范而拟定。先取同一份生姜样品分别制成 ３种姜
汁：首先将生姜洗去表面附着泥沙，控干明水，①生
姜榨汁：称取生姜３０ｇ，切碎加水３０％，浸泡，压榨
图４ 干姜煎汁ＨＰＬＣ图谱
图５ 生姜榨汁特征峰图谱
图６ 生姜煎汁特征峰图谱
图７ 干姜煎汁特征峰图谱
ａ．色氨酸；ｂ．６姜辣素；ｃ．６姜酚
取汁，得到３１ｍＬ姜汁；②生姜煎汁：称取生姜２５ｇ，
切片，加水１００ｍＬ，煎煮２次，每次煎煮１ｈ，合并煎
液，浓缩并定容至２５ｍＬ量瓶中；③干姜煎汁：称取
生姜２５ｇ，晒干制成干姜，（收率约为 １０％），加水
１００ｍＬ，煎煮２次，每次１ｈ，合并煎液，浓缩并定容
至２５ｍＬ量瓶中。
供试品制备采用单因素循环法，考察水直接稀
释进样；甲醇超声、甲醇浸渍、醋酸乙酯萃取的样品
处理方法。结果表明：水稀释的样品、甲醇浸渍样品
出峰较少，且色谱峰堆积严重；甲醇超声１０ｍｉｎ和
３０ｍｉｎ无明显区别，超声处理后，各成分相对含量增
加。可能是在用甲醇超声处理的过程中，沉淀除去
了部分干扰杂质，同时也有利于其他成分的溶出，故
选用甲醇超声１０ｍｉｎ提取。
由于不同市场所售生姜，鲜干程度不一致，决定
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了生姜内部含水量不同，导致相同质量、不同批次生
姜制备的姜汁，其化学成分的含量高低不同。因此，
作者认为不适合用指纹图谱相似度软件（要求样品
取样量一致）来评价，故采用各主要色谱峰与参照
峰的保留时间和峰面积的比值进行相似度考察。从
以上图（图１～４）、表（表１～４）可以明显看出相同
品种姜汁之间化学成分的数量基本一致（峰个数基
本相同），差别仅在于峰的面积大小。
各批次干姜煎汁在７～１０ｍｉｎ较生姜煎汁多出
两个峰，并且在干姜煎汁的液相图谱中高极性成分
含量明显增加，峰个数和峰面积都有增加。干姜和
生姜煎汁的１２批样品与榨汁的样品比较，前者４０
表１ 生姜不同批次指纹图谱的相对保留时间（△ｔ）和相对峰面积（△Ａ）的平均值（ｎ＝６）
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
１ ０１６８ １６４４ ００５３ ２８ １１ １５２５ ０３４９ ０１０４ ３７
２ ０３２９ ７８５１ ００９５ ５５ １２ １５６１ ０３９３ ００６１ ２７
３ ０７２２ ０６３９ ００５９ ３２ １３ １９７８ ０２５４ ０１１１ １６
４ ０７５６ ０９５３ ００１９ ３２ １４ ２１９９ ０９０３ ０１７４ ５３
５ ０８６３ ０５０１ ００２１ ３７ １５ ２４６６ ０６６３ ００４１ ６２
６ ０９１４ ０３０６ ００３１ ５８ １６ ２５６０ ０８９４ ００３７ ４０
７ ０９７５ ０１４１ ００１９ ２３ １７ ２６５１ ０９３４ ０１６１ ７１
８ １０００ ００００ １０００ ０ １８ ２６６４ ０５６８ ００２９ ６４
９ １２８５ ０２６４ ００３５ ３６ １９ ２８１０ ２１０２ ０４１５ ８７
１０ １３５５ ０３０６ ００５０ ４３
注：姜辣素的ｔ和Ａ均为１（表２～４同）
表２生姜榨汁不同批次指纹图谱的相对保留时间（△ｔ）和相对峰面积（△Ａ）的平均值（ｎ＝６）
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
１ ０１７５ ３４５２ ００７２ １０４ １１ １５２７ ０７７２ ０１１６ ２９
２ ０３６４ ６２１０ ００７７ ５１ １２ １５６２ ０９９６ ００４３ ４６
３ ０７１７ １７３２ ００６２ ３７ １３ １９８１ ０４０９ ０１００ ４２
４ ０７４８ １７５４ ００２４ １２ １４ ２１６９ ３８０５ ０２５３ ４５
５ ０８６３ ０８０９ ００１９ ４６ １５ ２４３１ ５６７６ ００７６ ８３
６ ０９１４ ０４９４ ００４３ ６１ １６ ２５５４ ３５６４ ００９２ １４４
７ ０９７６ ０２００ ００１６ ３４ １７ ２６４１ ２６０５ ０１６２ ７７
８ １０００ ００００ １０００ ０ １８ ２６７４ ２０７２ ００３５ ８４
９ １２８６ ０６２４ ００３３ １８ １９ ２８１２ ２７６５ ０７３３ ２０
１０ １３５５ ０６１１ ００４７ ４４
表３ 生姜煎汁不同批次指纹图谱的相对保留时间（△ｔ）和相对峰面积（△Ａ）的平均值（ｎ＝６）
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
１ ０１６９ ２３４７ ００６３ ９ ９ １５２３ ０６０９ ００３２ ５２
２ ０３５１ ９４５１ ００９１ ３０ １０ １５７７ ０２４１ ００２６ ６４
３ ０７１９ ０６９１ ００８９ ３３ １１ １６８５ ０５６８ ００１９ ２０
４ ０７４９ ０６１３ ００３９ １６ １２ １９７３ １２５８ ００２４ ３６
５ ０８５７ ２０１７ ００２８ ４５ １３ ２１６９ １７４５ ００３６ ６９
６ ０９１３ ０３７７ ００３９ ４１ １４ ２５５３ ０１３３ ００３０ ７８
７ ０９７５ ０２１２ ００１４ ５１ １５ ２７８６ ２６２３ ００２６ ４８
８ １０００ ００００ １０００ ０
ｍｉｎ后色谱峰（成分）急剧减弱或消失，各成分峰面
积总和小于８％。在生姜榨汁中４０ｍｉｎ后各色谱峰
的峰面积总和占总面积的５０％以上。生姜压榨取
汁与煎汁二者的化学成分差异显著。
３．５ 对于生姜及生姜榨汁图谱中存在的最后１个
大峰，在煎煮所得的姜汁中消失。试图运用 ＬＣＭＳ
进行分析，但此成分没有离子化；曾采用色谱方法制
备分离，但并未得到，可能是在分离过程中受热分解
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表４ 干姜煎汁不同批次指纹图谱的相对保留时间（△ｔ）和相对峰面积（△Ａ）的平均值（ｎ＝６）
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
峰号
△ｔ
平均值 ＲＳＤ／％
△Ａ
平均值 ＲＳＤ／％
１ ０１６５ ３３４２ ０３１６ ９４ ９ ０９０７ ０６１４ ００９５ ３７
２ ０２２４ ２５７２ １１６０ ４０ １０ ０９７６ ０１５２ ００２７ ２１
３ ０２６８ ３２８１ ０１１６ ２４ １１ １０００ ００００ １０００ ０
４ ０３５７ ５８１４ ０２１０ ４５ １２ １５０３ ０８０２ ００２１ ３２
５ ０６６５ ２９１４ ００５４ ２５ １３ １５６１ ０３４７ ００１６ ５８
６ ０７０９ １５６０ ０１１８ ３１ １４ １６８０ ０６１４ ００２２ ４７
７ ０７４３ １７１６ ００４１ ２２ １５ ２０８３ １９２６ ００２５ ２４
８ ０８５６ ０５５５ ００４２ ３７
或挥发损失。３种姜汁及生姜、干姜中共有成分为
色氨酸和６姜辣素，煎煮的姜汁（生姜煎汁、干姜煎
汁）中又有６姜酚出现，也从一个方面表明煎煮加
热的过程中会造成６姜酚含量升高。
姜汁作为常用中药饮片炮制辅料，３种不同制
备方法所得样品在炮制中均有应用，为确保炮制饮
片的临床疗效，作者对三者从化学角度分析了其内
在的异同性，该差异是否影响姜制饮片的疗效和有
效成分的溶出等，有待于下一步更深入的系统研究。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：６６．
［２］ 曹连民，杨红洁，陈金铎．不宜用干姜替代生姜制备姜汁［Ｊ］．
中药材，１９９４，１７（１２）：７．
ＲＰＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｅｖａｌｕａｔｉｎｇｄｉｆｅｒｅｎｔｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅａｓ
ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｍａｔｅｒｉａｌ
ＺＨＡＮＧＬｉ１，２，ＷＡＮＧＺｈｉｍｉｎ１，ＷＡＮＧＷｅｉｈａｏ１，ＧＡＯＨｕｉｍｉｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＨｅｎａｎＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｆｒｅｓｈａｎｄｄｒｉｅｄｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ
ＲＰＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｍｅｔｈｏｄｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａｎＡｌｔｅｃｈＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）ｗｉｔｈｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕ
ｔｉｏｎｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆＡａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｅａｎｄＢｗａｔｅｒａｔａｆｌｏｗｒａｔｅ：０８ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｎｇｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ２８０ｎｍ，ａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ２５℃．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｍｏｎｇｔｈｅｓａｍｅｂｒｅｅｄｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｂａｔｃｈｅｓ．Ｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｃｒｕｓｈｅｄｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅａｎｄｔｈｅｂｏｉｌｅｄｊｕｉｃｅ．Ｔｒｙｔｏｐｈａｎ，６ｇｉｎｇｅｒｏｌｗｅｒｅｃｏｍｍｏｎｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅ
ｋｉｎｄｓｏｆｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅ，ｔｈｅｆｒｅｓｈｇｉｎｇｅｒａｎｄｔｈｅｄｒｙｇｉｎｇｅｒ．Ｂｅｓｉｄｅｓ，６ｓｈｏｇａｏｌｅｍｅｒｇｅｄｉｎｔｈｅｂｏｉｌｅｄｊｕｉｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅＲＰＨＰＬＣ
ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｓｐｅｃｔｒｕｍｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｄｉｆｅｒｅｎｔｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅｓ．Ａｎｄｔｈｅｃｒｕｓｈｅｄｊｕｉｃｅｏｆｆｒｅｓｈｇｉｎｇｅｒｈａｖｅｔｈｅｓａｍｅｃｈｅｍｉｃａｌ
ｃｏｎｓｉｔｉｔｅｎｔｓｗｉｔｈｔｈｅｆｒｅｓｈｇｉｎｇｅｒ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｇｉｎｇｅｒｊｕｉｃｅ；６ｇｉｎｇｅｒｏｌ；ｔｒｙｔｏｐｈａｎ；６ｓｈｏｇａｏｌ；ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ
［责任编辑 鲍 雷］
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