全 文 ：６０４４％。因此，可对垂柳叶总黄酮进行药理研究，
有望成为提取医用黄酮的的新原料。１０月份的落
叶中总黄酮含量仍然较高，因此可考虑大力开发秋
季落叶的用途，既利于环保，又可废物利用。
［参考文献］
［１］ 江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］．上海：上海科技出版社，
１９８６：１５２２．
［２］ ＴｈａｐｌｉｙａｌＲＰ，ＩｓｍａｌｉＨ．ＦａｔｙａｃｉｄｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＳａｌｉｘｌｉｎ
ｌｅｙａｎａ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９３，３１（２）：１６５．
［３］ 刘 斌，石任兵，王 伟．蒲黄总黄酮含量测定方法研究［Ｊ］．
北京中医药大学学报，２００１，２４（４）：２３．
［责任编辑 张宁宁］
ＨＰＬＣ测定香橼中柚皮苷的含量
朱景宁，毛淑杰，顾雪竹，李先端
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［收稿日期］ ２００５１２０９
［基金项目］ 国家科技部基础性工作专项资助项目（２００３ＤＩＡ
ＴＨ０３１）
［通讯作者］ 李先端，Ｔｅｌ：（０１０）８４０３６５５２
香橼为芸香科植物枸橼ＣｉｔｒｕｓｍｅｄｉｃａＬ．与香圆Ｃ．
ｗｉｌｓｏｎｉＴａｎａｋａ的干燥成熟果实，具有舒肝理气、宽中
化痰之功效。用于治疗肝胃气滞，胸胁胀痛，脘腹痞
满，呕吐噫气，痰多咳嗽等［１］。有关香橼中成分的提
取、分离，仅见杨云等［２］分离出枸橼苦素成分。其质量
标准相关分析方法的建立未见文献报道。２００５年版药
典未见收录该药材的含量测定方法及理化鉴别项。作
者对香橼质量标准进行研究，首次发现香橼中所含二
氢黄酮类成分主要为柚皮苷。本试验采用ＨＰＬＣ测定
了不同产地市售及采集的香橼药材中柚皮苷的含量。
１ 仪器、药品和试剂
美国惠普１１００型单泵高效液相色谱仪。柚皮
苷对照品由中国药品生物制品检定所提供。香橼药
材为湖北、江西、云南、安徽、江苏等市售及自采鲜品
共２６批，均经本所胡世林研究员、广州中医药大学
张丹彦教授鉴定。实验用样品粉碎过８０目筛，备
用。甲醇为色谱纯，水为高纯水。
２ 方法
２．１ 色谱条件 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）色谱柱；流动相甲醇水冰醋酸溶液（３０∶６３∶
３），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２８４ｎｍ，柱温
３５℃。结果见图１。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取柚皮苷对照品
图１ 柚皮苷对照品及药材ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．香橼药材；１．柚皮苷
２４１ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀，即得对照品溶液１；精密量取柚皮苷对照
品溶液１３ｍＬ置１０ｍＬ量瓶用５０％甲醇稀释，摇
匀，即得对照品溶液２（００２８９２ｍｇ·ｍＬ－１）。
２．３ 供试品溶液的制备 取香橼粉末（过 ８０目
筛）约７５ｍｇ，精密称定，至５０ｍＬ锥形瓶中，精密加
５０％甲醇２５ｍＬ，称定重量，加热回流６０ｍｉｎ，放冷，
再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃
去初滤液，精密量取续滤液２ｍＬ，至１０ｍＬ量瓶中，
摇匀，０４５μｍ滤膜滤过，即得。
２．４ 标准曲线考察 精密吸取柚皮苷对照品溶液１
（００９６４ｍｇ·ｍＬ－１）２，４，６，８，１０，１２μＬ，分别注入高效
液相色谱仪，测定峰面积，以对照品进样量为横坐标，
峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程Ｙ＝３２９＋
１８３×１０３Ｘ，ｒ＝０９９９９，线性范围０１９３～１１５７μｇ。
２．５ 精密度试验 精密吸取供试品溶液，重复进样５
次，测定峰面积。结果柚皮苷峰面积ＲＳＤ为１２％。
２．６ 稳定性试验 取供试品溶液避光室温放置，分别
于制备后０，３，６，９，１２，２４ｈ进行测定，结果柚皮苷峰面
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第３２卷第３期
２００７年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００７
积 ＲＳＤ为１４％。表明柚皮苷在２４ｈ内基本稳定。
２．７ 重复性试验 精密称取香橼样品６份，制成供
试品溶液，进行测定，柚皮苷含量ＲＳＤ为０８４％。
２．８ 加样回收率试验 采用加样回收法，分别精密
称取已知含量的香橼样品约３７ｍｇ至５０ｍＬ锥形瓶
中，再分别精密加入柚皮苷对照品约１８ｍｇ后，精
密加５０％甲醇２５ｍＬ，后按２．３方法制成供试品溶
液，进行测定，计算回收率，结果见表１。
表１ 柚皮苷加样回收率
称样量
／ｍｇ
样品中含量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
３７５８ １８０８ ３６６０ １０２３
３７６９ １８１３ ３６９６ １０２９
３７８５ １８２１ ３６２１ ９８４ １０１５ １９
３７４０ １７９９ ３６４４ １０２５
３７５４ １８０６ ３６６９ ９９７
３７８４ １８２０ ３６４４ １０３１
２．９ 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液２
与供试品溶液各２０μＬ，注入液相色谱仪，测定，即
得。含量测定结果见表２。
表２ 各地区香橼药材样品中柚皮苷含量（ｎ＝２） ％
样品 来源 产地 柚皮苷
香圆 北京（市售） 四川 ４２０
香圆 河北安国（市售） 广西 ２３６
香圆 江西１（市售） 云南 ４７０
香圆 江西２（市售） 江西 ２２２
香圆 湖北１（市售） 湖北 ２４９
香圆 湖北２（市售） 湖北 ５６０
香圆 湖北３（市售） 广西 ２８７
香圆 湖北４（市售） 四川 ５７０
香圆 湖北５（市售） 湖北 ７２６
香圆 湖南１（市售） 云南 ３４８
枸橼 荷花池饮片厂（厂售） 四川 ００００２
香圆 浙江温州（市售） 浙江 ５５６
香圆 安徽合肥（公司售） 安徽 ５９１
香圆 安徽安庆市（自采） 安徽 １７１
枸橼 四川柑橘研究所（自采） 四川 ００００１
香圆 湖南２（市售） 湖南 ２５１
香圆 河北安国（市售） 湖南 ２９８
香圆 湖南３（市售） 湖南 ３０７
香圆 安徽亳州（市售） 湖南 ６７０
香圆 广西南宁医药公司（公司售） 广西 ３０１
枸橼 昆明菊花药材市场１（市售） 云南 ００００２
枸橼 昆明菊花药材市场２（市售） 云南 ００００３
香圆 江苏如皋市（自采） 江苏 ５１４
枸橼 云南永德县（自采） 云南 ００００１
枸橼 云南龙陵县（自采） 云南 ００００１
香橼１） 天津（厂售） 广西 ４６５
注：１）经鉴定为伪品枳壳
３ 小结与讨论
３．１ ２０００年版药典中没有香橼药材的含量测定方
法，ＨＰＬＣ测定香橼药材中柚皮苷的含量也没有报
道。经ＨＰＬＣ测定样品出峰时间与橙皮苷及柚皮苷
对照表明，样品出峰时间与柚皮苷一致，比橙皮苷出
峰时间早，说明柚皮苷是香橼中含量最高的二氢黄
酮类成分，与以前记载橙皮苷是其主含成分不尽相
同。采用相关文献报道的流动相甲醇水冰醋酸
（３５∶６１∶２）时［３］，峰有拖尾现象。用药典方法测定
陈皮中橙皮苷的流动相时［１］，峰未能完全分开。用
甲醇水冰醋酸（３０∶６３∶３）为流动相时，峰形良好并
可达到完全分离。
３．２ 综合相关文献资料和常规提取方法，考察了用
不同浓度的甲醇、乙醇提取，结果表明用５０％甲醇
提取率最高；考察了超声提取法、加热回流提取法，
结果表明加热回流６０ｍｉｎ效果最佳。故最终选择
用５０％甲醇加热回流６０ｍｉｎ对样品进行提取。
３．３ 此次实验收集到样品总共２６批，涉及书中记
载香橼所有主产地９个省市地区，其中有伪品１批
为枳壳，香圆１９批，枸橼６批。香圆中柚皮苷含量
最高达到７％，最低也可达到１％以上；而枸橼中含
微量柚皮苷。
３．４ 在收集样品过程中，发现市场上现今流通的香
橼主流品种是香圆，枸橼只占少部分，仅从云南的９
个县市及四川收集到了枸橼６批，而书上记载古代
香橼就是枸橼，即枸橼在以前是香橼的主流品种，所
以作者认为香橼的主流品种已经发生了变化，具体
原因仍有待于做进一步的研究。
３．５ 本方法简单易行，易于操作，且重复性好，通过
测定不同产地香橼药材中柚皮苷的含量确定本方法
的可行性。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２０００：１８２，２００．
［２］ 杨 云，张 晶，陈玉婷．天然药物化学成分提取分离手册
［Ｍ］．修订版．北京：中国中医药出版社，２００３：５５１．
［３］ 李先端，顾雪竹，林 生，等．ＨＰＬＣ测定青皮生品及炮制品中
橙皮苷的含量［Ｊ］．中成药，２００４，２６（９）：７２４．
［责任编辑 张宁宁］
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第３２卷第３期
２００７年２月
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ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００７