全 文 ：金银花中 t{种有机磷农药残留量分析方法的研究
向增旭t 3 o赵维佳u o郭巧生t
kt1 南京农业大学 中药材研究所 o江苏 南京 utss|x ~
u1 江苏省产品质量监督检验中心所 o江苏 南京 utssu|l
≈摘要 目的 }一次性检测金银花中 t{种有机磷农药的残留量 ∀方法 }以丙酮为提取溶剂 o超声提取 ts °¬±o
固相萃取为前处理方法 o配有脉冲式硫磷检测器k°ƒ°⁄l o° p tzst毛细管柱的气相色谱仪检测 ∀结果与结论 }t{
种农药能够在 vs °¬±内完全分离 o最低检测限为 w1s ∗ t{1s Λª#®ªp t ~对 t{种有机磷农药在金银花中的添加回收率
在 {v1yw h ∗ {{1yx h o ≥⁄u1{ h ∗ y1s h o符合多种农药残留的分析要求 ∀
≈关键词 金银花 ~农药残留 ~气相色谱 ~固相萃取
≈中图分类号 u{w1t ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylty2tvut2sv
≈收稿日期 ussx2sy2uu
≈通讯作者 3 向增旭 oר¯ }ksuxl{wv|yx|t o∞2°¤¬¯}¬¬¤±ª½¨ ±ª¬2
∏t|zu tyv q¦²°
在全球草药销售额中 o我国中药出口比例仅占
x h左右 o与我国中医药大国的地位极不相称≈t ∀药
品质量是影响我国中药出口的首要因素 o而农药残
留和重金属污染则是影响药品质量的重要因素≈u ∀
许多国家对传统药和草药保健食品增加微生物检
查 !防腐检查 !农药残留量和重金属含量 !黄曲霉毒
素检查 o并分别制定各自的标准≈v ∀我国除将微生
物检查列入部分标准 !ussx年版药典收录了黄芪 !
甘草的限量标准外 o其余各项尚在研究之中 o缺乏与
国际接轨的质量标准≈t ∀中药农药残留问题是中药
出口的瓶颈 o必须制定出相应的限量标准 ∀金银花
是我国传统的名贵中药材 o国际国内市场的需求量
很大 ∀本研究中气相色谱仪采用的是脉冲式硫磷检
测器 o其选择性很好 o对植物中含氮化合物不响应 o
能够很好的去除金银花本底的干扰 o并且灵敏度比
一般氮磷检测器和硫磷检测器要高 ∀金银花中有机
磷农药的残留量分析的前处理采用先进的固相萃取
技术 o并且作了方法学的研究 o为进一步制定金银花
药材农药残留标准奠定了基础 ∀
1 材料与方法
111 材料 农药标准品 }敌敌畏k⁄⁄∂°l o敌百虫
k·µ¬¦«¯²µ³«²±l o亚胺硫磷k³«²¶°¨ ·l o辛硫磷k³«²¬¬°l o
二嗪农 k§¬¤½¬±²±l o氧化乐果 k²°¨ ·«²¤·¨l o毒死蜱
k¦«²µ³¼µ¬©²¶l o 杀 螟 松 k ©¨ ±¬·µ²·«¬²± l o 喹 硫 磷
kª∏¬±¤¯³«²¶l o甲胺磷k °¨ ·«¤°¬§²³«²¶l o甲拌磷k³«²µ2
¤·¨l o久效磷k°²±²¦µ²·²³«²¶l o乐果k§¬°¨ ·«²¤·¨l o马拉
硫磷 k °¤¯¤·«¬²±l o倍 硫 磷 k©¨ ±·«¬²±l o对 硫 磷
k³¤µ¤·«¬²±l o甲基对硫磷k³¤µ¤·«¬²±2°¨ ·«¼¯ l o乙酰甲胺
磷k¤¦¨³«¤·¨lk浓度均 ∴||1| h l购买于国家标准物
质中心 ∀
金银花 ussw年 x月采于山东省平邑县流域镇
和河南省封丘县 o贮存于阴凉处 o采集 u周后烘干至
恒重 o粉碎机粉碎并过 ys目筛 o进行试验 ∀
112 仪器与试剂 ≤ p v{ss气相色谱仪k∂¤µ¬¤±o
美国l o配有脉冲式硫磷检测器k°ƒ°⁄l o自动进样器
k{wtsl o数字处理机k≥·¤µ·²²¯¥¤µl o色谱柱为 ° p
tzstks1vu °° ≅ vs ° os1ux Λ°l ~低噪音空气泵 ≥
p u
k北京精华苑技术研究所l ~高纯氢气发生器
≥ p vssk北京精华苑技术研究所l ~tu≥°∞固相萃
取仪k北京康林公司l ~v °≤t{型固相小柱k填充物 }
硅胶键合 ≤t{l和 v °型胶硅型k填充物 }硅胶l固相
小柱k≥∏³¯ ¦¨²l ∀丙酮为分析纯 ∀
113 色谱条件 汽化室温度 uzs ε ~检测室温度
vss ε ~柱温为程序升温 }ys ε ku °¬±l o然后以 ts ε
#°¬±pt o加温到 uss ε ks1x °¬±l o然后以 u ε #°¬±pt
升温至 uxs ε ~载气为高纯氮气 o流速 t1x °#
°¬±pt o氢气 tw °# °¬±pt o空气2t 流速为 tz °#
°¬±pt o空气2u流速为 ts °#°¬±pt o分流比 tΒts ∀
114 农药混合标样的配制 根据各种农药在色谱
仪上响应值的不同 o以丙酮为溶剂 o将农药配制成混
合标准溶液 o各种农药的质量浓度见表 t ∀
#tuvt#
第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ty
∏ª∏¶·oussy
表 t 农药混合标准溶液的质量浓度
农药品种
质量浓度
rΛª#°pt
农药品种
质量浓度
rΛª#°pt
敌敌畏 s qyx 乐果 s qzt
敌百虫 s q|s 倍硫磷 s qys
甲胺磷 s qyu 对硫磷 s qx|
甲拌磷 s qy{ 甲基对硫磷 s qyu
久效磷 s qyz 乙酰甲胺磷 s qyt
马拉硫磷 s q{x 亚胺硫磷 s qxw
辛硫磷 s qxs 二嗪农 s qw|
毒死蜱 s qzx 杀螟松 s qy{
氧化乐果 s qy{ 喹硫磷 s q{s
115 样品前处理 将金银花粉碎 o称取 ts ª于锥形
瓶中 o加入 xs °丙酮 o放入匀浆机中匀浆 v °¬±o超
声 ts °¬±o过滤 o用 tx °丙酮多次冲洗滤渣 o合并
滤液 ∀ ≤t{柱和硅胶型柱固相萃取 ∀将 ≤t{柱串联于
硅胶柱之上 o将全部滤液以 ts °#°¬±pt的流速上
柱 o滤瓶用 tx °丙酮多次冲洗 o收集流出液 o在 vs
ε 下旋转浓缩至近干 o用丙酮定容到 x °刻度试管
中 o待检测 ∀
2 结果
211 线性与检测限 将 114 中混合标准溶液用丙
酮依次稀释 u ow oy o{ ots倍配制成 x个系列含量的
标准溶液 o按 113中色谱条件进样 o以含量为横坐标
k Ξ) ,峰面积为纵坐标(Ψl o绘制 t{种有机磷的标准
曲线 o并确定最低检测限 o见表 u ∀相关系数在
s1|{| t ∗ s1||| w o最低检测限为 w1s ∗ t{1s Λª#
®ªpt ∀t{种有机磷农药的气相色谱图见图 t ∀
表 u t{种有机磷农药的标准曲线方程 !保留时间和检测限
农药 标准曲线方程 ρ τ r°¬± 检测限rΛª#®ªpt
敌敌畏 Ψ x .z{y x ≅ tsx Ξ p t .uxw t ≅ tsv s .||| w tu .sxx w .s
敌百虫 Ψ w .xzz w ≅ tsx Ξ p t .|yv { ≅ tsv s .||{ v x .xwz z .u
亚胺硫磷 Ψ t .tsx w ≅ tsx Ξ p t .vuu w ≅ tsw s .||u { | .{|u tw .s
甲胺磷 Ψ u .zz| z ≅ tsx Ξ p w .xuy t ≅ tsu s .||z x tv .vz{ x .x
二嗪农 Ψ v .{uv u ≅ tsx Ξ n v .|zt | ≅ tsu s .||z t tz .xuy w .s
甲拌磷 Ψ x .{wx x ≅ tsx Ξ n t .|{v { ≅ tsv s .||z w tz .vwx x .{
杀螟松 Ψ t .vst t ≅ tsx Ξ n w .|su y ≅ tsu s .||x { uu .u{u tv .s
久效磷 Ψ w .vst x ≅ tsx Ξ p u .zs{ v ≅ tsv s .||w | us .vzx tx .w
乐果 Ψ y .yw{ s ≅ tsx Ξ n | .vs| w ≅ tsu s .||{ { us .zut x .s
辛硫磷 Ψ t .w{u v ≅ tsx Ξ p t .zwu w ≅ tsu s .||x w tt .zx{ { .s
马拉硫磷 Ψ x .|sy | ≅ tsw Ξ p t .|sv u ≅ tst s .||x w uu .yw{ { .s
倍硫磷 Ψ v .{wz x ≅ tsx Ξ p v .twt s ≅ tsu s .||y y uv .uzx y .u
氧化乐果 Ψ u .wvs s ≅ tsx Ξ p v .u{x v ≅ tsv s .||v u t{ .wx| ts .s
对硫磷 Ψ w .tw| z ≅ tsx Ξ n t .|zy y ≅ tsv s .|{| t ux .wy{ x .{
毒死蜱 Ψ { .|yv t ≅ tsw Ξ p v .uvu x ≅ tsu s .||x w ut .twv x .s
甲基对硫磷 Ψ v .yw| s ≅ tsx Ξ n v .wuy u ≅ tsv s .||z y uw .x|z z .x
喹硫磷 Ψ y .x|x u ≅ tsw Ξ n t .vsu z ≅ tsu s .||w x u{ .vzv t{ .s
乙酰甲胺磷 Ψ t .stt v ≅ tsx Ξ n | .zww s ≅ tsu s .||z u ty .uyw tu .{
图 t t{种有机磷农药标准样品色谱图
t1敌百虫 ~u1 亚胺硫磷 ~v1 辛硫磷 ~w1 敌敌畏 ~x1 甲胺磷 ~y1 乙
酰甲胺磷 ~z1 甲拌磷 ~{1 二嗪农 ~|1氧化乐果 ~ts1 久效磷 ~tt1 乐
果 ~tu1 毒死蜱 ~tv1 马拉硫磷 ~tw1 杀螟松 ~tx1 倍硫磷 ~ty1 对硫
磷 ~tz1 甲基对硫磷 ~t{1喹硫磷k图 u同l
212 回收率试验 在金银花中添加 t{种有机磷农
药 v个含量水平 ov个含量水平为 114中混合标准溶
液稀释 u oy ots倍的混合标准溶液 o每个含量水平重
复 x次 o按照 115 提取 !净化方法和 113 的检测条
件 o计算添加回收率 o回收率 {v1yw h ∗ {{1yx h o
≥⁄u1{ h ∗ y1s h o见表 v ∀符合多种农药残留的分
析要求 o金银花中添加 t{种有机磷农药气相色谱图
见图 u ∀
213 样品测定 作者分别选取山东省平邑县流域
镇k样品 t ∗ xl和河南省封丘县城郊k样品 y ∗ tslx
个不同地点的金银花 o用以上方法对样品进行了有
机磷农药的残留量测定 o结果见表 w ∀在被测的 t{
种农药品种中 o除去敌敌畏和甲拌磷几种样品中有
检出外 o其余均未检出 ∀
在分析的 ts个样品中 ot{种有机磷农药大部
分未检出或残留量较低 ∀分析原因 o金银花在生长
#uuvt#
第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ty
∏ª∏¶·oussy
表 v 金银花中添加 t{种农药的平均回收率
农药
平均回收率
r h
≥⁄
r h 农药
平均回收率
r h
≥⁄
r h
敌敌畏 {w quz v qu 乐果 {v qyz w qu
亚胺硫磷 {x q|u w qs 辛硫磷 {w qyu v q{
敌百虫 {{ qvy u q{ 倍硫磷 {y qt| v qy
二嗪农 {z qy| v qx 杀螟松 {w qu{ w qz
甲胺磷 {{ qyx w qz 对硫磷 {x qyw x qy
毒死蜱 {x qxv u q| 氧化乐果 {w qwv w qv
甲拌磷 {z qx{ y qs 甲基对硫磷 {v qyw v qz
久效磷 {y qu| v qx 乙酰甲胺磷 {x qtz x qs
马拉硫磷 {w qzy w q{ 喹硫磷 {w q|z v qt
图 u 金银花中添加 t{种有机磷农药的色谱图
表 w 不同地点的金银花中 t{种有机磷残留测定 Λª#®ªp t
农药 t u v w x y z { | ts
敌敌畏 p p x q{ p z qw p p p y qz p
甲拌磷 y qt { qw p p ts qx p p z q| p p
注 }/ p 0未检出 ~其余 ty种均未检出
期间发生的虫害主要是棉铃虫 !蚜虫 o主要是用有机
磷农药来防治 o有机磷农药分子中含有酯键 o性质不
稳定 o遇碱 !高温都易分解 ∀而金银花在采摘后药农
普遍采用晒干或在土炕上加热烘干的方法处理 o这
一过程加速了有机磷农药的分解 ∀
3 讨论与结论
311 本研究采用丙酮为提取溶剂 o超声波提取 ts
°¬±o固相萃取的净化方法 ∀作者比较了振荡提取
tu «和超声波提取 ts °¬±u种提取方法 ou种方法的
平均回收率基本相当 o但超声波提取法使用时间少 o
操作简便 o故本研究采用超声波提取的方法 ∀由于
中草药成分比较复杂 o含有较多的植物油 !糖苷 !皂
苷和植物碱等 o一般的净化方法难以完全去除杂质 o
本研究采用 ≤t{小柱和硅胶柱串联的前处理方法 o得
到了较为满意的结果 ∀
312 固相萃取法是当今国际上较为先进的农药残
留前处理技术之一 o它克服了液液萃取及一般柱层
析的缺点 o与液液萃取相比 o可节省时间和溶剂约
|s h o减少杂质的引入 o得到较高的回收率 o对操作
者更安全 o重复性好 o可避免 ∞中乳化现象的产
生 ∀≥°∞实际上是色谱技术应用的另一种形式 o根
据柱中填料 o大体可分为吸附型k如硅胶 !大孔吸附
树脂等l !分配型k如 ≤t{小柱 !≤{小柱 !苯基柱等l和
离子交换型 ∀对水样和其他液体样品k如牛奶 !饮
料 !血浆 !尿等l o在选择合适的萃取柱和洗脱液及其
他优化条件后 o可萃取 !富集 !净化一步完成 o然后直
接进行 ≤或 °≤分析 ∀本研究采用配有 °ƒ°⁄的
毛细管柱气相色谱仪 o可以在 vs °¬±内分离 t{种有
机磷农药 ∀使用丙酮为提取溶剂 o超声波提取 ts
°¬±o固相萃取净化的前处理方法 o对金银花中 t{种
有机磷农药残留有较高的回收率 o并对在不同地点
采集的 ts个金银花样品进行了测定 o方法操作简
便 o重复性好 o能够节约大量的有机溶剂和时间 o适
合大批量样品农药残留量的检测 ∀
≈参考文献
≈t 薛 健 o杨世林 o陈建明 o等 q我国中药材农药残留污染现状与
对策 q中国中药杂志 ousst ouyk|l }yvz q
≈u 陈建存 q输美中成药重金属r化学品污染及违反 ƒ⁄ 规定情
况 q中国中医药信息杂志 ousss ozk{l }|s q
≈v 何迎春 o吴新正 q我国中药材农药污染状况研究 q江西中医学
院学报 oussv otxkvl }wt q
∆ετερµινατιον οφ 18 οργανοπηοσπηατε πεστιχιδε ρεσιδυεσιν Φλοσ Λονιχεραε
÷ ±¨ª2¬∏t o • ¬¨2¬¤u o ±¬¤²2¶«¨ ±ªt
(t1 Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Μεδιχιναλ Ματεριαλσ, Νανϕινγ Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utss|x , Χηινα ;
u1 ϑιανγσυ Θυαλιτψ Συπερϖισιον Βυρεαυ , Νανϕινγ utssu| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤± ¤±¤¯¼¶¬¦¤¯ ° ·¨«²§©²µ·«¨ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©t{ ®¬±§¶²©²µª¤±²³«²¶³«¤·¨ ³¨¶·¬¦¬§¨
µ¨¶¬§∏¨¶¬± ƒ¯ ²¶²±¬¦¨µ¤¨ q Μετηοδ : ׫¨ ³¨¶·¬¦¬§¨¶¬± ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§ º¬·«¤¦¨·²±¨ ¥¼ ¯·µ¤¶²±¬¦º¤√¨ ¶¶¬¶·¤±·∞¬·µ¤¦·¬²±k∞l o
³∏µ¬©¬¨§¥¼ ≥²¯¬§2°«¤¶¨ ∞¬·µ¤¦·¬²±k≥°∞l q ¶¬±ª °ƒ°⁄ §¨·¨¦·¨µª¤¶¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ º¬·« °2tzst ¦²¯∏°±q Ρεσυλτ ανδ Χονχλυτιον : ¯ ¯ t{
³¨¶·¬¦¬§¨¶º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§º¨¯¯¬± vs °¬±∏·¨¶q׫¨ §¨·¨¦·¬²± ¬¯°¬·¶º¤¶w1s2t{1s Λª#®ªp t q ׫¨ µ¤±ª¨ ²©µ¨¦²√ µ¨¼ ¤±§ ≥⁄ º µ¨¨ {v1yw h 2
{{1yx h ¤±§u1{ h 2y1s h oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q ±§¬·° ·¨·«¨ µ¨ ∏´¬µ¨° ±¨·¶²©³¨¶·¬¦¬§¨ °∏¯·¬2µ¨¶¬§∏¨¶¤±¤¯¼¶¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] ƒ¯ ²¶²±¬¦¨µ¤¨ ~³¨¶·¬¦¬§¨ µ¨¶¬§∏¨ ~≤ ~¶²¯¬§¨2³«¤¶¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ≈责任编辑 张宁宁
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第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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