全 文 ：黄连解毒汤对快速老化模型小鼠
海马蛋白表达的影响
王 杉 o蒋 宁 o周文霞 3 o张永祥
k军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要   目的 }研究黄连解毒汤 k‹⁄×l对快速老化模型小鼠 k¶¨± ¶¨¦¨±¦¨ ¤¦¦¨¯¨ µ¤·¨§°²∏¶¨o≥„ l的快速老
化亚系 ≥„ 2³µ²± r¨{k≥„ °{l海马蛋白表达的影响 o以期从分子水平较深入地阐明 ‹⁄×治疗阿尔茨海默病
k„⁄l的机制 ∀方法 }将 tu月龄 ≥„ 的快速老化亚系 ≥„ °{和抗快速老化亚系 ≥„ 2µ¨¶¬¶·¤±¦¨ rtk≥„ • tl分为
≥„ • t对照组 !≥„ °{模型组和 ‹⁄×给药组 o应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定 o观察 ‹⁄×对 ≥„ 海马组织
蛋白表达的影响 ∀结果 }与 ≥„ • t相比 o≥„ °{海马中有 u|个蛋白点的表达发生显著变化 ~给予 ‹⁄×后有 v{
个蛋白点的表达发生显著变化 ∀选取部分 ‹⁄×的作用蛋白点进行质谱分析结合数据库检索 o共鉴定出 tu个蛋
白 o这些蛋白涉及到能量代谢 !转录调控 !细胞骨架 !氨基酸代谢等功能 ∀其中有 w个蛋白是 ≥„ °{与 ≥„ • t海马
蛋白比较存在显著差异的蛋白 o给予 ‹⁄×后其蛋白表达得到了明显改善 ∀结论 }‹⁄×通过调节 ≥„ °{脑中与
能量代谢 !信号转导 !细胞骨架及氨基酸代谢等相关蛋白的表达 o从多途径对 ≥„ °{的老化起到了改善作用 ∀
≈关键词   黄连解毒汤 ~快速老化小鼠 ~海马 ~蛋白质组学
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uu{|2sy
≈收稿日期   ussz2sw2t{
≈基金项目   国家自然科学基金项目 kvsussvyzovszzuxyul~
国家重点基础研究发展规划项目 kussw≤…xt{|szl
≈通讯作者   3 周文霞 oר¯}kstslyy|vtyuxo∞2°¤¬¯}½«²∏º¬ƒ
±¬¦q¥°¬q¤¦q¦±
黄连解毒汤 k‹⁄×l源于唐代王焘 5外台秘
要 6o由黄连 !黄芩 !黄柏 !栀子 w味生药组成 o是经
典的清热解毒方剂 ∀临床研究表明该方剂治疗脑血
管痴呆及阿尔茨海默病 k„ ½¯«¨ ¬° µ¨. ¶§¬¶¨¤¶¨o„⁄l
都取得了较好疗效 ≈tou  o实验药理学研究表明该方
剂可以提高缺血性痴呆模型小鼠 ≈v 及 Β2淀粉样蛋
白注射形成 „⁄模型大鼠 ≈w 的学习记忆能力 o其治
疗效应可能与增加大脑皮质和海马脑血流量及抗
炎 !降低细胞因子和抑制免疫反应有一定关系 ∀但
目前尚无全面 !深入的研究黄连解毒汤对 „⁄作用
的报道 ∀快速老化模型小鼠 k≥„ l作为一个较理
想的衰老模型 o目前已被广泛应用于学习记忆功能
及促智药物的研究 ∀其中 ≥„ °{亚系具有类似老
年痴呆的脑部病理及学习记忆功能衰退 o而且随着
年龄增加 o其脑内 Β2淀粉样蛋白 kΒ2¤°¼¯ ²¬§o„Βl的
前体蛋白表达明显增加 o在脑内也发现了与 „⁄类
似的异常颗粒聚积 ∀ ≥„ • t具有相对正常的生存
期 o常被用做正常对照 ∀因此 o本研究以快速老化模
型小鼠为研究对象 o应用蛋白质组学技术 o研究黄连
解毒汤对快速老化模型小鼠海马蛋白表达的影响 o
以期从分子水平深入地阐明黄连解毒汤治疗 „⁄的
机制 ∀
1 材料与方法
1q1 试剂与仪器
Œ°Š缓冲液 !丙烯酰胺 !过硫酸胺 !四甲基乙二
胺 !二硫苏糖醇 k⁄××l!十二烷基硫酸钠 k≥⁄≥l!甘
氨酸等双向电泳试剂均购自 „° µ¨¶«¤° ³«¤µ°¤¦¬¤公
司 o考马斯亮蓝 • vxs购自 „ • ∞≥≤’公司 o山羊抗
鼠醛缩酶 ≤k¤¯§²¯¤¶¨ ≤l多克隆抗体 !山羊抗鼠谷氨
酰胺合成酶 kª¯∏·¤°¬±¨¶¼±·«¨ ·¤¶¨l多克隆抗体购自
美国 ≥¤±·¤¦µ∏½公司 o辣根酶标记兔抗山羊 ŒªŠ购自
北京中杉金桥生物技术有限公司 o预染的蛋白
°¤µ®¨ µ购自纽英伦生物技术 k北京 l有限公司 ~其他
试剂均为国产分析纯 ∀
Œ°Š³«²µ等 电 聚 焦 仪 !图 像 扫 描 仪 及 Œ°2
¤ª¨°¤¶·¨µu⁄ ³¯¤±¬·∏°x1s图像分析软件 k„° µ¨¶«¤°
³«¤µ°¤¦¬¤…¬²·¨¦«公司 lo ∏¯·¬× °¨³¶温控循环水浴
k军事医学科学院实验仪器厂 lo°• ’×∞‘ŒŒ¬¬垂直电
泳仪 k…¬²2• ¤§公司 lo• ∞ƒ∞÷¶基质辅助激光解吸电
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第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
离飞行时间质谱 k „⁄Œ2גƒ2 ≥o…µ∏®¨ µ公司 l~ ¬±¬
p °µ²·¨¬±电泳槽 k…¬²2• ¤§公司 l∀
1q2 动物
≥„ 的快速老化亚系 ≥„ °{和抗快速老化亚
系 ≥„ • t由日本京都大学引进 o本院动物中心繁
殖饲养 o自由饮水及进食 ∀选择 tu月龄雄性小鼠用
于实验 o分为 ≥„ • t组 ! ≥„ °{组和 ≥„ °{ n
‹⁄×组 ku1x ª# ®ªpt l∀给药组每日给予灌胃 t
次 o连续给药 ys §o另 u组给予等量的蒸馏水 ∀
1q3 方法
1q3q1 海马蛋白提取及定量 小鼠快速断头处死
后迅速取出大脑 o生理盐水洗去血渍 o迅速剥离出海
马 o加入适量裂解液和蛋白酶抑制剂 o采用液氮冻融
和超声破碎相结合的方法提取蛋白 o离心 ku万 ≅ γo
ws °¬±lo提取上清 o p zs ε 保存 o¥µ¤§©²µ§法测定蛋
白浓度 ∀
1q3q2 双向凝胶电泳 主要参考 Š²µª等 ≈x 的方法
和 Œ°Š³«²µ×等电聚焦系统操作指南进行 ∀等电聚焦
时采用 t{ ¦° ³‹ v2ts ‘Œ°Š胶条 o凝胶平衡 o垂直
≥⁄≥2°„Š∞电泳 os1suxh考马斯亮蓝 • 2vxs染色 ∀
1q3q3 凝胶图像分析 图像扫描仪透射扫描凝胶 o
所得图谱以 Œ°¤ª¨  ¤¶·¨µu⁄ x1s ³¯¤·¬±∏°软件进行
图像分析 o比较蛋白斑点差异 ∀
1q3q4 肽质量指纹谱测定 切割凝胶差异蛋白点 o
脱色 o胶内酶切 o „⁄Œ2גƒ2 ≥检测肽质量指纹
谱 ∀
1q3q5 数据库检索鉴定蛋白质 选择欲查询物种 o
输入肽质量指纹谱数据及其他参数 o数据库中查寻
与其相匹配的蛋白质 ∀检索数据库为  ¤¶¦²·o«·2
·³rr}ºººq°¤·µ¬¬¶¦¬¨±¦¨q¦²°∀
1q3q6 免疫印迹法检测部分差异蛋白表达 蛋白
样品煮沸处理后 o电泳 o电转印 o封闭 o抗体孵育 o曝
光显影及定影 o扫描定量及统计分析 ∀
2 结果
2q1 双向电泳图谱及凝胶图像分析
2q1q1 双向电泳图谱 各组海马组织图谱见图 to
图中左侧横向箭头表示第一等电聚焦电泳的方向 o
Œ°Š胶条的 ³‹梯度由右向左为 v ∗ tso左侧纵向箭
头表示第二向 ≥⁄≥2聚丙烯酰胺凝胶电泳方向 o从下
至上为相对分子质量增加 ∀
图 t 各组海马蛋白双向电泳图谱
2q1q2 凝胶图像分析 经 Œ°¤ª¨ °¤¶·¨µu⁄ ³¯¤±¬·∏°
x1s软件分析 o得到 tu月龄 ≥„ °{与 ≥„ • t以及
黄连解毒汤给药组与 ≥„ °{间海马中表达有明显
差异的蛋白点 o结果见表 t∀
表 t 各组间海马蛋白差异蛋白的表达情况
变化趋势 ≥„ °{ √¶≥„ • t ≥„ °{ n ‹⁄× √¶≥„ °{
上调 { t{
下调 ut us
由表 t可知 o与 ≥„ • t相比 o≥„ °{海马中有
{个蛋白点显著上调 out个蛋白点显著下调 ~与
≥„ °{相比 o‹⁄×给药组的 ≥„ °{海马中有 t{
个蛋白点显著上调 ous个蛋白点显著下调 ∀
2q2 差异蛋白点的质谱鉴定
2q2q1 差异蛋白点图示 对部分 ‹⁄×作用于 ≥„
的差异蛋白点进行胶内酶切 !质谱鉴定及  ¤¶¦²·数据
库检索 o这些蛋白在双向电泳图谱中的位置见图 u∀
2q2q2 差异蛋白点质谱鉴定结果 经  „⁄Œ2גƒ
获得差异蛋白肽指纹图谱 o数据库检索鉴定 o最终获
得 tu个蛋白点的相关信息 ∀结果见表 u∀
2q3 蛋白免疫印迹对部分差异蛋白表达水平的验证
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图 u 差异蛋白在双向电泳图谱中的位置
表 u 黄连解毒汤作用蛋白点质谱鉴定结果
序列号
相对体积 k cξ ? σl
≥„ • t ≥„ °{ ≥„ °{ n ‹⁄×
数据库
序列号
分值
匹配
肽段
等电点 r相对分
子质量 k ≅ tsv l
覆盖
率 rh 蛋白质名称
uxyz s1tv{ ? s1stt s1ttw ? s1ssytl s1s{| ? s1stwul ª¬rt{uxsu{w tts turut y1uzrws vw Α异柠檬酸脱氢酶
vsuy s1uzy ? s1sut s1uvw ? s1stytl s1vtw ? s1sv|ul ª¬rutvtvyz| tw{ {rts x1xurt{ zu „×°合酶
u{{t s s1swx ? s1ssttl s1szt ? s1stvul ª¬ryzxvsuu {s wrw z1surux vw 腺苷酸激酶 w
vs{{ s1sxz ? s1ss{ s1sww ? s1ssxtl s1sxw ? s1sssul ª¬r|z{|||x y| yrtt x1zyrtz v| ≥·¤·«°¬± t蛋白
uzzz s1swy ? s1ssy s1svx ? s1ssutl s1sw{ ? s1sswvl ª¬r|wvzz{vw {v zrts z1turuy vt 髓细胞性白血病细
胞因子 u同系物
uwyv s1s|{ ? s1sxw s1txs ? s1stz s1tsw ? s1stxul ª¬rysy{zxsy tv| txrvw y1yzrv| xt 醛缩酶 vo¦异构体
uuxy s1xwz ? s1szx s1xzz ? s1sww s1wxt ? s1swvul ª¬rtvuz{wtu zw zrty x1ysrv{ vs Α烯醇酶 t
utyz s1swt ? s1ssx s1sw{ ? s1ssv s1sv| ? s1sswul ª¬rtvxu|wyz ttv tsrtw x1{|rw| vx 不均一核内核糖核
蛋白异构体 ‹u
utxu s1sxs ? s1ssy s1ttu ? s1st| s1sy| ? s1ssvvl ª¬rv{vu{uus yx wrx y1vyrw| us ≥ ³¨·¬± tt蛋白
uvyt s1ut| ? s1s{z s1vxx ? s1su| s1usv ? s1swyul ª¬rvt|{uvvu tsy tvruv y1ywrwu vt 谷氨酰胺合成酶
t|vs s1twu ? s1szv s1t|s ? s1suu s1tux ? s1swvul ª¬rtu{xx|vw yz zruu {1vyru{ w| 未命名蛋白 t
u{yx s1vu{ ? s1svu s1vvt ? s1szw s1t|{ ? s1stuul ª¬rtu{ww|{| t{s txrt| y1yzru| yt 未命名蛋白 u
注 }与 ≥„ • t比较 tl Π  s1sx~与 ≥„ °{比较 ul Π  s1sxovl Π  s1st
蛋白免疫印迹是一种半定量的对蛋白表达进行
检测和分析的技术 o为了验证本实验中应用双向电
泳技术结合质谱鉴定所获的差异蛋白的可靠性和有
效性 o本研究运用蛋白免疫印迹实验对功能明确的
两个差异蛋白的表达进行了验证 ∀
2q3q1 差异蛋白醛缩酶 ≤表达水平的验证 双向
电泳结果显示 o与 ≥„ • t相比 o醛缩酶 ≤在 ≥„ °{
海马中表达上调 o给予 ‹⁄×后该蛋白表达水平显
著下调 o见图 v∀
图 v 醛缩酶 ≤在双向电泳中的表达情况
应用蛋白免疫印迹对醛缩酶 ≤进行检测 o实验
结果见图 w∀
图 w 醛缩酶 ≤在蛋白免疫印迹中的表达情况
蛋白免疫印迹结果表明 o与 ≥„ • t相比 o醛缩
酶 ≤在 ≥„ °{海马中表达上调 o给予 ‹⁄×后蛋
白表达水平下调 o与双向电泳的结果相一致 ∀
2q3q2 差异蛋白谷氨酰胺合成酶表达水平的验证
双向电泳结果显示 o与 ≥„ • t相比 o谷氨酰胺合
成酶在 ≥„ °{海马中表达上调 o给予 ‹⁄×后该
蛋白表达水平显著下调 o见图 x∀
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图 x 谷氨酰胺合成酶在双向电泳中的表达情况
应用蛋白免疫印迹对谷氨酰胺合成酶进行检
测 o结果见图 y∀
图 y 谷氨酰胺合成酶在蛋白免疫印迹中的表达情况
蛋白免疫印迹结果表明 o与 ≥„ • t相比 o谷氨
酰胺合成酶在 ≥„ °{海马中表达上调 o给予 ‹⁄×
后蛋白表达水平下调 o与双向电泳的结果相一致 o提
示双向电泳结合质谱分离鉴定差异蛋白的结果基本
可靠 ∀
3 讨论
蛋白质组是指 /一个细胞或一个组织基因组所
表达的全部蛋白质 0o这一概念体现了其具有整体
性 !动态性和系统性的特点 o它与中医药学所倡导的
整体观念和动态的 /证 0的思想是一致的 o因而借助
蛋白质组学技术研究中医药学应是中医药现代化研
究的重要途径之一 ∀本研究观察了 ‹⁄×对快速
老化模型小鼠海马蛋白质改变的影响 o旨在探讨该
方治疗 „⁄的分子作用机制 ∀
图像分析结果表明 o与 ≥„ • t相比 o≥„ °{海
马中有 {个蛋白点显著上调 out个蛋白点显著下
调 ~与 ≥„ °{相比 o‹⁄×给药组的 ≥„ °{海马中
有 t{个蛋白点显著上调 ous个蛋白点显著下调 ∀
对部分黄连解毒汤的作用蛋白点进行质谱鉴定 o发
现这些蛋白按功能可以分为 y类 }≠ 能量代谢相关
蛋白 o如 Α异柠檬酸脱氢酶 !„×°合酶 k‹ n传递体 o
线粒体 ƒ²复合体 o亚基 §l!腺苷酸激酶 w!醛缩酶 ≤
和 Α烯醇酶 ∀异柠檬酸脱氢酶是三羧酸循环中的
关键酶 o在 „×°能量产生及其他生物合成等方面都
有重要作用 o并且在调节线粒体氧化 2还原平衡及对
抗氧化损伤也具有一定的作用 ≈y  ∀ Ž¬¯ Œ≥等 ≈z 报
道 o„⁄患者的脑内线粒体三羧酸循环中关键酶的
测试结果显示异柠檬酸脱氢酶的活性下降了 uzh o
致使 „×°生成减少 o不能为细胞有效地提供能量 ∀
本研究发现该酶在 ≥„ °{海马中表达水平显著下
调 o提示 ≥„ °{脑中存在能量代谢障碍 o给予
‹⁄×后该酶表达水平显著上调 o提示 ‹⁄×可能
通过对异柠檬酸脱氢酶表达的影响而对 ≥„ °{的
能量代谢障碍有所改善 ∀ „×°合酶 k‹ n传递体 o线
粒体 ƒ²复合体 o亚基 §lo在 „⁄°磷酸化成 „×°时
参与质子传递 o对维持细胞内外离子平衡 o调节细胞
内外渗透压 !神经和肌肉冲动传导等发挥重要作用 ∀
衰老后体内自由基大量释放 o致使 „×°酶活性下
降 ∀已有研究报道 o„⁄病人脑中细胞水平的蛋白
和能量代谢受到损伤 ≈{  o海马 „×°合酶全酶的水平
下降 ≈|  ∀本研究发现该酶在 ≥„ °{海马中表达显
著下调 o提示 ≥„ °{脑中存在能量代谢障碍 o可能
是其学习记忆增龄性衰退的重要原因 ∀ 给予
‹⁄×后该酶表达水平显著上调 o推测可能是
‹⁄×使 „×°合酶的氧化减少 o活性恢复 o减少了
≥„ °{脑中能量代谢的异常改变 ∀  转录调控相
关蛋白 o如不均一核内核糖核蛋白 ‹u∀不均一核内
核糖核蛋白参与多种主要的生物学过程 o如 • ‘„转
运 !处理加工 !转录及翻译 ≈ts  ∀ 本研究发现在
≥„ °{海马中该蛋白表达水平上调 o给予 ‹⁄×后
其表达水平显著下调 o这可能是 ‹⁄×通过调节不
均一核内核糖核蛋白 ‹u的表达 o在一定程度上改
善了 ≥„ °{海马的转录调控障碍 ∀ ≈ 细胞骨架蛋
白 o如 ¶¨³·¬±tto¶¨³·¬±tt在维持 Š×°酶活性中发挥
重要作用 o并且与其他 ¶¨³·¬±分子相互作用调控肌
动蛋白或微管的相关功能 ≈tt  ∀本研究发现该蛋白
在 ≥„ °{海马中表达水平上调 o给予 ‹⁄×后其
表达水平显著下调 o推测可能是 ‹⁄×通过调节
¶¨³·¬±tt的表达 o改善了 ≥„ °{海马中微管的相关
病理变化 ∀ …氨基酸代谢相关蛋白 o如谷氨酰胺合
成酶 o该酶可以使神经兴奋性毒性物质谷氨酸和氨
离子转换成谷氨酰胺 o它的失活会导致氨的毒性增
强 o而且氨也是导致 „⁄形成的原因之一 ≈tu  ∀ ≥¤·²
∞等 ≈tv 研究报道谷氨酰胺合成酶对活性氧极其敏
感 o在 ≥„ °{脑中蛋白羰基含量的增加伴随着该酶
活性下降 o并且在 ≥„ °{脑中活性氧簇水平是增加
的 ∀本研究发现该蛋白在 ≥„ °{海马中的表达上
调 o这可能是由于其活性下降而引起的代偿性反应 ∀
给予 ‹⁄×后其表达水平显著下调 o推测可能是由
于 ‹⁄×具有抗氧化作用 o减少了活性氧对谷氨酰
胺合成酶的损害而使其活性增加 o表达恢复 ∀   信
#u|uu#
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‘²√ °¨¥¨ µo ussz
号转导相关蛋白 o如 ≥·¤·«°¬±蛋白 ∀该蛋白在细胞
分化 !组织再生 !修复及发育中发挥重要作用 o与大
脑老化有关 ≈tw  o并且 ≥·¤·«°¬±蛋白水平下调与神经
元纤维缠结及微管不稳定有密切关系 ≈tt  ∀ ≤«¨ ²±
 ≥等 ≈tx 使用二维电泳的方法发现在 „⁄患者额叶
和颞叶皮层中 ≥·¤·«°¬±蛋白的蛋白水平与正常对照
相比显著降低 ∀  ²µ¬‘等 ≈ty 等也报道了随着老化 o
≥·¤·«°¬±蛋白减少 o„⁄发病率也随着增加 ∀本研究
发现 ≥·¤·«°¬±蛋白在 ≥„ °{海马中表达显著下调 o
与上述研究结果一致 ∀给予 ‹⁄×后其表达明显
上调 o ‹⁄× 可能通过改善该蛋白的表达 o对
≥„ °{海马异常的信号转导功能起到了积极作用 ∀
¡其他蛋白包括髓细胞性白血病因子 u同系物 !
°ª¤°¯³µ²·¨¬±o未命名蛋白 t和未命名蛋白 uo这些
蛋白的功能目前仍不清楚 o需进一步研究 o这些蛋白
也可能成为治疗神经退行性疾病的潜在新的药物作
用点 ∀从上述结果可以看出 o‹⁄×通过对 ≥„ °{
海马中与能量代谢 !信号转导 !细胞骨架及氨基酸代
谢等功能相关蛋白表达的调节 o而从多途径对
≥„ °{的老化起到了改善作用 ∀
本研究以快速老化模型小鼠为研究对象 o应用
蛋白质组学技术 o观察了黄连解毒汤对快速老化模
型小鼠海马蛋白表达的影响 o并应用蛋白免疫印迹
法对部分差异蛋白的表达进行了验证 ∀研究结果表
明 o≥„ °{与 ≥„ • t海马蛋白表达存在显著差异 o
这些表达有显著变化的蛋白主要与能量代谢 !转录
调控和信号转导等方面相关 o提示这些蛋白的异常
表达可能与 ≥„ °{的老化及其脑内的病理变化相
关 ∀黄连解毒汤通过对上述老化相关蛋白的调节 o
使 ≥„ °{脑内的能量代谢障碍 !信号转导异常及氨
基酸代谢紊乱等得以改善 o进而缓解了老化的进程
及相应的病理变化 ∀
≈参考文献  
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学 # 中医中药分册 ot||totvkwl}uytq
≈u  小森薰 q黄连解毒汤 !钩藤散对阿尔茨海默型痴呆患者脑血
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用及对细胞因子含量的影响 ≈ q中国中药杂志 ou|kyl}xzxq
≈x  Š²µª„o ’¥¨ µ°¤¬¨µ≤o …²ª∏·«Šo ·¨¤¯q ׫¨ ¦∏µµ¨±·¶·¤·¨²©·º²2
§¬° ±¨¶¬²±¤¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶º¬·« ¬°°²¥¬¯¬½¨ § ³‹ ªµ¤§¬¨±·¶≈ q
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≈y  °²²± ⁄ „o ƒ¤µµ≥ „o …¤±®¶• „o ·¨¤¯q °µ²·¨²°¬¦¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²±
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§¨ ¤··«¨ „¥¨ ·¤ µ¨ª¬²± ²©¤°¼¯ ²¬§ ³µ¨¦∏µ¶²µ³µ²·¨¬±≈  q …µ¤¬±
• ¶¨ ²¯ …µ¤¬± • ¶¨o ussxotv{ktl}{q
≈z  Ž¬¯Œ≥o ‹∏« × o ¨¨≠ ≥o ·¨¤¯q • ª¨∏¯¤·¬²± ²©µ¨³¯¬¦¤·¬√¨¶¨2
± ¶¨¦¨±¦¨ ¥¼ ‘„⁄°n 2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¬¶²¦¬·µ¤·¨ §¨ «¼§µ²ª¨ ±¤¶¨ ≈  q
ƒµ¨¨• ¤§¬¦…¬²¯  §¨o ussyowsktl}ttsq
≈{  …∏¥¥¨ µ°o ‹¤µ²∏·∏±¬¤± ∂ o ƒ¬¶¦«Šo ·¨¤¯q  ¬·²¦«²±§µ¬¤¯ ¤¥±²µ2
°¤¯¬·¬¨¶¬± „ ½¯«¨ ¬° µ¨¥µ¤¬±} ° ¦¨«¤±¬¶·¬¦¬°³¯¬¦¤·¬²±¶≈ q „±±
‘¨ ∏µ²¯o ussxoxzkxl}y|xq
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¥¼ ¤ ±²√¨¯ ¤©©¬±¬·¼ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ ¤±§ ¬± „ ½¯«¨ ¬° µ¨. ¶§¬¶¨¤¶¨
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
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≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussz2sz2us
≈基金项目   国家自然科学基金面上项目 kvsxzuwwtl
≈通讯作者   3 沈霖 oר¯}ksuzl{xzuyv|xo∞2°¤¬¯}¶«¨ ± ¬¯±«¥ƒ
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从益气活血方拆方对健康人血小板聚集功能
的影响探讨方剂组成
石 威 o沈 霖 3 o秦 铀 o卢芙蓉 o高 兰 o潘腊梅
k华中科技大学 附属协和医院 o湖北 武汉 wvssuul
≈摘要   目的 }观察益气活血方及其拆方对健康人血小板聚集功能的影响来探讨其配伍规律 ∀方法 }健康献
血者静脉采血抗凝 o制备富血小板血浆 k³¯¤·¨¯ ·¨µ¬¦« ³¯¤¶°¤o°• °l和贫血小板血浆 k³¯¤·¨¯ ·¨³²²µ³¯¤¶°¤o°°°lo然后
在比浊管中加药孵育 o用血小板聚集仪检测二磷酸腺苷 k¤§¨ ±²¶¬±¨§¬³«²¶³«¤·¨o„⁄°l!血小板活化因子 k³¯¤·¨¯ ·¨¤¦2
·¬√¤·¬±ª©¤¦·²µo°„ƒl!花生四烯酸 k¤µ¤¦«¬§²±¬¦¤¦¬§o„„ l诱导的最大聚集率 ∀结果 }益气活血方能显著提高 „⁄°o
°„ƒ诱导的血小板聚集功能 o其中黄芪 !当归配伍为方中主药 o益气药与活血药相须为用才能发挥促聚作用 ∀结
论 }益气活血方体外实验能增强健康人血小板聚集功能 o但确切作用机制有待进一步实验验证 ∀
≈关键词   益气活血方 ~拆方 ~血小板聚集功能
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uu|w2sw
益气活血方是沈霖教授 us世纪 |s年代初针对 出血性血小板病 ≈t 通过大量体外筛选和临床实践 o
最终研制出的方剂 ∀经 ts余年临床验证 o该方在控
制本病临床出血症状 o纠正血小板聚集缺陷及降低
停药 t年后复发率等方面均明显优于常规西药安络
血 !维生素 ≤o°oŽ等 ∀近期临床药物实验表明在受
体蛋白水平上调节部分血小板膜糖蛋白的表达 o是
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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