全 文 ：酯的占 53. 3% ,穿心莲内酯含量低于脱水穿心莲内
酯的占 26. 7% ,两者含量差异在± 10%以内的占
20. 0% 。药理研究表明穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯
都有一定的抑菌、抗炎作用 [3, 4 ] ,因而以两者的总量
作为衡量穿心莲药材质量优劣的指标更为合理。
3. 2　穿心莲药材的性状与其有效成分的含量有着
直接联系 ,本次收集的样品中 ,大部分药材均呈墨绿
色 ,而叶和枝、梗均呈枯黄色的药材 ,其穿心莲内酯、
脱水穿心莲内酯含量均偏低。
参 考 文 献
1　中国人民解放军广州军区药训队 . 中草药通讯 , 1974, 5( 1): 43
2　中华人民共和国药典 . 广州:广东科技出版社 , 1995: 237
3　邓文龙 ,等 .药学通报 , 1982, 17( 4): 3
5　孟正木 ,等 .中草药通讯 , 1979, 10( 7): 6
( 1999-03-22收稿 )
HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及
日本汉方黄连解毒汤中的生物碱含量
沈阳药科大学中药系 ( 110015)　　沈　嘉 　孙春梅* *　徐荣源* *
沈阳大学师范学院化学系　　　　王　颖
摘　要　用 HPLC法测定 4种不同工艺制备的黄连解毒汤提取物粉末及 2种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小
檗碱和巴马汀含量。结果表明此方法简便、快速、精密度高、回收率较好。采用此法比较了上述 6种黄连解毒汤的生
物碱含量。结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高 ,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的 6倍和
13. 8倍 ,是传统水煎提取物的 3倍。
关键词　小檗碱　巴马亭　黄连解毒汤汉方制剂
Determination of Berberine and Palmatine in Chinese Decoction of Compounded
Coptis in Comparison with Japanese Kampo“ Oren-gedoku-to” by HPLC
　　 Depa rtment of Chinese Ma teria M edica , Shenyang Pha rmaceutical Univ er sity ( Shenyang 110015)　 Shen Jia , Sun
Chunmei and Xu Rongyuan
　　Depar tment of Chemistr y , No rmal Co llege o f Shenyaing Univ e rsity　Wang Ying
Abstract　　 Contents o f berberine and palma tine in four pow dery prepa ra tions f rom “ Antido tal
Decoction of Compounded Coptis” and two g ranula r Japanese Kampo “Oren-gedoku-to” were determinated
by HPLC. Results show ed that pow dery prepa ration obtained by the new production process show ed a
higher content of the tw o alkaloids than the tw o Japanese Kampo 6～ 13. 8 times and about 3 times of the
products obtained from the t radi tional w ater decoction process. The HPLC determination w as show n to be
simple, rapid, wi th high precision and sa tisfacto ry recovery.
Key words　　 berberine　 palmatine　“ Oren-gedoku-to”　 Japanese Kampo medicine
　　黄连解毒汤 (以下简称 HL JDT)原载于唐· 《外
台秘要》 ,由黄连、黄芩、黄柏和栀子组成 ,为清热解
毒的代表方。 近年来被用于高血压、中风后遗症、老
年痴呆症。 前文报道不同工艺制备的 HLJD T提取
物与日本汉方制剂中黄芩苷与栀子苷含量进行比较
研究 [1～ 3 ]。 本文报道生物碱测定结果。
1　仪器与色谱条件
LC-10AT液相色谱仪 (日本岛津 ) , SPD-10AV
紫外可见检测器 , C-R6A数据处理机 ; CX-25超声
清洗器 ;分离柱: Kromasi l C-18( 5μm, 150 mm×
4. 60 mm id) ;前置柱 YWG C18 ( 10 mm× 4. 60 mm
id) ; 流动相: 乙腈 -水 ( 30∶ 70) ,含 20 mmol /L
KH2 PO4 ,流速: 1 mL /min;柱温室温 ;检测波长: 346
nm
[4 ]。
·262· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 4期
Address: Sh en Jia, Department of Chinese Materia Medica, Sh enyang Pharmaceutical University, Shenyang沈　嘉　女 , 1982年毕业于沈阳药学院 ,学士 ,高级工程师。从事药用植物及复方中药有效成分富集提取及活性测定工作。 1991年～ 1993年在瑞典 Uppsala大学生物医学中心进行药用植物中血小板活化因子 ( PAF)拮抗剂、 5-脂氧合酶、环氧合酶抑制剂的体外筛选工作 ,参加银杏标准提取物研究工作。 1996年 8月～ 1997年 3月应日本岛根医科大学邀请 ,参加文部省课题 ,进行复方中药中抗炎及免疫调节成分研究等。在国内外刊物上发表论文近 20篇。 “无糖富集有效成分提取物及其制品”获国家发明专利。
* * 本校 62期毕业实习生
2　药品、样品及试剂
小檗碱、巴马亭对照品 (中国药品生物制品检定
所 ) ;实验用水为重蒸馏水 ,乙腈为色谱纯 ,其它试剂
均为分析纯。 4味中药为市售 , 4种自制黄连解毒汤
固体样品及 2种日本市售汉方黄连解毒汤颗粒剂的
处方、制法或来源见表 1。
表 1　黄连解毒汤样品及制剂
样　品
处　方 处方中
黄
连
黄
芩
黄
柏
栀
子
黄连含量
(% )
黄柏含量
(% )
来　　源
新工艺 9 6 6 9 30 20 新工艺 (合提 )
四　味 9 6 6 9 30 20 单提合并 (单提 )
水　煎 9 6 6 9 30 20 传统水煎 (合提 )
醇　提 9 6 6 9 30 20 60%乙醇回流 (合提 )
东　洋 2 3 2 2 22. 2 22. 2 日本市售
津　村 2 3 1. 5 2 23. 2 17. 6 日本市售
3　线性及精密度测定
3. 1　照前文配制巴马亭 2. 208μg /mL的甲醇对照
品溶液。分别精密量取 0. 5, 1, 2, 4, 6, 8, 10μL依次
进样 ,测定峰面积 ,得回归方程 (表 2)。
另取对照品溶液 ,分别进样 2, 6, 10μL,各重复
进样 6次 ,测定相应峰面积 ,其 RSD (% )分别为
0. 042, 0. 0167, 0. 010。
3. 2　同上述方法制得浓度为 9. 7μg /mL的小檗碱
对照品溶液。同上述方法得回归方程。 同上述方法
求得小檗碱含量测定的 RSD (% )分别为 0. 034 1,
0. 014 3, 0. 023 1。
4　加样回收实验
精密称取上述供式品粉末适量 (相于于黄连生
药约 20 mg ) ,分别加入精密称取的生物碱对照品约
1 mg ,置三角烧瓶中 ,加分析纯甲醇 30 mL,超声提
取 30 min[5 ] ,滤入 50 mL量瓶 (生药黄柏取约 20
mg ,超声前室温浸泡 3 h [6 ] )。 以分析纯甲醇洗涤三
角烧瓶及滤渣一并滤入量瓶中 ,定容至刻度 ,适当精
确稀释 ,用 0. 45μm滤膜过滤得供试液 ,精密进样 5
μL测定含量。另平行制备同量供试品 ,不加生物碱
对照品 ,同法操作 ,测定含量。二者含量之差 ,换算成
测得量 ,与实验加入量相比较 ,即得回收率 ,结果见
表 3。
表 2　生物碱定量曲线
线性范围 (μg) 回归方程 r n
巴马亭 1. 104× 10- 3～ 2. 208× 10- 2 Y= 3. 59× 106X+ 1. 48× 103 0. 999 6 3
小檗碱 4. 85× 10- 3～ 7. 76× 10- 2 Y= 3. 72× 106X+ 3. 19× 102 0. 999 6 3
5　样品测定
黄连、黄柏生药: 分别取样品粉末 (过 40目筛 )
约 20 mg ,置三角烧瓶中 ,同 4项自“加分析纯甲醇
约 30 mL……”起 ,至“… ,测定含量”。
含生物碱各样品:分别称取相当黄连生药约 20
mg的样品 ,操作同生药测定 ,含量测定结果见表 3。
测得图谱见图 1。
6　讨论
6. 1　实验样品中生物碱含量次序为: 新工艺> 四
味> 醇提> 水煎> 东洋> 津村。 新工艺制备的提取
物中生物碱含量最高 ,其小檗碱含量是水煎提取物
的 3倍 ,分别是东洋和津村的 6倍和 13. 8倍。新工
艺制备的提取物干粉量少 ,物理性状好 ,利于减小剂
量制成固体制剂。
6. 2　初步药理试验结果证明新工艺 HLJDT药理
活性高于水煎和东洋 ,可考虑的因素是生物碱是重
要活性成分之一 ,而新工艺提取物的生物碱含量大
大高于水煎和东洋。
6. 3　相同处方、原料以 4个不同工艺制备的提取物
的生物碱提出率结果见表 4,其提出率次序如下: 新
表 3　各样品生物碱含量测定结果 (n= 3)
样　品
巴　马　亭 小　檗　碱
含量
( mg /g)
R SD
(% )
加样回
收率 (% )
含量
( mg /g )
RSD
(% )
加样回
收率 (% )
黄　连 18. 2 2. 11 96. 9 74. 7 0. 01 103. 8
黄　柏 4. 74 4. 87 94. 3 13. 3 6. 52 84. 5
新工艺 22. 2 4. 58 98. 2 81. 6 6. 42 89. 1
水　煎 7. 73 4. 29 - 26. 9 0. 989 91. 2
四　味 21. 5 - 107. 9 77. 9 - 105. 4
醇　提 14. 1 2. 51 100. 2 53. 6 1. 42 92. 0
东　洋 1. 61 6. 20 83. 0 13. 6 2. 25 96. 7
津　村 0. 633 1. 27 83. 5 5. 91 1. 03 -
工艺> 四味> 醇提> 水煎。新工艺提生物碱的提出
率最高 ,水煎的提出率最低 ,还不及生药中含量的一
半。现有的试验结果还表明本次试验的 6个复方样
品中水煎、东洋、津村 3个样品的生物碱回收率都偏
低 ;东洋、津村黄连解毒汤的提取方式也是水煎 ,故
可以考虑在黄连解毒汤这 4味中药水煎合提时可能
有些成分与生物碱形成沉淀或吸附而使提取物的生
物碱提出率偏低。
6. 4　实验结果证明上述 4个工艺对巴马亭的提出
·263·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 4期
1-新工艺　 2-单味药提取后合并　 3-东洋　 4-津村　 5-水煎提取　 6-60%乙醇提取　 7-黄连生药
8-黄柏生药　 9-缺黄连、黄柏阴性对照　 10-黄连解毒汤缺黄连　 11-黄连解毒汤缺黄柏　 12-黄连、黄柏合提
图 1　黄连解毒汤生物碱提取物及日本汉方制剂色谱图 (* 为小檗碱 ,△为巴马亭 )
表 4　不同工艺对黄连解毒汤干粉的收率
及生物碱提出率的影响 (n= 3)
工　艺
　
干粉
收率
　
(% )
处方中每 1. 5 g 黄
连和 1 g黄柏可
提出的生物碱
处方中生药黄连、黄
柏中的生物碱提
出率
巴马亭 小檗碱 巴马亭 小檗碱
( mg )* (% )* *
新工艺 22. 2 24. 6 90. 6 76. 9 72. 2
四　味 21. 6 23. 2 84. 1 72. 5 67. 1
水　煎 28. 8 11. 1 38. 7 34. 7 30. 9
醇　提 31. 4 22. 1 84. 2 69. 1 67. 1
黄　连 - 100 100
黄　柏 - 100 100
黄连加黄柏 32. 0 125. 4
　* 处方中黄连 -黄柏 = 1. 5∶ 1　　* * 以生药提出率为 100%计。
率全高于小檗碱。HLJDT已测定的 4个有效成分的
提出率次序为栀子苷 > 巴马亭 > 小檗碱 > 黄芩
苷 [3 ]。
致谢:本实验所用日本汉方制剂东洋黄连解毒
汤、津村黄连解毒汤为日本的阿部胜利及李颂华医
生惠赠。
参 考 文 献
1　崔存利 ,等 .国外医药 -中医中药分册 , 1992, 14( 5): 1
2　沈　嘉 ,等 .中草药 , 1999, 30( 2): 102
3　沈　嘉 ,等 .中草药 , 1999, 21( 10): 502
4　周元瑶 ,等 .药学学报 , 1988, 23( 12): 938
5　闻 毓 ,等 .中国药科大学学报 , 1995, 26( 3) : 170
6　彭艳梅 ,等 .中草药 , 1997, 28( 10): 599
( 1999-07-12收稿 )
2000年《中文科技资料目录·中草药》征订启事
　　本刊 2000年改为大 16开本 ,每期 152页 ,报道条目增加至每期 2 200～ 2 300条 ,每期定价 25元 ,全年出版 4期及年
度主题索引 ,全年订费共 125元 (包括邮费 ) ,本刊尚有少量 1993～ 1997年各年度精装合订本 ,每本售价 70元 , 1998年合订本
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·264· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 4期