全 文 ：不同栽培模式下黄连质量评价
齐海涛 t o王有为 u3 o朱 强 t o王 庆 t
ktq中国科学院 武汉植物园 o湖北 武汉 wvsszw~ uq武汉大学 药学院 o湖北 武汉 wvsszul
≈摘要   目的 }评价 w种不同栽培模式下黄连的质量 ∀方法 }连续 u年选取简易棚下 !柳杉林下 !白马桑林下 !
厚朴林下 w种栽培模式下的黄连样品 o采用紫外 2可见分光光度法 !高效液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小
檗碱的含量 ∀结果 }w种栽培模式下黄连总生物碱含量和盐酸小檗碱含量均无明显差异 o总生物碱的含量变化幅度
在 tv1{{h ∗ tz1wth o盐酸小檗碱在 y1|xh ∗ |1wzh o均显著高于药典 t||s年版对黄连中总生物碱的含量的规定
kz1sh l和药典 ussx年版对黄连中盐酸小檗碱含量的规定 kv1yh l∀结论 }w种栽培模式下的黄连根均可作为黄
连药材入药 o且质量较好 ∀
≈关键词   黄连 ~栽培模式 ~质量 ~评价
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsz2sxzs2sv
≈收稿日期   ussx2tu2sx
≈基金项目   湖北省 /十五 0重大科技攻关项目 kusst„„vsw„l
≈通讯作者   3 王有为 oר¯}ksuzl{zxtsv|uo∞2°¤¬¯}º¼ºƒ º¥ª2
¦¤¶q¦±
黄连 Χοπτισ χηινενσι󃵤±¦«q为毛茛科黄连属多
年生草本植物 o以根茎入药 ≈t  ∀黄连中主要含有小
檗碱 !黄连碱 !巴马汀等生物碱类成分 ≈u  ∀黄连主
要分布在湖北 o重庆 o陕西等地 o湖北省利川市是黄
连的道地主产区之一 o也是湖北省道地药材黄连规
范化种植示范基地 o黄连的栽培在该市有着数百年
的历史 ∀由于黄连是阴生植物 o目前利川市黄连基
地主要通过林药间作 !药药间作 !粮药间作或搭简易
棚等方式来为黄连生产创造合适的生境 ≈v  o栽培面
积比较大的模式主要有简易棚下 !柳杉林下 !马桑林
下 !厚朴林下栽培 ∀本研究通过测定上述 w种模式
下三至四年生黄连中总生物碱和小檗碱的含量 o对
不同栽培模式下生长的黄连质量进行科学的评价 o
以指导黄连的规范化生产 ∀
1 仪器与材料
zuu型分光光度计 k上海仪器厂 lo岛津 ≤ p
ts„·√³高效液相色谱仪 o岛津 ≥°⁄ pts„·√³紫外 2可见
光检测器 o浙大智达 ‘usss色谱工作站 ~双蒸水 o乙腈
为色谱纯 o其他试剂为分析纯 ∀小檗碱对照品 k中国药
品生物制品检定所 o批号 sztv2||syottsztv2ussus{l∀
简易棚下 !柳杉林下 !马桑林下 !厚朴林下栽培
的黄连样品均采自湖北省利川市福宝山黄连 Š„°
基地 o海拔高度为 t wvs ∗ t xzs °o其生产管理均严
格按照该基地 ≥’°执行 ∀样品在农户家生产田中
采取 o兼顾 w种种植模式 o三年生黄连共采样 tx个 o
四年生黄连共采样 u|个 o每个采样点均随机采样
tx株 o样品经中国科学院武汉植物园李建强研究员
鉴定为毛茛科植物黄连 Χ. χηινενσισ∀样品除杂后
自然晒干 o再打粉后过三号筛备用 ∀
2 方法
2q1 总生物碱含量测定
2q1q1 对照品溶液的制备 精密称取小檗碱对照
品 |1| °ªo置 ux °量瓶中 o用甲醇溶解并稀释至
刻度 o摇匀 o即得 ∀
2q1q2 线性关系考察 精密吸取不同体积的对照
品溶液 o分别置于 tss °的量瓶中 o以 s1sx °²¯ #
pt ‹u ≥’w水溶液定容至刻度 o测定吸收度 o结果表
明 o在 t1|{ ∗ |1| Λª# °pt o小檗碱吸收度与含量
线性关系良好 ∀回归方程为 Ψ €s1txu tΞ ns1stv z
kρ€ s1||{ wl∀
2q1q3 供试品溶液的制备 精密称取本品粉末约 s1x
ªo置 tss °圆底烧瓶中 o加入 xsh甲醇 2水溶液 ws
°o加热回流提取 u «o过滤 ~重复提取 u次 o过滤 o合并
滤液 o转移至 tss °量瓶中 o用 xsh甲醇 2水溶液定容
至刻度 ∀吸取该溶液 t °置于 tss °量瓶中 o以
s1sx °²¯# pt ‹u ≥’w水溶液定容至刻度 o摇匀 o即得 ∀
2q1q4 重复性试验 取同一批样品 o平行称取 x
份 o照拟定的含量测定方法进行测定 ∀ x份样品测
定值的 • ≥⁄为 u1th o表明本法具有较好的重复性 ∀
#szx#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz
2q1q5 回收率试验 取已知含量的样品约 s1ux ª
kx份 lo精密称定 o精密加入小檗碱对照品适量 o按
本实验含量测定方法进行测定 o计算回收率 ∀结果
平均回收率为 |x1yh k• ≥⁄ u1th l∀
2q1q6 样品测定 取各种模式下黄连样品干燥粉
末约 s1x ªkν €ulo精密称定 o按 2q1q3项下制备供
试品溶液 o分光光度法进行含量测定 ∀其中 o总生物
碱测定以硫酸溶液 ks1sx °²¯ # pt l为空白 o总生
物碱含量以小檗碱计 ∀
2q2 小檗碱含量测定
2q2q1 色谱条件 岛津 ≥…2≤t{柱 kw1y °° ≅ txs
°°ox Λ°lo流动相乙腈 2s1su °²¯# pt磷酸二氢钾
溶液 2三乙胺 kvsΒzsΒulo³‹ v1xo流速 t1s °#
°¬±pt o检测波长 vwx ±°o柱温室温 o进样量 ts ˏ∀
峰形对称 o结果见图 t∀图 t 对照品及黄连样品 ‹ °≤图
„q对照品 ~…q黄连供试品 ~tq小檗碱
2q2q2 对照品溶液的制备 精密称取小檗碱对照
品 ts1{ °ªo置于 ux °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释
至刻度 o得小檗碱标准贮备液 ∀精密吸取小檗碱标
准贮备液 t °o置 ts °量瓶中 o加甲醇稀释至刻

度 o得对照品溶液 ∀
2q2q3 供试品溶液的制备 称取干燥后的黄连粉
末约 xs °ªo置 tss °量瓶中 o加入盐酸 2甲醇溶液
ktΒtsslxs °oys ε 水浴中加热 vs °¬±o取出 o超声
处理 vs °¬±o放置至室温 o加甲醇至刻度 o摇匀 os1wx
Λ°微孔滤膜滤过 o取滤液作为供试品溶液 ∀
2q2q4 线性关系考察 结果表明 o在 tx1{ ∗ tzu1{
Λª# °pt o小檗碱吸收峰面积与含量线性关系良好 ∀
回归方程 Ψ€w {v{1uΞ nw zuu1ykρ€s1||| ul∀
2q2q5 重复性试验 按拟定的含量测定方法 o取同
一批样品 o平行称取 x份 o进行含量测定 ∀结果表
明 ox份样品测定值的 • ≥⁄为 u1wh o表明本法具有
较好的重复性 ∀
2q2q6 回收率试验 取已知含量的样品约 xs °ª
ky份 lo精密称定 o精密加入对照品适量 o按本实验
含量测定方法进行测定 o计算回收率 ∀得平均回收
率为 |z1uh k• ≥⁄ s1yxh l∀
2q2q7 样品测定 称取各种模式下黄连样品干燥
粉末约 xs °ªkν €ulo精密称定 o按 2q2q3项下制备
供试品溶液 o‹°≤法进行含量测定 ∀
3 结果
3q1 不同栽培模式下黄连总生物碱含量
结果见表 t和表 uo在相同的生长年限 !相近的
海拔高度和相同的生产管理条件下 ow种栽培模式
下的总生物碱的含量 o若以 |xh 的置信度进行比
较 ow种栽培模式下的总生物碱的含量无明显的差
异 ∀
表 t 不同栽培模式下黄连总生物碱含量 kν € ul h
栽培模式 生长年限
样品编号
t u v w x y z {
均值
柳杉林下 v ty1xv tx1t| tz1tv ty1u{
w ty1sz tx1xy ty1v{ tx1{u tw1|v ty1sv tx1tt tx1|x tx1zv
马桑林下 v tx1vv tz1vu tz1wt tz1vx ty1wv ty1zz
w tx1uz tx1w| tx1|z ty1tt tx1wu tx1y{ tx1zy tx1x{ tx1yy
厚朴林下 v ty1tx ty1yx ty1zw ty1xt
w ty1su tx1{z ty1s{ tx1{t tv1{{ tx1xv
简易棚下 v ty1vz tx1uw tw1wx tz1ux tx1{v
w tw1ut ty1t| tx1{u tx1|s t{1tx tv1z{ tv1{w ty1vt tx1xv
3q2 不同栽培模式下黄连小檗碱含量 结果见表
v和表 w∀结果表明 w种栽培模式下的盐酸小檗碱
的含量也无明显的差异 ∀
4 讨论
4q1 三四年生黄连总生物碱的含量变化幅度在
tv1{{h ∗ tz1wth o盐酸小檗碱的含量在 y1|xh ∗
表 u 不同栽培模式下黄连总生物碱含量的方差分析
项目 平方和 自由度 平均平方 Φ Π
三年生 组间 u1sxv v s1y{w s1zxx s1xwu
组内 |1|zv tt s1|sz
总体 tu1suz tw
四年生 组间 s1uuv v s1szw u s1s{y s1|yz
组内 ut1xwt ux s1{yu
总体 ut1zyw u{
#tzx#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz
表 v 不同栽培模式下黄连小檗碱含量 kν € ul h
栽培模式 生长年限
样品编号
t u v w x y z {
均值
柳杉林下 v {1{z z1s| |1wz {1w{
w {1ux z1wx {1wv z1|x y1{s z1|x z1us {1us z1z{
马桑林下 v {1vy {1wx |1uu {1{y |1st {1z{
w z1yu z1{v {1tw {1v| z1xv z1|s z1|z z1y| z1{|
厚朴林下 v {1y| {1|| |1sv {1|t
w {1vx {1vx {1ww z1xw y1{{ z1|t
简易棚下 v {1ux {1vu z1wu |1ss {1ss
w z1uy {1wy {1su {1uu {1vy y1|x z1sw {1ww z1{w
表 w 不同栽培模式下黄连小檗碱含量的方差分析
项目 平方和 自由度 平均平方 Φ Π
三年生 组间 s1|{t v s1vuz s1zv s1xxx
组内 w1|u{ tt s1ww{
总体 x1|s{ tw
四年生 组间 s1sy| u v s1suv t s1szx s1|zv
组内 z1yzw ux s1vsz
总体 z1zwv u{
|1wzh o均显著高于药典 t||s年版对黄连中总生物
碱的含量的规定 kz1sh l和药典 ussx年版对小檗
碱含量的规定 kv1yh l≈wox  ∀表明这 w种栽培方式
下的黄连均可作为黄连药材入药 o且质量较好 ∀
4q2 本试验总生物碱含量测定没有采用传统的
t||s年版药典法 ≈x  o但方法学研究表明 o新的检测
方法各项指标均能达到要求 ∀同时 o检测结果也与
相关文献报道相符 ≈y  ∀
4q3 近年来 o采用 ‹°≤测定药材和成药中小檗碱
的方法多有报道 ≈zo{  ∀本研究小檗碱含量测定也采
用了 ‹°≤o新方法的各项方法学研究指标均能达
到要求 ∀相比 ussx年版药典规定的薄层扫描法 ≈x  o
‹°≤法操作更为简便 o结果更为精确 ∀
≈参考文献  
≈t  傅书遐 q湖北植物志 ≈   q第 t册 q武汉 }湖北科学技术出版
社 oussv}vuuq
≈u  江苏新医学院 q中药大辞典 ≈   q下册 q上海 }上海人民出版
社 ot|zz}usuuq
≈v  黄正方 o杨美全 o孟忠贵 o等 q栽培黄连的荫蔽方法 ≈ q中药
材 ot||totw}|q
≈w  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}utvq
≈x  中国药典 ≈≥ q一部 qt||s}uzxq
≈x  钟国跃 o黄小平 o马开森 o等 q我国黄连 k味连 l质量评价研究
≈ q中国中药杂志 oussxovskzl}w|yq
≈z  郭志刚 o赵 琳 o孙瑞强 o等 q利川黄连小檗碱含量 ≈ q中国
医学科学院学报 ousswouy}yt{q
≈{  林志华 o宋 敏 o李 苗 q反相高效液相色谱法测定黄连及制
剂中小檗碱的含量 ≈ q中国医院药学杂志 ousswouw}zv{q
Θυαλιτψ ασσεσσµ εντ φορ Χοπτισ χηινενσισωιτη διφφερεντ χυλτιϖατινγ σψστεµ
±Œ‹¤¬2·¤²t o • „‘Š ≠ ²∏2º ¬¨u o ‹ ˜ ±¬¤±ªt o • „‘Š ±¬±ªt
(t. Ωυηαν ΒοτανιχαλΓαρδεν, Τηε Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφ Σχιενχεσ, Ωυηαν wvsszw, Χηινα;
u. Χολλεγε οφ Πηαρµ αχψ Ωυηαν Υνιϖερσιτψ, Ωυηαν wvsszu, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²©Χοπτισ χηινενσισ ³¯¤±·¨§º¬·«©²∏µ®¬±§¶²©¦∏¯·¬√¤·¬±ª¶¼¶·¨°q Μετηοδ : ׫¨
¶¤°³¯ ¶¨o º«¬¦«º µ¨¨ ³¯¤±·¨§¥¨ ²¯º ·«¨ ¤µ·¬©¬¦¬¤¯ ¶«¤§¬±ªo ·«¨ ©²µ¨¶·²©≤«¬± ¶¨¨ ¦¨§¨ µº²²§o  °∏¯¥¨ µ¼ º²²§o  ¤ª±²¯¬¤²©©¬¦¬±¤¯ º²²§
º µ¨¨ ¦«²¶¨± µ¨¶³¨ ¦·¬√¯¨ ¼o˜∂ ¤±§‹°≤ º µ¨¨ ∏¶¨§·² §¨ ·¨µ°¬±¨²©·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§¶¤±§¥¨ µ¥¨ µ¬±¨²©¶¤°³¯ ¶¨q Ρ εσυλτ: ׫¨ µ¨ º¤¶±²¶¬ª2
±¬©¬¦¤±·§¬©©¨µ¨±¦¨ ¤°²±ª©²∏µ®¬±§¶²©¦∏¯·¬√¤·¬±ª¶¼¶·¨° ²± ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§¶¤±§¥¨ µ¥¨ µ¬± q¨ ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§¶
¤±§¥¨ µ¥¨ µ¬±¨º µ¨¨ ²¥√¬²∏¶¯¼ «¬ª«¨ µ·«¤± ¬± ·«¨ ¦µ¬·¨µ¬²± ²©≤«¬± ¶¨¨ °«¤µ°¤¦²³²¨ ¬¤q Χονχλυσιον: ׫¨ µ²²·¶²©Χ1χηινενσισ ³¯¤±·¨§¬±
·«¨ ©²∏µ®¬±§¶²©³¯¤±·¬±ª¶¼¶·¨° ¦¤± ¥¨ ∏¶¨§¤¶° §¨¬¦¬±¤¯ °¤·¨µ¬¤¯ ²©«¬ª« ∏´¤¯¬·¼q
[ Κεψ ωορδσ] Χοπτισ χηινενσισ~ ¦∏¯·¬√¤·¬±ª¶¼¶·¨°~ ∏´¤¯¬·¼ ¤¶¶¨¶¶° ±¨·
≈责任编辑 张宁宁  
#uzx#
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz