全 文 ：熟地黄水提物含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１细胞
增殖及 ＥＰＯ表达的影响
祝慧凤１，万 东２，陈 怡１，徐晓玉，陈 立３，何正光４
（１．西南大学 中医药学院，重庆 ４００７１６；
２．重庆医科大学 附属第一医院，重庆 ４０００１６；
３．西南大学 校医院，重庆 ４００７１６；４．重庆师范大学 校医院，重庆 ４０００４７）
［摘要］ 目的：探讨熟地黄水提物含药血清对人脐静脉内皮细胞１（ＨＵＶＥＣｓ１）增殖的影响及其机制。方法：
熟地黄水提物３，６，１０ｇ·ｋｇ－１分别给ＳＤ大鼠灌胃１周，取血制备含药血清，加入血管内皮细胞培养液。采用ＭＴＴ
法观察血清对ＨＵＶＥＣｓ１增殖的影响，免疫细胞化学染色和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测血清对ＨＵＶＥＣｓ１表达红细胞生成素
（ＥＰＯ）的影响。结果：与相同浓度的ＮＳ血清组比较，３，６ｇ·ｋｇ－１地黄水提液含药血清组ＨＵＶＥＣ１吸光度显著升
高（Ｐ＜００５）。免疫组化结果显示，３，６ｇ·ｋｇ－１熟地黄水提物５％含药血清组与相同浓度ＮＳ血清组比较，３，６，１０ｇ
·ｋｇ－１熟地黄水提物１０％，２０％含药血清组与相同浓度ＮＳ血清组比较，ＥＰＯ免疫反应阳性细胞平均吸光度均显著
增加（Ｐ＜００５）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析显示：与ＮＳ血清组比较，６ｇ·ｋｇ－１熟地黄水提物相同浓度含药血清各组 ＥＰＯ
相对条带吸光度值（ＩＯＤ）均显著增高（Ｐ＜００５）。结论：中药熟地黄水提物含药血清可上调血管内皮细胞 ＥＰＯ表
达，对血管内皮细胞有显著的促增殖作用。
［关键词］ 熟地黄水提物；内皮细胞；滋阴补血，益精填髓；红细胞生成素
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１３１５７９０４
［收稿日期］ ２００７１１１０
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３００７０９１５）；西南大学博
士基金项目（１０４２９０－２０７１０９０６）
［通讯作者］ 徐晓玉，Ｔｅｌ：（０２３）６８２５０７６５，Ｆａｘ：（０２３）６８２５１２２５，
Ｅｍａｉｌ：ｘｘｙ０６１８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ
高脂、高糖、氧自由基对血管内皮的损伤是启动
心脑血管疾病的关键环节［１］。具有滋阴补血，益精
填髓功效的熟地黄，有改善血虚大鼠外周血像、改善
痴呆模型鼠记忆、降糖、降脂、抗氧化等药理作
用［２，３］。熟地黄是治疗心脑血管疾病的常用药物，
推测其对脑血管疾病可能具有保护作用。红细胞生
成素（ＥＰＯ）是一种既能促进骨髓造血，又能促进内
皮细胞增殖、迁移和血管新生，并具有神经保护多效
性的细胞因子［４，５］，在心脑血管疾病修复中举足轻
重。本研究采用血清药理学方法，观察熟地黄对人
脐静脉内皮细胞１（ＨＵＶＥＣｓ１）增殖以及对 ＥＰＯ表
达的影响，旨在探讨熟地黄治疗脑血管疾病，抗衰老
的机制，为祖国医学“精血同源”学说提供依据。
１ 材料
１．１ 动物 ＳＰＦ级雄性 ＳＤ大鼠２４只，体重２５０～
２８０ｇ，由重庆医科大学实验动物中心提供（合格证
号２００２Ａ０４０），试验前适应环境饲养１周。
１．２ 药物 怀熟地黄饮片购自成都中医药大学惠
康药业有限公司，批号０３０８１８，经重庆医科大学中
医药学院王刚副教授鉴定。
１．３ 试剂 胰蛋白酶（ｔｒｙｐｓｉｎ），二甲基亚砜（ＤＭ
ＳＯ）、四氮唑蓝（ＭＴＴ）（美国 Ｓｉｇｍａ公司）；ＲＰＭＩ
１６４０培养基（Ｈｙｃｌｏｎｅ公司）；新生小牛血清（杭州四
季青公司）；兔多抗 ＥＰＯ，ＥＰＯＲ抗体（ＳａｎｔａＣｒｕｚ公
司）；ＳＡＢＣ试剂盒、ＤＡＢ显色试剂盒（武汉博士德生
物技术有限公司）。
１．４ 仪器 ＣＯ２培养箱（德国 ＨＥＲＡＥＵＡＳ），Ｒｅｖｃｏ
超低温冰箱、冷冻离心机（德国 ＥＰＰＥＮＤＯＲＦ）、Ｂｉｏ
Ｒａｄ５５０全自动酶标仪，ＳＨＢ－３循环水多用真空泵（郑
州杜甫仪器厂），ＺＸ９８－１Ｒｏｔｏｗａｐｏｒ旋转蒸发仪和
ＺＸ９８－１ＷａｔｅｒＢａｔｈ恒温水浴锅（瑞典ＬＫＢ公司）。
２ 方法
２．１ 地黄水提物的制备 取熟地黄，按液质比８，
６，５倍水煎煮３次，分别于沸后２，１５，１ｈ，滤取上
清，合并 ３次药汁，过滤，浓缩至含生药 ０８ｇ·
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ｍＬ－１，４℃保存备用。
２．２ 含药血清的制备 ２４只大鼠随机分为４组，
即地黄水提物３，６，１０ｇ·ｋｇ－１剂量组和生理盐水对
照组。参考文献［２，３］，每天用地黄水煎液定时灌
胃１次，每次４ｍＬ，持续７ｄ。末次灌胃后０５ｈ，腹
腔注射３５％水合氯醛麻醉，大鼠颈总动脉插管放
血，４℃冰箱过夜，离心取血清，５６℃，３０ｍｉｎ灭活
补体，４℃保存备用。对照组灌等量生理盐水，同法
制备对照组和正常组血清。
２．３ 细胞培养与分组 人脐静脉血管内皮细胞株
（ｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＨＵＶＥＣｓ１，
购自美国ＡＴＣＣ）常规培养，分为地黄水提物含药血
清３，６，１０ｇ·ｋｇ－１剂量组和生理盐水血清对照组。
各组又分２０％，１０％，５％含药血清亚组，每亚组重
复６孔。
２．４ 熟地黄含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１增殖活性的影
响（ＭＴＴ法） 取对数生长期的 ＨＵＶＥＣ１细胞以
１×１０３个／ｍＬ的细胞密度，接种于９６孔板，每孔２００
μＬ，５％ＣＯ２，３７℃条件下培养 ２４ｈ后，换无血清
ＲＰＭＩ１６４０培养液，３７℃再孵育２４ｈ，使细胞生长
同步于静止期。１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心２ｍｉｎ，弃上清
液，各组分别加入２０％，１０％，５％的含药血清和 ＮＳ
血清。培养４８ｈ后，１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心２ｍｉｎ，弃原
培养液，每孔加入 ２００μＬ无血清培养液及 ２０μＬ
ＭＴＴ，继续培养４ｈ。１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心２ｍｉｎ，弃
原液，每孔加入二甲亚砜（ＤＭＳＯ）２００μＬ，震荡 ５
ｍｉｎ使结晶充分溶解后，在全自动酶标仪中选择４９０
ｎｍ波长测各孔吸光度（Ａ）。
２．５ 免疫组织化学检测含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１红
细胞生成素表达的影响 采用０２５％胰酶消化细
胞，用新鲜培养液调细胞密度成１×１０３个／ｍＬ，接种
于预先放有载玻片的２４孔培养板中。３７℃培养箱
内继续孵育４８ｈ，加入不同浓度的含药血清，干预
４８ｈ后，吸出培养液，ＰＢＳ冲洗３次，将细胞爬片置
于４％多聚甲醛固定２０ｍｉｎ，用０３％ Ｈ２Ｏ２、山羊血
清封闭后，按照ＳＡＢＣ免疫组化试剂盒和 ＤＡＢ显色
试剂盒说明书逐条进行操作（一抗 ＥＰＯ浓度为１∶
１５０）。以一抗稀释液替代一抗作阴性对照，ＤＡＢ＋
镍剂显色，中性树胶封片观察。
２．６ 蛋白抽提和浓度测定 参照文献［６］方法，将
收集的细胞离心沉淀，吸干水分后，加入３００μＬ冰
冷的胞浆裂解液于冰上匀浆，冰浴 ３０ｍｉｎ；４℃下
１２０００×ｇ，离心１０ｍｉｎ；取上清（含胞膜和胞浆裂解
物）置于４℃预冷的 Ｅｐ管中，液氮速冻、－７０℃保
存备用。用Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定胞膜及胞浆抽提物中蛋
白浓度。
２．７ 电泳 用１２％变性不连续十二烷基硫酸钠聚
丙烯酰胺凝胶电泳法分离胞膜及胞浆抽提物，每泳
道上样 ４０μｇ蛋白；电泳结束，将蛋白电转印至
ＰＶＤＦ膜；ＴＴＢＳ洗膜后，用一抗工作液孵膜，４℃过
夜（１６～１８ｈ）；ＴＴＢＳ洗膜４次后，用 ＨＲＰ标记二抗
工作液孵膜，３７℃ １ｈ；ＴＴＢＳ洗膜４次后，将膜片移
入ＤＡＢ工作液中，避光显色５～１０ｍｉｎ；终止显色反
应后，自来水漂洗，自然晾干后扫描并采集图像。本
研究检测 ＥＰＯ（分子质量为 ３０×１０３）时，一抗为
ＥＰＯ兔多克隆抗体（１∶２５０），二抗为 ＨＲＰ标记羊抗
兔ＩｇＧ（１∶２５００）；检测内参照 βａｃｔｉｎ（分子质量为
４３×１０３）时，一抗为小鼠抗 βａｃｔｉｎ单克隆抗体（１∶
３００），二抗为ＨＲＰ标记羊抗小鼠ＩｇＧ（１∶２５００）。
２．８ 图像分析 免疫组化图像在 ＮｉｋｏｎＰ４０显微
镜照相，用 ｉｍａｇｅｐｒｏｐｌｕｓ６０图像分析软件对 ＨＵ
ＶＥＣ１ＥＰＯ染色进行半定量分析，光镜下蓝色产物
为阳性反应物。每组观察 ３张细胞爬片，每片在
２００倍镜下选取互不重叠的３个视野，分别测量其
平均Ａ。
２．９ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ膜片分析 用ＳｃａｎＭａｋｅｒＥ６系统
扫描，用Ｑｕａｎｔｉｔｙｏｎｅ４．５．１版图像分析软件（Ｂｉｏ
Ｒａｄ公司产品）测定ＥＰＯ蛋白和内参βａｃｔｉｎ蛋白各
显色条带的平均Ａ，以ＥＰＯ与对应的内参βａｃｔｉｎ蛋
白显色条带Ａ的比值表示ＥＰＯ蛋白相对表达量。
２．１０ 统计学处理 试验结果采用ＳＰＳＳ１１５版本
进行处理。每组数据以 珋ｘ±ｓ表示，采用单因素方差
分析（ＡＮＯＶＡ），组间两两比较用 ＳＮＫ法，Ｐ＜００５
表示为差异有显著性。
３ 结果
３．１ 熟地黄水提液含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１增殖的
影响 结果显示，与同浓度 ＮＳ血清组比较，地黄水
提物６，１０ｇ·ｋｇ－１组５％含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１有
显著促增殖效应（Ｐ＜００５）；地黄水提物６ｇ·ｋｇ－１
组１０％含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１有显著促增殖效应
（Ｐ＜００５），１０ｇ·ｋｇ－１组１０％ 含药血清有促增殖
趋势，但无显著性意义；而地黄水提物６，１０ｇ·ｋｇ－１
组２０％含药血清均能够促进 ＨＵＶＥＣ１增殖，具有
显著性差异（Ｐ＜００５）见表１。
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表１ 熟地黄水提物含药血清对ＨＵＶＥＣｓ１增殖的影响（Ａ，珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ５％血清 １０％血清 ２０％血清
生理盐水 － ０７６±００２６ ０９３±００３８ ０９９±００２４
熟地黄水提物 ３ ０７８±００４５ ０８９±００２４ １１０±００９４
６ ０９９±００１９１） １１３±００４７１） １１８±００８８１）
１０ １０４±００６３１） １０９±００５８ １１８±００５５１）
注：与相同浓度的ＮＳ组比较１）Ｐ＜００５
３．２ 熟地黄水提物含药血清对 ＨＵＶＥＣｓ１表达
ＥＰＯ影响的结果 ＨＵＶＥＣｓ１细胞形态轮廓清楚，
ＥＰＯ免疫反应阳性着色位于细胞胞浆区，核未着
色，呈空泡状。与５％ＮＳ血清组比较，熟地黄水提
物３，６ｇ·ｋｇ－１组相同浓度含药血清 ＥＰＯ免疫反应
阳性细胞平均 Ａ均显著增加（Ｐ＜００５）；与１０％，
２０％ ＮＳ血清组比较，熟地黄水提物３，６，１０ｇ·ｋｇ－１
组１０％含药血清ＥＰＯ免疫反应阳性细胞平均 Ａ均
显著增加（Ｐ＜００５），见表２。
３．３ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析显示：与
表２ 熟地黄水提物含药血清诱导的ＥＰＯ阳性的ＨＵＶＥＣｓ１（Ａ，珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ５％血清 １０％血清 ２０％血清
生理盐水 － ０３７±００２０ ０４３±００２８ ０５９±００２３
熟地黄水提物 ３ ０４９±００１９１） ０６０±００２９１） ０７０±００７６１）
６ ０６４±００４０１） ０７３±００３６１） ０７９±００６３１）
１０ ０３８±００３５ ０６９±００４１１） ０７４±００３２１）
注：与相同浓度的ＮＳ组比较１）Ｐ＜００５
５％，１０％，２０％ ＮＳ血清组比较，６ｇ·ｋｇ－１熟地黄
水提物同等浓度含药血清各组 ＥＰＯ相对条带吸光
度（Ａ）均显著增高（Ｐ＜００５），１０％，２０％含药血
清组比相应浓度 ＮＳ血清组增加 ３倍多。提示熟
地黄对内皮细胞 ＥＰＯ蛋白表达有明显上调作用
（表３）。
表３ 熟地黄水提物含药血清诱导ＥＰＯ表达（Ａ，珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ５％血清 １０％血清 ２０％血清
生理盐水 － ０１４±００４６ ０１６±０００６ ０２４±００２７
熟地黄水提物 ６ ０４１±００４３１） ０６９±０１９６１） ０８５±００３５１）
注：与相同浓度的ＮＳ组比较１）Ｐ＜００５
４ 讨论
缺血性心脑血管疾病，如缺血性中风、冠心病
心肌缺血、梗死、血管性痴呆等的治疗都依赖于治疗
性血管新生，以改善缺血区血供。红细胞生成素
ＥＰＯ是受缺氧调节的造血因子，首先被发现在肾脏
合成。内皮细胞表达 ＥＰＯ，ＥＰＯ通过自分泌或旁分
泌机制促进内皮前体细胞和内皮细胞增殖、迁
移［７９］，从而启动血管新生。近年发现，ＥＰＯ在脑血
管内皮同样表达［５］，不仅对抗缺血大鼠神经元凋
亡，并能促进缺血脑血管内皮细胞存活和血管新生，
帮助脑缺血局部血流重建［５，１０］对脑具有保护作用。
本实验首次报道熟地黄含药血清对血管内皮细
胞的增殖效应，并从调节ＥＰＯ表达的角度探讨了含
药血清促进内皮细胞增殖的机制。结果表明，６ｇ·
ｋｇ－１熟地黄２０％，１０％，５％含药血清有显著的促内
皮细胞增殖效应。形态学结果显示，熟地黄含药血
清促进ＥＰＯ在内皮细胞的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ半定量
结果支持上述结论：１０％，２０％含药血清组 ＥＰＯ表
达比相应浓度 ＮＳ血清组增加３倍以上，提示熟地
黄含药血清可能通过 ＥＰＯ途径调控内皮细胞增殖
和迁移，从而诱导和启动缺血区域血管新生，这可能
是临床使用熟地黄治疗众多缺血性疾病如中风、冠
心病等作用的共同靶点。
祖国医学认为：肝藏血，肾藏精，肝肾同源，精血
可以相互化生。而现代研究发现：ＥＰＯ早期产生于
肝，后期合成于肾，作用于骨髓促进造血，又作用于
脑抗神经元凋亡，并促进脑微血管新生，对缺血脑具
有保护作用。由此可见：ＥＰＯ与中医理论中的“精”
有高度的吻合性。“补肾填精生髓充脑”治则是中
医药临床广泛用于痴呆、脑血管疾病治疗的主要手
段。《本草纲目》把熟地黄归于“填骨髓”类，现代研
究证实熟地黄有良好的保护骨髓、促进骨髓造血生
血作用［１１］。熟地黄含药血清上调 ＥＰＯ表达，为其
滋阴补血机制提供了实验依据，同时提示熟地黄上
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调ＥＰＯ表达可能是其补血生精、生髓治疗脑部疾患
的可能机制之一。但熟地黄何种成分上调 ＥＰＯ表
达以及上调ＥＰＯ表达的机制尚需进一步深入研究。
［参考文献］
［１］ ＰｒｉｅｓＡＲＫＷ．Ｎｏｒｍａｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ［Ｊ］．ＨａｎｄｂＥｘｐＰｈａｒｍａｃｏｌ，
２００６，１７６：１．
［２］ 崔 瑛，侯士良，颜正华，等．熟地黄对毁损下丘脑弓状核大
鼠学习记忆及海马 ｃｆｏｓ，ＮＧＦ表达的影响［Ｊ］．中国中药杂
志，２００３，２８（４）：３６２．
［３］ 崔 瑛，颜正华，侯士良，等．熟地黄对毁损下丘脑弓状核大
鼠学习记忆及下丘脑垂体肾上腺海马轴的影响［Ｊ］．中药
材，２００４，２７（８）：５８９．
［４］ ＫｅｒｔｅｓｚＮ，ＷｕＪ，ＣｈｅｎＴＨ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｉｎ
ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙ，２００４，２７６
（１）：１０１．
［５］ ＭａｒｔｉＨＨ．Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎａｎｄｔｈｅｈｙｐｏｘｉｃｂｒａｉｎ［Ｊ］．ＪＥｘｐＢｉ
ｏｌ，２００４，２０７（１８）：３２３３．
［６］ 万 东，罗 勇，谢 鹏．电刺激小脑顶核对缺血／再灌注大
鼠脑组织内ＮＦκＢ活性及其活化的影响［Ｊ］．中华物理医学
与康复杂志，２００６，２８（１０）：６６０．
［７］ ＡｎａｇｎｏｓｔｏｕＡ，ＬｅｅＥＳ，ＫｅｓｓｉｍｉａｎＮ，ｅｔａｌ．Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｈａｓ
ａｍｉｔｏｇｅｎｉｃａｎｄｐｏｓｉｔｉｖｅｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃｅｆｅｃｔｏｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ
［Ｊ］．ＰＮＡＳ，１９９０，８７（１５）：５９７８．
［８］ ＧｅｏｒｇｅＪ，ＧｏｌｄｓｔｅｉｎＥ，ＡｂａｓｈｉｄｚｅＡ，ｅｔａｌ．Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｐｒｏ
ｍｏｔｅｓｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｎｄａｄｈｅｓｉｖｅｐｒｏｐ
ｅｒｔｉｅｓｉｎａＰＩ３ｋｉｎａｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ［Ｊ］．ＣａｒｄｉｏｖａｓｃＲｅｓ，
２００５，６８（２）：２９９．
［９］ ＭｕｌｅｒＥｈｍｓｅｎＪ，ＳｃｈｍｉｄｔＡ，ＫｒａｕｓｇｒｉｌＢ，ｅｔａｌ．Ｒｏｌｅｏｆｅｒｙｔｈ
ｒｏｐｏｅｔｉｎｆｏｒａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｖａｓｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ：ｆｒｏｍｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅ
ｖｅｌｏｐｍｅｎｔｔｈｒｏｕｇｈａｄｕｌｔｈｏｏｄ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉ
ｏｌ，２００６，２９０（１）：Ｈ３３１．
［１０］ ＣｈａｎｇＹＳ，ＭｕＤ，ＷｅｎｄｌａｎｄＭ，ｅｔａｌ．Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｉｍｐｒｏｖｅｓ
ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｄｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｏｕｔｃｏｍｅｉｎｎｅｏｎａｔａｌｓｔｒｏｋｅ［Ｊ］．Ｐｅｄｉ
ａｔｒＲｅｓ，２００５，５８（１）：１０６．
［１１］ 李 林，魏海峰，张 兰，等．中医“肾生髓，脑为髓海”现代生
物学基础探讨［Ｊ］．中国中药杂志，２００６，３１（１７）：１３９７．
Ｅｆｅｃｔｓｏｆｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓｅｒｕｍｏｎｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄ
ＥＰＯｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｉｌｉａｌｃｅｌｓ
ＺＨＵＨｕｉｆｅｎｇ１，ＷＡＮＤｏｎｇ２，ＣＨＥＮＹｉ１，ＸＵＸｉａｏｙｕ１，ＣＨＥＮＬｉ３，ＨＥＺｈｅｎｇｇｕａｎｇ４
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ＆ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４００７１６，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｍｅｒｇｅｎｃｙ，ＦｉｒｓｔＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４００７１６，Ｃｈｉｎａ；
４．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００４７，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｉｃａｃｙｏｆｔｈｅｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔｄｅｃｏｃｔｉｏｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｉｎｅｎｈｅｎｃｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｏｆＨＵＶＥＣｓ１ａｎｄＥＰＯｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｏｇｉｖｅｌｉｂｒａｔｏｒｙｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｔｏｎｉｆｙｉｎｇｂｌｏｏｄａｎｄｋｉｄｎｅｙｔｈｅｒａｐｙｗｉｔｈｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＴｗｅｎｔｙｆｏｕｒｍａｌｅＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｅｖｉｄｅｄｉｎｔｏ４ｇｒｏｕｐａｎｄａｄｍｉｎｉｓｔｒｅｒｅｄｂｙｇａｓｔｒｏｇａｖａｇｅｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔｄｅ
ｃｏｃｔｉｏｎｏｆ３，６，１０ｇ·ｋｇ－１ｏｎｃｅａｄａｙｆｏｒ１ｗｅｅｋｓ．Ｕｓｉｎｇｓｅｒｕｍｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＨＵＶＥＣｓ１ｃｅｌｗａｓｄｅｔｅｒ
ｍｉｎｅｄｂｙＭＴＴｃｈｒｏｍａｔｏｍｅｔｒｙａｔ４８ｈｐｏｉｎｔｓｂｙｃｏｃｕｌｔｕｒｉｎｇｗｉｔｈｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔ
ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｔｉｏｎｏｆＥＰＯｏｎＨＵＶＥＣｓ１ｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｍｍｕｎｉｔｙｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．ＮＳｓｅｒｕｍｗａｓｔａｋｅｎａｓ
ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＡｆｔｅｒｔｈｅＨＵＶＥＣｓ１ｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇｗｉｔｈｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｆｏｒ４８ｈ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＮＳｓｅｒｕｍ，２０％ ｓｅｒｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｒｅｈ
ｍａｎｎｉａｒｏｏｔ（６ｇ·ｋｇ－１）ｃｏｕｌｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＨＵＶＥＣ１（Ｐ＜００５）ａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｔｉｏｎｏｆ
ＥＰＯｏｎＨＵＶＥＣｓ１（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＲｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔｅｘｔｒａｃｔｈａｓｇｏｏｄａｃｔｉｏｎｓｏｆｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＨＵＶＥＣｓ１ａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅ
ＥＰＯｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｉｓｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｎｏｕｒｉｓｈｉｎｇｙｉｎａｎｄｂｌｏｏｄａｎｄｔｏｎｉｆｙｉｎｇｅｓｓｅｎｃｅｏｆｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｒｅｈｍａｎｎｉａｒｏｏｔｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓｅｒｕｍ；ＨＵＶＥＣ１；ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｎｏｕｒｉｓｈｉｎｇｙｉｎａｎｄｂｌｏｏｄ；ＥＰＯ
［责任编辑 古云侠］
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第３３卷第１３期
２００８年７月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００８