全 文 ：茶氨酸和厚朴提取物对 z日龄小鸡分离应激
过程的影响
杨秋生 t o徐平湘 t o李宇航 t o姜 山 u o张 旭 u o薛 明 t3
ktq首都医科大学 化学生物学与药学院 o北京 tsssy|~
uq首都医科大学 生物工程学院 o北京 tsssy|l
≈摘要   目的 }研究茶氨酸对 z日龄小鸡应激反应的影响 o与厚朴提取物 kux °ª# ®ªpt l合用是否具有协同作
用 ∀方法 }茶氨酸 ktu1xouxoxs °ª# ®ªpt腹腔注射 vs °¬±后 o记录分离小鸡和未分离小鸡自主活动 !分离发声和福
尔马林诱导的疼痛反应的影响 ∀结果 }茶氨酸 v个剂量和厚朴提取物 kux °ª# ®ªpt l能显著减轻分离小鸡的悲鸣
kΠ  s1sxoΠ  s1stl~茶氨酸 uxoxs °ª# ®ªpt对分离应激引起的痛觉钝抑 k¤±¤¯ª¨ ¶¬¤l有对抗作用 ∀各组对自主活
动均无明显影响 ∀结论 }茶氨酸与厚朴单独应用可以缓解小鸡分离应激反应 o提示对紧张 !焦虑和抑郁症有潜在的
治疗作用 ∀不同剂量茶氨酸与厚朴提取物 ux °ª# ®ªpt合用协同作用不明显 ∀
≈关键词   应激 ~茶氨酸 ~厚朴提取物 ~z日龄小鸡 ~分离试验
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2usws2sw
≈收稿日期   ussz2sx2us
≈通讯作者   3 薛明 oר¯}kstsl{v|ttxuso∞2°¤¬¯}÷ ∏¨ ° ƒ ¦¦2
°∏q §¨∏q¦±
现代社会中 o应激 k¶·µ¨¶¶l是许多疾病的基本发
生因素 o如高血压 !肿瘤和情感性疾病等 ∀随着社会
压力的逐渐增大 o应激诱发的疾病逐年增加 ∀应激
是指机体受到各种内外环境因素刺激时所出现的非
特异性全身反应 o引起应激的 /应激源 0包括生理因
素 !环境因素及心理文化因素 o其主要特征为机体受
到刺激后发生肾上腺 2垂体 2下丘脑活性增强 o伴有
神经 !内分泌和行为等变化 ≈t  ∀
茶氨酸 k·«¨ ¤±¬± o¨系统命名为 Ν2乙基 Χ2Λ2谷氨
酰胺 oΧ2ª¯∏·¤°¼¯ ·¨«¼¯ ¤°¬§¨ l是茶叶中特有的一种氨
基酸 ∀ t|xs年由日本首次从茶叶中提取 o并确定了
其化学结构 ∀茶氨酸具有多种生物学活性 }如降低
血压 !直接和间接的抗肿瘤作用 !缓解紧张 !提高学
习及记忆能力等 ∀据国外临床验证服用茶氨酸 o对
慢性应激引起的抑郁和焦虑有一定的防治效果 ≈u  ∀
厚朴 Μαγνολια οφφιχιναλισ • «¨§ ·¨• ¬¯¶属木兰科
木兰属乔木 o其树皮为我国传统芳香化湿类中药 ∀
主要含厚朴酚 !和厚朴酚及生物碱等成分 ∀含有厚
朴的汤剂在临床上治疗精神焦虑 !抑郁 ≈v 等具有很
好疗效 o引起广泛关注 ∀
本试验的目的在于观察茶氨酸对小鸡分离应激
和疼痛模型的影响 o同时检测茶氨酸与厚朴提取物
合用是否具有增强作用 ∀
1 材料和方法
1q1 动物
北农大 v号小型粉壳商品代雄性雏鸡 o中国农
业大学动物科技学院 2北农大种禽公司提供 ∀参照
5用户手册 6其生活习性接近自然 ∀
1q2 药品
茶氨酸 k׫¨ ¤o||h o批号 ussysvtylo厚朴提取
物 k‹∞o类白色半结晶状物 o批号 ussysytuo厚朴酚
与和厚朴酚为 {sh l均由美国 ׊ …¬²·¨®o公司
提供 ∀
1q3 仪器 !试剂
程控自主活动箱 Œ2uk中国医学科学院药物研究
所研制 lo直径 vs ¦°o内装 w个红外线探头 o记录小鸡
自主活动状况 ∀电子天平 kŠ i Š× p uss型 o常州 l∀
乙醇 !甲醛均为分析纯 k北京化工厂 ousswszt{l∀
1q4 方法
小鸡孵出 t §后 o放于动物盒中 o半开放式立体
笼养 oux只 r盒 ∀每日喂食 y次 o自由进食与饮水 ∀
室温 kuy ? tl ε ∀湿度 kxs ? tslh ∀自然光和人
工光照相结合 o光照时间为 tx «# §pt o成活率
|xh ∀每日更换垫料 o小鸡从一个盒子换入另一个
盒子时 o用手轻触小鸡 o使其适应 o以减少未来实验
#swsu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
引起的过度反应 ∀连续喂养 z §o第 { §开始试验 ∀
1q4q1 分组 本实验分组为 u水平 k分离与未分
离 lv因素 k剂量分别为 tu1xouxoxs °ª# ®ªpt o约为
人的 w ∗ ty倍 l设计 o每组动物 us只 ∀ ׫¨ ¤溶解于
生理盐水中 ∀ ‹∞先用乙醇少量溶解 o缓慢加入生
理盐水至所需浓度 ∀试验开始前 vs °¬±腹腔注射
给药 ou ˏ# ªpt o以等量溶媒为对照 ∀
1q4q2 自主活动 实验中 o分离组小鸡每次 t只单
独放入自主活动箱 ∀未分离组小鸡每次 t只放入自
主活动箱的同时 o将另外 v只小鸡一起放在活动箱
的侧部 o使其可以清楚地看到自己的同伴 ∀ °≤专用
程序分别记录每只小鸡 v °¬±的活动次数 ∀
1q4q3 分离发声 k¶¨³¤µ¤·¬²± √²¦¤¯¬½¤·¬²±l试验 ≈w 
用 ’ ¼¯°³∏¶• ≥ p tss数字声音记录仪记录各组小
鸡鸣叫 o每只 v °¬±∀记录仪麦克风置于小鸡头部 {
¦°处 ∀声音记录后存入计算机 ∀利用音频处理软
件 k≤²²¯ §¨¬·³µ² u1slo对小鸡叫声进行峰值频率
k°ƒl和声强 k§…l分析 ≈x2z  ∀
1q4q4 疼痛试验 用微量注射器将 s1th福尔马
林注入小鸡足跖 oxs ˏr只 ∀观察小鸡对福尔马林
的反应 o记录小鸡的抬脚次数 !抬脚时间 k‹∏ª«¨ ¶i
≥∏©®¤ot||to≥∏©®¤i • ¨¨ §ot||wl和啄脚次数 ≈{  ∀
1q5 统计学处理
数据表示成 cξ ? σo用 ≥°≥≥软件 ktu1s版 l进行 τ
检验和方差分析 ∀
2 结果
2q1 ׫¨ ¤和 ‹∞提取物对小鸡自主活动和分离发
声的影响
雄性小鸡 o随机分为 |组 }׫¨ ¤低 !中 !高剂量
组 ktu1xouxoxs °ª# ®ªpt l~‹∞kux °ª# ®ªpt lo不
同剂量 ׫¨ ¤加 ‹∞组 kux °ª# ®ªpt l∀记录各组自
主活动和分离发声情况 k表 tl∀
表 t 茶氨酸和厚朴提取物对小鸡自主活动和分离发声的影响 kcξ ? σ, ν € usl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
自主活动
分离发声
°ƒ §…
分离 p vv1t ? y1y w w|t1su ? t|v1t{ p uz1sx ? s1ws
未分离 p vv1s ? z1| w vus1ts ? tyx1zy p vt1yw ? s1ytul
׫¨ ¤ tu1x vu1| ? z1y w vww1vu ? uv|1xv p u|1sz ? s1ywtl
ux1s vs1v ? {1w v |||1z| ? t|v1s| p u|1wt ? s1z{tl
xs1s vu1t ? |1t w tw|1t{ ? t{y1tv p vs1|y ? s1zsul
‹∞ ux1s uw1x ? |1{ w {|y1tt ? tzz1xy p u|1|z ? s1{|ul
׫¨ ¤n ‹∞ tu1x vs1t ? {1| w |yx1ts ? uus1z| p uz1yt ? s1zy
ux1s vt1v ? |1v w ywt1zx ? uuu1{t p uz1|z ? s1yx
xs1s vt1| ? z1y w xzw1wy ? uuu1{v p u{1xx ? s1zw
注 }与分离组相比 tl Π  s1sxoul Π  s1stk表 u同 l
结果表明 o在实验剂量下 o׫¨ ¤对自主活动没
有影响 o‹∞对小鸡自主活动虽有轻度抑制 o但无显
著性差异 ∀分离发声的检测表明 o分离组小鸡与未
分离组小鸡相比 o频率改变不明显 o但叫声明显增强
k§…负值减小 oΠ  s1stlo说明分离应激可以使叫
声增强 ∀给药后鸣叫强度减小 kΠ  s1sxoΠ 
s1stl∀而与分离对照组相比 o二药合用以后 §…不
变而随着 ׫¨ ¤浓度增加 °ƒ有减小趋势 o需要进一
步试验证实 ∀由于药物对自主活动均无明显影响 o
在此剂量下不具有镇静作用 o说明小鸡发声强度减
少与镇静作用无关 ∀
2q2 ׫¨ ¤对福尔马林诱导的足跖疼痛的影响
分组同前 ∀观察福尔马林致痛后 v °¬±小鸡的
行为表现 ∀注射福尔马林引起小鸡炎性疼痛 ∀分离
组小鸡疼痛钝抑 k¶·µ¨¶¶2¬±§∏¦¨§ ¤±¤¯ª¨ ¶¬¤lo疼痛持
续时间明显减少 kΠ  s1stlo说明分离应激使疼痛
感觉减弱 ∀ ׫¨ ¤于 ux °ª# ®ªpt和 xs °ª# ®ªpt单
独应用 o可以增加抬脚持续时间 o提高疼痛感觉
kΠ s1sxlo说明其有对抗分离应激导致疼痛减弱
的作用 ∀ ‹∞kux °ª# ®ªpt l单独应用对疼痛减弱反
应没有影响 ≈|  ∀从本实验检测来看 o不同剂量的
׫¨ ¤合用 ‹∞kux °ª# ®ªpt l对此模型协同作用不
明显 k表 ul∀
3 讨论
本实验的目的是观察药物对小鸡分离应激行为
的影响 ∀离开群体可以使小鸡分离发声增加而对福
尔马林引起的疼痛感觉减弱 ∀分离模型 k¶¨³¤µ¤·¬²±
°²§¨ ¶¯l包括灵长类动物的母子分离 !群居动物的
孤养等 ∀研究表明 o动物母子分离后出现激越 !哀鸣
等特征性表现 ∀最有价值的分离动物模型是除人类
#twsu#
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表 u 茶氨酸和厚朴提取物对小鸡福尔马林
诱导的疼痛反应的影响
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
抬脚频率
抬脚时间
r¶
啄脚次数
r次
分离 p vt1t ? |1t y|1u ? z1{ s1ts
未分离 p ww1| ? ts1t |v1t ? {1vul s1ts
׫¨ ¤ tu1x ws1t ? |1{ {w1u ? tw1y s1tx
ux1s vx1x ? |1y {z1u ? tt1ttl s1xs
xs1s ws1u ? {1t {|1t ? z1wstl s1xs
‹∞ ux1s v|1| ? |1v zy1| ? ts1u s1ss
׫¨ ¤n ‹∞ tu1x wu1v ? |1u z{1z ? tt1x s1ts
ux1s wt1z ? {1| {{1| ? {1ztl s1ts
xs1s v|1x ? z1{ {|1v ? |1ttl s1tx
之外的灵长类 ∀然而由于稀少和昂贵 o很少有人用
其进行药物筛选或作用机制的研究 ∀事实上 o许多
动物如猫 !狗 !鼠和鸡等都会因为与群体隔离出现绝
望现象 ∀其中 o小鸡分离模型 k¶¨³¤µ¤·¬²± °²§¨ ¯ ¬±
¦«¬¦®¨ ±l是最典型的抗议 2绝望 k³µ²·¨¶·2§¨ ¶³¤¬µl模
型 ∀孵出 t周的小鸡 o单独隔离 o开始是困苦鸣叫
k¶«µ¬¯¯ ¦¤¯ ¶¯ ·¨µ° §¨ §¬¶·µ¨¶¶ √²¦¤¯¬½¤·¬²± ·¨¶·t|{xo
Š¤µ§± µ¨lo频度很高 o典型者 t «后减低 ∀抗焦虑药 !
抗抑郁药等均能明显影响困苦鸣叫的时间 ~而抗胆
碱药和中枢兴奋药则无效 ≈ts  ∀
在小鸡分离应激的行为改变 kƒµ²«° i • ¤¯ 2¯
±¤∏ot|{v~ Š¤¯ ∏¯³ i ≥∏¤µ¨½ot|{s~²± ¶¨i ‹¤µ√ ¼¨o
t|{z~²± ¶¨i  µ¨¼ot|{{l中 o分离发声 k ¨¨ ®¨ µi
… ¤¨±ot|{sl和痛觉消失 k≥∏©®¤ i ‹∏ª«¨ µ¶o t||to
t||wl是最常用的两个指标 ∀分离发声方法比较简
单 o但需要摄像机 !声音接收系统和 °≤分析程序 o
限制了其应用 ≈ts  ∀近年来随着医学科学的发展 o特
别是分子生物学 !医学影像 !°≤程序的应用 o为应激
等研究提供了新方法 !新思路 ∀与生物工程系合作 o
利用音频处理软件 ≤²²¯ §¨¬·³µ²u1s中的频谱分析 o
对小鸡叫声进行峰值频率 k°ƒl分析 ∀峰值频率是
在一段音频频谱中声强值最高处的音频频率值 o为
反映该音频信号特性的指标之一 ∀此外 o峰值频率
对应的强度值可以表示为小鸡叫声在这个频率上所
占成份最多 o因此也可把声强 k§…l值作为分析比较
的一种途径 ≈x2z  ∀结果表明 o在本实验条件下 o分离
组小鸡比未分离组小鸡的鸣叫在声强 k§¥l上差别
明显 kΠ  s1stl∀说明分离应激使小鸡叫声增强 ∀
不同剂量的 ׫¨ ¤和 ‹∞单独应用对小鸡分离发声
有明显抑制 kΠ  s1sxoΠ  s1stlo具有潜在的抗焦
虑作用 ∀同时对自主活动没影响 o不具有镇静催眠
特性 ∀这些药理学特征正是人们所期待的 ∀结合临
床病人用药习惯 o动物试验多采用灌胃给药 o我们采
用腹腔注射主要是在尽可能排除药物影响的同时观
察方法的可行性 ∀
应激 !焦虑和抑郁是当前医学生物学和社会科
学研究的热点之一 ∀利用天然植物制剂改善这些症
状已成为国际上的流行趋势 ≈tt  ∀ ׫¨ ¤对中枢的作
用机制可能与其竞争谷氨酸受体 o抑制谷氨酸的兴
奋毒性有关 ≈tuotv  ∀此外 o׫¨ ¤还能增加纹状体的多
巴胺浓度 !减少 x2‹×的合成 ≈tw  ∀这些神经递质与
精神和行为活动密切相关 ∀厚朴资源丰富 o其主要
成分厚朴酚与和厚朴酚 ks1u ∗ s1x °ª# ®ªpt l对小
鼠有明显的抗焦虑作用 ≈tx  ∀ ׫¨ ¤和 ‹∞均具有心
境稳定 k¤ ©¨¨¯¬±ª²©º¨¯ 2¯¥¨ ¬±ªlo舒缓紧张 k³«¼¶¬¦¤¯
¤±§° ±¨·¤¯ µ¨ ¤¯¬¤·¬²±l的药理作用 o且无明显的不良
反应 o有望成为不错的中药制剂 ∀
研究发现雏鸡和哺乳动物的学习记忆机制 !情
绪机制有很多相似之处 o并在相关的脑结构及功能
上具有一定的可比性 ≈ty  ∀这在一定程度上为研究
人的学习 !记忆 !情绪反应提供了参考 ∀参照国外方
法 o研究了 ׫¨ ¤和 ‹∞对小鸡分离应激行为的影
响 o为其临床应用提供了初步数据 ∀
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册 ousssouukwl}uwwq
≈w  Š ≥·¨±±¬¶• ¤¶·²±o Ž¨ ±± ·¨« ≥∏©®¤q ≤«¯²µ§¬¤½¨ ³²¬¬§¨ µ¨√ µ¨¶¨¶
¶²¦¬¤¯2¶¨³¤µ¤·¬²±2¬±§∏¦¨§√²¦¤¯¬½¤·¬²± ¤±§¤±¤¯ª¨ ¶¬¤¬± ¼²∏±ª§²2
° ¶¨·¬¦©²º ≈¯ q ∞¬³ ≤ ¬¯± °¶¼¦«²³«¤µ°¤¦²¯o t||yowkwl}vwzq
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≈{  ≥∏©®¤Žo • ¨¨ §‘≤q ≤²±¶·µ∏¦·√¤¯¬§¤·¬²± ²©¥¨ «¤√¬²µ¤¯ ¬±§¬¦¨¶
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µ¤·¶≈ q中草药 ousswovxkul}t{uq
≈ts  徐淑云 q药理实验方法学 ≈   qv版 q北京 }人民卫生出版社 o
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≈tx  王立青 o江荣高 o陈慧芳 o等 q厚朴酚与和厚朴酚药理作用的
研究进展 ≈ o中草药 oussxovyktsl}tx|tq
≈ty  肖 颖 o李 兵 q日龄雏鸡的学习记忆模型及其分子机制和
药理学研究进展 ≈ q°µ²ª …¬²¦«¨ ° …¬²³«¼¶oussxovuktul}
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Εφφεχτσ οφ τηεανινε ανδ ηουπυ εξτραχτ ιν z2δαψ χηιχκ
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(t. Σχηοολοφ Χηεµ ιχαλΒιολογψ & Πηαρµ αχευτιχαλΣχιενχεσ, ΧαπιταλΜεδιχαλΥνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsssy|, Χηινα;
u. Σχηοολοφ Βιοενγινιεερινγ , ΧαπιταλΜεδιχαλΥνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsssy|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬¨¤°¬±¨·«¨ ¤¥¬¯¬·¬¨¶²©·«¨ ¤±¬±¨¤±§«²∏³∏ ¬¨·µ¤¦·¶k‹∞l ·²µ¨√ µ¨¶¨ ¥¨ «¤√¬²µ¤¯ ¬±§¨ ¬¨ ¶k¶¨³¤µ¤·¬²±
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¥¨ ¬±ª·¨¶·¨§¬± ·«¨ ³µ¨¶¨±¦¨ ²©·«µ¨¨ ¶²¦¬¤¯ ¦²°³¤±¬²±¶²µ¬± ¬¶²¯¤·¬²± ©²µv2°¬± ²¥¶¨µ√¤·¬²± ³¨ µ¬²§q ⁄ ³¨¨ ±§¨ ±·° ¤¨¶∏µ¨¶º µ¨¨} ¤l
≤«¬¦®¶º µ¨¨ ³¯¤¦¨§¬±·²¤± ¬±©µ¤µ¨§µ¤¼ §¨ √¬¦¨ ·²¦¤¯¦∏¯¤·¨·«¨ ¬µ¶³²±·¤± ²¨∏¶¤¦·¬√¬·¬¨¶¥¼ ¤¦²°³∏·¨µ³µ²ªµ¤° ¥l µ¨¦²µ§·«¨ ¶¨³¤µ¤·¬²±
√²¦¤¯¬½¤·¬²±¶©²µ¨ √ µ¨¼ ¦«¬¦®q ¦l Œ± ·«¨ ¬¨³¨ µ¬° ±¨·²©¶·µ¨¶¶2¬±§∏¦¨§¤±¤¯ª¨ ¶¬¤o xs ∏²©©²µ°¤¯¬± ks1th l º¤¶¬±­¨¦·¨§¬±·²·«¨ ³¯¤±·¤µ
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¤©©¨¦··«¨ ¶³²±·¤± ²¨∏¶¤¦·¬√¬·¬¨¶¬± ·«¬¶¦«¬¦®°²§¨ ¯º¬·«²∏·¦¤∏¶¬±ª¶¨§¤·¬²±q Χονχλυσιον: ׫¨ ¶¨ µ¨¶∏¯·¶¶∏ªª¨ ¶··«¤··«¨ ¤±¬±¨¤±§‹∞
¬± ·«¨ §²¶¤ª¨ ¶°¤¼ ¥¨ ∏¶¨©∏¯ ¬± °²§∏¯¤·¬±ª¤±¬¬¨·¼ ¶·¤·¨¶q ׫¨ ¼ ¤µ¨ ¶¨ °¨¶±² ¶¼± µ¨ª¬¶° ¬± ·«¨ ¦«¬¦® °²§¨ q¯
[ Κεψ ωορδσ] ¶·µ¨¶¶~ ·«¨ ¤±¬± ~¨ «²³∏2¨ ¬·µ¤¦·~ z2§¤¼2¦«¬¦®¶~ ¶¨³¤µ¤·¬²± °²§¨ ¯
≈责任编辑 刘  
征订启事
5中国天然药物 6是由中国药科大学与中国药学会共同主办的国家级药学学术期刊 oussv年 x月创刊 ∀以报道来自天然
产物的活性化合物的发现与改造 o以及其药效与药理作用机制为重点 o是具有我国独特优势的中药 !草药 !海洋药物 !生化药
物 !微生物药物 !民族药物 !民间药物进行国内外学术交流的重要窗口 ∀本刊主要报道天然药物创新性研究成果 o辟有思路与
方法 !综述 !论文 !简报 !技术交流 !快报 !药事法规等栏目 ~登载中药学 !天然药物化学 !药剂学 !药物分析学 !药理学 !毒理学 !
生物化学 !微生物学 !分子生物学及其相关学科的研究原著 o刊物体现了前沿性 !创新性 !科学性 !可读性的特点 o在高等院校 !
科研机构 !制药企业 !药检部门 !医疗单位拥有众多读者群 ∀ 5中国天然药物 6为双月刊 o„w开本 o {s页 o铜版纸精美印刷 o逢
单月 us日出版 o国内外公开发行 ∀国内定价每期 tx元 o全年 |s元 ∀国际连续出版物号 Œ≥≥‘}tyzu2vyxt~国内统一刊号 }≤‘
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第 vu卷第 t|期
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中 国 中 药 杂 志
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