全 文 ：羌活药材的色谱指纹图谱研究
古丽娜 #沙比尔 tou o崔亚君 t o郭 慧 t o王 炜 t o果德安 t3
ktq北京大学 药学院 o北京 tsss{v~
uq新疆中药民族药研究所 o新疆 乌鲁木齐 {vsssul
≈摘要   目的 }建立羌活药材的色谱指纹图谱 o为评价羌活药材的质量提供依据 ∀方法 }采用 °«¨ ±²° ±¨ ¬¨ ∏2
±¤≤t{ kul kwqy °° ≅ uxs °°ox Λ°l色谱柱 o乙腈 k„l2sqvh醋酸水 k…l为流动相梯度洗脱 o流速 t °# °¬±pt o检
测波长 vvs ±°o柱温 vs ε o洗脱时间 zs °¬±∀结果 }得到分离度较好的羌活 ‹ °≤ 2˜∂色谱指纹图谱 o标示了 z个
共有峰 ∀并采用对照品比对和 ‹ °≤ 2 ≥技术对其部分色谱峰进行了定性鉴别 ∀结论 }色谱指纹图谱分析方法为
全面控制羌活药材的质量提供了依据 ∀
≈关键词   羌活 ~‹ °≤ 2˜∂ 2 ≥~色谱指纹图谱
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlst2ssvs2sw
≈收稿日期   ussy2sv2u{
≈通讯作者   3 果德安 oר¯}kstsl{u{suzsso∞2°¤¬¯}ª§¤ƒ ¥­2
°∏q §¨∏q¦±
中药羌活为伞形科植物羌活 Νοτοπτερψγιυµ ινχι2
συµ ׬±ª!宽叶羌活 Ν1φορβεσιι …²¬¶¶或川羌活
Ν1φρανχηετιι …²¬¶¶的根及根茎 ∀有散表寒 !祛风湿 !
利关节等功效 ~用于治疗感冒风寒 !头痛无汗 ~风寒
湿痹 !项强筋急 !骨节酸痛 !风水浮肿 !痈疽疮毒
等 ≈t  ∀羌活根据形状可分为蚕羌 !人头羌 !竹节羌
和条羌 o根据产地可分为川羌和西羌 o川羌的来源以
羌活 Ν. ινχισυµ为主 o主产于四川 ∀西羌的来源为
羌活和宽叶羌活 u种 o主产于甘肃 !青海等地 ∀市场
上不同产地的羌活容易混淆 o使用者多据形状鉴别 o
这对经验的依赖性强 ∀近年来国内外对中药羌活所
含化学成分进行了较深入的化学研究工作 o分离鉴
定出了几十种香豆素类化合物 ∀羌活中主要含有挥
发油 !香豆素 o除此之外还含有糖类 !氨基酸 !有机
酸 !甾醇等 ≈u  ∀药典 ussx年版一部对羌活药材未作
含量测定要求 o仅通过测定其挥发油来控制质
量 ≈v  ∀但是仅用挥发油作为羌活药材质控指标 o难
于全面控制羌活的内在质量 ∀羌活的气相色谱指纹
图谱曾有文献报道 ≈w  o但对 ‹°≤指纹图谱的研究
尚未见报道 ∀为了更好地反映羌活活性成分 o有效
控制药材质量 o作者建立了评价羌活药材质量的液
相色谱指纹图谱分析方法 o对 ux批不同来源的羌活
药材进行了 ‹°≤指纹图谱和 ‹°≤ 2 ≥联用分析 o
以质谱的总离子流图进一步提供了与色谱图互补的
信息 ∀该实验方法可操作性强 o重现性好 o可用于羌
活药材的鉴别和质量控制 ∀
1 仪器与材料
1q1 仪器和试药 高效液相色谱仪 }„ª¬¯¨ ±·ttss
型高效液相色谱仪 o配二极管阵列检测器和 ≤«¨ °2
≥·¤·¬²±色谱工作站 o四元溶剂系统 !在线脱气机 !自
动进样器 !柱温箱 ∀ ≤±型液相色谱 2质谱联用仪
kƒ¬±±¬ª¤±  „×o≥¤± ²¶¨o≤„ lo配有 ∞≥Œ源及 ≤±
数据处理系统 ∀
‹°≤级乙腈 k×⁄公司 o≤¤±¤§¤l~色谱纯甲醇
k北京市华准化学试剂科技开发部 l~醋酸为分析纯
k北京化学试剂公司 l~水为高纯水 ∀
v种对照品为作者从羌活药材中分离得到 o经
˜∂ o ≥ot ‹ 2‘ • otv ≤ 2‘ • 谱分析鉴定为羌活醇 !
苯乙基阿魏酸酯和异欧前胡素 ~阿魏酸购自中国药
品生物制品检定所 k批号 szzv2|yszl~‹°≤检测 w
个对照品纯度均在 |{h以上 ∀
1q2 生药样品来源 羌活对照药材购自中国药品
生物制品检定所 k批号 tus|vx2usswsxl∀四川羌活
药材采自四川阿坝州地区 o其他 uv个羌活药材均购
自全国各地药店或医院 ∀由果德安教授鉴定为羌
活 o药材来源见表 t∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 液相色谱条件 } °«¨ ±²° ±¨ ¬¨ ∏±¤
≤t{ kul 色谱柱 kw1y °° ≅ uxs °°o x Λ°lo预
保护柱 } °«¨ ±²° ±¨ ¬¨o ≥ ¦¨∏µ¬·¼ Š∏¤µ§o流动相 „乙
#sv#
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼o ussz
表 t 羌活药材来源
‘²1 购买地 ‘²1 购买地
t 中国药品生物制品检定所 tw 辽宁沈阳药店
u 北京同仁堂药店 tx 安徽亳州药店
v 北京天衡药店 ty 辽宁抚顺药店
w 北京海淀药店 tz 山东药店
x 北京长春堂药店 t{ 安徽药店
y 北京南庆仁堂药店 t| 江西南昌药店
z 北京京隆堂药店 us 吉林药店
{ 上海医院 ut 宁夏药店
| 云南昆明药店 uu 甘肃药店
ts 云南西双版纳药店 uv 河北石家庄药店
tt 云南大理药店 uw 四川阿坝州
tu 新疆乌鲁木齐医院 ux 陕西榆林药店
tv 广东深圳医院
腈 o… s1vh 醋酸水 ∀梯度洗脱程序 }s ∗ vx °¬±o „
由 tsh ∗ uuh ~vx ∗ wx °¬±o„由 uuh ∗ xsh ~wx ∗
xx °¬±o„由 xsh ∗ xxh ~xx ∗ yx °¬±o„由 xxh ∗
yxh ~yx ∗ zs °¬±o„ yxh ~柱温 vs ε ~流速 t °#
°¬±pt ~检测波长 vvs ±°~进样量 ts ˏ∀
质谱分析条件 }²µ¥¤¬ ∞¬·¨±§ ≤t{色谱柱 kw1y
°° ≅ uxs °°ox Λ°l柱 o预柱 ²µ¥¤¬∞¬·¨±§≤t{ kw1y
°° ≅ tu1x °°ox Λ°l~流速 sq{ °# °¬±pt o分流
比 tΒvo进样量 us ˏo其他液相条件同前 ∀质谱检
测条件 }离子源为 ∞≥Œ源 o负离子检测 ~扫描范围 µ /
ζ tss ∗ t xss~鞘气 k‘u l流速 yx个单位 ~辅助气流
速 tx个单位 ~源电压 w1x ®∂ ~毛细管温度 vxs ε ~毛
细管电压 pwzqss ∂ ~管透镜补偿电压 p wsqss ∂ ∀
2q2 对照品溶液制备 精密称取阿魏酸 !羌活醇 !
苯乙基阿魏酸酯 !异欧前胡素各适量 o分别置于 t
°量瓶中 o用甲醇定容至刻度 ∀再分别精密吸取上
述对照品储备液各适量置 x °量瓶中 o用甲醇定容
至刻度配制成混合对照品溶液 o备用 ∀
2q3 供试品溶液制备 羌活药材粉碎 k过 ys目
筛 lo精密称取 squ ªo加甲醇 ts °o超声提取 wx
°¬±∀取上清液过 sqwx Λ°滤膜 o作为羌活药材供
试品溶液 ∀
2q4 精密度考察 精密吸取同一份羌活药材 k‘²q
uwl供试品溶液 ts ˏo连续进样 y次 o测得各共有
峰相对峰面积和相对保留时间的 • ≥⁄分别小于 uh
和 sqyh o表明仪器精密度良好 ∀
2q5 重复性考察 精密称取羌活药材 k‘²quwl粉
末 y份 o按 2q3项下制备供试品溶液 o分别进样 ts
ˏo测得供试品溶液各共有峰相对峰面积和相对保
留时间的 • ≥⁄分别小于 vh和 s1vh o表明重复性
良好 ∀
2q6 稳定性考察 精密吸取同一份羌活药材 k‘²q
uwl供试品溶液 o分别在 s ouoyotuouwow{ «进样 ts
ˏo测得各共有峰相对峰面积和相对保留时间的
• ≥⁄分别小于 v1uh和 th o表明样品溶液在 w{ «
内稳定 ∀
2q7 羌活指纹图谱的建立 分别精密吸取空白溶
剂 o混合对照品溶液及供试品溶液各 ts ˏ注入高
效液相色谱仪 o分别按 2q1色谱条件测定 o并记录
zs °¬±内的色谱图 o即得 ∀
共有峰的确定 }测定了 ux个羌活样品 ∀在 ux
份样品的指纹图谱中 o其相对保留时间及色谱峰较
稳定的峰有 z个 o确定为羌活共有峰为 touovowoxo
yoz号峰 ∀通过与对照品对照 o指认了其中 w个色
谱峰 ∀即 u号峰为阿魏酸 ~w号峰为羌活醇 ~x号峰
为苯乙基阿魏酸酯 ~y号峰为异欧前胡素 ∀典型色
谱图见图 t∀
图 t 羌活 k‘²quwl‹ °≤指纹图谱
2q8 羌活样品相似度分析 采用 /中药色谱指纹
图谱相似度评价系统 kussw „ l0软件进行数据处
理 o选取色谱图中的 z个共有峰 o对不同来源羌活药
材成分的指纹图谱进行相似度评价 ∀计算 t ∗ ux批
羌活药材的相似度分别为 s1|zos1yxos1{vos1x|o
s1zso s1w{o s1{|o s1z{o s1xwo s1{vo s1yyo s1wwo
s1{so s1{xo s1uvo s1{zo s1u|o s1wxo s1yso s1z|o
s1vsos1{{os1y{ot1ssos1z|∀结果表明 t和 uw号
样品相似度较高 o其他羌活药材的相似度值相差较
大 ∀
2q9 羌活药材中化学成分的 ‹°≤ 2 ≥分析及指认
为了尽可能多的了解 ‹°≤指纹图谱中各成分的
结构信息 o对四川阿坝州羌活药材进行了 ‹°≤ 2 ≥
分析 ∀羌活药材的供试品溶液及对照品溶液分别在
上述 ‹°≤ 2 ≥条件进行分析 ∀分析得到了 z个成
分的相对分子质量 o参考已有文献报道 ≈x 及对照品
对照 o对色谱图中的部分色谱峰进行了指认 o共鉴定
#tv#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t
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了 x个成分见表 u∀液相色谱图与总离子流图见图
u和图 v∀
表 u 羌活药材 ‹ °≤指纹图谱中化学成分指认
峰号 τ• r°¬±  2t(µ / ζl 鉴定化合物
t {1w| vxv 羌活酚
v uu1xv t|v 阿魏酸
x xz1s| vxv 羌活醇
y x{1s{ u|z 苯乙基阿魏酸酯
z yu1vy uy| 异欧前胡素
图 u 羌活药材 k‘²quw样品 l≤ 2˜∂色谱图
图 v 羌活药材 k‘²quw样品 l≤ 2 ≥总离子流图
图 v为经 ≤ 2 ≥k∞≥Œl联用得到的总离子流色
谱图 o可以看出与紫外检测有较好的互补信息 ∀羌
活的色谱峰的指认工作还有待于进一步深入研究 o
并获取尽可能多的羌活化学成分对照品 o在同一色
谱条件下进行 ≤ 2 ≥分析 o并解析化合物的结构信
息 ∀
3 讨论
3q1 不同色谱柱的考察 考察了选择不同色谱柱
°«¨ ±²° ±¨ ¬¨∏±¤ ≤t{柱 o„¯¯·¬°¤ ‹° ≤t{柱和 ²µ¥¤¬
∞¬·¨±§≤t{柱 ∀根据 v种类型色谱柱的色谱图 o比较
了保留时间 !出峰数量 !分离度 !峰形对称性 !柱压以
及经济等因素 ∀综合考虑确定选用 °«¨ ±²° ±¨ ¬¨∏2
±¤≤t{柱建立了羌活药材的色谱指纹图谱 ∀
3q2 流动相系统的选择 分别用甲醇 2水 !甲醇 2醋
酸水 !乙腈 2水 !乙腈 2醋酸水 !甲醇 2磷酸水 !乙腈 2磷

酸水体系等不同比例的流动相进行等度和梯度洗
脱 ∀结果表明 o用乙腈 2s1vh醋酸水体系进行梯度
洗脱为佳 ∀
3q3 不同波长 !柱温和流速的考察 采用二极管阵
列检测器 o对 t|s ∗ wss ±°扫描的各波长下的色谱
图进行分析比较 o在 vvs ±°波长处羌活中含有的主
要成分香豆素 !芳香酸酯类化合物有较强吸收 o出峰
数量多 o故选 vvs ±°作为指纹图谱检测波长 ∀同时
考察了不同柱温 kuxovsovxowsowx ε l及不同流速
ks1{os1|ot1s °# °¬±pt lo最后选定 vs ε 和 t1s
°# °¬±pt ∀
3q4 提取溶剂和提取方法的优化 提取方法比较
了不同溶剂甲醇与甲醇水 k{sh oysh owsh l!乙醇
和乙醇水 k|xh o{sh oysh l的不同提取方法 k回
流 !冷浸 !超声以及石油醚处理后甲醇超声 l提取 ∀
考察不同提取时间 kvsowxoyso|sotusotxs °¬±l∀
经比较甲醇 wx °¬±超声提取既利于处理又能提取
出较多成分 ∀加水可以使极性大的化合物峰有所增
高 o但是香豆素成分峰降低 ∀因羌活中主要有效成
分是香豆素类化合物 o指纹图谱应该比较全面的反
映药材主要成分的整体性 o所以选用甲醇 wx °¬±超
声提取作为提取方法 ∀
3q5 本实验利用相似度软件处理羌活指纹图谱数
据 o通过相似度计算结果对药材进行评价 ∀有结果
可知 oux个来源的的羌活药材相差较大 ∀主要是由
于各成分相对含量的差异造成了指纹图谱相似度较
大 ∀本研究采用 ‹°≤ 2 ≥技术提供了更多化合物
的信息 o是对紫外检测器的一种补充 ∀根据羌活及
已知的羌活化学成分的报道 o利用质谱技术对其部
分成分进行了初步定性 ∀
≈参考文献  
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 ≈  q上册 q上海 }上海科学技术出
版社 ot|{y}ttzuq
≈u  李云霞 o高春华 o沙 明 q中药羌活化学成分及药理作用研究
进展 ≈ q辽宁中医学院学报 ousswoyktl}uuq
≈v  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}tuzq
≈w  高广慧 o邓捷圆 o王秀敏 o等 q中药材羌活质量控制的气相色谱
指纹图谱 ≈ q沈阳药科大学学报 ousswoutkyl}wv{q
≈x  杨秀伟 o严仲铠 o顾哲明 q羌活化学成分的研究 ≈  q中草药 o
t||vouwktsl}xszq
#uv#
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Στυδιεσ ον χηροµ ατογραπηιχ φινγερπριντσ οφ Ρ ηιζοµ α ετ Ρ αδιξ Νοτοπτερψγιι
≥„…Œ• Š∏¯±¤µtou o ≤˜Œ≠¤2­∏±t o Š˜’ ‹∏¬t o • „‘Š • ¬¨t o Š˜’ ⁄ 2¨¤±t
(t. ΣχηοολοφΠηαρµ αχευτιχαλΣχιενχεσ, Πεκινγ Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss{v, Χηινα;
u. Ξινγϕιανγ Ινστιτυτε οφ Χηινεσε ΜατεριαλΜεδιχαλανδ Ετηιχαλ, Υρυµ θι {vsssu, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦©¬±ª¨ µ³µ¬±·¶©²µ·«¨ ¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§ ∏´¤¯¬·¼ √¨¤¯∏¤·¬²± ²©• «¬½²°¤ ·¨
• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬q Μετηοδ : ≥ ³¨¤µ¤·¬²± º¤¶³¨ µ©²µ° §¨²± °«¨ ±²° ±¨ ¬¨∏±¤≤t{ kul kwqy °° ≅ uxs °°o x Λ°l ¦²¯∏°±o º¬·«°²2
¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ¦²±¶¬¶·¬±ª²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ k„l ¤±§º¤·¨µ¦²±·¤¬±¬±ªs1vh ¤¦¨·¬¦¤¦¬§k…l º¬·«ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²± ¤··«¨ ©¯²º µ¤·¨ ²©t °#
°¬±pt q ׫¨ ˜∂ §¨ ·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«º¤¶vvs ±°o ¦²¯∏°± ·¨°³¨ µ¤·∏µ¨ º¤¶vs ε o ¤±§·«¨ ¤±¤¯¼¶¬¶·¬°¨º¤¶zs °¬±q Ρ εσυλτ: „ ¶¤·¬¶2
©¤¦·²µ¼ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·º¤¶²¥·¤¬± §¨ ¥¼ ‹°≤ ° ·¨«²§o ¤±§ ∏´¤¯¬·¤·¬√¨ ¤±¤¯¼¶¬¶²©¶²°¨ ²©·«¨ ³¨ ¤®¶º µ¨¨ ¦¤µµ¬¨§ ²± ¥¼ ‹°≤ r ≥ ¤³2
³µ²¤¦«q Χονχλυσιον: ׫¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §° ·¨«²§¬¶¶¬°³¯¨¤±§µ¤³¬§·²¬§¨ ±·¬·¼ ¤±§§¬©©¨µ¨±·¬¤·¨¶¤°³¯ ¶¨²©‘«¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬
¦²¯¯¨ ¦·¨§©µ²° §¬©©¨µ¨±·¶²∏µ¦¨¶¤±§°¬ª«·¥¨ ∏¶¨§¤¶¤ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ° ·¨«²§©²µ• «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬q
[ Κεψ ωορδσ] • «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬~ ‹°≤ 2˜∂ 2 ≥~ ©¬±ª¨ µ³µ¬±· ≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussx2sz2ut
≈基金项目   国家中医药管理局中医药科学技术研究专项项
目 ksw2sx°twl
≈通讯作者   3 李发美 oר¯}ksuwluv|{yu{|oƒ¤¬}ksuwluv|{y2
u{|o∞2°¤¬¯}©¤° ¬¨¯¬ƒ tyvq¦²°
‹°≤测定野菊花中蒙花苷与木犀草素的含量
崔兰冲 o李小芩 o韩 莹 o李发美 3
k沈阳药科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttsstyl
≈摘要   目的 }建立野菊花中蒙花苷与木犀草素的含量测定方法 ∀方法 }运用高效液相色谱法测定 o色谱柱为
׫¨ µ°² ‹¼³¨ µ¶¬¯…⁄≥ ≤t{ kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°lo流动相为甲醇 2四氢呋喃 2水 kxsΒwΒwylo流速 s1y °# °¬±pt ~检
测波长 vxs ±°∀结果 }蒙花苷与木犀草素分别在 s1stx u ∗ s1txu °ª# °pt和 s1sst { ∗ s1st{ °ª# °pt线性关系
良好 oρ分别为 s1||| {os1||| w∀平均回收率分别为 |{1|h o|z1uh o• ≥⁄均小于 v1sh ∀结论 }本法方便 o准确 o可
以用于野菊花药材的质量控制 ∀
≈关键词   野菊花 ~蒙花苷 ~木犀草素 ~含量测定 ~高效液相色谱法
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlst2ssvv2sv
野菊花为菊科植物野菊 Χηρψσαντηεµ υµ ινδιχυµ
q的干燥头状花序 o味苦辛 o性微寒 o归肝 o心经 o清
热解毒 o用于疔疮痈肿 o目赤肿痛 o头痛眩晕 ≈t  ∀蒙
花苷与木犀草素是 u种重要黄酮类成分 o其中蒙花
苷对金黄色葡萄球菌和乙型溶血链球菌具有一定的
抑制作用 ≈u  o是野菊花的特征成分之一 ~木犀草素
也具有明确抗菌作用 ≈v  ∀目前 o只有对野菊花药材
或其制剂中的绿原酸或蒙花苷进行含量测定工作的
报道 ≈wox  ∀由于总黄酮是野菊花的主要有效成分 o
且蒙花苷与木犀草素在野菊花中的含量均较高 o因
此建立同时测定 u种黄酮类成分的高效液相色谱测
定方法 o对野菊花药材或制剂的质量标准研究具有
很重要的意义 ∀本实验在确定了测定方法后 o对采
集到的 ts批野菊花药材中的蒙花苷与木犀草素进
行了含量测定 ∀
1 仪器与试药
≥‹Œ „⁄˜高效液相色谱仪 k≤ p ts„×输液
泵 o ≥°⁄ p ts„紫外检测器 o ∞¤¶¼ vsss色谱工作
站 l∀实验用甲醇 ! 乙腈 ! 四氢呋喃均为色谱纯 o
#vv#
第 vu卷第 t期
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t
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