全 文 ：中存在老化等问题，因而利用 ＴＧＤＴＡ，ＸＲＤ，ＦＴＩＲ
等手段评价固体分散体非常重要。
［参考文献］
［１］ 邱明丰，吴建兵，王小荣，等．固体分散技术在中药给药系统中
的研究和应用［Ｊ］．中华医学实践杂志，２００６，５（７）：７４２．
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ａｍｏｒｐｈｏｕｓｓｔａｔｅｉｎｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍ Ｓｃｉ，
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Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｈｙｓｉｃａｌｓｔａｔｅｏｎｃｏｍｐｏｕｎｄｈａｗｔｈｏｒｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ
ＺＨＡＮＧＷｅｉ１，ＣＨＥＮＨｏｎｇｙａｎ２，ＪＩＡＮＧＪｉａｎｌａｎ１
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＴｉａｎｊｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０００７２，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇＮｏ．４ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ．Ｌｔｄ．，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００２１，Ｃｈｉｎａ；
３．ＣｈｉｎｅｓｅＰｅｏｐｌｅ＇ｓＡｒｍｅｄＰｏｌｉｃｅＦｏｒｃｅｓＡｃａｄｅｍｙ，Ｌａｎｇｆａｎｇ０６５０００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｈｙｓｉｃａｌｓｔａｔｅｗｉｔｈａｃｃｅｌｅｒａｔｅｔｅｓｔａｎｄｄｒｏｐｐｉｎｇｉｎｐｒｏｃｅｓｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｏｎ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｈａｗｔｈｏｒｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｓｃａｎｎｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＴＧＤＴＡ，ＦＴＩＲａｎｄＸＲＤｗｅｒｅｕｓｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅａｃｔｉｖｅ
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｐｒｅｓｅｎｔｅｄａｍｏｒｐｈｏｕｓ，ｔｉｎｙｃｒｙｓｔａｌａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｔａｔｅｉｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ，ａｎｄｉｔｈａｄｎｏｏｂｖｉｏｕｓｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＰＥＧ４０００
ａｎｄａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ｗｉｔｈｔｉｍｅｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ，ａｌｉｔｌｅｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｃｈａｎｇｅｄｆｒｏｍａｍｏｒｐｈｏｕｓｓｔａｔｅｔｏｔｉｎｙｃｒｙｓｔａｌｏｒｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｓｔａｔｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｓｏｌｉｄｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｈａｗｔｈｏｒｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌ；ｐｈｙｓｉｃａｌｓｔａｔｅｅｓｔｉｍａｔｅ；ｓｔａｂｉｌｉｔｙ
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００８１００８
［通讯作者］ 杨伟俊，Ｔｅｌ：（０９９１）２３２０２９２，Ｅｍａｉｌ：ｗｉｌ
ｆｒｅｄ３１０６＠１６３．ｃｏｍ
复方雪莲滴丸中羌活、独活的纯化工艺考察
罗玉琴１，杨伟俊２，徐建国２，邢建国２
（１．中国科学院新疆理化技术研究所，新疆 乌鲁木齐 ８３００１１；
２．新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 ８３０００４）
［摘要］ 目的：考察复方雪莲滴丸中羌活、独活提取物的大孔树脂纯化工艺。方法：以蛇床子素和异欧前胡素
为指标，对树脂型号、上样量、洗脱溶剂进行了筛选；考察了上样液浓度、上样液 ｐＨ、柱径高比对吸附的影响。结
果：选择ＨＰＤ４００Ａ大孔树脂，树脂体积与上样量体积比１∶２，ｐＨ３５（原液），柱径高比１∶７，洗脱溶剂９５％乙醇时，
解吸效果较好。结论：可以应用ＨＰＤ４００Ａ大孔树脂纯化羌活、独活提取物。
［关键词］ 复方雪莲滴丸；羌活；独活；大孔吸附树脂；纯化
［中图分类号］Ｒ２８３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２１２４７８０４
复方雪莲滴丸为传统方，由天山雪莲、延胡索、
羌活、川乌（制）、独活、草乌（制）、木瓜、香加皮８味
药组成，具有温经散寒，祛风逐湿，化瘀消肿，舒筋活
络之功能。用于风寒湿邪，痹阻经络所致类风湿性
关节炎，风湿性关节炎。本品原工艺为水提醇沉淀，
服用量大，为减少服用剂量，提高疗效，重新设计了
其提取工艺路线，并进行了纯化。大孔吸附树脂现
已广泛应用于天然产物的分离，近年来逐步用于中
药有效成分的提取分离和复方制剂中杂质的去
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除［１２］，本研究采用大孔吸附树脂对收膏量大的羌
活、独活进行纯化，纯化后服用量显著降低，有望成
为治疗风湿、类风湿性关节炎的经典维药复方。
１ 仪器与试药
高效液相色谱仪，包括 ＬＣ－１０ＡＴＶＰ二元高压
泵，ＳＰＤ－１０ＡＶＰ检测器，ＣＴＯ－１０ＡＳＶＰ柱温箱，
ＳＣＬ－１０ＡＶＰ系统控制器，Ｃｌａｓｓ－ＶＰ６０色谱工作
站（日本岛津制造所）；ＢＳ１１０Ｓ型电子天平（Ｓａｒｔｏｒｉ
ｕｓ）；Ｍｉｌｉｐｏｒｅｓｉｍｐｌｉｃｉｔｙ１８５超纯水器（美国密理博
公司）；ＫＱ－１００ＤＥ型数控超声波发生器（昆山市超
声仪器有限公司）。羌活、独活药材购自亳州永刚
药材公司，经新疆药物研究所张彦福教授鉴定，符合
《中国药典》规定。蛇床子素及异欧前胡素对照品
（中国药品生物制品检定所，批号分别为 １１０８２２
２００４０６，１１０８２７２００４０７）；ＡＢ－８大孔树脂（南开大
学化工厂）；Ｄ１０１大孔树脂（天津农药厂）；ＨＰＤ１００
－ＨＰＤ７００大孔树脂（沧州宝恩化工有限公司）。甲
醇、乙腈为美国Ｆｉｓｈｅｒ公司产色谱纯，其他试剂均为
国产分析纯。
２ 方法与结果
２．１ 含量测定方法［３］
２．１．１ 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填
充剂；色谱柱 ＫｒｏｍａｓｉｌＯＤＳ１（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ），乙腈水（６０∶４０）为流动相；检测波长３２０ｎｍ；
柱温３５℃。
２．１．２ 对照品溶液的制备 精密称取蛇床子素和
异欧前胡素对照品各８ｍｇ，分别置１０ｍＬ量瓶中，
用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制对照品储备
液。分别精密吸取对照品储备液各１ｍＬ，置１０ｍＬ
量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成混合
对照品溶液。
２．１．３ 供试品溶液的制备 按优选的提取工艺，将
羌活、独活药材用８倍量５５％乙醇提取３次，每次１
ｈ，过滤，合并滤液，浓缩成稠膏，稀释使其样品含生
药００９８ｇ·ｍＬ－１。
精密吸取２ｍＬ，置２５ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻
度，用微孔滤膜（０４５μｍ）滤过，即得供试品溶液。
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各２０μＬ进样，外
标一点法计算，得羌活、独活提取液中蛇床子素和异
欧前胡素的质量浓度分别为０４９３，０１６７ｇ·Ｌ－１。
２．１．４ 线性范围 蛇床子素回归方程 Ｙ＝
５８４７４Ｘ＋６３０７８，ｒ＝０９９９１，线性范围８５～６８ｍｇ
·Ｌ－１；异欧前胡素回归方程 Ｙ＝５３２６７Ｘ＋１４４５６，
ｒ＝０９９９３，线性范围９～７２ｍｇ·Ｌ－１。
２．２ 大孔树脂纯化工艺考察
２．２．１ 树脂型号的选择 采用静态吸附法，通过测
定吸附残液和解吸液的蛇床子素和异欧前胡素的量
筛选最适树脂。从表１中可以看出，不同型号的树
脂对蛇床子素和异欧前胡素的吸附量差异不显著，
但Ｄ１０１，ＨＰＤ６００和ＨＰＤ４００Ａ对蛇床子素和异欧前
胡素的洗脱率较高，故又考察了三者的动态饱和吸
附量和洗脱率。结果见表２。
表１ ８种大孔树脂主要特性和对蛇床子素和异欧前胡素的吸附量（Ｑ）、解吸率（α）
树脂
粒径
／ｍｍ
比表面
／ｍ２·ｇ－１
孔径
／ｎｍ
Ｑ／ｍｇ·ｇ－１
蛇床子素 异欧前胡素
α／％
蛇床子素 异欧前胡素
ＨＰＤ１００ ０３～１２５ ６５０～７００ ９～１０ ２５０９ ０８５５ ７６４３０ ７４３７１
ＨＰＤ３００ ０３～１２５ ８００～８７０ ５～５５ ２５０２ ０８６６ ７６０４２ ７５０８８
ＨＰＤ４００ ０３～１２５ ５００～５５０ ７５～８ ２４８９ ０８６５ ７７６４７ ７４８６４
ＨＰＤ４００Ａ ０３～１２５ ５５０～６００ ９～１０ ２５０７ ０８５９ ８２６２１ ８３４１０
ＨＰＤ６００ ０３～１２５ ５００～５５０ １０～１２ ２５１８ ０８６８ ８２８６５ ７６５９９
ＨＰＤ７００ ０３～１２５ ６５０～７００ ８５～９ ２４８０ ０８６１ ６３１２０ ５８９３４
ＡＢ－８ ０３～１２５ ４８０～５２０ １３～１４ ２４７３ ０８５６ ７９０８５ ７８６６０
Ｄ１０１ ０３～１２５ ４２０～５００ １３～１４ ２５０３ ０８５９ ９２１２５ ９１６２２
表２ ３种树脂动态饱和吸附量和洗脱率的比较
树脂
Ｑ／ｍｇ·ｇ－１
蛇床子素 异欧前胡素
α／％
蛇床子素 异欧前胡素
Ｄ１０１ ２７８６ ０９３８ ８２７６７ ８５５８５
ＨＰＤ４００Ａ ２７９２ ０９４０ ９６４１６ ９７９９８
ＨＰＤ６００ ２７９１ ０９３８ ９０６５８ ９３３４１
由表２可见，ＨＰＤ４００Ａ对蛇床子素和异欧前胡
素的吸附和洗脱效果最好，故选用之。
２．２．２ 上样量的确定 取 ２０ｍＬＨＰＤ４００Ａ大孔树
脂装柱（柱径高比为１∶７，１５ｃｍ×３０ｃｍ），不断向
树脂柱上样，收集下口流出液每１０ｍＬ为１份，测定
每份中蛇床子素和异欧前胡素的量。结果见图１。
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１蛇床子素；２异欧前胡素
图１ 吸附曲线
图 １表明，ＨＰＤ４００Ａ大孔树脂柱可处理 ４ＢＶ
００９８ｇ生药·ｍＬ－１的羌活、独活提取液而无明显
泄漏，达到饱和吸附时可处理６ＢＶ提取液，即湿态
ＨＰＤ４００Ａ树脂对羌活、独活提取液中蛇床子素和异
欧前胡素的吸附量为０４２７，０１３４ｇ·Ｌ－１，达到饱
和时的吸附量为０８５４，０２６７ｇ·Ｌ－１。
２．２．３ 上样液质量浓度对回收率的影响 装４根
ＨＰＤ－４００Ａ大孔树脂柱，树脂体积均为２０ｍＬ，将
４０ｍＬ上样液（合３９２ｇ生药）分别稀释０，１５，２，
２５倍后上样，用３倍水洗柱后，用４倍９５％乙醇洗
脱。测定每份洗脱液中蛇床子素和异欧前胡素的含
量，分别计算蛇床子素和异欧前胡素回收率，回收率
（％）＝洗脱液中的量／上样液中的量 ×１００％，结果
稀释０，１５，２，２５倍上样液中的蛇床子素收率分别
为９４３７％，８９５９％，８０８０％，６４５３％。异欧前胡
素 收 率 分 别 为 ９６９８％，８８４６％，８３７４％，
６０２３％。
上样液质量浓度在稀释１５～２倍时，对收率影
响不大，但稀释２５倍时，树脂收率下降。故确定上
样液质量浓度范围在：蛇床子素０３～０４ｇ·Ｌ－１、
异欧前胡素００８～０１ｇ·Ｌ－１。
２．２．４ 上样液ｐＨ对回收率的影响 取６份４０ｍＬ
上样液（合３９２ｇ生药）用１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸或１ｍｏｌ
·Ｌ－１氢氧化钠调ｐＨ分别为１０，２０，３５（原液），
５０，７０，８０上样，用３倍水洗柱后，用４倍９５％乙
醇洗脱。测定每份洗脱液中蛇床子素和异欧前胡素
的含量，分别计算蛇床子素和异欧前胡素回收率，结
果见表３。
２．２．５ 洗脱溶剂的确定 样品溶液 ４０ｍＬ，上
ＨＰＤ４００Ａ２０ｍＬ的树脂，吸附流速为１ＢＶ·ｈ－１，吸
附１２ｈ，分别用水，２０％，３０％，４０％，５０％，６０％，
７０％，８０％，９５％的乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液，
表３ 上样液浓度对吸附的影响
上样液 蛇床子素收率 异欧前胡素收率
原液 ９４３７ ９６９８
１５倍稀释 ８９５９ ８８４６
２０倍稀释 ８０８０ ８３７４
２５倍稀释 ６４５３ ６０２３
计算洗脱液中蛇床子素和异欧前胡素的回收率，结
果见表４。
表４ 上样液ｐＨ及洗脱溶剂的确定
条件 考察项目 蛇床子素回收率 异欧前胡素回收率
ｐＨ １０ ７４０６９ ６６６０４
２０ ８３０９８ ７３９５４
３５ ９１４６３ ８４６００
５０ ８４４４９ ７６１３０
７０ ８５８２０ ７７９１０
８０ ８０９７１ ７５６６１
洗脱溶剂 水 ０ ０
２０％乙醇 ０ ０
３０％乙醇 ０ ０
４０％乙醇 ０ ０
５０％乙醇 １０６７ ０８９１
６０％乙醇 ２４８２ １７２６
７０％乙醇 ３６６８ １１３４
８０％乙醇 ４１９８ ４０８８
９５％乙醇 ９６８５ ９６０６
２．２．６ 不同径高比对吸附量的影响 分别向径高比
为１∶４，１∶７，１∶１０，１∶１３的树脂柱上样，树脂体积均为
２０ｍＬ，上样液４０ｍＬ，吸附流速为１ＢＶ·ｈ－１，吸附１２
ｈ，３倍量水洗后，４倍量９５％乙醇洗脱。测定洗脱液
中蛇床子素和异欧前胡素量，结果径高比为１∶７时蛇
床子素和异欧前胡素量最高，故选择１∶７。
２．２．７ 树脂柱重复使用次数考察 ＨＰＤ－４００Ａ大
孔树脂柱，径高比为１∶７，上样液质量浓度蛇床子素
０４９３ｇ·Ｌ－１，异欧前胡素０１６７ｇ·Ｌ－１，树脂体积
２０ｍＬ，上样液４０ｍＬ，４倍量９５％乙醇洗脱。洗脱
结束后直接用３倍水洗（不经酸碱再生），进行下次
上样，共反复进行１０次上样和洗脱。使用９次后，
蛇床子素和异欧前胡素回收率下降约１０％。故在
前面确定的上样量和洗脱条件下，树脂可重复使用
８次。
３ 讨论
大孔树脂纯化原理为吸附作用和分子筛，吸附
的产生是由于范德华力或氢键，分子筛作用是由于
其多孔结构，故吸附力较弱，有机溶剂容易洗脱。因
此用水或低体积分数乙醇预洗除杂时应考察其用
量，以免目标成分的损失。实验中发现５０％以下的
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乙醇不能将蛇床子素和异欧前胡素洗出，故若需蛇
床子素和异欧前胡素达到较高的聚集程度时，可采
用５０％以下的乙醇预洗除杂。本实验中９５％乙醇
洗脱下蛇床子素和异欧前胡素的转移率最高，超过
９０％，故确定９５％乙醇为洗脱剂。且４倍量的９５％
乙醇可完全将目标成分洗净，大孔树脂冲洗的较为
干净，有利于树脂的再生及规模化生产。
羌活、独活是中药处方中常用的对药，其主要有
效成分为挥发油和香豆素类成分，其中主要是蛇床
子素和异欧前胡素，与本方功能相关。为最大程度
地保留有效成分并减少服用剂量，以香豆素类成分
蛇床子素和异欧前胡素作为指标，对大孔树脂纯化
工艺进行优选，纯化后蛇床子素和异欧前胡素保留
率分别为 ９４９８％，９１０１％（ｎ＝３）；干膏收率从
３２５％降为５３％（ｎ＝３）。
适宜的上样量是有效而经济地纯化目标成分的
重要因素，既能保证有效成分不流失，又能保证树脂
不浪费，还可缩短生产周期。实验中确定的上样量
距离泄漏点较远，故树脂柱可重复使用较多次而吸
附力不下降。若确定的上样量距离泄漏点较近，虽
可提高上样量，但树脂重复使用次数可能会下降。
应根据具体情况确定一个平衡点。
树脂纯化的主要步骤为上样、吸附、洗脱，在纯
化过程中还考察不同ｐＨ的洗脱液对蛇床子素和异
欧前胡素的影响，结果发现未经调过的洗脱液量最
高。本实验围绕这几个步骤进行了考察，设定的工
艺参数便于实际操作和应用。在用大孔树脂进行其
他中药的纯化时，还应针对具体目标成分的性质进
行其他影响因素的考察，例如温度等，以保证纯化效
果。
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ＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＲｈｉｚｏｍａｅｔＲａｄｉｘＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉ
ａｎｄＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＰｕｂｅｓｃｅｎｔｉｓｉｎＦｕｆａｎｇＸｕｅｌｉａｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ
ｂｙｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎ
ＬＵＯＹｕｑｉｎ１，ＹＡＮＧＷｅｉｊｕｎ２，ＸＵＪｉａｎｇｕｏ２，ＸＩＮＧＪｉａｎｇｕｏ２
（１．ＸｉｎｊｉａｎｇＴｅｃｈｎｉｃａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｈｙｓｉｃｓａｎｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００１１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａｏｆＸｉｎｊｉａｎｇＵｉｙｇｈｕｒＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓＲｅｇｉｏｎ，Ｕｒｕｍｑｉ８３０００４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＲｈｉｚｏｍａｅｔＲａｄｉｘＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉａｎｄＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＰｕｂｅｓｃｅｎｔｉｓ
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ｈｅｉｇｈｔｏｆｃｏｌｕｍｎｔｏａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＨＰＤ４００Ａｗａｓｃｈｏｓｅｎｔｏｐｕｒｉｆｙ，ｔｈｅｓｕｉｔａｂｌｅｓａｍｐｌｉｎｇｒａｔｉｏｏｆｒｅｓｉｎｖｏｌｕｍｔｏｒａｗ
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ｅｌｕａｎｔｆｏｒｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＨＰＤ４００ＡｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｐｕｒｉｆｙＲｈｉｚｏｍａｅｔＲａｄｉｘＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉａｎｄＲａｄｉｘＡｎｇｅｌ
ｉｃａｅＰｕｂｅｓｃｅｎｔｉｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＦｕｆａｎｇＸｕｅｌｉａｎｄｒｏｐｐｉｎｇｐｉｌｓ；ＲｈｉｚｏｍａｅｔＲａｄｉｘＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉ；ＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＰｕｂｅｓｃｅｎｔｉｓ；ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓａｂ
ｓｏｒｐｔｉｏｎｒｅｓｉｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
［责任编辑 鲍 雷］
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