全 文 ：确切归属 o纠正了文献中归属错误的碳信号 ∀具体
数据见表 u ∀
表 u 化合物 ·的tv≤2‘ • ot ‹2‘ • 及 ‹2  …≤ 数据
‘²q tv≤2‘ • t ‹2‘ • ‹2  …≤
t tyt qyyul ‹2u ot2’ ‹
u tuw qtx z qty ‹2w ov2≤ ‹v ot2’ ‹
v twz qsy v2≤ ‹v
w tt| qvs z qw{ ‹2u ov2≤ ‹v
w¤ tvu qsztl
x tsy qx| z qvy ‹2z
y tyw qzu ‹2x o‹2z oy2’≤ ‹v
z tsz qxt z qt| ‹2x
{ tys qy{ul ‹2z o‹2 Š¯ ∏2tχ
{¤ ttw qw|tl ‹2x o‹2z
| t{y qwt
|¤ ttw qw|tl ‹2u o‹2w ot2’ ‹
ts t{t q{w ‹2w o‹2x
ts¤ tvy qvwtl ‹2x
t2’ ‹ tv qst
v2≤ ‹v ut qvv u qwt ‹2u o‹2w
y2’≤ ‹v xy qsw v q|y
Š¯ ∏2tχ tss q|vtl x qtw
Š¯ ∏2uχ zv qu|tl
Š¯ ∏2vχ zz qwytl
Š¯ ∏2wχ y| q{|tl
Š¯ ∏2xχ zy qxxtl
Š¯ ∏2yχ ys q{wtl
注 }tl为文献中未明确归属的碳信号 ul为文献中归属错误的碳
信号
化合物 ∏ 白色针晶k氯仿2丙酮l o°³ uxy ∗
uxz ε o紫外灯kuxw ±°l下显紫蓝色荧光 ∀t ‹2‘ •
kvss qtv  ‹½o⁄ ≥’2§yl∆}| qxykt‹ o¶o≤2wj2’ ‹l o
| qus ku‹ o¶ov2’ ‹ ox2’ ‹l oz qv|ku‹ o§oϑ€ { qx ‹½o
‹2ujo‹2yjl oy qzwku‹ o§oϑ€ { qx ‹½o‹2vjo‹2xjl oy q|v
kt ‹ o§oϑ € ty qv ‹½ o乙烯 ‹2Βl oy q{skt ‹ o§oϑ €
ty qv ‹½o乙烯 ‹2Αl oy qv{ku‹ o§oϑ € u qs ‹½o‹2u o
‹2yl oy qttkt‹ o·o‹2wl }tv ≤2‘ • kzx qwz  ‹½o
⁄ ≥’2§yl∆}tuy qvxk≤2Αl otu{ qx{k≤2Βl otv| q|zk≤2
tl otsw q||k≤2u o≤2yl otx| qutk≤2v o≤2x l otsu qwy
k≤2wl otu{ qzz k≤2tjl otu{ qx{k≤2ujo≤2yjl otty quuk≤2
vjo≤2xjl otxz q|uk≤2wjl ∀以上数据与文献≈x 中报道
的白藜芦醇kµ¨¶√ µ¨¤·µ²¯l一致 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss qtyz q
≈u  ≠²¶«¬¼∏Ž¬Ž¬°∏µ¤o ¬·¶∏ª¬Ž²½¤º¤o Ž¬°¬¼¨ …¤¥¤o ·¨¤¯ q ‘¨ º
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≈v  朱廷儒 o王素贤 o裴月湖 o等 q中药虎杖抗菌活性成分研究 q中草
药 ot|{x otykvl }ut q
≈w  פ¯¤³¤·µ¤ …¤±¬o  ²±²­ Žo • ²¼ o ·¨¤¯ q ≥·µ∏¦·∏µ¨¶²© × º² ‘¨ º
°«·«¤¯¬§¨¶©µ²° Αναπηαλιδισ χοντορτα ‹²²® ©qŒ±§¬¤±  ≤«¨ ° o
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≈x   ¤±±¬¯¤ ∞µ®®¬o פ¯√¬·¬√¨ „±··¬ ∞µ®®¬ Ž²¯ «¨°¤¬±¨ ± q „±·¬2
¯¨ ∏®¤¨ °¬¦ ≤²°³²∏±§¶ ⁄¨ µ¬√ §¨ ©µ²° ≥·¬¯¥¨ ±¶¬± Πιχεα αβιεσ
¥¤µ®q°«¼·²¦«¨ °¬¶·µ¼ ot||v ovvkwl }{tv q
≈责任编辑 李 禾 
高效液相色谱法测定不同产地葛根中葛根素 !
大豆苷及大豆苷元的含量
金文姗 o谈钰元 o陈有根 o王 妍
k北京裕科植物中间体开发有限公司 o北京 tsssszl
≈摘要  目的 }建立同时测定葛根中葛根素 !大豆苷及大豆苷元的含量测定方法 ∀方法 }选用 ≥≠   ∞× • ≠2
≤t{色谱柱kv q| °° ≅ txs °° ox Λ°l o甲醇2t h醋酸水溶液为流动相梯度洗脱 o紫外检测波长为 uxs ±° o‹°≤ 法 ∀
结果 }平均回收率分别为 tst qz h otss qz h otst qz h k ν € vl o• ≥⁄分别为 s qwv h os q{u h ot qxs h k ν € vl ∀结论 }
本法简便 o准确 o快速 ~适用于含葛根素 !大豆苷及大豆苷元的葛根药材及制剂的质量控制 ∀
≈关键词  二极管阵列高效液相色谱法 ~梯度洗脱 ~葛根素 ~大豆苷 ~大豆苷元 ~野葛
≈中图分类号  • u{u ~ • u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号 tsst2xvsukussvlst2ssw|2sv
≈收稿日期  ussu2tu2ts
≈通讯作者  ר¯ }kstslywsxu{x{ ƒ¤¬}kstslywsxu{xx
∞2°¤¬¯}­¬±º ±¨¶«¤± ƒ ¼¤«²²q¦²° q¦±
葛根为豆科植物野葛 Πυεραρια λοβατα k • ¬¯¯§ql
’«º¬或甘葛藤 Π. τηοµσονιι …¨ «·«q的干燥根 ∀用
于外感发热头痛 !颈强等 ∀现代研究证实 o葛根中的
#|w#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv
主要有效成分为葛根素 !大豆苷 !大豆苷元等 o它们
均属于异黄酮类化合物 o具有抗炎解热 !扩张冠状动
脉血管 !增加冠状动脉血流量的作用 o同时也有降低
血压的作用≈t  ∀有关葛根素等异黄酮的含量测定研
究已有不少报道≈t ∗ v  ousss年版5中国药典6以其中
的葛根素为含量测定的指标 o但采用高效液相色谱
梯度洗脱法同时测定葛根中葛根素 !大豆苷及大豆
苷元的含量测定方法未见文献报道 ∀本文建立了同
时测定葛根中葛根素 !大豆苷及大豆苷元的高效液
相含量测定方法 o测定和比较了 y个不同产地的野
葛根药材中的含量 o为更好地控制葛根药材及其制
剂的内在质量提供了依据 ∀
1 仪器与试药
• „× ∞• ≥公司高效液相色谱系统 oyss 型控制
器 o||y 型二极管阵列检测器 oztz 型自动进样器 o
Œ∞‘‘Œ˜  vu色谱工作站 o滤膜k美国 ¬¯¯¬³²µ
≤²µ³²µ¤·¬²±o孔径 s qwx Λ°l ∀
葛根素对照品k中国药品生物制品检定所 o批号
zxv2usssszl ~大豆苷及大豆苷元对照品 k美国
≤ ‹ • ’  „⁄∞÷ 公司 o批号 st2swssx2wts ost2swssy2
wtyl ∀y个不同产地的野葛根药材样品k详见样品测
定结果表l由各产地药材公司邮购得到 o采收时间均
为 usss年 ts月 o经本公司陈有根博士鉴定 o均符合
usss年版5中国药典6的规定 ∀甲醇k南开大学精细
化学实验厂l为色谱纯 o水为重蒸水 o冰醋酸为分析
纯 ∀
2 实验条件
2 q1 色谱条件 ≥≠   ∞× • ≠ ≤t{色谱柱 k • „2
×∞• ≥公司 ov q| °° ≅ txs °° oxΛ °l 柱 o流动相甲
醇2t h醋酸水溶液梯度洗脱 o梯度洗脱条件见表 t ∀
检测波长 uxs ±° ~流速 t qs °#°¬±p t ~柱温为室温 ∀
按葛根素峰计算 o柱理论塔板数大于 t sss ∀
表 t 梯度洗脱条件
τ
r°¬±
甲醇
r h
t h醋酸水溶液
r h
s ux zx
tv qs ux zx
tx qs xs xs
vs qs zs vs
vu qs ux zx
ws qs ux zx
注 }流速均为 t qs °#°¬±p t
2 q2 标准曲线的绘制 精密称取葛根素 ts qut °ª!
大豆苷 u qt{ °ª及大豆苷元 u qsu °ªo置于 xs °¯ 容
量瓶中 o用甲醇溶解 o定容 ∀分别吸取上述对照品溶
液 t ov oy o| otu otx ˏo进样 o按上述色谱条件测定峰
面积积分值 o以峰面积积分值为纵坐标 o对照品进样
量为横坐标绘制曲线 o计算回归方程 ∀葛根素 }Ψt €
y stt .x n u tvz vss Ξt , ρ € s q||| | o线性范围 s qus
∗ v qsy Λª∀大豆苷 }Ψu € | wxu .y n tx{ y|{ Ξu , ρ €
s q||| y o线性范围 s qsw ∗ s qyx Λª∀大豆苷元 }Ψv €
tux xwt .u n yy {|s .{ Ξv , ρ€ s q||| x o线性范围 s qsw
∗ s qyt Λª∀
2 q3 精密度试验 精密吸取对照品溶液 ts ˏo重
复进样 x次 o测得峰面积积分值 o分别算出葛根素 !
大豆苷及大豆苷元的峰面积积分值之平均值为
t| vvx yzy ovwvw vys及 uy s{t s{y o其 • ≥⁄分别为
t qt h ou qs h ot qu h ∀
2 q4 稳定性试验 精密吸取葛根素 !大豆苷及大豆
苷元对照品混合液 ts ˏo分别在 s ot ow oy ots «进
行测定 o结果峰面积积分值的平均值为t| wzx y|x o
v w|w xvs及uw vu| xzu o• ≥⁄分别为t qv h o
t q{ h ot qy h o表明 ts «内葛根素 !大豆苷及大豆苷
元稳定性良好 ∀
2 q5 回收率试验 精密称取葛根粉末 s qt ªkws目 o
山东产l o共 w份 o其中 v份各加 v °ª葛根素 !t °ª
大豆苷及 s qsx °ª大豆苷元 o另 t份不加标准品 o按
样品测定项下的方法提取 o定容 o按上述色谱条件测
定 o结果见表 u ∀
表 u 葛根样品回收率测定结果
检测指标
药材含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均回收率
r h
• ≥⁄
r h
葛根素 v qut v qss y quvv tss q{ tst qu s qw
y quys tst qz
y quwx tst qu
大豆苷 s qx{ t qss t qx|u tst qu tst qt s qy
t qx{w tss qw
t qx|y tst qy
大豆苷元 s qsux s qsx s qsz{ tsy qs tsw qs t q|
s qszz tsw qs
s qszy tsu qs
2 q6 重复性试验 对同一批样品称取 x份测定 o其
峰面积积分值的平均值为ts vuu {xz ot xzu {{| o
||| |{y o• ≥⁄分别为 t qz h ou qu h ot q| h k ν € xl ∀
3 样品测定
精密称取不同产地 y 份葛根粉末各 s qu ªkws
目l于 xs °容量瓶中 o加甲醇约 ws °o超声提取
vs °¬± o冷却 o以甲醇定容至xs °o取上清液以
s qwx Λ°微孔滤膜滤过 o滤液作为供试品溶液 ∀精
#sx#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv
密吸取 ts ˏ进样 o测定色谱峰峰面积积分值 o计算
含量 o测定结果见表 v ∀葛根素 !大豆苷及大豆苷元
对照品及葛根样品的 ‹°≤ 色谱图见图 t ∀
表 v y个不同产地葛根k野葛l样品中
葛根素 !大豆苷及大豆苷元含量的测定结果
产地
含量r h
葛根素 大豆苷 大豆苷元
总含量
r h
河南 u q|y s qv| s qs{ v qw
陕西 u q|u s quw s qtw v qv
山东 v qut s qx{ s qsv v q{
湖南 s qyx s qs| s qsy s q{
安徽 u quy s quy s qsz u qy
河北 u qvs s qvt s qus u q{
图 t 葛根素 !大豆苷及大豆苷元对照品
及葛根样品 ‹°≤ 图谱
„ q对照品 …q样品
t q葛根素 u q大豆苷 v q大豆苷元
4 讨论
4 q1 从文献≈u 可以看出 o野葛中的葛根素含量普
遍要高于粉葛k即甘葛藤l ~所以从品种上看 o野葛优
于粉葛 ∀故本文只选择了野葛进行测定 ∀
4 q2 在 y种不同产地的野葛中 o产于山东的野葛中
葛根素含量及 v种有效成分总含量最高 ∀若以葛根
素或总黄酮作为葛根及其制剂含量测定的指标成
分 o则山东产的野葛为首选药材 ∀
4 q3 试验中我们曾做过样品提取方法比较 ∀加热
提取与超声波振荡提取测定结果基本一致 o因超声
波振荡方法简便 o故决定采用此法 ∀超声波振荡提
取时 o我们曾采用 vs h乙醇 !zs h乙醇与甲醇 o当用
zs h乙醇提取进行测定时 o推测可能因葛根素等异
黄酮分子中的酚羟基以分子状态与离子状态共存 o
故 ‹°≤ 色谱图出现双峰 o影响测定结果的准确性 ∀
而用 vs h乙醇时异黄酮分子中的酚羟基主要以离子
状态存在 o‹°≤ 色谱图出现单一峰 ~用甲醇时分子
中的酚羟基主要以分子状态存在 o‹°≤ 色谱图亦出
现单一峰 ∀但考虑到标准品是用甲醇溶解的 o故最
终采用甲醇为样品提取溶剂 ∀
≈参考文献 
≈t  章育中 o杨 凡 q高效液相色谱法测定葛根及其片剂中异黄酮的
含量 q药物分析杂志 ot|{w owkul }yz q
≈u  张 蕾 o潘 扬 o朱蓉贞 o等 q不同品种及产地的葛根中葛根素含
量的比较 q中国中药杂志 ot||x ouskzl }v|| q
≈v  肖学凤 o高 岚 q‹°≤ 法测定不同产地葛根中葛根素的含量 q
中草药 ousst ovukvl }uus q
∆ετερµινατιον οφ Πυεραριν , ∆αιδζιν ανδ ∆αιδζειν
ιν Ροοτ οφ Πυεραρια λοβατα οφ ∆ιφφερεντ Οριγιν βψ ΗΠΛΧ
Œ‘ • ±¨2¶«¤±o × „‘ ≠∏2¼∏¤± o≤ ‹∞‘ ≠²∏2ª¨ ± o • „‘Š ≠¤±
k…¨ ¬­¬±ª ≠∏®¨ …²·¤±¬¦¤¯ ⁄¨ √¨¯²³° ±¨·≤ ’ qo× ⁄qo …¨ ¬­¬±ª tsssyu o ≤«¬±¤l
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Μετηοδ : × «¨ ¶¨³¤µ¤·¬²± º¤¶³¨µ©²µ° §¨¬± ¤≥≠   ∞× • ≠ ≤t{ ¦²¯∏°± º¬·«¤ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²© ° ·¨«¤±²¯2t h ‹ „≤ ¶²¯∏·¬²± kªµ¤§¬¨±·¨ 2
∏¯·¬²±l o·«¨ × «¨ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«¥¨¬±ªuxs ±° qΡεσυλτ : × «¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼ tst qz h otss qz h ¤±§tst qz h
k ν € vl o• ≥⁄ s qwv h os q{u h ¤±§t qxs h k ν € vl ©²µ°∏¨µ¤µ¬± o⁄¤¬§½¬± ¤±§ ⁄¤¬§½¨ ¬± qΧονχλυσιον : ׫¬¶° ·¨«²§¬¶¶∏¬·¤¥¯¨©²µ·«¨
§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²© °∏¨µ¤µ¬± o⁄¤¬§½¬± ¤±§ ⁄¤¬§½¨ ¬±¬± Πυεραρια λοβατα ¤±§¬·¶³µ¨³¤µ¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] ‹°≤ º¬·« ⁄„⁄ §¨·¨¦·¬²± ~ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²± ~°∏¨µ¤µ¬± ~⁄¤¬§½¬±~⁄¤¬§½¨ ¬± ~ Πυεραρια λοβατα
≈责任编辑 李 禾 
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第 u{卷第 t期
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