全 文 ：≈v  肖小河 o方清茂 o尹国萍 o等 q药用鼠尾草属分布式样与丹参药
材道地性 q中草药 ot||{ ou|k增刊l }tut q
≈w  黄秀兰 o王长根 o董月丽 o等 q野生与栽培丹参的质量研究 q中
药材 otukyl }vt q
≈x  熊 毅 o李庆逵 q中国土壤 q第二版 q北京 }科学出版社 ot||s q
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≈y  王承颂 q中药材药效与微量元素关系的质疑 q中国中药杂志 o
twktsl }xy q
Χοντεντ οφινοργανιχ ελεµεντσ οφ Σαλϖια µιλτιορρηιζα ροοτ ιν διφφερεντ αρεα
ανδ πηψσιχοχηεµιχαλ προπερτιεσ οφιτσ γροωινγ σοιλ
‹„’ ≠¤±ª2­¬±ªt o≤‹∞‘≥¬2¥¤²t oŠ„’ Š∏¤2¼¤²t oƒ∞‘Š ≠∏2¬¬∏t o ≠„‘Š ≥«¬2¯¬±t o ÷˜ ¬2½«¨ ±t o⁄˜ ¬2­∏±u oŒ‘¬¤t oŒ ¬±t
(t . Ινστιτυτε οφ Μεδιχιναλ Πλαντ , Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ ανδ Πεκινγ Υνιον Μεδιχαλ Χολλεγε , Βειϕινγ tsss|w , Χηινα ;
u . Τσινγηυα Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss|t , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ³µ²√¬§¨ ¥¤¶¬¶²© ±¨√¬µ²±° ±¨·¤¯ ©¤¦·²µ¶²©ª¨ ±∏¬±¨ ¦µ∏§¨ §µ∏ªo Σαλϖια µιλτιορρηιζαµ²²·q Μετηοδ : ’±2·«¨2¶³²·
¬±√ ¶¨·¬ª¤·¬²± ¤±§¬±§²²µ¦«¨ °¬¦¤¯ ¤±¤¯¼¶¬¶º µ¨¨ °¤§¨ ·²¶·∏§¼·«¨ ³«¼¶¬¦²¦«¨ °¬¦¤¯ ³µ²³¨µ·¬¨¶²©ªµ²º¬±ª¶²¬¯ ¤±§¦²±·¨±·²©¬±²µª¤±¬¦¨¯ °¨ ±¨·¶
²© Σ . µιλτιορρηιζα , ¤±§²¥·¤¬±¨ §§¤·¤ º µ¨¨ ¤±¤¯¼¶¨§º¬·«≥°≥≥ ts qs ¶²©·º¤µ¨ q Ρεσυλτ : Σ . µιλτιορρηιζαµ²²·²©«¬ª««¤µ√ ¶¨·¤µ¨¤¤¦¦∏°∏¯¤·¨§
≤∏¤±§±qŒ±¶²¬¯ ³µ¬±¦¬³¤¯ ¦²°³²±¨ ±·¤±¤¯¼¶¬¶o±²³µ¬±¦¬³¤¯ ¦²°³²±¨ ±·º¤¶²¥√¬²∏¶q≥²·«¨ §µ∏ª«¤¶ª²²§¤§¤³·¤¥¬¯¬·¼¬± ¦¨²¯²ª¬¦¤¯ ±¨√¬µ²±2
° ±¨·²©¶²¬¯q Χονχλυσιον : ∞¦²¯²ª¬¦¤¯ ±¨√¬µ²±° ±¨·²©¶²¬¯¬¶±. ·¯ ¤¨§¬±ª©¤¦·²µ¬±©²µ°¬±ªª¨ ±∏¬±¨ ¦µ∏§¨ Σ . µιλτιορρηιζα .
[ Κεψ ωορδσ] Σαλϖια µιλτιορρηιζα ; ¦²±·¨±·²©¬±²µª¤±¬¦¨¯ °¨ ±¨·¶~¶²¬¯
≈责任编辑 袁桂京 
栽培藏红花与藏红花培养细胞的成分对比研究
孙瑞强t o郭志刚t 3 o刘瑞芝t o孙素琴u
kt q清华大学 化工系生物化工研究所 o北京 tsss{w ~
u q清华大学 化学系分析中心 o北京 tsss{wl
≈摘要  目的 }比较人工栽培藏红花和藏红花培养细胞的主要成分种类以及含量的异同 ∀方法 }利用傅立叶
变换红外光谱法kƒ×Œ• l和高效液相色谱法k‹°≤l对两类样品进行对比分析 o借以考察藏红花细胞的培养效果 ∀结
果 }表明不同产地的藏红花的主要成分种类和含量差异显著 o与藏红花相比 o藏红花培养细胞中的代谢产物种类较
少 o但是其具有抗癌活性的藏红花素 „k¦µ²¦¬± „l的含量高于藏红花 u ∗ v倍 ∀结论 }藏红花培养细胞的主要成分种
类与人工栽培藏红花基本相同 o但其含量差异较大 o培养细胞现只具有部分替代性 ∀
≈关键词  藏红花培养细胞 ~藏红花 ~ ‹°≤ ~ƒ×Œ•
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls|2s{xs2sw
藏红花 Χροχυσ σατιϖυσ q系名贵中药 o具有很强
的活血化瘀功效≈t  ∀根据近年的研究表明 o藏红花
还具有良好的抗癌活性 o而且低毒无副作用≈u2x  o所
以引起人们的关注 ∀清华大学化工系生物化工研究
所经过数年研究 o从藏红花的培养细胞中分离到一
种藏红花素类物质k¦µ²¦¬± „l o经过北大肿瘤研究所
≈收稿日期  ussv2sy2t{
≈通讯作者  3 郭志刚 oר¯ }kstslyuz{xysv o ∞2°¤¬¯}ª∏²½«¬ªƒ ·¶2
¬±ª«∏¤q¨§∏q¦±
的体外试验证明其对肺癌和胃癌细胞具有较强的抑
制活性 ∀但是 o这种物质在藏红花中的含量较低 ∀
表明可以利用藏红花的植物细胞培养生产其有效成
分来改善这一问题 ∀
目前市售的藏红花几乎全部为人工栽培 o野生
藏红花极为少见 ∀由于人工栽培藏红花受栽培地区
的自然环境 !土壤条件以及季节的影响 o不同产地的
藏红花的成分种类和含量应该存在差别 ∀而采用细
胞培养技术获得的藏红花细胞是在恒温 !人工培养
#sx{#
第 u|卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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基和无光照条件下培养出来的 o所以其成分种类和
含量也应该与自然界生长的藏红花柱头有所差别 ∀
利用植物细胞培养技术生产藏红花细胞是否能够作
为藏红花的替代品 o需要与人工栽培藏红花作一些
成分比较研究 ∀为了了解不同产地的藏红花以及藏
红花培养细胞中的成分或含量是否存在差别 o作者
利用用高效液相色谱k‹°≤l和傅立叶变换红外光
谱法kƒ×∞• l对藏红花培养细胞和印度以及西班牙
生产的藏红花进行了对比分析 ∀
ƒ×Œ• 能够对被测物的全组分进行宏观分析 o避
免了目前一般检测方法中只测定样品中一二种有效
成分 o并以其含量的高低进行质量评价的缺陷 ∀本
研究将利用 ƒ×Œ• 和 ‹°≤定量分析法综合考察藏红
花和藏红花培养细胞的成分差别 o以期为藏红花细
胞培养提供参考 ∀
1 材料与方法
试验样品选用西班牙产藏红花 o印度产藏红花
k均购于北京同仁堂l o藏红花细胞k本研究室自己培
养l ∀
1 q1 红外光谱分析 采用 ≥³¨¦·µ∏° u sss傅立叶变
换红外仪k美国 °¨ µ®¬± ∞¯ °¨ µ公司l o光谱分辨率 w
¦°pt o测量范围 w sss ∗ wss ¦°pt o扫描次数 { o’°⁄
速度 s qu ¦°#¶pt o扫描过程中即时除去 ‹u’ 和 ≤’u
的影响 ∀样品采用压片法 o取干燥样品粉末和 Ž…µ
按照质量比约 tΒtss混和 !研磨均匀 o用压片机压片
k厚约 s qx °°l o同时制备 Ž…µ空白压片作背景扫
描 o选择藏红花培养细胞和藏红花作其红外光谱图 ∀
1 q2 ‹°≤ 分析 精密称取 v种样品各 uss °ªo分
别置于 ux °烧瓶中 o用 xs h甲醇2水体系共 us °
分 v次萃取 o合并萃取液 o补足失重 o定容 o用孔径为
s qwx Λ°的滤膜过滤后 o进入色谱测定 ∀色谱分析采
用 ≥‹Œ„⁄˜ p ≤„≥≥ p ts„√³型高效液相色谱k日
本岛津公司l o色谱柱为日本岛津公司分析色谱柱
°• ∞° p ’⁄≥k‹lŽŒ×kw qy °° ≅ uxs °°l ~检测波长
uxs ±° ~柱温 ws ε ~流动相甲醇2水 ~流速 t °#
°¬±pt ~流动相梯度 s ∗ ux °¬±o甲醇 s ∗ xs h ~ux ∗ vs
°¬±甲醇 xs h ~vs ∗ ws °¬±甲醇 xs h ∗ {s h ~ws ∗ wx
°¬±甲醇 {s h ∗ s ∀对照品 }¦µ²¦¬± „ ~¦µ²¦¬± …~¦µ²¦¬±
≤由本实验室分离纯化 o各对照品色泽为 „ 深红色 ~
…深土黄色 ~≤橙色 ~其纯度分别达到k|x q{z ?
s qutl h ok|{ qv| ? s qsxl h ok|t qwy ? t qvxl h o并经
清华大学化学系用质谱与核磁共振进行结构分析 o
并确定了分子量及其分子式 ∀
2 结果与讨论
2 q1 傅立叶变换红外光谱kƒ×Œ• l分析
从图 t中可以直观地看出 o藏红花培养细胞和
藏红花的光谱特征基本一致 o其强峰出现的位置相
同或相近 o只是有个别相对峰和相对强度略有不同 o
这说明藏红花培养细胞和藏红花在整体成分上具有
一致性 o同时也存在一定差异 ∀从图 u中 „图的波
数 u |uy ∗ u |vs ¦°pt处可以看到 o藏红花的甲基吸
收峰的相对强度较大 o并且伴有一个肩峰 o而藏红花
培养细胞则没有这个肩峰 o这是由于藏红花中含有
甲基 !亚甲基等基团的成分种类较多致 ∀说明藏红
花的烷基链相对较长和结构也比较复杂 ∀另外 o该
肩峰和 t uvs ¦°pt的较为明显的吸收峰k…图l表明
藏红花中含有较多的酯基 o说明其挥发油含量高于
藏红花培养细胞 ∀在 t yxs ¦°pt处培养细胞样品有
明显的双峰 o而藏红花则不明显 o这一区域是双键的
信号区≈x  o这说明培养细胞中的顺式结构物质多于
藏红花 ∀同时在 t xss ∗ t uss ¦°pt处藏红花培养细
胞与藏红花存在着明显的图谱轮廓差异 o藏红花培
养细胞在 t wsz ¦°pt以及 t v{x ¦°pt处出现较强的
吸收 o而藏红花则不存在 ∀该处的小吸收峰是羧基
的特征吸收峰 o说明在培养细胞中含有较多的酸与
盐 o这可能与藏红花培养细胞吸收的培养基有关 ∀
在指纹区kt sss ∗ wss ¦°ptl藏红花于 t szw
¦°pt出现大吸收峰 o而培养细胞是在 t syu ¦°pt处
出现 o这是由样品中氮与糖的含量差异所致 ∀同时 o
培养细胞的图谱在 {ss ¦°pt处出现了许多振动峰 o
而藏红花中则不明显 o这些振动峰的产生也是由各
种糖所形成的≈y  ∀这是因为藏红花培养细胞一直处
于高糖浓度环境下 o故而造成胞内糖分积累 ∀此外 o
收取细胞也会有少量糖分粘在细胞上 ∀
单独比较 u种藏红花时 o其图谱具有较高的相
似性 o只是在细微之处有峰型宽窄的区别 o这与氢原
子的振动k如在波数 v wss ¦°pt附近l有关 ∀在碳碳
双键的振动波区k波数在 t yxs ¦°pt附近l o印度产
藏红花的波数是 t yxw ¦°pt o而西班牙产藏红花的
波数是 t yw| ¦°pt o根据经验表明 o印度产藏红花的
油脂含量要高于西班牙产藏红花 ∀
通过 ƒ×Œ• 分析 o从宏观上了解藏红花培养细胞
与藏红花之间的异同 ∀红外光谱分析具有非分离提
取制定宏观指纹的能力 o基于红外光谱丰富的指纹
#tx{#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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性以及其部分特征峰的峰位 !峰形变化 o可从宏观上
较好地反应出样品的原貌 ∀检测结果清楚地表现出
了藏红花培养细胞与藏红花之间的非可溶性物质的
异同 o为在某些成分结构的推断上起到了辅助作用 ∀
图 t v种样品红外图谱
t q藏红花培养细胞 ~u q印度产藏红花 ~
v q西班牙产藏红花 k图 u同l
图 u 红外局部图
2 q2 高效液相色谱k‹°≤l分析
从图 v ∗ 图 x的 ‹°≤分析谱图可以看出 o与藏
红花比较 o藏红花培养细胞在 uxs ±°处的出峰数量
相对较少 o说明藏红花培养细胞的胞内二次代谢产
物的种类少于藏红花 ~从峰的保留时间上看 o藏红花
培养细胞所含有的物质峰在藏红花中都存在 ∀分析
其原因 o可能是在藏红花素合成培养过程中 o采用了
定向诱导技术 o既添加一些有利于藏红花素合成的
调控物质和前体物质 o从而使细胞的二次代谢产物
方向趋向于某些藏红花素及其结构相近的共轭多烯
及其苷类化合物的合成 ∀作为藏红花 o其化学成分
的种类还包括黄酮类 o挥发油 o藏红花醛≈t oz 等多种
与藏红花素结构相差较大的化合物 ∀因此 o藏红花
细胞中的成分少于藏红花是很正常的 ∀因为植物二
次代谢产物的合成 o其最重要的原因就是提高植物
体对多变的自然环境的适应性 ∀而定向培养的藏红
花细胞所接受的物理环境比较单一 o其合成的二次
代谢产物种类也就相对减少 ∀由于藏红花是处在复
杂的自然环境下的产物 o其二次代谢物质的种类必
然十分丰富 o但是并不是其所有的成分都与人们所
需求的目标产物相吻合 o所以通过细胞培养技术提
高目标产物并减少其他不需要的成分更有利 ∀
图 v 藏红花培养细胞的 ‹°≤ 图谱
t q¦µ²¦¬± „ ~u q¦µ²¦¬± …~v q¦µ²¦¬± ≤k图 w o图 x同l
图 w 西班牙产藏红花 ‹°≤图谱
从表 t见 o从藏红花培养细胞中分离出来的 v
种藏红花素中 o只有具有良好抗癌活性的¦µ²¦¬± „的
含量明显高于藏红花 o是其他 u种藏红花的 u ∗ v
倍 o但是其 ¦µ²¦¬± …o¦µ²¦¬± ≤ 的含量却低于 u种藏红
花 ∀一般来说 o培养细胞具有与植物体相同的次生
代谢能力 o但由于培养细胞处于比较单一和稳定的
环境下 o其次生代谢能力有所降低 ∀ ≤²±¶·¤¥¨¯等对
细胞培养中二次产物的形成指出 o二次代谢产物的
积累 o依赖于植物细胞中特殊生物化学和结构上的
修饰 o而部分修饰是可以诱导的≈{  ∀作者在藏红花
细胞培养中采取了代谢调控技术 o¦µ²¦¬± „在定向诱
导下提高了含量 o但是其他代谢产物的合成则受到
了抑制 o所以各种次生代谢产物的表达水平与在自
然界生长的植物体就产生了差异 ∀这表明用植物培
养细胞直接用于中药会存在很大问题 o如果只生产
植物体内的某种有效成分却具很大优势 ∀
表 t 培养细胞与人工栽培藏红花的
藏红花素类成分含量 °ª#ªp t
样品 ¦µ²¦¬± „ ¦µ²¦¬± … ¦µ²¦¬± ≤
藏红花培养细胞 tz q{ | qx y q{
西班牙产藏红花 w qz tw qw t| qy
印度产藏红花 x qt ty qx t{ qs
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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3 结论
由于 ƒ×Œ• 法具有不需对样品进行分离提而取
直接快速地检测样品的优点 o而且也可以利用其红
外光谱的特征吸收峰的位置以及强度进行宏观的分
析 ∀检测结果表明 ou种藏红花和藏红花培养细胞
的主要成分基本相同 o这为细胞培养法生产二次代
谢产物提供理论支持 ∀
图 x 印度产藏红花 ‹°≤ 图谱
‹°≤法能够比较精确地检测出样品的成分种
类和其含量差异 ∀从分析结果来看 o藏红花培养细
胞与西班牙产藏红花或印度产藏红花在物质数量和
含量上均存在较大差别 o但是藏红花培养细胞中所
含有的成分在藏红花中均存在 o表明利用藏红花细
胞培养可以定向生产其有效成分 ∀结合 u种分析方
法 o可以从整体到局部全面地考察藏红花培养细胞
与藏红花在成分上的差异 o可以更科学地判断和了
解植物细胞培养生产次生代谢产物的可行性 ∀
≈参考文献 
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 q上海 }上海人民出版社 ot|zz q
uyz q
≈u  ∞¶¦µ¬¥¤±²o „¯ ²±¶² Š o≤²¦¤°µ¤§²¶ o ετ αλ. ≤µ²¦¬±o¶¤©µ¤±¤¯ ¤±§
³¬¦µ²¦µ²¦¬±©µ²° ¶¤©©µ²± k Χροχυσσατιϖυσql ¬±«¬¥¬··«¨ ªµ²º·«²©«∏2
°¤± ¦¤±¦¨µ¦¨¯¯¶¬± √¬·µ²q Χανχερ Λεττ , t||y otsskt2ul }uv q
≈v  Š¤µ¦¬¤2 ’¯ °² ⁄ ≤ o•¬¨¶¨ ‹‹ o∞¶¦µ¬¥¤±²o ετ αλ. ∞©©¨¦·¶²© ²¯±ª2·¨µ°
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χυσσατιϖυσ Λ.l } „± ∞¬³¨µ¬°¨ ±·¤¯ ≥·∏§¼ ¬± ׫¨ •¤·q Νυτριτιον Ανδ
Χανχερ, t||| ovxkul }tus q
≈w  ∞¶¦µ¬¥¤±² ∏¯¬²o •m²¶Œ±°¤¦∏¯¤§¤o ƒ µ¨±e±§¨½ ²¶i „ qŒ¶²¯¤·¬²± ¤±§
¦¼·²·²¬¬¦³µ²³¨µ·¬¨¶²© ¤ ±²√¨¯ ª¯¼¦²¦²±­∏ª¤·¨ ©µ²° ¦²µ°¶²© ¶¤©©µ²±
³¯¤±·k Χροχυσσατιϖυσql q Βιοχηιµ Βιοπηψσ Αχτα , t||| otwuyktl }
utz q
≈x  ∞¶¦µ¬¥¤±²∏¯¬²o⁄m¤½2Š∏¨µµ¤  o²¶i  o ετ αλ. Œ± √¬·µ²¤¦·¬√¤·¬²± ²©
°¤¦µ²³«¤ª¨¶¥¼ ¤ ±²√¨ ¯ ³µ²·¨²ª¯¼¦¤± ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ¦²µ°¶²© Χροχυσ
σατιϖυσq Χανχερ Λεττ , t||| otwwktl }tsz q
≈y  谢晶曦 q红外光谱在有机化学和药物化学中的应用 q北京 q科
学出版社 ot|{z quz q
≈z  董玉睿 q浅谈西红花的药理研究概况 q天津中医学院学报 o
usss ot|kul }xv q
≈{  奚元龄 o颜昌敬 q植物细胞培养手册 q北京 q农业出版社 o
t||u qvtz q
Χοµ παρισον ον ινγρεδιεντσ βετωεεν χυλτυρεδ χελλ ανδ χυλτιϖατεδ σαφφρον πιστιλσ
≥˜‘•∏¬2 ¬´¤±ªt oŠ˜’ «¬2ª¤±ªt oŒ˜ •∏¬2½«¬t o≥˜‘≥∏2 ¬´±u
(t . ∆επαρτµεντ οφ Χηεµιχαλ Ενγινεερινγ , Τσινγηυα Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tss{w , Χηινα ;
u . ∆επαρτµεντ οφ Χηεµιστρψ, Τσινγηυα Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss{w , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¦²°³¤µ¨ ·«¨ §¬©©¨µ¨±¦¨¶²©¤¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¥¨·º¨¨ ±·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨§¦¨¯¯¶¤±§¦∏¯·¬√ ¤¨·¨§¶¤©©µ²± ³¬¶·¬¯¶q
Μετηοδ : ׫¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·¥¼·«¨ ©²∏µ¬¨µ·µ¤±¶©²µ°¬±©µ¤µ¨§¶³¨¦·µ²¶¦²³¼ kƒ×Œ• l ¶³¨¦·µ¤¤±§«¬ª«³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ª2
µ¤³«¼ k‹°≤l q Ρεσυλτ : ׫¨ §¤·¤¬±§¬¦¤·¨§·«¤··«¨ ¶³¨¦¬¨¶¤±§¦²±·¨±·¶¤¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬±¶¤©©µ²± ³¬¶·¬¯¶©µ²° §¬©©¨µ¨±·³¯¤¦¨¶º µ¨¨ §¬©©¨µ2
±¨·q׫¨ ¶³¨¦¬¨¶²©¤¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬±·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨§¦¨¯¯¶¤µ¨ ¯¨ ¶¶·«¤±·«²¶¨ ¬±¦∏¯·¬√¤·¨§¶¤©©µ²± ³¬¶·¬¯¶q‹²º √¨ µ¨o·«¨ ∏´¤±·¬·¼ ²©¦µ²¦¬± „ o
º«¬¦«¶«²º §¨ª²²§¤±·¬¦¤±¦¨µ ©¨©¨¦·o¬¶u2v·¬° ¶¨°²µ¨ ·«¤±·«¤·¬± ¦∏¯·¬√¤·¨§¶¤©©µ²± ³¬¶·¬¯¶qΧονχλυσιον : ׫¨ ¤¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶²©·«¨ ·¬¶¶∏¨
¦∏¯·∏µ¨§¦¨¯¯¶¤µ¨ ¶¬°¬¯¤µ·²·«²¶¨ ²©¶¤©©µ²± ³¬¶·¬¯¶o¥∏··«¨¬µ¦²±·¨±·¶¤µ¨ §¬©©¨µ¨±·q׫¨µ¨©²µ¨ o·«¨ ·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨§¦¨¯¯¶¦¤± ²±¯¼ ¥¨ ·«¨ ³¤µ·2
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[ Κεψ ωορδσ] ¦∏¯·∏µ¨§¦¨¯¯ ~¶¤©©µ²±~ ‹°≤ ~ƒ×Œ•
≈责任编辑 袁桂京 
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