全 文 ：反相高效液相色谱
测定清开灵注射液中栀子苷的含量
王京辉 o金红宇 o尤立华 o张小茜
k北京市药品检验所 o北京 tsssvxl
清开灵注射液为临床常用中药 o是由胆酸 !珍
珠母 !猪去氧胆酸 !栀子 !水牛角 !板蓝根 !黄芩苷 !金
银花 {味中药经加工制成 ∀具有清热解毒 o化痰通
络 o醒神开窍的功能 o用于中风偏瘫 !肝炎 !上呼吸道
感染等多种疾病的治疗 ∀清开灵注射液已收载于
5卫生部药品标准6中药成方制剂第十六册≈t o其含
量测定项为分光度法控制黄芩苷的含量 o无栀子苷
的定量方法 ∀文献报道 o栀子苷的定量方法多为高
效液相色谱法≈u2w ∀为了更好的控制产品质量 o本
文又建立了采用高效液相色谱法测定栀子苷kª¨ ±¬2
³²¶¬§¨l含量的方法 ∀采用酸沉淀除去杂质的前处理
方法 o有效地排除了黄芩苷及大量有机酸对栀子苷
的干扰 o该方法操作简便 !可行 o重现性好 ∀
1 仪器与试剂
° ttss高效液相色谱仪 ∀栀子苷对照品k中
国药品生物制品检定所 o批号 zw|2|uswl ∀清开灵
注射液 k山西太行制药厂提供 o批号 sssysw2u o
sssxt{2y osts{su2w osts{tz2yl ∀乙腈为色谱纯 ∀其
他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 ≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs °° ox
Λ°l ∀流动相乙腈2水 kts Β|sl o流速 s qx °#
°¬±p t o检测波长 uv{ ±° o柱温 ux ε ∀对照品栀子
苷与杂质峰分离度大于 t qx ∀理论板数按栀子苷峰
计算应不低于 v sss ∀
2 q2 供试品溶液及对照品溶液的制备 供试品溶
液及阴性对照溶液的制备 精密量取本品 us °o
置具塞锥形瓶中 o精密加入磷酸溶液kt ψ vlt °o
混匀 o置冰箱中静置t«o取出 o放置至室温 o离心
kv sss µ#°¬±p tlus °¬±o精密量取上清液 x °o置
xs °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o用微孔滤
≈收稿日期 ussu2sw2tx
≈通讯作者 ר¯ }kstslyytuwwtw
膜ks qwx Λ°l滤过 o取续滤液 o作为供试品溶液 ∀阴
性对照溶液的制备是按处方中药味的比例 o自配不
含栀子的群药 o按其工艺制成空白制剂 o再按供试品
溶液制备方法制备 ∀
对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品适
量 o加甲醇制成每 t °含 vs Λª的溶液 o即得 ∀在
上述色谱条件下 o分别精密吸取对照品溶液与供试
品溶液 !阴性对照溶液各 ts Λo注入液相色谱仪 o
测定 o得到栀子苷对照品溶液 !供试品溶液与阴性对
照溶液的色谱图k见图 t ∗ vl ∀
图 t 栀子苷对照品色谱图
图 u 供试品色谱图
图 v 阴性对照色谱图
2 q3 线性关系考察 精密吸取栀子苷对照品溶液
ks qtwx { °ª#°p tls qx ot ot qx ou ou qx °o分别置
x °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o分别精密吸
#zzz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ {
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取 ts Λo注入液相色谱仪 o记录峰面积 o以栀子苷
对照品进样量kΛªl为横坐标 o峰面积积分值为纵坐
标 o绘制标准曲线 ∀回归方程 }Ψ u{yu .{ Ξ n
| .tu , ρ s q||| | o结果表明 o栀子苷对照品在
s qtwx { ∗ s qzu| s Λª线性良好 ∀
2 q4 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 o进样
ts Λo连续重复进样 y次 o结果 ≥⁄ s qy| h k ν
yl ∀
2 q5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 o进样
ts Λo分别于配制后 s ou ow o{ oty ow{ «测定 o结果
表明 o供试品溶液在 w{ «内基本稳定 ∀
2 q6 重现性试验 精密量取同一批样品 y份 o按供
试品溶液制备方法制备 !测定栀子苷含量 ∀结果表
明本法重现性良好 o ≥⁄ t qu h k ν yl ∀
2 q7 加样回收率试验 精密量取已知含量的同一
批号的样品k含量 s qv{s | ª#ptly份 o分别精密加
入栀子苷对照品 o按供试品溶液的制备方法制备及
上述色谱条件测定含量 o计算回收率 o结果见表 t ∀
表 t 清开灵注射液中栀子苷回收率测定结果
测得量r°ª 回收率r h ξr h ≥⁄r h
z qyxw |z qy|
z qzy| tss qyt
z qyty |y qzu |{ qu
t qyz qyxt |z qyt
z qytv |y qyx
z qzvs || qyu
注 }样品含量均为 v q{s| °ªo加入量为 v q|vy °ª
2 q8 样品测定
分别精密吸取栀子苷对照品溶液及供试品溶液
各 ts Λo按上述色谱条件测定 o计算栀子苷含量 o
测定结果批号为 sssysw2u osssxt{2y osts{su2w o
sts{tz2y的样品中栀子苷含量分别为 s qv{ os qws o
s qw{ os qv| °ª#°p t ∀
3 讨论
3 q1 栀子苷为环烯醚萜苷类成分 o在水 !乙醇 !甲醇
中均有较好的溶解性 o试验中采用甲醇稀释样品 ∀
但由于处方中含有大量有机酸类成分及黄芩苷 o它
们在酸性环境下均可析出 o所以采用酸沉淀后离心
的方法 o除去有机酸和黄芩苷 ∀曾试用 y °²¯ #p t
盐酸溶液 !磷酸溶液kt ψ ul !磷酸溶液kt ψ vl !磷酸
溶液kt ψ wl !磷酸溶液kt ψ xl 除去杂质 o结果磷酸
溶液kt ψvl除杂质的效果最佳 o且样品色谱图中 o栀
子苷峰可与杂质峰较好分离 o方法操作简单 !易行 ∀
3 q2 由于本品为复方制剂 o成分复杂 o为使色谱图
中栀子苷与其他杂质峰能获得满意的分离 o我们试
用过多种流动相 }乙腈2水ktsΒ|sl !乙腈2t h磷酸
kyΒ|wl !甲醇2水kusΒ{sl !乙腈2s qsx °²¯ #pt磷酸
氢二钠溶液k用磷酸调节 ³ 为 v qxlk|uΒ{l作为流
动相 o经实验 o采用流动相乙腈2水ktsΒ|sl时 o栀子
苷对照品峰形优于其他流动相 o且样品中栀子苷峰
可与杂质峰完全分离 ∀
3 q3 本方法样品预处理简单 o回收率高 o重现性好 o
可作为清开灵注射液的质量控制标准 ∀
≈参考文献
≈t 卫生部药品标准k中药成方制剂l q第十六册 qt||{ qtxs q
≈u 中国药典 q一部 qusss qust q
≈v 聂凌云 o曹 红 o刘文尧 q反相高效液相色谱法测定复方茵陈注
射液中栀子苷的含量 q药物分析杂志 ot||z otzkyl }wtu q
≈w 狄留庆 o郭 戎 o谢 辉 q高效液相色谱法测定加味逍遥丸中栀
子苷和芍药苷的含量 q中国中药杂志 ot||z ouukttl }yzt q
≈责任编辑 李 禾
°≤2∞≥⁄法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量
朱德领 o毛黎静 o杨根元
k浙江三九邦而康药业有限公司 o浙江 浦江 vuuussl
黄芪注射液为部颁标准所收载的品种≈t o其功
≈收稿日期 ussv2sy2tx
≈通讯作者 ר¯ }ksxz|lwtxxxy{
能为益气养元 !扶正祛邪 !养心通脉 !健脾利湿 ∀黄
芪甲苷为有效成分之一 o标准中采用 ×≤2≥法测定
其含量 o但该法操作繁琐 o薄层条件不易控制 ∀有文
献报道采用 °≤2∞≥⁄法测定黄芪药材中的黄芪
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第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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