全 文 ：大黄对小鼠肠道免疫分泌物的影响
胥 楠 o陈晓理 3 o芦灵军 o次仁桑珠
k四川大学 华西医学中心 附属华西医院 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要  目的 }观察大黄治疗组和正常组小鼠肠道免疫分泌物的变化 ~探讨大黄对肠道黏膜屏障保护作用的
机制 ∀方法 }实验用 …„…r¦小鼠 ∀分成生理盐水灌胃组和 ts h大黄煎剂灌胃组 ∀uw «后处死动物 o灌洗肠道 o收
集灌洗液 o分别测定 Œª„ !总蛋白 !补体 ≤v !高密度脂蛋白k‹⁄l !µ型磷脂酶 „uk°„ul活力和溶菌酶的含量 ~同时切
取并收集各小鼠小肠组织 ws °ªo运用 • ×2°≤• 扩增 o琼脂糖凝胶电泳成像检测隐窝素2t基因和隐窝素2w基因扩增
片段含量 ∀结果 }u组小肠灌洗液中 Œª„ o总蛋白 o补体 ≤v o溶菌酶含量以及 µ型 °„u 活力有统计学差别k Π 
s1sxl ∀u组小肠灌洗液中 ‹⁄含量无统计学差别k Ё s1sxl ∀u组小肠组织匀浆中隐窝素2tk≤µtl基因扩增片段含
量与隐窝素2wk≤µwl基因扩增片段含量无统计学差别k Ё s1sxl ∀结论 }大黄能促进肠黏膜上皮分泌多种免疫相关
物质 o对于减轻创伤 !烧伤 !休克等严重应激反应时的肠黏膜损伤 o防止肠道菌群移位和全身炎症反应综合征的发
生具有重要的理论和临床意义 ∀
≈关键词  大黄 ~肠道免疫功能 ~肠道黏膜屏障
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlt{2twwt2sv
≈收稿日期  ussw2tu2tw
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv||zs|vul
≈通讯作者  3陈晓理 oר¯ }tv{{t{{sz|t
大黄对肠道黏膜屏障的保护作用已为许多临床
和动物实验所证实≈t ou  ∀然而其具体作用机制尚需
深入地研究阐释 ∀作者以往实验发现大黄对肠道运
动具有促进作用 o这是其作用机制之一 ∀但是 o大黄
是否还具有影响肠道免疫状态的功能却不甚清楚 ∀
为此 o作者观察了大黄对正常小鼠肠道分泌物质 o如
Œª„ !总蛋白 !补体 !高密度脂蛋白 ! µ型磷脂酶 „u
k°„ul !溶菌酶以及肠道抗生素肽k隐窝素l的作用 ∀
1 材料和方法
111 动物和材料 us只 …„„r¦小鼠 o体重 uy ∗
vv ªo购自四川大学华西医学中心动物实验中心 ∀
大黄购于成都市五块石中药批发市场 o原产于四川
阿坝州 o属南大黄 Ρηευµ οφφιχιναλε …¤¬¯o配制成 s1t ª
#°pt大黄煎剂 o煮沸 t °¬±后离心取上清液 ∀Œª„
放射免疫检测试剂盒购自上海生物制品研究所 ∀
‹Œ×„≤‹Œztzs„型全自动生化分析仪购自日本东芝
公司 ∀≥°„u 鉴定盒购自 ≤¤¼°¤± ≤«¨ °¬¦¤¯ ≤²°³¤±¼∀
溶菌酶购于中国科学院生物物理所生化厂 ∀溶壁微
球菌由四川大学华西医学中心微生物教研室提供 ∀
’±¨ ≥·¨³ • ‘„ °≤• Ž¬·k规格 }xs• l购自日本 פŽ¤•¤
公司 ∀°≤• 产物纯化试剂盒k规格 }xs次l及 Β2巯基
乙醇均购自上海华舜生物工程有限公司 ∀
112 方法 us只小鼠分为 u组 }正常对照组k ν €
tsl ~大黄灌胃组k ν € tsl ∀实验组给以 ts h大黄灌
胃 o每次 xs °ªo每日每只 uss °ª~对照组给予等量生
理盐水 ∀uw «后处死小鼠 o立即剖腹分别切取各小
鼠小肠全长k从屈氏韧带至回盲部l o称重 !量长度 ∀
用生理盐水洗净血渍及粪便 o以 ts h醋酸溶液冲洗
肠腔并收集灌洗液 o于 w ε ouz sss µ#°¬±pt条件下
离心 vs °¬±o收集上清液 ∀同时 o用电子天平准确称
量各鼠小肠 ws °ª∀小肠灌洗液用放免法测定 Œª„ ~
用 ‹Œ×„≤‹Œztzs„ 型全自动生化分析仪测定总蛋
白 !补体 ≤v和 ‹⁄~用 ¶°„u鉴定盒测定 µ型 °„u
活力 ~溶菌酶含量测定利用样本溶菌酶含量与标准
曲线对比求得 ~隐窝素基因扩增片段含量测定按照
购买的试剂盒说明书步骤进行 o最后的纯化产物送
基康公司进行 ⁄‘„序列分析 ∀
113 数据处理 全部数据采用 cξ ? σ表示 o采用成
组设计两样本均数比较 τ检验 ∀
2 结果
小鼠肠道灌洗液中的 Œª„ 含量 ou组有非常显
著差别k Π s1stl ~总蛋白含量 ou组有非常显著差
别k Π s1stl ~补体 ≤v 含量 ou组有显著差别k Π 
s1sxl ~‹⁄含量 ou组无统计学差别k Ё s1sxlk表
#twwt#
第 vs卷第 t{期
ussx年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ t{
≥¨ ³·¨°¥¨µoussx
tl ∀ µ型 °„u 活力 ou 组有非常显著差别k Π 
s1sstl ~溶菌酶含量 ou 组有非常显著差别 k Π 
s1sstlk表 ul ∀大黄组小鼠小肠组织匀浆中隐窝素2
t基因扩增片段含量较对照组有增加 o但无统计学
差别k Ё s1sxlk表 ul ∀
大黄组小鼠小肠组织匀浆中隐窝素2w基因扩
增片段含量与对照组比较无统计学差别k Ё s1sxl
k表 ul ∀
表 t 正常和大黄治疗小鼠肠道灌洗液中免疫
分泌物质比较kcξ ? σ, ν € tsl
组别 Œª„ r°ª#pt 总蛋白rª#pt ≤vr°ª#pt ‹⁄r°°²¯#pt
对照组 |vqx ? tvqz uqsy ? sqzz uqzv ? sq|| w{qs ? tqs
实验组 txsq{ ? wwqytl txqxw ? tvqsvtl ttqv| ? |q|{ |yqv ? z|qv
注 }与对照组比较tl Π s1stk表 u同l
表 u 正常和大黄治疗小鼠肠道灌洗液及组织匀浆中免疫物质比较kcξ ? σ, ν € tsl
组别 µ型 °„urΛ°²¯#pt#°¬±pt 溶菌酶rΛª#°pt ≤µtr±ª#ˏpt ≤µwr±ª#ˏpt
对照组 s qtus w ? s qst{ |y z quuv ? t qtvx w ws| quuv ? uy qxty wux qztt ? wu qsws
实验组 s qywx v ? s qs{u wxtl uw qwwt ? v qswy ttl wuz qs{z ? uw qwtz wuw q{{u ? wv q|zw
3 讨论
大黄用于疾病的治疗已有几千年的历史 ∀大黄
所含的大黄酸kµ«¨¬±l !大黄素k °¨²§¬±l !芦荟大黄素
k¤¯²¨ °¨²§¬±l等成分能对多种细菌具有不同程度的
抑制作用 ∀然而 o实验证明 o大黄的体外杀菌作用较
弱 o不能解释危重疾病时大黄的治疗作用 ∀本实验
即是在除开大黄的促进肠道蠕动 o增加肠道对细菌
和毒素排除作用这一传统治疗机制的前提下 o探讨
了大黄与肠道黏膜屏障及肠道免疫功能之间的关
系 ∀
肠黏膜不仅是一层机械屏障更是一层卓有成效
的生物屏障 ∀它能分泌多种免疫相关物质 o其中包
括有获得性免疫的分泌型免疫球蛋白 ¶Œª„ !补体
≤v !黏蛋白和 ‹⁄o以及天然免疫的肠道抗生素肽
k隐窝素l !µ型 °„u和溶菌酶 ∀
Œª„被认为是肠道特异性免疫的主要成分 o除
能够中和病毒 !毒素和酶等生物活性抗原以外 o还具
有类似凝集素的功能 ∀由肠液中黏蛋白组成为主的
黏膜表面黏液毯成分通过特异性和非特异性机制发
挥黏膜保护作用 ∀ ≤v和 ‹⁄两者为炎症反应产物 o
前者增加黏膜的血循环 o后者具有内毒素结合作用 ∀
两者均对黏膜屏障有保护作用 ∀本实验中大黄灌胃
组大鼠肠道灌洗液 Œª„ !补体 ≤v !黏蛋白含量均明显
高于正常组 o显示大黄很好的诱导肠道特异性免疫
作用 ∀
由于分泌型免疫球蛋白 ¶Œª„ 合成十分复杂 ∀
因此 o对于肠道急性感染的防御主要依靠 µ型
°„u !溶菌酶 !隐窝素等天然免疫因子 ∀
在肠道中 µ型 °„u存在于潘氏细胞的噬天晴
颗粒中≈v  o当受到细菌刺激时潘氏细胞分泌 µ型
°„u入肠腔 o参与肠黏膜防御 ∀溶菌酶能水解革兰
阳性菌和革兰阴性菌如大肠杆菌等 o对真菌也有杀
灭作用≈w  ∀溶菌酶可改善和增强吞噬细胞吞噬和消
化功能 o促进免疫球蛋白的形成≈x  o增强免疫力 ∀本
实验中大黄灌胃组的这两种天然免疫因子含量与正
常组比较具有显著性差异 ∀
隐窝素具有广谱抗微生物活性 o对革兰阳性细
菌 !阴性细菌 !厌氧菌 !分枝杆菌 !霉菌 !梅毒螺旋体 !
钩端螺旋体 !部分包膜病毒均有杀伤作用≈y  ∀另外
隐窝素杀灭病原微生物后仍结合于抗原性微生物表
面 o形成隐窝素2抗原复合体 o经隐窝素受体 k如
≤≤• yl的介导 o从而促进未成熟树突状细胞对抗原
的摄取≈z  ∀在本实验中 o≤µt基因表达量较对照组
有增加而 ≤µw表达量基本不变 o二者在表达时没有
量的相关性 o提示二者表达的调节因素可能不一样
或者二者表达方式有差别 ∀
综上所述 o肠道黏膜免疫分泌物构成了肠道黏
膜的重要机械和生物屏障 o起到保护肠黏膜 o防止肠
道菌群移位 o预防创伤 !烧伤后继发感染以及全身炎
症反应综合征k≥Œ• ≥l甚至多器官功能障碍综合征
k’⁄≥l发生的作用 ∀而大黄在本次实验中显示了
极强的诱生肠黏膜免疫分泌物的功效 ∀正是大黄的
这种诱导黏膜人工炎症 o促进黏膜免疫相关物质分
泌的功能使得大黄必将成为重要的抗炎药物在重症
炎症治疗过程中发挥积极作用 ∀
≈参考文献 
≈t  陈德昌 q大黄对肠黏膜屏障保护作用的机制探讨 q中国危重
病急救医学 ot||y ok{l }ww| q
≈u  陈晓理 o冉瑞图 q大黄治疗急性胰腺炎的效果和机理 q华西医
科大学学报 ot||y ouz }wt{ q
≈v  Ž¯¼²«¤µ¤ ‹ o∞ª¤°¬‹ o≥«¬¥¤·¤ ≠ o ετ αλ. ¬ª«·°¬¦µ²¶¦²³¬¦¬°°∏±²2
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第 vs卷第 t{期
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中 国 中 药 杂 志
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Εφφεχτσ οφ ρηυβαρβ ον τηειµ µ υνε συβστανχεσσεχρετεδ
φροµ ιντεστινειν µιχε
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( Ηυαξι Ηοσπιταλ, Μεδιχαλ Χεντερσ οφ Ωεστ Χηινα , Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦° ¦¨«¤±¬¶° ²©µ«∏¥¤µ¥¬± ³µ²·¨¦·¬±ª·«¨ ¬±·¨¶·¬±¤¯ °∏¦²2° °¨¥µ¤±²∏¶¥¤µµ¬¨µ¬±·«¨
°¬¦¨ q Μετηοδ : …¤¯ ¥r¦°¬¦¨ º µ¨¨ §¬√¬§¨§¬±·²u ªµ²∏³¶oª¤√¤ª¨§º¬·«±²µ°¤¯ ¶¤¯¬±¨ ¤±§ts h µ«∏¥¤µ¥§¨¦²¦·¬²±oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q׫¨ ¤±¬°¤¯¶
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·²·¤¯ ³µ²·¨¬±o≤v o«¬ª«§¨±¶¬·¼ ¬¯³²³µ²·¨¬±o·¼³¨ µ°„u ¤¦·¬√¬·¼o¤±§¦²±·¨±·²© ¼¯¶²½¼°¨q„··«¨ ¶¤°¨·¬°¨ows °ª²©¶°¤¯¯¬±·¨¶·¬±¨ º µ¨¨ ¬±2
¦¬¶¨§¬± ¤¨¦« °²∏¶¨ q• √¨ µ¨¶¨ ·µ¤±¶¦µ¬³·¬²± ³²¯¼° µ¨¤¶¨ ¦«¤¬±µ¨¤¦·¬²± k• ×2°≤• l ¤±§ª¨¯¬°¤ª¨ ¤±¤¯¼¶¬¶º µ¨¨ ³¨µ©²µ° §¨·² §¨·¨¦··«¨ ¦²±·¨±·²©
·«¨ ¦µ¼³·§¬± ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±q Ρεσυλτ : ׫¨ ¦²±·¨±·²©Œª„ o·²·¤¯ ³µ²·¨¬±o·«¨ ≤v o ¼¯¶²½¼°¨o¤±§·«¨ ·¼³¨ µ°„u ¤¦·¬√¬·¼¬±¬±·¨¶·¬±¤¯ ¤¯√¤ª¨ §
­∏¬¦¨ ¬¨«¬¥¬·¨§·«¨ ¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ §¬©©¨µ¨±¦¨¶¥¨·º¨¨ ±·«¨ ·º²ªµ²∏³¶k Π s1sxl q׫¨ µ¨ º µ¨¨ ±²¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨µ¨±¦¨ ¬±·«¨ ²±·¨±·¶²©‹⁄o¦µ¼³·2
§¬±2t ¤±§¦µ¼³·§¬±2w ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¥¨·º¨¨ ±·«¨ ·º²ªµ²∏³¶k Ё s1sxl q Χονχλυσιον : • «∏¥¤µ¥¦²∏¯§¬±¦µ¨¤¶¨ ¶¨¦µ¨·¬²± ²©¶¨√ µ¨¤¯ ¬°°∏±¨
¤¶¶²¦¬¤·¨§¶∏¥¶·¤±¦¨¶²©·«¨ °∏¦²∏¶° °¨¥µ¤±¨ ¬± ±²µ°¤¯ ¬±·¨¶·¬±¨ o¬±§¬¦¤·¬±ª¤³²¶¶¬¥¬¯¬·¼·²¤¥¤·¨·«¨ ¬±­∏µ¼ ²©¬±·¨¶·¬±¨ °∏¦∏¶µ¨¶∏¯·¨§©µ²°
¶¨√ µ¨¨ ¶·µ¨¶¶¬±§∏¦¨§¥¼·µ¤∏°¤o¥∏µ± ¤±§¶«²¦®q׫µ²∏ª«¤¥²√¨ ° ¦¨«¤±¬¶°¶•«∏¥¤µ¥ °¤¼ ¤¯¶²µ¨§∏¦¨ ·«¨ ¬±¦¬§¨±¦¨ ²©¥¤¦·¨µ¬¤¯ ·µ¤±¶¯²¦¤·¬²±
¤±§¶¼¶·¨°¬¦¬±©¯¤°°¤·²µ¼ µ¨¤¦·¬²± ¶¼±§µ²°¨k≥Œ• ≥l q
[ Κεψ ωορδσ] • «∏¥¤µ¥~¬±·¨¶·¬±¤¯ ¬°°∏±¨ ©∏±¦·¬²±~ª∏·°∏¦²2° °¨¥µ¤±²∏¶¥¤µµ¬¨µ
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussx2sv2ty
≈基金项目  江苏省农业攻关项目k…∞ussuvvyl
≈通讯作者  3马海乐 oר¯ }ksxttlx{yuvyu o∞2°¤¬¯}°«¯ ƒ ∏­¶q¨§∏q¦±
无花果残渣中抗肿瘤成分的超临界
≤’u萃取和抑瘤试验
王振斌 o马海乐 3
k江苏大学 生物与环境工程学院 o江苏 镇江 utustvl
≈摘要  目的 }研究无花果残渣中抗肿瘤功效成分的超临界 ≤’u萃取技术及萃取物的体内外抗肿瘤效果 ∀方
法 }采用 ××法检测萃取物质的体外抗肿瘤活性 o研究残渣中抗肿瘤功效成分的最佳萃取条件 ~采用 ×× 法研究
萃取物质对 ˜|vz细胞 !|x⁄细胞和 „Š≥细胞 v株肿瘤细胞株的体外抑制作用 ~以小鼠移植性肝癌 ‹ ³¨¶为对象 o研
#vwwt#
第 vs卷第 t{期
ussx年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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