全 文 :药典6usss年版该项下方法进行测定 o结果不加挡
板平均溶散时间为 w qww ow qy{ ow q{u °¬±o符合规定 ∀
≈参考文献
≈t 范碧亭 q中药药剂学 q上海科技出版社 ot||z qv{s q
≈u 魏玉平 o刘 俊 q头痛舒滴丸的成型工艺研究 q中国实验方剂学
杂志 ousss oykwl }tz q
≈v 张志华 o赵新华 o孟庆军 q正交试验法优选益心酮滴丸制备工
艺 q中草药 ousst ovuktl }u{ q
≈责任编辑 刘
水解原位萃取薯蓣皂苷元的工艺条件研究
王 俊t ou o陈 钧t o杨克迪t o仰榴青v o欧阳臻t
kt q江苏大学 生物与环境工程学院 o江苏 镇江 utustv ~
u q华东船舶工业学院 生物技术学院 o江苏 镇江 utust{ ~
v q江苏大学 药学院 o江苏 镇江 utusstl
≈摘要 目的 }正交试验法研究利用穿山龙提取薯蓣皂苷元的生产工艺 ∀方法 }采用水解原位萃取法 o以薯蓣
皂苷元得率为指标 o确定了最佳工艺 o并将该工艺与传统工艺相比较 ∀结果 }穿山龙用含约 t qx °²¯ #p t硫酸的
zx h异丙醇水溶液在沸水浴中加热回流提取 w qx «o其提取效果最佳 o优于传统工艺 ∀结论 }该工艺薯蓣皂苷元得
率高 o成本低 o操作简单 o实用性好 ∀
≈关键词 水解原位萃取 ~薯蓣皂苷元 ~工艺条件 ~穿山龙 ~正交试验法
≈中图分类号 u{w qu ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlts2s|vw2sw
穿山龙原植物为薯蓣科植物穿龙薯蓣 ∆ιοσχορε2
α νιππονιχα ¤®¬±²qo分布在我国的东北 !西北 !华
北 !华东及四川等地 o根状茎入药 o具有活血舒筋 !消
食利水 !怯痰截疟等功效 o可用于治疗风寒湿痹 !慢
性气管炎 !消化不良 !劳损扭伤等疾病≈t ∀穿龙薯蓣
也是高质量的薯蓣皂苷元k§¬²¶ª¨ ±¬±l资源植物 o薯
蓣皂苷元是目前合成甾体抗炎药 !女用避孕药的重
要合成原料≈u ∀最新的药理研究表明 o薯蓣皂苷元
具有抑制骨肉瘤细胞中环氧化酶k≤ ÷¶l的活性≈v o
还具有降低胆固醇≈w ox o抗高脂血症≈y oz o刺激肝素
细胞生长与调控胆汁分泌≈{ o| 等作用 o是目前备受
关注的天然化合物之一 ∀
长期以来 o一直采用 ²·«µ²¦®法≈ts 的改进方法
提取薯蓣皂苷元 o即直接将植物加压酸水解其中所
含的皂苷 o然后用有机溶剂提取薯蓣皂苷元k简称加
压酸水解2有机溶剂萃取法l ∀该工艺操作繁琐 o需
≈收稿日期 ussu2ts2tx
≈通讯作者 王 俊 ר¯ }ksxttlxyv|y|z ∞2°¤¬¯} º¤±ª∏±¶
·²° q¦²°
要在高温高压下水解 o设备投资大 o能耗高 o生产周
期长 o成本高 o且提取物中杂质含量高 o需要脱色 !多
次的重结晶工艺 o纯化步骤多且难度大 o收率低 ∀本
研究采用水解原位萃取法提取薯蓣皂苷元 o无需高
温高压条件 o常压下即可获得高得率的产品 o且工艺
简单 o实用性强 ∀国内目前尚无相关文献报道 ∀
1 仪器与材料
≥≤ ≤txss 高效液相色谱仪k日本分光工
业株氏会社l ousss色谱工作站k浙江大学智能信
息研究所l o分析柱 ¬± ¶¬¯ ≤t{kw qy °° ≅ uxs °° o
x Λ° o日本 ≠ ×∞≤ ≤²µ³²µ¤·¬²±l oux Λ微量进
样器k美国 ≤ ×∞ l oysƒuxw薄板kx ¦° ≅ ts
¦° ≅ s qu °° o德国 ¬¨§¨ 2¯§¨ ¤•±公司l o2uss型旋
转蒸发器k瑞士
|¦«¬公司l o∞uws分析天平k上海
梅特勒2托利多仪器有限公司l o≥2s qx型高压反
应釜k威海化工器械有限公司l ∀
薯蓣皂苷元标准品k美国 ≥¬ª°¤公司l ∀盐酸 !
硫酸 !无水甲醇 !无水乙醇 !异丙醇 !石油醚k沸点
ys ∗ |s ε l !醋酸乙酯 o所用试剂均为分析纯 ∀双蒸
水 o本试验室自制 ∀药材穿山龙采于云南省东川县 o
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第 u{卷第 ts期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ ts
¦·²¥¨µoussv
经本校生药学研究所欧阳臻高级工程师鉴定为 ∆ .
νιππονιχα的干燥根茎 ,粉碎 ,过 10 目筛 ,备用 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 实验方案设计
根据穿山龙药材的性质及单因素预实验的结
果 o我们选择硫酸为催化剂 o异丙醇为有机溶剂 ∀本
实验中选取不同的硫酸浓度 !异丙醇浓度 !水浴温度
和提取时间为 w个考察因素 o以薯蓣皂苷元提取率
为指标 o选用 |kvwl正交表 o每个因素取 v个水平 o
因素与水平见表 t ∀
表 t 因素与水平表
水平
Α
硫酸浓度
r°²¯#p t
Β
异丙醇浓度
r h
Χ
水浴温度
r ε
⁄
提取时间
r«
t t qs yx {s v qx
u t qx zs |s w qs
v u qs zx tss w qx
2 q2 提取工艺
2 q2 q1 原位水解萃取法 准确称取 us qss ª样品
置 uxs °的圆底烧瓶中 o按实验条件分别加入含一
定浓度硫酸的含水异丙醇溶液 tus °o在一定温度
的水浴中加热回流提取一定时间 ∀提取完毕后 o将
反应物过滤 o滤液收集于三角瓶中 ∀用石油醚k沸点
ys ∗ |s ε l在磁力搅拌下进行多次液2液萃取 o萃取
液用 ×≤定性分析k展开剂为石油醚2醋酸乙酯
zΒv o薄板展开后喷 ts h u≥w 溶液 otsx ε 下烘干
显色 o薯蓣皂苷元的 ©值为 s qxzl ∀每萃取 s qx «
后 o换用新鲜溶剂 o继续萃取 o重复 w次 ∀最后 t次
的萃取液经 ×≤ 检测 o无薯蓣皂苷元特征点 o表明
有机溶剂的水溶液中的薯蓣皂苷元已提尽 ∀合并萃
取液 o先后用 w h ∗ { h的 溶液和蒸馏水反复
清洗 o去除石油醚中的有机溶剂 ∀回收石油醚至干 o
用无水乙醇溶解 o超声促溶 o定容 o待测定 ∀
2 q2 q2 加压酸水解2有机溶剂萃取法 准确称取两
份 us qss ª样品 o置高压反应釜中 o加入 u qx °²¯ #
pt的盐酸溶液 tus °o反应条件参照文献≈tt 的最
佳工艺进行水解 o并分别采用索氏提取法和加热回
流提取法提取薯蓣皂苷元 ∀分别在提取器的底部烧
瓶中加入 uxs °石油醚 o水浴 |s ε 加热回流 o至
×≤ 法检测已提取干净为止 ∀提取完毕后 o回收石
油醚至干 ∀将提取物用无水乙醇溶解 o定容 o作为供
试品溶液 ∀
2 q3 含量测定及数据处理
2 q3 q1 色谱条件 色谱柱 ¬± ¶¬¯ ≤t{kw qy °° ≅
uxs °° ox Λ°l o流动相甲醇2水k|wΒyl o波长 us|
±° o流速 t °# °¬±p t o柱温 ws ε o进样量 ts Λ∀
薯蓣皂苷元在上述色谱条件下与其他成分实现了基
线分离 ∀在本文色谱条件下 o薯蓣皂苷元标准品与
样品的谱图见图 t ∀
图 t 薯蓣皂苷元标准品与样品的色谱图
q标准品
q样品 t q薯蓣皂苷元
2 q3 q2 标准曲线的绘制 取薯蓣皂苷元标准品约
xs qu °ªo精密称定 o用无水乙醇配制浓度为 t qssw
Λª#°p t的标准品溶液 ∀分别取 t ox oz o| otu otx o
tz Λ进样 o各个点重复 v次 o按上述色谱条件测定 o
以峰面积为纵坐标 o以薯蓣皂苷元标准品的量为横
坐标 o绘制标准曲线 o回归方程 Ψ ttv ||v .vz Ξ n
w| swy .zs , ρ s q||| { o线性范围为 t qs ∗ tz qsz
Λª∀
2 q3 q3 样品测定及数据处理 将供试品溶液用
s qwx Λ°微孔膜过滤 o弃去粗滤液 o精密吸取 ts Λ
进样 o按 2 q3 q1 条件测定不同提取条件下穿山龙中
薯蓣皂苷元的含量 o计算生药中薯蓣皂苷元的提取
率 o所得结果与极差分析见表 u ∀
由正交试验数据结果可以看出 o各因素的影响
次序为 Α Β Χ ∆ ~各因素不同水平的影响次序
为 Αu Αv Αt , Βv Βu Βt , Χv Χu Χt , ∆v
∆u ∆t ,因此选择最佳提取工艺为 Αu Βv Χv ∆v o即
穿山龙用含 t qx °²¯ #pt硫酸的 zx h 异丙醇水溶
液 o在 tss ε 水浴中加热回流 o提取 w qx «后采用石
油醚进行多次液2液萃取 o直至萃取完全 ∀
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第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ ts
¦·²¥¨µoussv
表 u 水解原位萃取法提取工艺的正交试验数据
试验号 薯蓣皂苷元提取率r h
t s qw{y
u t quxz
v u qty|
w u qsx{
x u qus{
y u qttv
z t q|ws
{ u qsst
| u qsw|
2 q4 验证试验
为考察上述优选提取工艺的稳定性 o按最佳提
取工艺条件重复 v次 o分别测定提取物中薯蓣皂苷
元的含量 o结果见表 v ∀v次测定结果均优于正交试
验表中的任何一组 o说明该工艺稳定可行 ∀
表 v 工艺验证实验结果
² 薯蓣皂苷元提取率r h 平均提取率r h
t u quv{
u u quvs u quvw
v u quvx
2 q5 水解原位萃取法与传统的加压酸水解法提取
薯蓣皂苷元的工艺比较
用正交试验后选取的最佳水解原位萃取法提取
工艺和目前常用的传统提取方法 ) ) ) 加压酸水解2
有机溶剂提取工艺 o对同一批样品进行提取 o对提取
条件及提取率进行比较k见表 wl ∀结果表明 o与加
压酸水解 p有机溶剂萃取法相比 o水解原位萃取法
的提取条件温和 o无需高温高压设备 o生产成本明显
降低 o生产周期大大缩短 o薯蓣皂苷元提取率与其相
当 o操作简便 o实用性强 ∀
表 w 水解原位萃取法与加压酸水解2有机溶剂萃取法的
提取条件及薯蓣皂苷元提取率的比较
工艺参数 水解原位萃取法 加压酸水解2有机溶剂提取法
温度 tss ε tws ε r|s ε
压力 常压 s qu ∗ s qw °¤r常压
时间 w qx « w «k水解lrtu «k溶剂提取l
提取率 u quvw h u qywz h k索氏提取法l
t qxys h k加热回流法l
注 }文中的样品均未作预发酵处理
3 讨论
3 q1 作者参照文献≈tu otv o采用单因素试验对催
化剂 !有机溶剂的选择以及各因素对薯蓣皂苷元提
取率的影响均作了考察 o其中发现 }≠同一摩尔浓度
的盐酸与硫酸的最佳水解效果相当 o从水解反应的
时间进程来看 o盐酸催化的水解反应温和 o反应曲线
圆滑 o薯蓣皂苷元在反应液中较稳定 ~而硫酸催化的
反应较激烈 o且苷元不稳定 ∀这与盐酸和硫酸的分
子特性有关 o≤¯分子小 o比较活泼 ~而 u≥w 分子
较大 o氧化性很强 ∀但是 o硫酸只需要 w «就能够获
得最大的薯蓣皂苷元得率 o且比盐酸反应 tu «的得
率略高 o因而只要控制好硫酸浓度及反应时间 o就能
获得较好的水解效果 o故选择硫酸为催化剂 ~因为
实现水解原位萃取法的关键在于选择合适的有机溶
剂最大程度的溶解薯蓣皂苷类化合物和薯蓣皂苷
元 o一方面保证薯蓣皂苷类化合物的萃取和水解完
全 o另一方面要保证其苷元的萃取完全 ∀考虑到薯
蓣皂苷类化合物易溶于 zs h的甲醇水溶液 o而薯蓣
皂苷元易溶于氯仿 !甲醇 !乙醇等溶剂 o因此拟选择
极性较大的溶剂系统 o实验比较了甲醇 !乙醇 !异丙
醇 !丙酮 !正丁醇等不同极性溶剂的提取效果 o结果
表明异丙醇是非常合适的溶剂 ∀ ≈单因素试验还对
酸的浓度 !有机溶剂的浓度 !反应温度 !反应时间以
及粗提物的纯化方法进行了探讨 o其结果为本文的
正交试验法提供了基础资料和试验范围 ∀
3 q2 本文的所有样品均未作预发酵处理 o目的是减
少预发酵工艺中的因素对薯蓣皂苷元提取率的影
响 o但若在实际使用水解原位萃取法提取之先作预
发酵处理 o估计薯蓣皂苷元的得率还要提高 ∀
3 q3 本文通过正交试验法对穿山龙中薯蓣皂苷元
的水解原位萃取法提取工艺进行了优化 o并按最佳
工艺进行了验证实验 o该工艺简单易行 o生产成本大
大降低 o适合工业生产 ∀水解原位萃取法为彻底解
决我国目前生产薯蓣皂苷元的工艺所带来的能耗
高 !周期长 !维护高温高压设备投资大等一系列问题
找到了一个投资少 !见效快的新思路 o其大规模的工
业化应用是我们下一步研究和探索的问题 ∀
≈参考文献
≈t 柳全文 q穿山龙的成分 !药理及临床应用研究概况 q山东中医
杂志 ot||{ otzktl }u| q
≈u 谌 芳 q苦良姜中薯蓣皂苷元的提取及应用 q云南化工 ousss o
uzkxl }tz q
≈v ≥¤±§µ¤ ²¤¯¬¦o
¨ µ·µ¤±§¬¤ªµ¨ q °¯ ¤±·≥·¨µ²¬§o⁄¬²¶ª¨ ±¬± o±2
§∏¦¨¶³²³·²¶¬¶o≤¨¯¯ ≤¼¦¯¨µµ¨¶·¤±§≤ ÷ ¦·¬√¬·¼¬± ¶·¨²¶¤µ2
¦²°¤ ≤¨¯ ¶¯qƒ∞
≥ ¨··¨µ¶ousst oxsy }uux q
≈w °²ª² o ±¨§²½¤ o ¤±¯ ∏±ª² ≥ o ·¨¤¯ q ∞±µ¬¦«° ±¨·²©
≤¤±¤¯¬¦∏¯¤µ¨°¥µ¤±¨ º¬·« ≤«²¯ ¶¨·¨µ²¯ ¤±§≥³«¬±ª²°¼¨¯¬± °µ¨2
√ ±¨·¶
¬¯¨ ≥¤¯·2¬±§∏¦¨§ ³¨¤·¬¦⁄¤°¤ª¨ q²∏µ±¤¯ ²© ¬³¬§¶ 2¨
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≈x ¤µ¬¨ q ¦±∏©©o ƒ¨¯¬¬ q °²µ∏¼¬o ∞µµ²¯ ≠ q ·¨¤¯ q °¯ ¤¶°¤
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¤±§ ¬√ µ¨¬³¬§ ⁄¬¶·µ¬¥∏·¬²±¶¬± ≥·µ¨³·²½²·²¦¬±2¬±§∏¦¨§ ⁄¬¤¥¨·¬¦
¤·¶ ƒ §¨ ≥¤³²ª¨ ±¬± ∞¬·µ¤¦· ²© ׫¨ ¤°¤¬¦¤± ¥¬··¨µ ¼¤°
k ∆ιοσχορεα πολψγονοιδεσl q ∏·µ¬·¬²± ¶¨¨¤µ¦«qussu ouu }twuz q
≈y 马海英 o周秋丽 o王本祥 q黄山药总皂苷和薯蓣皂苷元抗高脂
血症及体外抗血小板聚集的比较 q中国医院药学杂志 qussu o
uukyl }vuv q
≈z 马海英 o赵志涛 o王丽娟 o等 q薯蓣皂苷元和黄山药总皂苷抗高
脂血症作用比较 q中国中药杂志 qussu ouzkzl }xu{ q
≈{ ¦¦¤·¬±²o∏¬ª¬o°¬½¤µµ²o ¤µª¤µ¬·¤o²¨ ±¬ªo ≤ ¦¨¬¯¬¤ ≥ q ∞©©¨ ¦·¶
²© ⁄¬²¶ª¨ ±¬±o ³¯¤±·2⁄¨ µ¬√ §¨ ≥·¨µ²¬§o ²±
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³¨¤·²¦¨¯¯∏¯¤µ≤«²¯ ¶¨·¤¶¬¶±§∏¦¨§¥¼ ∞¶·µ²ª¨ ±¶¬±·«¨ ¤·q ³¨2
¤·²¯²ª¼ ot||{ ou{ }tu| q
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ª¨ ±¬± ¥¼ ¦¬§ ¼§µ²¯¼¶¬¶²© ≥¤³²ª¨ ±¬±o±§ ∞±ª ≤«¨ ° ot|xz o
w| }t{y q
≈tt 王 俊 o杨克迪 o陈 钧 q均匀设计法优选穿山龙水解条件的
研究 q中药材 oussu ouxk|l }yx| q
≈tu ≥¤∏√¤¬µ¨ ≠ o
¤¦¦²²∏ ≤ q ° µ¨©¨ ¦·¬²±±¨ ° ±¨·¶§¤±¶¯ ∞¬·µ¤¦·¬²±
⁄¨ ¶ ¶¤³²ª¨ ±¬±¨ ¶ ≥·¨µ²¬§¬´∏¨¶q ∂ ¤¯²µ¬¶¤·¬²± §¨¶ ≥²∏¶³µ²§∏¬·¶q
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ª¨ ±¬± ∞¬³µ¨¶¶¬²± ¬± ×µ¬ª²±¨ ¯¯¤ ƒ²¨ ±∏°2ªµ¤¨¦∏° °¯ ¤±·¶¥¼ ⁄¬©2
©¨ µ¨±·°¯ ¤±·µ²º·« ª¨∏¯¤·²µ¶q ƒ²²§ ≤«¨ °¬¶·µ¼ q t||| oyx }
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Στυδψ ον τηε Προδυχτιον Χονδιτιον
οφ Εξτραχτιον ιν χοµ βινατιον Ηψδρολψσισιν σιτυ φορ Ισολατινγ ∆ιοσγενιν
• ∏±t ou o ≤ ∞∏±t o ≠ ¨2§¬t o ≠ ¬∏2 ¬´±ªv o ≠ «¨ ±t
kt q≥¦«²²¯ ²©
¬²¯²ª¬¦¤¯ ¤±§ ∞±√¬µ²±° ±¨·¤¯ ∞±ª¬±¨ µ¨¬±ªo¬¤±ª¶∏ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o«¨ ±¬¤±ª utustv o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤~
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¬²·¨¦«±²¯²ª¼ ¦²¯¯¨ ª¨ o ∞¤¶·≤«¬±¤≥«¬³¥∏¬¯§¬±ª±¶·¬·∏·¬²±o«¨ ±¬¤±ª utust{ o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤~
v q≥¦«²²¯ ²© °«¤µ°¤¦¼ o¬¤±ª¶∏ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o«¨ ±¬¤±ª utusst o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ³µ²§∏¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼ ²© ¬¨·µ¤¦·¬²±¬±¦²°¥¬±¤·¬²± «¼§µ²¯¼¶¬¶¬±¶¬·∏©²µ¬¶²¯¤·¬±ª§¬²¶ª¨ ±¬±
©µ²° ∆ιοσχορεα νιππονιχα ¥¼ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª±q Μετηοδ : × «¨ ²³·¬°∏° ³µ²§∏¦·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨§ º¬·«·«¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©
§¬²¶ª¨ ±¬± ¤¶¤±¬±§¨ ¬ ¥¼ ¬¨·µ¤¦·¬²±¬± ¦²°¥¬±¤·¬²± «¼§µ²¯¼¶¬¶¬± ¶¬·∏o¤±§ º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§ º¬·«·«¨ ·µ¤§¬·¬²±¤¯ ° ·¨«²§q Ρεσυλτ : ∞¬2
·µ¤¦·¬²±¬± ¦²°¥¬±¤·¬²± «¼§µ²¯¼¶¬¶¬± ¶¬·∏¦²±§∏¦·¨§¬± t qx °²¯#p t ¶∏¯©∏µ¬¦¤¦¬§²© º¤·¨µ¦²±·¤¬±¬±ªzx h ¬¶²³µ²³¤±²¯ ¤·tss ε ©²µ
w qx «¦²∏¯§ª¨·«¬ª«¨µµ¨¦²√ µ¨¼ ²©§¬²¶ª¨ ±¬±·«¤±·µ¤§¬·¬²±¤¯ ° ·¨«²§¶qΧονχλυσιον : ׫¬¶³µ²§∏¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼ ¦¤± ª¨·«¬ª«¨µµ¨¦²√2
µ¨¼ ²©§¬²¶ª¨ ±¬± o¤±§¬·¬¶¶¬°³¯¨o·¬°¨¤±§ °²±¨ ¼ ¶¤√¬±ªq
[ Κεψ ωορδσ] ¬¨·µ¤¦·¬²± ¬± ¦²°¥¬±¤·¬²± «¼§µ²¯¼¶¬¶¬± ¶¬·∏~§¬²¶ª¨ ±¬± ~³µ²§∏¦·¬²± ¦²±§¬·¬²± ~ ∆ιοσχορεα νιππονιχα ~²µ·«²ª²±¤¯
§¨¶¬ª± ≈责任编辑 刘
× °2°≤ 法测定
红花注射液中红花黄色素 的含量
刘月庆 o王 睿 o毕开顺
k沈阳药科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttsstyl
≈摘要 目的 }为红花注射液质量控制提供新方法 ∀方法 }色谱柱为 ⁄≥ukuss ≅ w qy °° ox Λ°l o甲醇2s qu h
乙酸水溶液ktvΒ{zl为流动相 o流速为 t qs °#°¬±p t o柱温 ux ε o检测波长 wsu ±° ∀结果 }线性范围 w qs ∗ {s q{ Λª
≈收稿日期 ussu2ts2ts
≈通讯作者 刘月庆 ר¯ }ksuwluv{wvztt2vvyv ∞2°¤¬¯}®¶¥¬ °¤¬¯q¶¼ q¯± q¦±
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第 u{卷第 ts期
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