全 文 ：• °2‹°≤ 测定六味地黄方中苷类成分的含量
熊善丽 o赵毅民 o栾新慧 o乔善义 o孙 磊 o任凤霞 o郭继芬 o张永祥
k军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要  目的 }建立 • °2‹°≤ 测定六味地黄方中苷类成分含量的方法 ∀方法 }选用 ≤t{色谱柱 o甲醇2水kvvΒ
yzl为流动相 o检测波长 uvy ±° o柱温 vs ε 下进行含量测定 ∀结果 }六味地黄方水煎液中莫诺苷 !马钱素 !芍药苷进
样浓度分别在 z qw ∗ ys oz qz ∗ yu o{ qx ∗ y{ °ª#p t与其色谱峰面积呈良好线性关系 o加样回收率分别为 |{ q{ h o
|{ qv h o|| qy h ∀结论 }本方法简便 !快速 !准确 o可作为六味地黄制剂中苷类部位的质量检测方法 ∀
≈关键词  六味地黄 ~• °2‹°≤ ~含量测定 ~莫诺苷 ~马钱素 ~芍药苷
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls{2szvx2sw
六味地黄方是中药/滋补肾阴0的经典名方 o系
由熟地 !山茱萸 !山药 !茯苓 !丹皮 !泽泻按重量比 {Β
wΒwΒvΒvΒv组成 ∀现代药理研究表明该方对神经 !
内分泌和免疫系统有调节作用≈t2v  o具有抗氧化 !抗
衰老≈w  o抗肿瘤≈x  o改善肾功能及保肝等多项药理作
用 ∀该方广泛应用于临床 o尤其以原方为基础进行
加减后组成的六味地黄加减方 o几乎涉及到人体各
个系统的疾病 ∀目前临床主要应用该方治疗糖尿
病 !肾脏疾病 !生殖系统疾病 !更年期综合征 !肿
瘤≈y2ts 等多种疾病 ∀基于对六味地黄方药理和化学
物质基础多年研究结果 o本室采用化学与药理相结
合的方法 o从该方水煎剂醇溶部分分离得到发挥免
疫调节作用的物质主要为苷类成分≈tt  ∀本文探索
用高效液相色谱法对六味地黄水煎液醇溶部分的苷
类成分进行定性鉴别和定量测定 o确定了六味地黄
水煎液中主要苷类成分为莫诺苷 !马钱素 !芍药苷 o
并建立了这 v个苷类成分的定量分析方法 o为六味
地黄方制剂的质量评价提供可靠的检测手段 ∀
1 仪器与试药
„ª¬¯¨ ±·ttss 高效液相系统 o含四元梯度泵 !
⁄„⁄检测器 !柱温箱和化学工作站 ∀美国 „…Œ公司
„°Œvsss 液相色谱2质谱联用仪 o配有 ×∏µ¥² Œ²±2
¶³µ¤¼离子化源以及 „±¤¯¼¶·t qt数据处理系统 ∀
≈收稿日期  ussv2st2tx
≈基金项目  国家重点基础研究发展计划 k|zvl项目 k Š
t|||sxwwstl
≈通讯作者  赵毅民 ר¯ }kstsl yy|vtyw{ ƒ¤¬}kstsl
y{uttyxy ∞2°¤¬¯}½«¤²¼° ƒ ±¬¦q¥¬° q¤¦q¦±
莫诺苷 !马钱素对照品为本室自制 o经光谱确定
结构 o‹°≤ 面积归一化法测得纯度在 |{ qs h以上 ∀
芍药苷对照品购自中国药品生物制品检定所 ∀熟
地 !山茱萸 !山药 !茯苓 !泽泻 !牡丹皮均购自北京同
仁堂药材批发站 ∀甲醇为色谱纯 o水为去离子水 ∀
2 实验方法
2 q1 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱kw qy °° ≅
uxs °° ox Λ°l o流动相为甲醇2水kvvΒyzl o流速 t qs
°#°¬±p t o柱温 vs ε o⁄„⁄检测波长 uvy ±° o进样
量 us ˏ∀理论塔板数按马钱素峰计算大于 v sss o
在此条件下 o莫诺苷 !马钱素 !芍药苷均能与其他组
分达到良好的基线分离 ∀
2 q2 质谱条件 负离子检测 o喷射电压为 p w sss
∂ o⁄°电压 p zs ∂ oƒ°电压 p u|s ∂ o×∞ vss ε o
‘∞…为 { o≤ ˜ • 为 tt ∀
2 q3 对照品溶液的制备 精密称取莫诺苷 !马钱
素 !芍药苷对照品各 ts °ªo置于 ts °容量瓶内 o
用甲醇定容至刻度 o摇匀 ∀分别从中吸取 zx otss o
txs ovss oyss ˏo加水稀释成 ts °o制备成 x份对
照品溶液 ∀
2 q4 样品溶液的制备 熟地 !山茱萸 !山药 !茯苓 !
泽泻 !丹皮按重量比 {ΒwΒwΒvΒvΒv组成 o称取六味生
药共 xs ªoy倍水煎 u次k每次 u «l o水煎液浓缩后
经 zs h醇沉处理 o离心去除沉淀部分 o醇溶上清液
浓缩至干 ∀取 s qx ª干燥品用适量 ws h甲醇溶液超
声提取 o过滤 o加水定容成 tss °样品溶液 ∀
3 结果
在上述色谱条件下 o分别对 v 个对照品进行
‹°≤2⁄„⁄和 ‹°≤2  ≥分析 ∀莫诺苷 !马钱素 !芍
#xvz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussv
药苷保留时间分别为 y qs ott qs otu qs °¬±o电喷雾质
谱检测确证质量数与计算值相符 ~再对样品进行
‹°≤2⁄„⁄和 ‹°≤2  ≥分析 o主要成分的色谱保
留时间和质谱数据均与对照品相符 o结果见图 t ∗
图 { ∀
3 q1 线性范围考察 分别取 x种不同浓度的莫诺
苷 !马钱素 !芍药苷对照品溶液 o按上述色谱条件进
样分析 o测定峰面积值 o将所测峰面积与进样浓度
k°ª#p tl进行线性回归 ∀结果莫诺苷的标准曲线
方程为 Α € u zzu .{ Χp tv .u{ , ρ€ s q||| { o线性范
图 t 莫诺苷对照品色谱图
¤q莫诺苷
图 u 马钱素对照品色谱图
¥q马钱素
图 v 芍药苷对照品色谱图
¦q芍药苷
图 w 样品 ‹°≤ 色谱图
¤q莫诺苷 ¥q马钱素 ¦q芍药苷k图 x同l
图 x 样品总离子流色谱图
图 y 样品中莫诺苷负离子质谱图
图 z 样品中马钱素负离子质谱图
图 { 样品中芍药苷负离子质谱图
围 z qw ∗ ys °ª#p t ~马钱素的标准曲线方程为 Α €
u yzy .v Χp w .tw , ρ € s q||| y o线性范围 z qz ∗ yu
°ª#pt ~芍药苷的标准曲线方程为 Α € u xwt .v Χp
#yvz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussv
wu .w| , ρ€ s q||| t o线性范围 { qx ∗ y{ °ª#pt ∀
3 q2 精密度试验 分别取 u| qx °ª#p t莫诺苷 !
vs qz °ª#pt马钱素 !vw qs °ª#pt芍药苷对照品溶
液 o各连续进样 y 次 o测得 y 次峰面积 o计算 • ≥⁄
值 ∀结果这 v个对照品溶液精密度良好 o其 • ≥⁄分
别为 s q{z h os qyx h os qvu h ∀
3 q3 稳定性试验 取同一份样品溶液 o分别在 s o
u ow oy o{ ouw «测定 o考察样品溶液的稳定性 ∀样品
溶液中 v个主要化合物在 uw «内稳定 ∀
3 q4 重复性试验 按/样品溶液的配制0项下 o平行
制备样品溶液 x份 o测得样品峰面积计算莫诺苷 !马
钱素 !芍药苷的含量 ∀结果重现性很好 o其 • ≥⁄值
分别为 u qs h ou qx h ou qw h ∀
3 q5 加样回收率试验 按/样品溶液的配制0项下
制备醇溶部分干燥样品 o从中称取质量相近的 x份
k约 s qux ªl样品 o用 ws h 甲醇超声提取后过滤至
tss °容量瓶 o每瓶按表 t分别加入莫诺苷 !马钱
素 !芍药苷对照品 o加水定容成 tss °溶液 o按上述
色谱条件进样分析 o结果见表 t ∀
表 t 六味地黄水煎液中莫诺苷 !马钱素 !芍药苷
加样回收率试验结果
对照品
称样量
rª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
莫诺苷 s quxt u u qx w qxv tss q{ |{ q{
s quxs { u qy w qy{ tsu q{
s quxt s u qv w quu |y qu
s quxs y u qu w qts |x qu
s quxs | u qu w qt{ |{ q{
马钱素 s quxt u t qy u qyw tsu qu |{ qv
s quxs { t qv u quy |y qz
s quxt s t qw u qv| || qs
s quxs y t qu u qtx |x qz
s quxs | t qu u qt{ |{ qs
芍药苷 s quxt u t qx u qy| |{ q| || qy
s quxs { t qy u q{x tsu q|
s quxt s t qw u qxy |y qz
s quxs y t qx u qzu tst qt
s quxs | t qw u qx{ |{ qv
3 q6 样品含量测定 按/样品溶液的配制0项下制
备 v份样品溶液 o进样分析 ∀结果以醇溶部分量计
算莫诺苷含量为 s q{s h o马钱素含量为 s qws h o芍
药苷含量为 s qw{ h ~按生药量计算 o莫诺苷含量为
s qtu h o马钱素为 s qsy h o芍药苷为 s qsz h ∀
4 讨论
4 q1 色谱条件的选择 莫诺苷 !马钱素 !芍药苷对
照品溶液紫外吸收图表明最大吸收波长分别是
uwu ouvy ouvv ±° ∀在这 v个波长下进行样品检测 o
比较得到的色谱图 o检测波长 uvy ±°下谱图基线稳
定 o出峰个数多 o各峰均较高 o最后确定检测波长为
uvy ±° ∀选用 ≤t{柱 o参照文献≈tu otv 选用甲醇2水系
统为流动相 o甲醇2水系统在 vvΒyz配比时分离效果
较好 ∀选择了 v个温度 us oux ovs ε o最后确定柱温
vs ε o在此温度下各成分分离度较好 o柱效较高 ∀
4 q2 中药复方往往以多成分 !多靶点发挥其药效作
用 ∀六味地黄水煎剂中除糖类化合物外 o尚含有较
多糖苷类成分 o其药理学作用以及对全方整体药效
作用的贡献 o有待于深入的研究和探讨 ∀因此 o这些
糖苷类成分的定性定量分析方法 o是六味地黄方系
统研究中不可缺少的研究手段 ∀本文运用水煎醇沉
法获取六味地黄水煎剂中小分子部位 o然后利用
• °2‹°≤ 法对其中主要糖苷类成分进行定量分析 ∀
方法简便易行 !稳定可靠 ∀这一方法可作为该复方
药理 !药化研究中较好的分析工具 o并可以用于各种
六味地黄制剂质量评价 ∀
≈参考文献 
≈t  聂 伟 o张永祥 o茹祥斌 o等 q六味地黄汤免疫调节活性成分化
学分离的药理学导向评价 q中国中西医结合杂志 ot||{ ot{kxl }
u{z q
≈u  马 渊 o周文霞 o程军平 o等 q六味地黄汤调节皮质酮所致小鼠
下丘脑2垂体2卵巢轴紊乱作用的拆方研究 q中药药理与临床 o
ussu ot{k增刊l }z q
≈v  齐春会 o张永祥 o乔善义 o等 q六味地黄多糖体外对正常及衰老
小鼠脾细胞免疫功能的影响 q中国药理学通报 ot||| otx kul }
txz q
≈w  强世平 o赵 华 q六味地黄汤对老龄小鼠血清 ≥’⁄和 °’ 的影
响 q中医药研究 ot||{ otwkyl }wu q
≈x  齐春会 o王 艳 o赵修南 o等 q六味地黄汤抗肿瘤转移的实验研
究 q中药药理与临床 oussu ok增刊l }x q
≈y  张美贞 o张柏玲 q六味地黄丸加味治疗非胰岛素依赖型糖尿病
yu例 q河北中医 ot||{ ouskwl }uwt q
≈z  刘学文 o汤庆祥 q六味地黄汤加味治疗肾脏疾病 {s例 q辽宁中
医杂志 ot||y ouvkzl }vs{ q
≈{  陈 奇 q中成药名方药理与临床 q北京 }人民卫生出版社 ot||{ q
xvy q
≈|  张娟娟 o林海燕 q六味地黄汤治疗更年期综合征疗效观察 q实
用医学杂志 ot||| otxkul }twy q
≈ts  杜希岱 q六味地黄汤加味治疗甲状腺腺瘤 w{例 q陕西中医 o
t||x oty kttl }w{x q
≈tt  杨 胜 o张永祥 o吕晓东 o等 q六味地黄汤醇溶部分免疫活性成
分的药理学导向分离评价 q中药药理与临床 ousss otykvl }t q
≈tu  陈贺新 o严 娟 o房克慧 q六味地黄方中马钱素的含量测定 q中
#zvz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussv
国药业 ot||| o{ kttl }vy q
≈tv  潘 扬 o王天山 o张 弦 o等 q• °2‹°≤ 法测定中药山茱萸中
马钱素的含量 q南京中医药大学学报k自然版l ousss otyktl }
ux q
∆ετερµινατιον οφ Γλψχοσιδεσιν Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε
Λιυ2ωει ∆ι2ηυανγ βψ ΡΠ2ΗΠΛΧ
÷Œ’‘Š ≥«¤±2¯¬o ‹ „’ ≠¬2°¬±o˜„‘ ÷¬±2«∏¬o ±Œ„’ ≥«¤±2¼¬o≥˜‘ ¨¬o • ∞‘ƒ ±¨ª2¬¬¤o Š˜’ ¬2©¨ ± o ‹ „‘Š ≠²±ª2¬¬¤±ª
k„¦¤§¨ °¼ ²© ¬¯¬·¤µ¼  §¨¬¦¤¯ ≥¦¬¨±¦¨¶Œ±¶·¬·∏·¨ ²© °«¤µ°¤¦²¯²ª¼ ¤±§ ײ¬¬¦²¯²ª¼ o…¬±ª­¬±ª tss{xs o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤ • °2‹°≤ ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©ª¯¼¦²¶¬§¨¶¬± ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨
 §¨¬¦¬±¨ ¬∏2º ¬¨⁄¬2«∏¤±ªq  ·¨«²§}׫¨ ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §²± ¤± ’⁄≥ ¦²¯∏°± ¤·vs ε o º¬·« °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²© ° ·¨«¤±²¯r
º¤·¨µkvvΒyzl ¤·©¯²º µ¤·¨ t qs °#°¬± ¤±§§¨·¨¦·¬²± ¤·º¤√¨¯ ±¨ª·«²©uvy ±° q Ρεσυλτ : ׫µ¨¨ °¤­²µ¦²°³²±¨ ±·¶µ¨¤¦«¨ §¥¤¶¨2¯¬±¨
¶¨³¤µ¤·¬²± ¤±§º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§·²¥¨ °²±²±¬¶¬§¨ o¯ ²ª¤±¬±o³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± q• ¶¨³¨ ¦·¬√¨¯¼©²µ·«¨ ·«µ¨¨¦²°³²±¨ ±·¶o¯¬±¨ ¤µ¦²µµ¨ ¤¯·¬²±¶º µ¨¨
©²∏±§¥¨·º¨¨ ± ³¨ ¤®¤µ¨¤¶¤±§¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶¬±·«¨ µ¤±ª¨¶²©z qw ∗ ys oz qz ∗ yu °ª#p t ¤±§{ qx ∗ y{ °ª#p t o¤±§·«¨ µ¨¦²√ µ¨¬¨¶
º µ¨¨ |{ q{ h o|{ qv h o|| qy h qΧονχλυσιον : × «¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ § ° ·¨«²§¬¶³µ²√ §¨·² ¥¨ ¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¶¬°∏¯·¤±¨ ²∏¶ ∏´¤±·¬©¬¦¤·¬²± ²©·«µ¨¨
°¤­²µª¯¼¦²¶¬§¬¦¦²°³²±¨ ±·¶¬± ¬∏º ¬¨⁄¬«∏¤±ª §¨¦²¦·¬²± ¤±§¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ √¨¤¯∏¤·¬²± ²©·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²© ¬∏º ¬¨⁄¬«∏¤±ª ³µ¨³¤µ¤2
·¬²±¶q
[ Κεψ ωορδσ] ¬∏2º ¬¨⁄¬2«∏¤±ª~ • °2‹°≤ ~ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ~ °²±²±¬¶¬§¨ ~ ²¯ª¤±¬±~³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±
≈责任编辑 李 禾 
‹°≤ 法测定紫菀中紫菀酮的含量
吴 t ou o王国艳v o 桂新t ou o谷丽华t ou o王峥涛t ou o胡之璧t ou
kt q上海中药标准化研究中心 o上海 usssvu ~u q上海中医药大学 o上海 usssvu ~
v q上海第二医科 大学化学教研室 o上海 usssuxl
≈摘要  目的 }测定不同收集地及产地紫菀中紫菀酮的含量 o以期评价紫菀药材的质量 ∀方法 }采用 ‹°≤ 法
直接测定 ∀色谱柱 °²¯¤µ¬¶≤t{柱 o流动相为乙腈 o流速 t qs °#°¬±p t o检测波长 uss ±° ∀结果 }测定了 ts个地区的
商品紫菀 o紫菀酮含量在 s qsy h ∗ s qt{ h ∀结论 }所测样品中紫菀酮含量均低于 usss年版5中国药典6k一部l规定
紫菀酮的最低限度 ∀
≈关键词  紫菀 ~紫菀酮 ~含量测定 ~‹°≤
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls{2szv{2sv
紫菀为常用中药 o具有润肺下气 !止咳祛痰之功
效 o主治气逆咳嗽 !痰吐不利 !肺虚久咳 !痰中带血等
症 ∀usss年版5中国药典6收载其来源为菊科植物
紫菀 Αστερταταριχυσq©q的干燥根茎及根≈t  ∀紫菀
≈收稿日期  ussu2s|2sx
≈基金项目  国家中药管理局重点学科项目ktss{sutl ~上海市
重点学科k重中之重l项目
≈通讯作者  王峥涛 ר¯ }ksutlxwuvutst
中主要含有三萜及其苷类 !甾类 !单萜苷类 !肽类 !黄
酮类 !蒽醌类 !酚类等化合物≈u2y  ∀现代药理研究表
明紫菀具有祛痰 !镇咳的作用 o且三萜类成分k紫菀
酮为其祛痰的有效成分之一≈z  ∀由于紫菀酮无紫外
吸收 o因此 ousss年版5中国药典6采用薄层扫描法
对其进行含量测定 o然而薄层扫描法进行含量测定
的系统误差较大 o所以 o我们尝试用 ‹°≤ 法 o采用
末端吸收作为检测波长 o对紫菀中紫菀酮的含量进
#{vz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussv