全 文 ：
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ³µ²√¬§¨ ³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ √¨¬§¨ ±¦¨ ©²µ·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨ ¦·¶²© ׬¤±°¤¦∏½«¬
µ¤±∏¯ ¶¨k× ≤l ¬± °²∏¶¨ ¥µ¤¬±¬± ¤¬¶¦«¨ °¬¤p µ¨³¨µ©∏¶¬²± °²§¨¯q Μετηοδ : ¦¨¨³·²µ¥¬±§¬±ª·¨¶·²© ⁄
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[ Κεψ ωορδσ] ׬¤±°¤¦∏½«¬ªµ¤±∏¯ ¶¨~¥µ¤¬±¬±∏µ¼ ~2° ·¨«¼¯2⁄2¶³¤µ·¤·¨ µ¨¦¨³·²µo¦«²¯¬±¨ µª¬¦ µ¨¦¨³·²µ
≈责任编辑 方文贤
氧化苦参碱肠内菌代谢及吸收入血活性成分的研究
王明雷t 3 o周秋丽u o王本祥t
kt q长春中医学院 新药研究中心 o吉林 长春 tvssut ~
u q白求恩医科大学 生物工程研究所 o吉林 长春 tvssutl
≈摘要 目的 }通过离体和整体实验观察人肠内菌对氧化苦参碱的代谢 o并确定吸收入血的代谢物 ∀方法 }通
过薄层色谱和高效液相色谱仪定性检测氧化苦参碱及其代谢产物 ∀并通过 ∂ o o 及 ≥等光谱学方法确
定代谢物的结构 ∀结果 }离体实验结果表明 o氧化苦参碱可被人肠内菌代谢成苦参碱 ∀给大鼠按 tss °ª#®ªp t灌胃
氧化苦参碱 v «后 o剪头处死取血 o以 ×≤ 和 °≤ 检测血清中代谢产物 ∀证明氧化苦参碱和苦参碱均能被吸收
入血 ∀结论 }人肠内菌可将氧化苦参碱代谢成苦参碱 o上述两种生物碱均可被吸收入血 ∀
≈关键词 氧化苦参碱 ~苦参碱 ~肠内菌代谢
≈中图分类号 u{x qx ~ |y| qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusstlsw2suy|2sv
豆科植物苦参 Σοπηορα φλοϖεσχενσ ¬·q根是著名
中药 o具有清热燥湿 !杀虫 !利尿等功效 o被广泛用于
治疗热痢 !便血 !黄疸 !尿闭 !赤白带下 !阴肿阴痒 !湿
疹 !皮肤瘙痒等疾病 ∀氧化苦参碱和苦参碱是苦参
中两种主要生物碱 o氧化苦参碱具有抗炎症 !免疫抑
制 !抗肿瘤等药理作用≈t o苦参碱则具有抗心律不齐
和抗心肌缺血等药理作用≈u ∀上述两种生物碱的药
理作用既有相似之处 o但又有某些差别 ∀谢明智≈v
≈收稿日期 usss2s|2ut
≈基金项目 国家中医药管理局资助项目k|x{stzl
3 现地址 }美国宾夕法尼亚大学药学院
等曾报告氧化苦参碱的代谢 o由于从灌胃氧化苦参
碱大鼠的血中检测到苦参碱 o从而推测氧化苦参碱
在胃肠道内可能转化成苦参碱 ∀我们对氧化苦参碱
的代谢做了进一步研究 o观察了人体肠内菌在离体
条件下 o对氧化苦参碱的代谢转化 ∀亦观察了给大
鼠灌胃氧化苦参碱后 o氧化苦参碱及其代谢产物吸
收入血的情况 ∀
1 材料
1 q1 药品及试剂 氧化苦参碱和苦参碱购于卫生
部药品检定所 o经精制纯化后纯度在 || h ~厌氧培
养液≈w 组成及制备 }取 vz qx °¯ 溶液 ks qz{ h
u °wl ovz qx °¯ 溶液
ks qwz h u°w ot qt{ h
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第 uy卷第 w期
usst年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤≤¯ot qu h kwlu≥w os qtu h ≤¤≤ u¯ os qux h ª2
≥w#u l ot °¯ s qt h µ¨¶¤½∏µ¬±¨ os qx ª λ2¦¼¶·¨¬±¨ #
u ou °¯ ux h λ2¤¶¦²µ¥¬¦¤¦¬§oxs °¯ { h ¤u≤ v ot
ª牛肉膏 ot ª蛋白胨和 t ª营养琼脂 o加蒸馏水至 t
o最后调 ³ z qx ∗ { qs ~其它化学试剂均为分析纯 ∀
1 q2 动物 体重 tvx ∗ txx ª o⎯ o • ¬¶·¤µ大鼠 o由
白求恩医科大学实验动物部提供 ∀
1 q3 仪器 薄层色谱 k×≤l预制板k青岛海洋化
工厂产品l ~≤t{色谱预处理柱k河北省津杨滤材厂l ~
≤2{高效液相色谱仪k日本岛津公司产品l ~熔点
k°³l测定用 ≠¤±¤¦²显微熔点测定仪 ~紫外光谱仪
k ∂2uts 型 o岛津公司产品l ~红外光谱k l仪
k
µ∏®¨ µƒ≥2xxl ~核磁共振光谱k l仪k
µ∏®¨ µ
÷2wss型l ~质谱k ≥l仪k⁄2tzss 型l ~厌氧培
养罐k{ux2型 o沈阳市第五人民医院l ~自制代谢用
鼠笼 ∀
2 方法
2 q1 离体厌氧培养人肠内菌对氧化苦参碱的代
谢≈w 取青年健康志愿者的新鲜粪 o按 t ªΒw °¯ 的
比例将粪与生理盐水混合制成悬浊液 o取 s qx °¯ 新
鲜配制的粪悬浊液 o加入厌氧培养液 w qx °¯ o混匀 o
得到 x °¯ 肠菌培养液 ∀取此新鲜配制的肠菌培养
液 y份 o各加氧化苦参碱 x °ªo分别置于 vz ε 厌氧
培养罐k产气袋法 }向培养罐中的产气袋内注入水后
启动化学反应 o产生氢气 o在催化剂作用下氢与罐内
氧气反应产生水 o在密闭罐内局部造成缺氧环境 o用
于肠道厌氧菌培养l中培养 uw «o用氯仿萃取培养物
v次 o萃取液减压干燥后做 ×≤ 分析 ∀将此提取物
上硅胶柱色谱 o以氯仿2甲醇混合溶媒做梯度洗脱 o
回收溶媒得一新代谢产物 ∀此代谢提取物除做 ×≤
和 °≤ 定性分析 o为了确定其化学结构 o又做了
o ∂ o 和 ≥分析 ∀
2 q2 大鼠整体肠内菌对氧化苦参碱的代谢 取大
鼠 {只 o匀分 u组 o饲养 z §o待其充分适应环境后 o
禁食 tu «o一组按 ts °¯ #®ªp t灌胃生理盐水做对照 o
另 t组灌胃氧化苦参碱 tss °ª#®ªp t ∀然后将大鼠
置于代谢笼中 o并继续禁食 o自由饮用糖盐水k含
x h葡萄糖和 s q| h氯化钠l ∀于给药后 v«o将两组
大鼠分别剪头处死 o收集血液 x °¯ r 鼠 o加入 us h
三氯醋酸 t °¯ # x °¯ p t血液 o混匀 o离心kwβ≤ otxss µ
# °¬±p tl o取上清 o加入 t °¯ us h ¤ o然后用氯
仿提取 o回收氯仿后 o该提取物供 °≤ 分析 ∀
°≤ 采用的色谱柱为 ≥«¬°2³¤¦® ≤≤2⁄≥kw qy
°° ≅ uxs °°l o以 ¨ 2u k{Βul为流动相 ∀
检测波长为 usw ±° o流速 t °¯ #°¬±p t o柱压 tt qzy
°¤∀
3 结果与讨论
氧化苦参碱于人粪肠内菌厌氧培养后 o将代谢
物按上述方法用氯仿提取后做 ×≤ 检查 ∀结果表
明 o经 uw «的代谢转化后 o大部分氧化苦参碱都转
化成苦参碱 ∀氯仿提取物经硅胶柱色谱处理后 o得
一无色针状结晶物质 ∀在薄层色谱检查时 o其 φ值
与苦参碱相同k图 tl ∀
图 t 离体肠内菌对氧化苦参碱的代谢 ×≤ 图谱
t q氧化苦参碱 u q苦参碱 v q代谢产物 w q空白对照
薄层色谱条件 点样 }供试品溶液 x Λ¯ o标准品溶液 u Λ¯
固定相 }硅胶 ys os qux °°
展开剂 ≤ ≤ v¯2 ¨ 2ukyxΒvxΒts o下层l
显色剂 §µ¤ª¨ ±§²µ©©试剂
该无色针状结晶代谢物又进一步做了以下检
测 o其结果如下 }°³zz ∗ z{ ε ∀ ≥ °r½}uw{k n l o
uwz ousx otzz otxs o|y oxx ∀ ¦°p t }u|vz o uzx{ o
tywz otwy{ otvw{ ottzt ∀ ∂Κ°¤¬±° }usw ∀t
k≤⁄≤ v¯l∆}w qwskt o§§o2zl ov q{kt o° o2xl o
v qswkt o·o 2yl ∀tv ≤ k≤⁄≤ v¯l∆}ty| qvk≤2
txl oyv qzk≤2yl oxz quk≤2ul oxz quk≤2tsl oxv qtk≤2
ttl owv quk≤2tzl owt qwk≤2zl ovx qvk≤2xl ovu q{k≤2
twl ouz qzk≤2tul ouz qtk≤2wl ouy qwk≤2{l out qtk≤2
|l ous qzk≤2vl ot{ q|k≤2tvl ∀分析上述检测数据表
明 o该化合物为苦参碱 ∀
整体给药时 o于给药后 v «o取血用 °≤ 检测
证明 o氧化苦参碱和苦参碱在血中均有发现 o但苦参
碱的血药浓度高于氧化苦参碱k图 ul ∀
此结果表明 o在肠道内氧化苦参碱逐渐转化为
苦参碱的过程中 o两种生物碱均可被吸收入血 ∀我
们进一步对这两种生物碱的生物活性做了比较性研
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第 uy卷第 w期
usst年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图 u 口服给药氧化苦参碱ktss °ª#®ªp tl
后大鼠血清 °≤ 图谱
色谱条件 色谱柱 }≥«¬°2³¤¦® ≤≤2⁄≥kw qy °° ≅ uxs °°l
流动相 } ¨ 2uk{Βul 检测波长 }usw ±°
流速 }t °¯ #°¬±p t ~柱压 }tt qzy °¤
究 ∀实验证明 o氧化苦参碱的浓度为 xss ouxs °ª#
pt时 o可明显抑制 °≥和 ° 诱导的 ×°2t细
胞产生 2tΒ和人外周血单核细胞产生 × ƒΑ∀苦
参碱的浓度为 xss °ª#p t时 o可抑制 °≥和 °
诱导的 × °2t细胞产生 2y和人外周血单核细胞
产生 × ƒΑ∀上述两种生物碱均不能抑制 × °2t细
胞 × ƒΑ的基因表达 ∀总的看来 o氧化苦参碱抑制
炎症细胞因子产生的作用强于苦参碱 ∀
≈参考文献
≈t 王本祥 q现代中药药理学 q天津 }天津科学技术出版社 ot||z q
vtw q
≈u 张宝恒 o王年生 o李学军 o等 q苦参硷的抗心律失常作用 q中
国药理学报 ot||s ottkvl }uxv q
≈v 谢明智 o周文正 o张 瑛 q氧化苦参硷的代谢 q药学学报 o
t|{t otykzl }w{t q
≈w 陈 昕 o周秋丽 o王本祥 q人参皂甙 ¥t的肠内菌代谢 q药学
学报 ot||| ovwkyl }wts q
Στυδιεσ ον Μεταβολισµ οφ Οξψµ ατρινε βψ Ηυµ αν Ιντεστιναλ Βαχτερια
• ¬±ª2¨¬t o«²∏ ±¬∏2¬u o • ¤±ª
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ²¬¼°¤·µ¬±¨ ° ·¨¤¥²¯¬¶°¬±§∏¦¨§¥¼ «∏°¤±¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤¦·¨µ¬¤¤±§¬·¶
¤¥¶²µ¥¨ § ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶¬± ¥¯²²§q Μετηοδ :×≤ ¤±§ °≤ º µ¨¨ ∏¶¨§·² ¬¨¤°¬±¨ ²¬¼°¤·µ¬±¨ ¤±§¬·¶° ·¨¤¥²¯¬·¨¶o
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·µ¬±¨ º¤¶·µ¤±¶©²µ° §¨¬±·² °¤·µ¬±¨ ¥¼ «∏°¤±¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤¦·¨µ¬¤ ° ·¨¤¥²¯¬¶°¬± √¬·µ²q ¤·¶º µ¨¨ ª¬√ ±¨ ²µ¤¯ ¼¯ ²¬¼2
°¤·µ¬±¨ tss °ª#®ªp t ¤±§ º µ¨¨ §¨¦¤³¬·¤·¨§v «²∏µ¶¤©·¨µ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²±o¤±§·«¨¬µ¥¯²²§ º¤¶·¤®¨ ±·² ¬¨¤°¬±¨
¶¨µ∏° ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶¥¼ ×≤ ¤±§ °≤ o º«¬¦«µ¨√ ¤¨¯ §¨·«¤·²¬¼°¤·µ¬±¨ ¤±§ °¤·µ¬±¨ º µ¨¨ ¤¥¶²µ¥¨ §¬±·² ¥¯²²§q
Χονχλυσιον :¬¼°¤·µ¬±¨ º¬¯¯ ¥¨ ·µ¤±¶©²µ° §¨¬±·² °¤·µ¬±¨ º«¨ ±¬·¬¶ª¬√ ±¨ ²µ¤¯ ¼¯ ¤±§¥²·«²©·«¨ ¤¯®¤¯²¬§¶¦¤± ¥¨
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≈责任编辑 方文贤
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≈v 钟建平 q大黄 虫丸 !鳖甲煎丸 !乌鸡白凤丸治疗慢性肝病体会 q
新中医 ot||v ouxktl }uw q
≈w 王宝恩 o王志富 o殷蔚 q实验性免疫性肝纤维化模型的研究 q中
华医学杂志 ot|{| oy|k|l }xsv q
≈x 梁英锐 q慢性活动性肝炎的胆小管增生机制 q临床与实验病理学
杂志 ot|{{ okwl }z| q
≈y 雨谷荣 o荻原幸夫 q从药理和药化探讨小柴胡汤 q国外医学#中
医中药分册 ot||s otukvl }ts q
≈责任编辑 方文贤
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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