全 文 ：高效液相色谱法测定加味保和冲剂中橙皮苷的含量
张燕平t o吴 丹u o孙毅坤v
kt q解放军总医院 o北京 tss{xv ~u q同仁堂集团公司 北京中药二厂 o北京 tssssx ~
v q北京市药品检验所 o北京 tsssvxl
≈摘要 目的 }建立一种测定加味保和冲剂中橙皮苷含量的方法 ∀方法 }高效液相色谱外标法 o采用 ≠ • 2
≤t{kts Λ° ow qy °° ¬§≅ uxs °°l o甲醇2水2醋酸kvsΒzsΒwl为流动相 o紫外检测波长 u{v ±° ∀结果 }线性范围为
s qs{ ∗ s qws Λªoρ s q|||w o回收率 || qu h o ΡΣ∆ t qv h k ν yl ∀结论 }本法测定加味保和冲剂中橙皮苷的含量 o
操作简便 o结果准确 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~橙皮苷 ~加味保和冲剂
≈中图分类号 u{v qy ~ u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsx2svt{2su
加味保和冲剂是在古方/加味保和丸0基础上 o
运用现代制药技术研制成的一种健胃理气 !利湿和
中之有效成药 o由白术 !陈皮 !枳实 !枳壳 !茯苓 !厚
朴 !香附 !山渣 !六神曲 !麦芽 !法半夏等 tt味中药组
成 ∀由于陈皮 !枳实 !枳壳 v味中药均含有效成分橙
皮苷≈t o陈皮又为君药之一 o文献报道中以橙皮苷为
制剂的质量控制标准的报道较为多见 o其含量测定
方法有薄层扫描法≈u !紫外分光光度法≈v !高效液相
色谱法≈w ∗ y o本文运用高效液相色谱外标法对该冲
剂橙皮苷进行了含量测定 ∀经方法学考察 o认为本
法准确 !简便 !无干扰 o可用于本品质量控制 ∀
1 仪器与试剂
≤2y高效液相色谱仪k岛津l ~橙皮苷对照品
k中国药品生物制品检定所 o批号 zut2|wsx o°≤
面积归一化法测得含量纯度 || qs h l ~加味保和冲
剂k北京中药二厂l ~甲醇 !乙腈为色谱用试剂 o水为
重蒸馏水 o其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件
≠ • 2≤t{色谱柱 ow qy °° ¬§≅ uxs °° ots Λ° ~
流动相甲醇2水2醋酸kvsΒzsΒwl o流速 t °¯ #°¬±p t ~
紫外检测波长 u{v ±° ~理论板数按橙皮苷峰计算应
不低于 v sss ~分离度 t qz ~柱温 ws ε ∀
2 q2 供试品溶液及对照品溶液的制备
2 q2 q1 供试品溶液及阴性对照液的制备 取本品
y ªo研成细粉 o精密称取 t qx ªo置具塞锥形瓶中 o精
≈收稿日期 usss2tt2tx
密加入甲醇 ux °¯ o称重 o加热回流 vs °¬±o放冷 o用
甲醇补足减失的重量 o摇匀 o滤过 o弃去初滤液 o收集
续滤液 o作为供试品溶液 ∀
仿此法制得不含陈皮 !枳实 !枳壳的加味保和冲
剂的阴性对照液 ∀
2 q2 q2 对照品溶液的制备 精密称取减压干燥到
恒重的橙皮苷对照品 ts °ªo置 xs °¯ 量瓶中 o加甲
醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 ∀精密量取 x °¯ o置 ux
°¯ 量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 o即得
k每 t °¯ 中含橙皮苷 ws Λªl ∀
在上述色谱条件下 o分别精密吸取对照品溶液
{ Λ¯ o阴性对照液 ts Λ¯ 与供试品溶液 ts Λ¯ o注入液
相色谱仪 o测定 o得到橙皮苷对照品溶液 !阴性对照
液与供试品溶液的色谱图k见图 tl ∀
图 t 加味保和冲剂高效液相色谱图
¤q橙皮苷 q对照品
q样品 ≤ q阴性对照
#{tv#
第 uy卷第 x期
usst年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qx
¤¼ qousst
2 q3 线性关系的考察
按上述制备方法 o精密量取橙皮苷对照品溶液
kws Λª# °¯ p tlu qs ow qs oy qs o{ qs ots qs Λ¯ 进样 o以进
样量 ΞkΛªl为横坐标 o峰面积积分值 Ψ为纵坐标 o
绘制标准曲线 ∀回归方程 } Ψ tvy|yzu . | Ξ p
tyyv| .w , ρ s .|||w( ν xl o结果表明橙皮苷在
s qs{ ∗ s qws Λª具有良好的线性关系 ∀由于工作曲
线不过原点 o故测定时采用二点法测定 ∀
2 q4 精密度试验
精密吸取供试品溶液 o重复进样 x次 o测定橙皮
苷 o结果 ΡΣ∆ s .x%( ν xl ∀
2 q5 加样回收率试验
精密称取已测知含量的同批样品 k批号
|{svtsly份 o分别精密加入橙皮苷对照品 o按供试
品溶液的制备方法并适当稀释 o测定含量 o计算回收
率 o结果见表 t ∀
表 t 加味保和冲剂中橙皮苷回收率测定结果
样品含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均回收率
r h
ΡΣ∆
r h
s q|y|y s q||xs t q|wx |{ qs
s q|zt| s q||xs t q|y| tss qu
s q|zus s qw|zx t qwzv tss qz || qu
t qvs q|y|{ s qw|zx t qwx{ |{ qu
s q|zs{ t q||s u q|yx tss qu
s q|ztz t q||s u q|uw |{ qt
2 q6 稳定性试验
按样品溶液制备及测定方法项下进行试验 o配
制 u批样品溶液 o从配制完毕开始放置 o在不同时间
进样 o进行含量测定 ∀结果表明本品供试溶液中橙
皮苷在 tu «内稳定 ∀
2 q7 重复性试验
精密称取同一样品k批号 |{svtslx份 o按供试
品溶液的制备方法制备 !测定橙皮苷含量 o结果表明
样品测定重现性良好 oΡΣ∆ t .u%( ν xl ∀
2 q8 样品测定
分别精密量取橙皮苷对照品液 w o{ Λ¯ 及供试品
溶液 ts Λ¯ o按上述色谱条件测定 o用外标 u点法计
算样品中橙皮苷含量 o共 ts批样品 ∀结果见表 u ∀
3 讨论
3 q1 由色谱图 t对比可看出 }橙皮苷对照品溶液与
样品溶液出峰时间分别为 ux q|tu °¬±和 ux qz{z
°¬±o而不加陈皮 !枳壳 !枳实 v味药材的阴性样液在
us ∗ vs °¬±无峰出现 o故可确定橙皮苷不受方中其
他药味的干扰 ∀
表 u 样品中橙皮苷含量测定结果
批号 含量r°ª#ªp t
|{sxst s qyus
|{sxsv s qyst
|{sxsy s qysu
|{sxsz s qx|{
|{sxs| s qyty
|{sxts s qyws
|{sxtt s qyts
|{sxtv s qyss
|{sxtx s qyu{
|{sxty s qyty
3 q2 提取条件的选择 }由于橙皮苷为黄酮类化合
物 o难溶于水≈t o故用甲醇加热回流提取 ∀对提取时
间 o分别以s qx ot ot qx«进行了对比试验 o结果以
s qx «提取的橙皮苷含量最高 ∀
3 q3 由于本品为复方制剂 o且方中陈皮 !枳壳 !枳实
v味药除含橙皮苷以外 o亦含有柚皮苷等多种黄酮
苷类成分 o结构较为接近≈t o极易干扰橙皮苷峰的测
定 ∀为使橙皮苷的分离效果好 o在流动相系统选择
上 o我们试用文献报道的几组系统 }如甲醇2kt qx °²¯
#ptl冰醋酸水液≈w !甲醇2冰醋酸2异丙醇2水≈x !甲
醇2乙腈2磷酸2水≈y 等 o均不适合本品 ∀经多次试验 o
确定甲醇2水2醋酸kvsΒzsΒwl分离效果较好 !峰形对
称 o但时间较长 o因而我们又对柱温进行了多次选
择 o以 ws ε 分离效果好 o条件最佳 ∀
3 q4 按照上述样品测定方法 o对陈皮 !枳壳 !枳实 v
味对照药材进行了液相色谱识别 ∀结果表明 v味药
材均含橙皮苷 ~由于枳实 !枳壳的主峰两侧各有 t个
邻峰 o而陈皮没有这两个峰 o因此可通过对样品色谱
图峰形的检测与控制 o保证枳实 !枳壳的加入 ∀
3 q6 本方法样品预处理简单 o回收率高 o重现性好 o
稳定性好 o可作为加味保和冲剂的质量控制标准 ∀
≈参考文献
≈t 王慕邹 q常用中草药高效液相色谱分析 q北京 }科学出版社 o
t||| qtzt ouuw ouvs q
≈u 洒丽明 o张 蕾 q薄层扫描法宝贝开胃冲剂中橙皮苷的含量 q
中成药 ot||y ot{kxl }tu q
≈v 阎东海 o林恒彪 q呕立舒口服液中橙皮苷的含量测定 q药物分析
杂志 ot||y otykvl }t{z q
≈w 崔铉玖 o迟彦春 o董伟林 q°≤ 测定芎芷香苏散流浸膏中橙皮
苷的含量 q药物分析杂志 ot||y otykxl }vut q
≈x 王陈军 o郭绪林 q高效液相色谱法测定增生消散液中橙皮苷的
含量 q中国中药杂志 ot||z ouuktl }vu q
≈y 欧阳强 o邱黎和 o周郗竹 q高效液相色谱法测定枳实 !枳术丸中
橙皮苷的含量 q中成药 ot||y ot{kzl }| q
≈责任编辑 李 禾
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