免费文献传递   相关文献

Modulation of Tonic Herbs on the Immune Cell Inhibition in Stressed Model Animal and Its Possible Mechanism

补益中药调整应激模型动物免疫细胞受抑及其可能机制



全 文 :补益中药调整应激模型动物免疫细胞
受抑及其可能机制
钱瑞琴 o孟 勇
k北京医科大学 中西医结合研究室 o北京 tsss{vl
≈摘要  目的 }观察补益中药对应激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 ∀方法 }建立小鼠应激模型 ∀观察菟丝子 !川
断 !女贞子 !枸杞子等补益中药对应激小鼠免疫细胞增殖过程中胞浆内 ≤¤u n浓度 !细胞膜流动性 !Œ2u oŒ2u• 以及
细胞周期的影响 ∀结果 }补益类中药均可增强应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 ~降低胞浆内 ≤¤u n浓度 o恢复细胞膜
的流动性 o增强 Œ2u的活性 !提高 Œ2u• 阳性细胞数 o与应激组比较有显著性差异k Π s qstl ∀而四药合用的结果
更佳 o可促进细胞进入 ⁄‘„合成期 o减少细胞滞留在 Š ∀rŠt 期k Π s qstl o接近正常对照组水平 ∀结论 }补益类
中药可调整应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 o缓解应激对机体的不利反应 ∀
≈关键词  应激 ~免疫细胞增殖 ~补益中药
持续性应激可使机体免疫功能紊乱 o并诱发和
加重机体多种疾病的发生 o如感染性疾病 !自身免疫
性疾病以及肿瘤等≈t  ∀因此 o缓解 !降低应激的不利
反应 o对临床多种疾病的治疗有积极的意义 ∀祖国
医学对持续性应激k七情 !六淫l的临床治疗效果非
常显著 o且多数补益中药均有免疫增强作用 o为此 o
本文用补益中药及其复方观察对应激小鼠脾淋巴细
胞受抑的影响及其调整机制 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 动物 y ∗ {周龄的 …„…r¦雄性小鼠 o由本
校医学动物部提供 o将动物随机分为对照组 !应激模
型组 !给药组 ∀
1 q1 q2 束缚性应激动物模型≈u  将小鼠装入自制
圆柱形小筒 o后肢固定 o禁食水 o室温下 uw «过夜 ∀
1 q1 q3 中药 菟丝子 !川断 !女贞子 !枸杞子等药购
自北京医科大学第三临床医院 o并组成不同复方 }菟
丝子 !川断组k简称丝断l ~女贞子 !枸杞子组k简称贞
杞l ~菟丝子 !川断 !女贞子 !枸杞子组k简称合剂l ∀
以上复方按 tΒt比例 o制成 tss h水煎剂 ow ε 保存备
用 ∀灌胃给药 o每只小鼠每日 s qw °¯ k约含 s qw ª生
药l o应激小鼠在应激前连续给药 t周 o对照组灌服
等量自来水 ∀
≈收稿日期  t|||2sy2t{
≈基金项目  卫生部科研基金资助课题k|w2t2uuzl
1 q1 q4 主要试剂 • ° Œ2tyws o × × o⁄°‹ 等为
≥¬ª°¤公司产品 ∀ ƒ∏µ¤2ur„  为中国医学科学院药
物研究所产品 ∀
1 q2 检测方法
1 q2 q1 小鼠脾淋巴细胞的增殖反应 参见文献≈v 
方法 ∀
1 q2 q2 细胞胞浆游离钙的测定 参见文献≈w 方
法 ∀
1 q2 q3 淋巴细胞膜流动性测定 参见文献≈x 方
法 ∀
1 q2 q4 白细胞介素2ukŒ2ul测定 参见文献≈v 方
法 ∀
1 q2 q5 白细胞介素2u受体kŒ2u• l及细胞增殖周期
测定 参见文献≈y 方法 ∀
1 q3 统计学方法 试验数据采用 ≥°≥≥软件 τ检验
法 ∀
2 结果
2 q1 补益中药对应激后小鼠脾淋巴细胞增殖的影
响 从表 t可见应激后小鼠淋巴细胞对 ≤²±„ 诱导
的增殖反应低下 o与对照组比较明显下降k Π 
s qstl o灌服中药后均可提高 ≤²±„诱导的小鼠脾淋
巴细胞增殖 o其增加百分率分别是 t{ h out h o
v| h ∀丝断组与贞杞组两组之间无明显差异 o合剂
组有增强的趋势 ∀从表 t还可见应激后小鼠对 °≥
诱导的脾淋巴细胞增殖无明显影响 o提示应激可抑
制 × 淋巴细胞的增殖 o而对 …淋巴细胞的增殖则无
#|yt#
第 ux卷第 v期
usss年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qv¤µqousss
明显影响 ∀
表 t 补益中药对应激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
组别
刺激指数
≤²±„ °≥
对照组 v q|{ ? s qtw u qx{ ? s qty
应激组 u q{t ? s qvttl u qs{ ? s qut
丝断组 v qys ? s qsxul u qtw ? s qts
贞杞组 v qzw ? s qs{ul u qv{ ? s qt|
合剂组 w qsy ? s qttul u qvt ? s qut
注 }≠ ξ ? σ  ν € y t)与对照组比 Π s .st u)与应激组比
Π s qst
2 q2 补益中药对应激后小鼠脾淋巴细胞胞浆内钙
离子的影响 从表 u可见应激后小鼠脾淋巴细胞胞
浆内 ≤¤u n浓度与对照组比较增加 vy h k Π s qsxl o
灌服各药组均可降低细胞胞浆内 ≤¤u n浓度 o其中合
剂组作用最好 o接近正常对照组水平k Π s qsxl ∀
表 u 补益中药对应激小鼠脾淋巴细胞胞浆游离钙的影响
组别 t ≅ tsx# °¯ p t脾细胞中 ≤¤u n含量r±°²¯#p t
对照组 y{ qyw ? { qwz
应激组 |v qts ? tz qx{tl
丝断组 xu qxy ? | qtzul
贞杞组 xw qyv ? tw qwvul
合剂组 yt q{w ? tu qvxul
注 }≠ ξ ? σ  ν € y t)与对照组比 Π s .sx u)与应激组比
Π s qst
2 q3 补益中药对应激后小鼠脾淋巴细胞膜的流动
性的影响 从表 v可见应激后小鼠脾淋巴细胞膜的
荧光偏振度k°l明显降低k Π s qstl o提示膜流动性
增高 o而灌服中药后均可使 °值显著增高k Π 
s qsxl o合剂组的°值接近正常对照组水平k Π 
s qsxl ∀表明补益中药对细胞膜有保护作用 ∀
表 v 中药对应激后小鼠脾淋巴细胞膜流动性的影响
组别 荧光偏振度r°
对照组 s qvuv ? s qsuu
应激组 s quxw ? s qswstl
丝断组 s qvsu ? s qsu|ul
贞杞组 s qu|y ? s qsutul
合剂组 s qvus ? s qsuxul
注 }≠ ξ ? σ  ν € y t)与对照组比 Π s .st u)与应激组比
较 Π s qsx
2 q4 合剂对应激后小鼠脾淋巴细胞增殖周期的影
响 对照组 !应激组 !合剂组各组小鼠脾淋巴细胞在
增殖过程中进入 ≥期k⁄‘„ 合成期l的细胞百分比
分别为 tv qzu ? u quv ow qzu ? s q{t及 | qzy ? t q|z ∀
Šur  k⁄‘„合成后期 o有丝分裂l期分别为 w qw{ ?
t qww o{ quw ? t qwu及 w qzw ? t q{w ∀ ŠsrŠtk⁄‘„ 合
成准备期l分别为{t qs{ ? u qwx o{z qsy ? t qxv及
{x qw{ ? u qv{ ∀进入 ⁄‘„ 合成期的细胞百分比 o模
型组明显低于正常对照组k Π s qsxl o⁄‘„ 合成后
期及 ⁄‘„合成准备期 o模型组与对照组比较相对增
多k Π s qsxl ∀灌服中药后进入 ⁄‘„ 合成期细胞
增多 o滞留在 ⁄‘„合成后期及 ⁄‘„ 合成准备期的
细胞相对减少 ∀
2 q5 合剂组对应激后小鼠脾淋巴细胞 Œ2u活性 !
Œ2u• 阳性细胞的影响 对照组 !模型组 !合剂组脾
淋巴细胞 Œ2u活性分别为 { qyu ? s qut ow q{t ? s q
u| oy qxv ? s qvy ˜# °¯ p t ∀Œ2u• 阳性细胞分别为
t{ qyy ? u q|t o| qv| ? t qyz及 tv q|v ? v qst ∀与对照
组比较模型小鼠脾淋巴细胞合成的 Œ2u活性下降 o
Œ2u• 阳性细胞减少k Π s qstl o合剂组可促进脾淋
巴细胞 Œ2u的合成k Π s qsxl o增加 Œ2u• 阳性细
胞k Π s qstl ∀
3 讨论
现代医学对应激的研究进展较深入 o偏重于基
础理论的探讨 o但如何减少和缓解应激对机体的不
利的影响 o报道甚少 ∀祖国医学根据/阴平阳秘 o精
神乃治0的整体治疗观点 o对各种应激k七情 !六淫l
所致疾病的治疗 o采用调整机体阴阳失调 o多收到较
好疗效 ∀为更深入 !系统探讨中医药缓解应激 !提高
免疫功能的作用机理 o本文观察了补益中药对应激
小鼠脾淋巴细胞增殖过程中 Œ2u oŒ2u• !细胞周期 !
胞浆内钙离子浓度 !细胞膜流动性等的影响 ∀本课
题采用束缚性应激方法 o表明应激后小鼠脾淋巴细
胞增殖能力下降 o胞浆内钙离子浓度增加 !Œ2u产生
的活性降低 !Œ2u• 阳性细胞表达减少 !细胞膜流动
性增强 o细胞增殖周期中进入 ≥期细胞减少 o滞留于
Šur  与 ŠsrŠt 期的细胞相对增多 ∀灌服菟丝子 !
川断及女贞子 !枸杞子及四药合剂后可使上述状况
改善 o均可恢复或接近正常对照组水平 ∀
据报道菟丝子 !川断 !女贞子 !枸杞子各药 o对机
体造血系统 !细胞与体液免疫功能有调整功能 o并有
较广泛的药理作用≈z  ∀为此本试验选用这两组药 ∀
#szt#
第 ux卷第 v期
usss年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qv¤µqousss
试验结果表明补阳类药菟丝子 !川断与补阴类药女
贞子 !枸杞子两组药均可改善对应激小鼠免疫细胞
的影响 o而两组之间无明显差异 o但四药合剂的作用
较强 o与正常组水平接近 ∀提示中医在组方治疗应
激所致疾病时 o补阴药与补阳药相互配伍 o可以提高
疗效 ∀结合本试验 o表明上述补益中药对应激小鼠
免疫细胞的调整作用机理是多环节 o初步认为可对
抗应激后小鼠淋巴细胞细胞胞浆内 ≤¤u n亢进 o恢复
细胞膜流动性 o增加白细胞介素2u受体阳性细胞 o提
高白细胞介素2u合成 o调整细胞增殖周期 o从而可缓
解和降低应激对机体的不利反应 ∀但应激对免疫细
胞的影响是多方面的 o本课题正在作进一步的研究 ∀
≈参考文献 
≈t  许贤豪 1 神经免疫学 1 北京 }北京医科大学 !中国协和医科大
学联合出版社 ot||v1{t q
≈u  查宏斌 o徐红 o翟清竹 o等 1 束缚应激大鼠血清淋巴细胞转化抑
制因子的研究 1 生理学报 ot||t owvktl }vt q
≈v  周道洪 1 测定淋巴细胞转化和 Œ2u活性的新方法 ) ) )  × × 比
色分析法 1 中国免疫学杂志 ot|{y ouktl }v| q
≈w  张均田 o李锡明 o石成璋 o等 1 用 ƒ∏µ¤2ur„  测定细胞内游离钙
浓度的方法 1 中国药学杂志 ot||t ouykttl }yxx q
≈x  陈泽涛 o顾振东 1 中药对淋巴细胞型白血病小鼠细胞膜流动性
的影响 1 中西医结合杂志 ot||t ottktl }v| q
≈y  宋平根 o李素文 1 流式细胞的原理和应用 1 北京 }北京师范大
学出版社 ot||u1{u q
≈z  李广勋 1 中药药理毒理和临床 1 天津 }天津科技出版公司 o
t||u1u{u ovy{ ov{| ov|u q
Μοδυλατιον οφ Τονιχ Ηερβσ ον τηεΙµ µ υνε ΧελλΙνηιβιτιον ιν
Στρεσσεδ Μοδελ Ανιµ αλ ανδ Ιτσ Ποσσιβλε Μεχηανισµ
±Œ„‘ • ∏¬2 ¬´± o ∞‘Š ≠²±ª
k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²©Œ±·¨ªµ¤·¬²± ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤±§ • ¶¨·¨µ±  §¨¬¦¬±¨ o
…¨ ¬­¬±ª  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o…¨ ¬­¬±ª tsss{v o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨ ¦·²©·²±¬¦«¨µ¥¶²± ·«¨ ¬°°∏±¨ ¦¨¯¯ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¬± ¶·µ¨¶¶¨§
°¬¦¨ qΜετηοδσ:„ °²§¨¯²©¶·µ¨¶¶¨§°¬¦¨ º¤¶¥∏¬¯··²²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨ ¦·²©¶∏¦«·²±¬¦«¨µ¥¶¤¶×∏¶¬½¬o≤«∏¤±§∏¤±~
‘|½«¨ ±½¬oŠ²∏´¬½¬²±·«¨ ¦¤¯¦¬∏° ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬±¦¼·²³¯¤¶°¬±·«¨ ³µ²¦¨¶¶²©¬°°∏±¨ ¦¨¯¯ µ¨³µ²§∏¦·¬²±o¤¶º¨¯¯
¤¶²±·«¨ °¨°¥µ¤±¨ ©¯∏¬§¬·¼ ²©¶³¯ ±¨¨ ·¬¦¯ ¼°³«²¦¼·¨¶oŒ2u oŒ2u• ¤±§¦¨¯¯ ³¨µ¬²§qΡεσυλτσ:׫¨ ·²±¬¦«¨µ¥¶¦²∏¯§
¬°³µ²√¨·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤¥¬¯¬·¼ ²©¶³¯¨¨ ± ¼¯°³«²¦¼·¨¬±·«¨ ¶·µ¨¶¶¨§ °¬¦¨ oµ¨§∏¦¨ ·«¨ ¦¤¯¦¬∏° ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±o¤±§
µ¨¦²√ µ¨·«¨ ©¯∏¬§¬·¼ ²©¦¨¯¯ °¨°¥µ¤±¨ q׫¨ ¼ ¦²∏¯§¤¯¶²¬°³µ²√¨·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©Œ2u ¤±§¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¤°²∏±·²©Œ2
u• ¦¨¯¯k Π s qstl q׫¨ ¦²°¥¬±¤·¬²± ²©·«¨ ©²∏µ·²±¬¦«¨µ¥¶³µ²√ §¨ °²µ¨ ©¨©¨ ¦·¬√¨o©¤¦¬¯¬·¤·¬±ª·«¨ ¦¨¯¯ ¬±·² ⁄‘„
¶¼±·«¨·¬¦³¨µ¬²§¤±§µ¨§∏¦¬±ª·«¨ µ¨·¨±·¬²±³¨µ¬²§¬± ŠsrŠtk Π s qstl qΧονχλυσιον : ײ±¬¦«¨µ¥¶¦¤± °²§∏¯¤·¨
·«¨ µ¨³µ²§∏¦·¬√¨©∏±¦·¬²± ²©·«¨ ¶³¯¨¨ ± ¼¯°³«²¦¼·¨ ¤±§µ¨ ¬¯¨√¨·«¨ ∏±©¤√²µ¤¥¯¨µ¨¶³²±¶¨ ²©·«¨ ¶·µ¨¶¶²±·«¨ ²µ2
ª¤±¬¶° q
[ Κεψ ωορδσ] ¶·µ¨¶¶~µ¨³µ²§∏¦·¬²±¬°°∏±¨ ¦¨¯¯ ~·²±¬¦«¨µ¥¶
≈责任编辑 方文贤 
本刊通知
本刊对来稿收取处理费k每篇 tsss字以下 vs元 otsss字以上 xs元l o请作者在寄发稿件的同时将处理费通过邮局寄汇
本刊k请勿在稿件中夹带现金l ∀汇单上请注明论文题目及第一作者姓名 ∀收款地址 }北京东直门内北新仓 t{号中国中药杂
志 o邮编 tsszss ∀
本刊对来稿k已收处理费者l恢复退稿制度 ∀
#tzt#
第 ux卷第 v期
usss年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qv¤µqousss