全 文 ：#药剂#
黄柏 ≥
∞法与 • ∞法的成分比较
张学兰 张兆旺 徐霞 3 王英姿 k山东中医药大学 济南 uxsstwl
摘要 目的 }对黄柏进行/饮片颗粒化0的研究 ∀方法 }以小檗碱 !总生物碱 !干浸膏量为指标 o对其
作半仿生提取法k简称 ≥
∞法l和水提取法k简称 • ∞法l比较 ∀结果 }黄柏 x种提取液中 o以 ≥
∞t 液明
显优于 • ∞液 ∀结论 }黄柏饮片制备口服颗粒剂 o以采用 ≥
∞法盐酸调至水为 ³t qs作第一煎 o饱和氢
氧化钙溶液调至水为 ³z qs和 ³ts qs作第二 !第三煎为佳 ∀
关键词 黄柏 ≥
∞法 • ∞法 小檗碱 总生物碱 浸膏得率
为对黄柏进行/饮片颗粒化0的研究 o根据
≥
∞法理论≈t ou o在用比例分割法优选 ≥
∞法
最佳提取条件的基础上 o本文报道以小檗碱 !总
生物碱 !干浸膏量为指标 o对 ≥
∞法及 • ∞法 x
种提取液的对比研究 ∀
1 仪器与药品
≤≥2|vs薄层扫描仪k岛津l ~定量毛细管
kw otsΛ¯ o日本l ~°≥2v≤ 型数字酸度计k上海雷
磁仪器厂l ~ tts型电子分析天平k上海第二
天平仪器厂l ~zut2tss型可见分光光计k上海
第三分析仪器厂l ~
∞≤ 高效液相色谱
仪k美国l ∀
药材经本校张兆旺教授鉴定为芸香科植物
黄皮树 Πηελλοδενδρον χηινενσε ≥¦«±¨ ¬§q除去栓
皮的干燥树皮 ∀
盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检
定所提供 ~³ z qs 缓冲液按5中国药典6t||x
年版二部附录 tzy页磷酸盐缓冲液k³ z qsl法
配制 ~s qssz h溴麝香草酚蓝溶液用 ³ z qs缓
冲液配制 ~试剂均为 ∀
2 方法与结果
2 q1 供试液的制备
2 q1 q1 • ∞液 精密称取黄柏 ts ∗ us目的粗
粉 uxªo加水煎煮 v次k加水量分别为药材量的
ts ots o{倍 ~浸泡 tx°¬±o煎煮时间分别为 u ot o
t«l分别抽滤 o合并滤液 o浓缩至 uss °¯ ∀
精密吸取浓缩液 us °¯ o置蒸发皿中 o水浴
蒸至近干 o加硅藻土 wªo搅匀 o{s ε 烘干 o研匀 o
以甲醇 txs °¯ 索氏回流提取 w«o提取液回收甲
醇至少量 o水浴蒸干 o以甲醇定容至 ux °¯ k每
t °¯ 相当于原药材 s qtªl o即得 • ∞液 ∀
2 q1 q2 ≥
∞t液 按 2 q1 q1 项下方法 o只将第
t煎用水以 t°²¯#p t盐酸调至 ³ t qs o第 u煎
和第 v煎用水以饱和氢氧化钙溶液分别调至
³ z qs o³ ts qs o依法制得 ≥
∞t液 ∀
2 q1 q3 ≥
∞u 液 按 2 q1 q2 项下方法 o只将
t°²¯#p t盐酸改用 s qx°²¯ #pt硫酸 o依法制
得 ≥
∞u液 ∀
2 q1 q4 ≥
∞v液 按 2 q1 q2 项下方法 o只改用
s qt°²¯ #pt氢氧化钠溶液调至 ³ z qs和 ³
ts qs分别作第二 !第三煎 o依法制得 ≥
∞v液 ∀
2 q1 q5 ≥
∞w液 按 2 q1 q3 项下方法 o只改用
s qt°²¯ #pt氢氧化钠溶液调至 ³ z qs和 ³
ts qs分别作第 u !第 v煎 o依法制得 ≥
∞w液 ∀
2 q2 小檗碱的含量测定
2 q2 q1 对照液的制备 精密称取盐酸小檗碱
对照品 t°ªo用甲醇定容至 u °¯ ∀
2 q2 q2 吸收曲线和标准曲线的制备 取 2 q2 q
1项下盐酸小檗碱对照液 u qs ow qs oy qs o{ qs o
ts qsΛ¯ o分别点于同一块 s qv h ≤ ≤2¤2硅胶
板上 o用苯2醋酸乙酯2甲醇2异丙醇2氨水ktuΒy
3 北海舰队 wst医院 青岛 uyyswu
#ssy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
ΒvΒvΒtl展开 {¦° o晾干 o测定吸收曲线 o结果在
vxz±°处有最大吸收 ∀扫描条件 }单波长反射
法锯齿扫描 oΚ¶ vxz±° o≥÷ v o狭缝 t qu°°
≅ t qu°° o灵敏度中 ∀
按上述条件扫描测定 o以点样量为横坐标 o
峰面积积分值为纵坐标 o进行回归处理 o回归方
程 Ψ w|s|z .|z Ξ n vtyt .{s , ρ s q|||s ∀点
样量在 u qs ∗ ts qsΛ¯ 线性关系良好 ∀
2 q2 q3 供试液的含量测定 取 2 q1 项下 x种
供试液各 w qsΛ¯ o与 2 q2 q1 项下盐酸小檗碱对照
液 w qs ots qsΛ¯ o分别点于同一块 s qv h ≤ ≤2
¤2硅胶 板上 o按 2 q2 q2 项下条件展开 o扫
描 ∀小檗碱含量以盐酸小檗碱计算 o见表 t ∀
2 q3 总生物碱的含量测定≈v
表 t 黄柏 x种提取液中小檗碱含量
提取液 测得值 °ª#ªp t ξ ? σ °ª#ªp t ΡΣ∆ h
• ∞液 y qwxw y qszt y qwxz y qvuz ? s quuu v qxs
≥
∞t液 { q||w | qttw | qsvt | qswy ? s qsyttl s qy{
≥
∞u液 { qxxz { qy{s { qww| { qxy| ? s qttyt oul t qvx
≥
∞v液 { qtsw z q{vs { qsxz z q||z ? s qtwzt ou ovl t q{v
≥
∞w液 z quzt z qyus z q{yw z qx{x ? s qu|{t ou ov owl v q|v
注 }tl Π s qstk与 • ∞液比较l ~ul Π s qstk与 ≥
∞t液比较l ~vl Π s qstk与 ≥
∞u液比较l ~wl Π s qsxk与 ≥
∞v液比较l
2 q3 q1 对照液的制备 精密称取盐酸小檗碱
对照品 t qx°ªo用 ³ z qs缓冲液定容至 ts °¯ ∀
2 q3 q2 标准曲线的制备 取 2 q3 q1 项下盐酸
小檗碱对照液 s qu os qw os qy os q{ ot qs °¯ o分别
置具塞三角瓶中 o均用³z qs缓冲液稀释至
u qs °¯ ∀加入 s qssz h溴麝香草酚蓝溶液 { qs
°¯ o摇匀 o加入氯仿 ts qs °¯ o盖好瓶塞 o充分振
摇 u°¬±o移入分液漏斗中 o静置分层 ∀分取氯
仿层 o用干燥滤纸滤过 o滤液以相应的试剂为空
白 o在 wus±°处测定吸收度 ∀以吸收度为纵坐
标 o浓度为横坐标 o绘制标准曲线 ∀回归方程
Ψ s .suxz Ξ n s .tsxw , ρ s .|||{ ∀
2 q3 q3 供试液的含量测定 取 2 q1 项下 x种
供试液各 s qts °¯ o置具塞三角瓶中 o水浴蒸发
至干 o残渣加入 ³ z qs缓冲液 u qs °¯ 使溶解 o
按 2 q3 q2 项下方法进行测定 ∀总生物碱含量以
盐酸小檗碱计算 o结果见表 u ∀
表 u 黄柏 x种提取液中总生物碱含量
提取液 测得值 °ª#ªp t ξ ? σ °ª#ªp t ΡΣ∆ h
• ∞液 z qvv| z quuu z qyxs z qwsw ? s quut v qss
≥
∞t液 tu q{yw tu q|{t tu q|wu tu q|u| ? s qsystl s qwy
≥
∞u液 tt q|vs tu qusu tt q{|t tu qss{ ? s qty|t oul t qwt
≥
∞v液 tt qxwt tt q{tv tt qyxz tt qyzs ? s qtvyt oul t qtz
≥
∞w液 | qwst | qwws | qstu | qu{w ? s quvzt ou ov owl u qxx
注 }tl Π s qstk与 • ∞液比较l ~ul Π s qstk与 ≥
∞t液比较l ~vl Π s qstk与 ≥
∞u液比较l ~wl Π s qsxk与 ≥
∞v液比较l
2 q4 干浸膏量的测定
取 2 q1 项下 x种提取液的浓缩液各
us qsΛ¯ o分别置恒重的蒸发皿中 o水浴蒸干 o
tsx ε 烘至恒重 o计算干浸膏得率 ∀结果见表
v ∀
表 v 黄柏 x种提取液的干浸膏得率
提取液 测得值 °ª#ªp t ξ ? σ °ª#ªp t ΡΣ∆ h
• ∞液 s quss| s qt|{| s qussw s qusst ? s qssts s qxu
≥
∞t液 s qvxu{ s qvv{y s qvw{w s qvwyy ? s qsszvtl u qts
≥
∞u液 s qvxu| s qvxvs s qvw|w s qvxt{ ? s qssuttl s qx{
≥
∞v液 s qwt|z s qwuu| s qwusw s qwuts ? s qsstzt ou ovl s qws
≥
∞w液 s qwzuv s qwy|t s qwzww s qwzt| ? s qssuzt ou ov owl s qxz
注 }tl Π s qstk与 • ∞液比较l ~ul Π s qstk与 ≥
∞t液比较l ~vl Π s qstk与 ≥
∞u液比较l ~wl Π s qsxk与 ≥
∞v液比较l
#tsy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
2 q5 黄柏 5 种提取液的综合评价
以小檗碱 !总生物碱 !干浸膏量为指标 o对
黄柏 x种提取液作综合评价 o经标准化变换处
理后 o结果见表 w ∀
表 w 黄柏 x种提取液的综合评价比较
提取液 小檗碱 总生物碱 干浸膏 Ψ
• ∞液 p t qyv| p t qys{ p t qzux p t qyyx
≥
∞t液 t quuw t qtuu p s qtu{ s q|tv
≥
∞u液 s qztu s qyyz p s qszt s qxvz
≥
∞v液 s qs|| s qxss s qy{w s qvzy
≥
∞w液 p s qvwv p s qyz| t quv| p s qtyt
注 }Ψ 小檗碱 ≅ s qw n总生物碱 ≅ s qw n干浸膏 ≅ s qu
2 q6 • ∞液与 ≥
∞t液的多成分反相液相色谱
精密吸取 2 q1 项下 ≥
∞t 液 o • ∞ 液各
t °¯ o用甲醇定容至 ts °¯ o微孔滤膜ks qwxΛ°l
滤过后 o分别进样 us qsΛ¯ o另取 u qu qt项下盐酸
小檗碱对照液 us qsΛ¯ 进样 o进行色谱分析 ∀色
谱条件 }色谱柱 ⁄∞× ⁄2≤t{ kv q| ≅
vss°°l ~柱温 ux ∗ vs ε ~检测波长 uxw±° ~灵
敏度 u qsƒ ≥ ~流动相由甲醇2水kusΒ{sl至
tss h甲醇 o在 wx°¬±内作梯度洗脱 ∀u种提取
液色谱图中各吸收峰面积积分值见表 x ∀
表 x • ∞液与 ≥
∞t液色谱图中吸收峰面积积分值
峰号
面积积分值
• ∞液 ≥
∞t液
t xyzxs w{|ux
u uwxyx ut{wv
v tzwvs ustzy
w {tyxx ttts|y
x tuxs|| uzu|xz
y tutzu u|tts
z v|vw ttvyz
{ tvsv| txv{|
| uswzv
ts ww{s
tt x|vw
tu ttt|s
3 小结与讨论
3 q1 以小檗碱 !总生物碱 !干浸膏量为指标 o对
黄柏 u种提取方法的 x种提取液进行综合评
价 o结果 ≥
∞法明显优于 • ∞法 ∀在 ≥
∞法
中 o小檗碱 !总生物碱含量高 o且澄明度较佳的
是 ≥
∞t液 ∀故黄柏煎提 v次用水的 ³ o依次
以盐酸调至 ³t qs o饱和氢氧化钙溶液调至
³z qs和 ³ts qs为佳 ∀
3 q2 黄柏 • ∞液与 ≥
∞t 液的多成分反相液
相色谱表明 o≥
∞t 液检出 tu个吸收峰 o而 • ∞
液只检出 {个吸收峰 ~≥
∞t 液 ! • ∞液共有吸
收峰 t ∗ z o除峰 t ou面积积分值 • ∞液略高于
≥
∞t液外 o其余 x个吸收峰面积积分值 ≥
∞t
液均明显高于 • ∞液 ~• ∞液色谱图中峰 {在
≥
∞t液中未检出 o而 ≥
∞t 液色谱图中峰 { ∗
tu在 • ∞液中未检出 ~≥
∞t 液与 • ∞液色谱
图中 o各吸收峰面积积分值 ≥
∞t 液kxzu|wsl
明显高于 • ∞液kvvwywwl ∀
3 q3 干浸膏得率测定中 o≥
∞v 液 !≥
∞w 液得
率较高 o可能是由于在氢氧化钠调节的碱性水
中 o黄柏中粘液质大量溶出所致 ∀
3 q4 传统的饮片配方煎汤 o存在诸多不足 o近
年来出现了/饮片颗粒化0 ∀其有 u种方法 o一
种是将饮片由传统的切制规格 o改变为直接粉
碎成颗粒或粗末 ~另一种是将单味中药用水煎
提 o制成浸膏颗粒 ∀后一种饮片浸膏颗粒 o实质
上是一种单味药的制剂 ∀国家中医药管理局在
江苏 !广州布点 o进行后种/饮片精制颗粒0的研
究 ∀本文及多种制剂的研究报道提示 o/ ≥
∞
法0有可能替代/ • ∞法0≈w ∗ { ∀ ≥
∞法在中药
饮片颗粒化的研究中 o也有着广阔的应用前景 ∀
4 参考文献
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t||{2tu2tx收稿
#usy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期