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小柴胡汤对病毒性心肌炎动物模型治疗作用的实验研究



全 文 :#药理#
小柴胡汤对病毒性心肌炎动物模型
治疗作用的实验研究 3
王西栋 k山东省枣庄市第二卫生学校 枣庄 uzzxssl
张广兰 k山东省滕州市妇幼保健院 滕州 uzzxssl
梁玉梅 k山东省滕州市中心人民医院 滕州 uzzxssl
陈晨华 仇素英 k山东医科大学 济南 uxsstul
摘要 以柯萨奇病毒 …v感染 …¤¯¥r¦小鼠建立心肌炎模型 o用小柴胡汤进行治疗 ∀结果显示 o小柴
胡汤能够调节 × 细胞亚群 o影响抗心肌抗体的产生 o有助于机体对病毒的清除 o对病毒性心肌炎起到有
效治疗作用 ∀
关键词 小柴胡汤 柯萨奇病毒 …v 心肌炎 × 细胞亚群 抗心肌抗体
病毒性心肌炎k∂  l为临床常见的心脏疾
患 o其发病机理目前尚不十分清楚 o一般认为该
病的发生与病毒感染及机体的自身免疫反应有
关 ∀小柴胡汤为和解少阳药 o更具有抗炎 !抗病
毒及免疫调节作用≈t  ∀今用此汤剂对柯萨奇病
毒 …vk≤ ∂ …vl感染的心肌炎模型小鼠进行治疗
研究 o以探讨治疗病毒性心肌炎的有效方法 ∀
1 材料与方法
111 材料
11111 病毒 ≤ ∂ …v o‘¤±¦¼毒株 o由山东医科
大学病毒室提供 ∀
11112 动物 …¤¯¥r¦小鼠 oy ∗ {周龄 o健康雌
性 o由北京医科大学动物室提供 ∀将 xs只小鼠
随机分成两大组 o即治疗组和对照组 o每组 ux
只 o每组再随机分成 x组 o每组 x只 ∀
11 1 1 3 抗体 单克隆抗体 }大鼠抗小鼠
׫¼t oun k× 总l o¼·un kצr׶l ov×wn k׫r
׬l单克隆重抗体kŒªŠl o由北京医科大学免疫
室提供 ∀荧光抗体 }异硫氰酸荧光素标记的羊
抗鼠 ŒªŠ o由卫生部武汉生物制品研究所提供 ∀
酶标抗体 }辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠 ŒªŠ o
由北京华美生物工程公司提供 ∀
11114 抗原 …¤¯¥r¦小鼠心脏肌球蛋白 o自
制 ∀
11115 药物 小柴胡汤 }柴胡 tuªo黄芩 |ªo甘
草k炙lyªo生姜 |ªo大枣 w枚k约 wªl o半夏 |ªo
人参|ª∀水煎 !过滤 o浓缩 o使生药含量s1 |
ªr°¯ os1t®°¤高压灭菌 ow ε 保存备用 ∀
112 方法
11211 药物剂量的选择 将昆明种小鼠随机
分成 y组 o每组 x只 ∀usª小鼠每日药物用量按
ys®ª成人用量kªlrv{z1|计算 o约 z1xªr®ª体
重小鼠 o以此作为每只小鼠日平均用量 ∀实验
组小鼠分别给予 v个平均量 !u个平均量 !平均
量 !tru平均量 !trw平均量 o灌胃给药 o每日 t
次 o连续给药 u周 ∀对照组小鼠给予生理盐水
灌胃 ∀结果各实验组小鼠均未死亡现象 o我们
选择 v个平均量作为治疗量 ∀
11212 动物的感染与给药 …¤¯¥r¦小鼠经腹
腔接种含 tsx × ≤Œ⁄xs ≤ ∂ …v液 s1t °¯ ovs°¬±后 o
灌胃给药 o药物用量为 v个平均量k每日每只小
鼠 s1wxª生药rs1x °¯ l o连续给药两周 ∀对照组
小鼠接种相同剂量的病毒 o每日给予生理盐水
灌胃 o连续 u周 ∀
11213 标本的采集 分别于病毒感染后 v ox o
z otx out天摘眼球取血 o分离血清作检测抗体
3 国家自然科学基金资助课题 ‘²qv{|zs|tt
#w{y# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期
用 ~取心脏作分离病毒及组织病理学检查 ~取脾
脏作 × 细胞亚群检测 ∀
11214 × 细胞亚群检测 按 Ž¬¶«¬°²·²≈u 报道
的方法分离脾细胞 ∀用 °…≥k³‹z1wl调细胞至
u ≅ tsyr °¯ o分装 w只小管 o每管加脾细胞 t °¯ o
wsssµr°¬±离心 u°¬±o弃上清 ∀分别加入大鼠
抗小鼠 ׫¼t oun o¼·un ov×wn单克隆抗体 o
每管 tssΛ¯ o对照管加 °…≥ ∀混匀 ow ε 作用
vs°¬±owsssµr°¬±离心 u°¬±洗 v 遍 ∀加荧光
抗体 o每管 tssΛ¯ ow ε 作用 vs°¬±owsssµr°¬±离
心 u°¬±洗 v遍 o铺片 o置荧光显微镜下观察 o计
数 uss个细胞中荧光阳性细胞数 o计算阳性率 ∀
11215 抗心肌抗体检测 抗原制备按王西栋
等≈v 报道的方法进行 o所提抗原为正常 …¤¯¥r¦
小鼠的心脏肌球蛋白重链 ∀用间接酶联免疫吸
附试验检测血清抗心脏肌球蛋白重链的抗体 o
按 ‘¨ ∏等≈w 报道的方法进行 ∀
11216 组织病理学检查 常规处理心脏标本 !
‹∞染色 o镜检 o观察心肌细胞损伤及间质炎性
改变等病理变化 ∀
11217 心脏病毒分离 常规处理心脏标本进
行心脏病毒分离 ∀
11218 统计方法 样本均数比较用 τ检验 ∀
2 结果
211 × 细胞亚群检测结果 从表 t中可见 o病
毒感染后 z ∗ ut天 o治疗组 v×wn和 ¼·un均
明显低于对照组 ~而 ׫¼t oun除于第 x天外 o均
无明显改变 ∀说明小柴胡汤的 ¼·un和 v×wn
具有调节作用 ∀
表 t 小柴胡汤对感染小鼠 × 细胞亚群的影响
感染后天数
× 细胞 h
׫¼t ou n ¼·un v×w n
治疗组 x uv1|z ? t1uzul t|1yu ? s1yu tv1xt ? s1vw
z uu1sv ? s1|u tu1tu ? s1yztl tu1uw ? s1xvul
tx t{1v{ ? s1uw tw1st ? t1{{ul tt1{s ? u1utul
ut us1zu ? v1yw tu1yz ? s1uzvl tu1uu ? s1{ul
对照组 x uz1zz ? s1xu t{1|| ? s1vv tv1vw ? s1xv
z us1xz ? s1w{ t|1st ? s1vs tx1zs ? s1zx
tx t|1v{ ? t1tw us1sy ? s1|z t{1v{ ? u1vu
ut uw1ty ? t1{| ut1t| ? t1yv ty1ww ? s1xs
注 }≠ ξ ? σ  ν € x 与对照组比较t) Π s1sx u) Π s1st v) Π s1sstk下同l
212 抗心肌抗体检测结果 从表 u中可见 o小
柴胡汤治疗后 tx天 o抗心肌抗体明显低于对照
组 o第 ut天 o其滴度进一步降低 ∀说明药物可
抑制抗心肌抗体的产生 ∀
213 心脏病毒分离结果 从表 v中可见 o病毒
感染后 v天 o治疗组和对照组心脏病毒分离均
为阳性 o第 x ∗ z天 o治疗组阳性率明显低于对
照组 ∀说明小柴胡汤有抗病毒作用 ∀
表 u ∞Œ≥„检测小鼠血清中抗心肌抗体

抗心肌抗体
x§ z§ tx§ ut§
治疗组 s1uy ? s1tw s1uy ? s1tt s1vy ? s1tuul s1ws ? s1tuul
对照组 s1uz ? s1s| s1uz ? s1ts s1xy ? s1tu s1yz ? s1tw
表 v 治疗组和对照组心脏病毒分离情况


例数 阳性数 阳性率 h

例数 阳性数 阳性率 h

例数 阳性数 阳性率 h
治疗组 w w tss x v ys x t us
对照组 w w tss x x tss x v ys
#x{y# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期
214 组织病理学检查结果 病毒感染后 x天 o
治疗组小鼠心肌坏死及炎性细胞浸润明显低于
对照组 ~第 z天 o治疗组小鼠心肌坏死区产生纤
维母细胞 ~第 tx ∗ ut天 o治疗组小鼠心肌呈现
恢复期表现 ∀而对照组小鼠 o心肌坏死及炎性
细胞浸润呈进行性加重 ∀
3 讨论
本文以 ≤ ∂ …v感染 …¤¯¥r¦小鼠建立心肌炎
模型 o经小柴胡汤治疗后 o心肌炎明显改善 o其
作用机理可能与如下因素有关 ∀ ≠小柴胡汤具
有抗炎作用 }文献报道≈t  o小柴胡汤中的柴胡和
甘草具有抗炎 !抗变态反应作用 ∀本研究证实 o
病毒感染后 x ∗ ut天 o治疗组心肌炎症反应明
显低于对照组 o可能与小柴胡汤的抗炎作用有
关 ∀该汤剂具有激素样抗炎作用 o又有非激素
样抗炎作用 ∀ 小柴胡汤具有调节 × 细胞亚群
的作用 }× 细胞介导的免疫在 ∂  的发病中起
着重要作用≈x  ∀本研究证实 o小柴胡汤主要调
节 ¼·un和 v×wn ∀病毒感染后 z ∗ ut天 o治
疗组 ¼·u和 v×w均明显降低 o与心脏病理改
善一致 ∀文献报道≈t  o小柴胡汤对正常小鼠 ×
细胞具有调节作用 o且可将异常免疫状态调节
为正常免疫状态 ∀对 ׫细胞具有抑制作用 ∀
作者认为小柴胡汤通过抑制 ¼·un和 v×wn的
生成 o改善心肌炎 o同时 v×wn的减少 o也影响
一些细胞因子的生成 o从而改善炎症反应 ∀ ≈
小柴胡汤影响抗心肌抗体的产生 }抗心肌抗体
参与心肌炎的发病过程≈w  ∀本研究发现 o小柴
胡汤治疗后 tx ∗ ut 天 o坏死心肌呈恢复期表
现 o与小柴胡汤抑制抗心肌抗体产生一致 ∀ …
小柴胡汤有助于机体清除病毒 }本研究证实 o病
毒感染后 x ∗ z天 o治疗组心脏病毒分离阳性率
明显低于对照组 ∀文献报道≈y  o人参能诱导细
胞产生干扰素 o并能改善细胞代谢 o有助于机体
建立抗病毒状态 ∀
4 参考文献
t 雨谷荣等 1 国外医学#中医中药分册 ot||s ~tukwl }tv
u Ž¬¶«¬°²·² ≤ ·¨¤¯ q≤¬µ¦∏¯¤·¬²±ot|{{ ~zzkvl }ywx
v 王西栋等 1 中国病毒学 ot||x ~tskvl }uty
w ‘¨ ∏ ‘ ·¨¤¯ qŒ°°∏±²¯ ot|{z ~uw{{
x ≥ „ ‹∏¥¨µ ·¨¤¯ q„ ° °¤·«²¯ ot|{w ~tty }ut
y 魏然等 1 中国病毒学 ot||u ~zktl }vy
t||y ) ts ) ty收稿
厚朴对消化系统的药理作用 3
朱自平 张明发 沈雅琴 王红武
k陕西省中医药研究院中药研究所 西安 ztsssvl
摘要 厚朴乙醇提取物 x otxªr®ª均明显抑制盐酸型溃疡 o明显对抗番泻叶性小鼠腹泻 ∀v otsªr®ª
均明显增加大鼠胆汁流量 o实验表明厚朴对消化系统有明显促进作用 ∀
关键词 厚朴 抗溃疡 抗腹泻 利胆
厚朴与以往我们研究的 {味温里药同属辛
温入脾胃经药 ∀{味温里药都有抑制动脉血栓
形成作用≈t  o对消化系统影响广泛 o都有抗溃疡
作用和抗腹泻作用 o还有或多或少的利胆作
用≈u ∗ |  ∀为探讨同属辛温入脾胃经药的共同
点 o本实验观察了厚朴对消化系统的影响 ∀
1 材料
111 药物与主要试剂
厚朴购自西安市万寿北路药材市场 o经本
院生药研究室鉴定为木兰科植物厚朴的干燥干
3 国家自然科学基金资助项目 ‘²qv|vzs{v{
#y{y# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期