全 文 ：高效液相色谱法同时测定肝得宁2 µ号丸中
五味子甲素和五味子乙素的含量
刘峰群 o贺承山 o李正明 o何守文 o吴素体
k中国人民解放军第 vsu医院 o北京 tsssv|l
≈摘要 目的 }建立肝得宁2 µ号丸中五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法 ∀方法 }高效液相色谱法 oµ²2
°¤¶¬¯ ≤t{分析柱 o甲醇2四氢呋喃2水kzyΒwΒusl为流动相 o检测波长 uxw ±° ∀结果 }五味子甲素回归方程为 Ψ
uwzs .zvs Ξ p t .u|v , ρ s .||||( ν xl o线性范围 s qtwzz ∗ t qt{ty Λªo平均回收率为 |z qyw h oΡΣ∆ t .wt % ;五味
子乙素回归方程 Ψ tzyu .vuz Ξ n s .vw{ , ρ s .|||z( ν xl o线性范围 s qs{tt ∗ s qyww{ Λªo平均回收率 |y qtw h o
ΡΣ∆ s q|s h ∀结论 }方法简便 !快速 !准确 o可作为该制剂的定量方法 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~五味子甲素 ~五味子乙素 ~含量测定
肝得宁2 µ号丸是本院自制制剂 o为五味子 !女
贞子 !连翘 !败酱草 w味药材经粉碎后加炼蜜机制而
成的蜜丸 o临床用于急 !慢性肝炎的治疗 o效果满意 ∀
方中君药五味子主要含五味子甲素和五味子乙素 o
有明显促进肝糖元生成 !降低转氨酶 !保护肝细胞等
作用 o故其含量可作为控制本制剂质量的指标 ∀为
此 o本文研究建立了高效液相色谱法同时测定肝得
宁2 µ号丸中五味子甲素和五味子乙素含量的方法 ∀
1 仪器 !材料与试药
高效液相色谱仪 }惠普 ° tsxs2⁄⁄系统 ∀
五味子甲素和五味子乙素对照品k中国药品生
物制品检定所l ~甲醇k色谱纯l ~四氢呋喃 !氯仿k分
析纯l ~五味子药材k市售l ~肝得宁2 µ号丸由本院药
学部制备 ∀
2 色谱条件
µ²°¤¶¬¯ ≤t{分析柱 w qy °° ≅ uxs °° ~流动相
甲醇2四氢呋喃2水kzyΒwΒusl ~流速 t qs °¯ # °¬±p t ~
检测波长 uxw ±° ~柱温 vs ε ∀
3 实验方法
3 q1 对照品溶液的制备 精密称取减压干燥至恒
重的五味子甲素对照品 tw qzz °ªo加甲醇使溶解 o
定容至 ux °¯ ∀另精密称取减压干燥至恒重的五味
子乙素对照品 { qtt °ªo加甲醇使溶解 o定容至 ux
°¯ ∀
≈收稿日期 t||{2tu2uu
≈基金项目 国家中医药管理局科研基金资助项目k|xvvtul
精密量取上述两种溶液各 t °¯ o加甲醇定容 ts
°¯ o制成五味子甲素和五味子乙素的混合溶液 ∀
3 q2 样品溶液的制备 取肝得宁2 µ号丸约 t ªo精
密称定 o加硅藻土少量研细 o置索氏提取器中 o加氯
仿回流提取 w «o挥干氯仿 o残渣加甲醇定容至 ts
°¯ 量瓶中 o摇匀 o作为样品溶液 ∀
分别精密吸取对照品溶液和样品溶液各 ts Λ¯ o
注入液相色谱仪 o按上述色谱条件测定 o色谱图见图
t o图 u ~以外标法计算样品中五味子甲素和五味子
乙素的含量 ∀
3 q3 空白对照溶液的制备与测定 按处方量制备
不含五味子药材的阴性样品 o按样品溶液制备方法
制备阴性对照溶液 ∀进样 ts Λ¯ o记录色谱图 o见图
v o结果无干扰 ∀
3 q4 线性关系考察 准确吸取对照品混合溶液
u qx ox qs ots qs otx qs ous qs Λ¯ 依次进样 o按上述色谱
条件测定峰面积 o以峰面积积分值为纵坐标 o五味子
甲素 !五味子乙素进样量kΛªl为横坐标 o绘制标准曲
线 ∀回归方程为 }五味子甲素 Ψ uwzs .zvs Ξ p
t .u|v , ρ s .||||( ν xl o线性范围s qtwzz ∗
t qt{ty Λª~五味子乙素 Ψ tzyu .vuz Ξ n s .vw{ , ρ
s .|||z( ν xl o线性范围 s qs{tt ∗ s qyw{{ Λª∀
3 q5 精密度试验 准确吸取对照品混合溶液 ts
Λ¯ o重复进样 y次 o五味子甲素和五味子乙素峰面积
积分值的 ΡΣ∆分别为 s q{t h ot qtu h ∀
3 q6 重现性试验 按 3 q2 项下测定方法 o对批号
|zttts样品重复测定 x次 o结果五味子甲素平均含
#zxt#
第 ux卷第 v期
usss年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qv¤µqousss
量 yys qut Λª#ªp t oΡΣ∆ s q{v h ~五味子乙素平均含
量 u{u qx| Λª#ªp t oΡΣ∆ t qwu h ∀
3 q7 稳定性试验 取批号 |zttts样品溶液 o在 s o
s qx ot ou ow o{ «分别进样 ts Λ¯ o记录峰面积 o结果 y
次进样五味子甲素和五味子乙素峰面积 ΡΣ∆ 分别
为 t .ut%和 t .{|%( ν yl o说明样品溶液较稳定 ∀
3 q8 加样回收率 取已测定含量的样品约 s qx ªo
精密称定 o加入对照品混合溶液适量 o按 3 q2 项下样
品溶液的制备法制备并测定 o计算回收率 o结果见表
t o表 u ∀
4 样品测定
精密吸取样品溶液 ts Λ¯ o按上述色谱条件测
定 ow批样品中五味子甲素和五味子乙素的含量测
定结果见表 v ∀
5 讨论
本品为复方中药丸剂 o本研究对样品的提取条
τr°¬±
图 t 五味子甲素 !五味子乙素
混合对照品 °≤ 图谱
t1 五味子甲素 u1 五味子乙素k图 u同l
τr°¬±
图 u 样品 °≤ 图谱
τr°¬±
图 v 阴性对照品 °≤ 图谱
表 t 样品中五味子甲素回收率试验结果
称样量rª 相当五味子甲素量rΛª 加入五味子甲素量rΛª 测得量rΛª 回收率r h 平均回收率r h ΡΣ∆r h
s qxsuv vvt qy yxu qtt |{ qy
s qxsst vvs qu yxv qz{ || qy
s qw|x{ vuz qv vuw q| ywt qsv |y qx
|z qyw
t qwts qw||u vu| qx yws q|w |x q{
s qw|{z vu| qv ywz qvs |z q|
s qxsut vvt qx yw{ qst |z qw
表 u 样品中五味子乙素回收率试验结果
称样量rª 相当五味子乙素量rΛª 加入五味子乙素量rΛª 测得量rΛª 回收率r h 平均回收率r h ΡΣ∆r h
s qxsuv twt q| u{t q{y |x q{x
s qxsst twt qv u{u qxw |y qzw
s qw|x{ tws qt twy qs uz| qzs |x qyu
|y qtw
s q|ss qw||u twt qt u{v qsw |z qux
s qw|{z tws q| uz| qwu |w q{z
s qxsut twt q| u{u q{u |y qxw
表 v w批样品五味子甲素 !五味子乙素
含量测定结果 Λª#ªp t
批号 五味子甲素 五味子乙素
|zttsz |uv qx vyz qs
|zttts yys qu u{u qy
|ztttt yss qs uuy qw
|zttt{ zvu qy vtu qw
件进行了氯仿回流提取 w «!超声 vs °¬±等的考察 o
结果表明超声 vs °¬±提取的五味子甲素 !五味子乙
素含量仅约相当于氯仿回流提取量的 yy qz h ∀以甲
醇2水≈t 或乙腈2甲醇2水≈u 作为流动相 o五味子乙素
均达不到基线分离 o改用甲醇2四氢呋喃2水满足了实
验要求 ∀
≈参考文献
≈t ≠²±ª¬¬± «∏o¨§²±ª ≠¤±o¬¤±°¬± • ∏o ·¨¤¯ q¶¶¤¼ ²©¬ª±¤±¶²©
Σχηιζανδρα χηινενσισ ¬± ≥«¨ ±ª ¤¬ ≥¤± ¥¼ ¬ª«2³¨ µ©²µ°¤±¦¨
¬ª∏¬§≤«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ q ≤«µ²°¤·²ªµot|{{ owv{kul }wwz
≈u 张永煜 o郭允珍 o中岛薰 o等 1 不同产地五味子中木脂素类成分
的高效液相色谱法测定 1 药物分析杂志 ot||s otskvl }twy
≈责任编缉 李 禾
#{xt#
第 ux卷第 v期
usss年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qv¤µqousss