全 文 ：通道相是 }细胞内亲水蛋白质极性通道 !细胞间类脂
质非极性通道相 o如前所述 o扩散阻力 Ρι ηι/ ∆ι
Κι(ηι .膜厚度 ; ∆ι .渗透剂在膜各相扩散系数 ; Κι .
药物在各相和膜两侧的分配系数) ∀ ∆ι , Κι除与体
系的密度 !粘度有关外 ,主要与药物溶解度有关 ∀当
ηι不变 o增大 °∏¶¦²±¨ 在载体的 Κι可有选择性地
降低 Ρι而使 Π值增大 ∀因此药物在载体中溶解是
穿透皮肤的首要条件 ∀ °的亲水性使之渗入极性
通道形成积蓄 o溶解角质层 Α2蛋白并与之形成氢键
促进皮肤水合而降低通道阻力≈x oy ~∞· 是两亲性
溶剂 o既能溶胀亲水蛋白又能提取类脂质 o与 °结
合使用增大了药物在各相的 Κι , ∆ι值而使渗透速
率增加 ~具有类似角质层脂质的化学结构 o其双
键结构形成不对称空间有效地影响细胞间隙的脂质
结构 o增强类脂的流动性而促进了亲脂性药物透皮
转运≈x ∀三者的复合促进剂体系能影响皮肤多层的
亲水亲油层的通道 o因而对 °∏¶¦²±¨ 具有显著增渗
作用 ~°2∞· 体系中加入 x h ¤½²±¨ 或 s qx h ⁄
后均呈混浊状态 ouw «内的促渗效果降低 o透皮时滞
延长 ∀从两方面解释 }其一是本实验组尚未达到三
者适宜比例 o还需进一步研究 ∀其二 o从 ¤½²±¨ 结构
上看 o可视为极性基团氮酮和非极性基团长链烷烃
所形成的非离子表面活性剂≈z o所以 o与 ⁄ 相似 o
亲脂性药物被结合在0胶团0内 o极性药物吸附在胶
团表面 o造成透皮时滞延长及脂溶性药物促渗作用
较弱的原因≈z ∀
≈参考文献
≈t 朱耀伟 o程桂芳 o朱秀媛 q麝香酮在大鼠 !家兔和狗体内的药代
动力学 q药学学报 ot||v ~u{k vl }tzz q
≈u 徐叔云 q药理实验方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot|{u qttzu q
≈v ≠¬¨ • q≤«¬¨± q ⁄¨ √¨¯²³° ±¨·²© ×µ¤±¶§¨µ°¤¯ ⁄µ∏ª ⁄¨ ¬¯√ µ¨¼ ≥¼¶2
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≈x ƒ 基多尼厄斯 q药物给药新剂型 q郑俊民译 q北京 }科学技术
出版社 ot||s q| q
≈y 平其能 q现代药剂学 q北京 }中国医药科技出版社 ot||{ qxzs q
≈z 梁秉文 q经皮给药制剂 q北京 }中国中医药科技出版社 ot||u q
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≈责任编缉 李 禾
高效液相色谱法
测定乐得胶囊中总大黄素的含量
袁海龙t o肖小河t o刘峰群t o贺承山t o蔡光明t o张 纯u o柳正良u
kt q解放军第 vsu医院 药学部 o北京 tsssv| ~
u q第二军医大学 药学院 o上海 usswvvl
≈摘要 目的 }建立原料药制何首乌及乐得胶囊的质量标准中总大黄素含量测定方法 ∀方法 }高效液相色谱
法 o固定相 ∞≤ ≥°∞ ∞ ≤{kw qy °° ¬§≅ uxs °° ox Λ°l o流动相甲醇2水2磷酸kzssΒvssΒs qvl o检测波长 wvz
±° ∀结果 }本法准确可靠 o平均回收率 |y q|s h oΡΣ∆ t qux h o并应用本法测定了 ts批样品及 y个不同产地的制何
首乌原料 ∀结论 }建立的含量测定方法可用于原料药制何首乌及样品的质量控制 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~乐得胶囊 ~总大黄素
≈中图分类号 u{v qy ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusssls|2sxvv2sv
乐得胶囊系扬州曙光天然保健品厂研制中的中
药三类新药 o系由制何首乌 !黄精 !枸杞子 !五味子 !
≈收稿日期 t|||2s{2ux
淫羊藿 !紫河车 !当归 !丹参 !蒲公英 !蛇床子 !菟丝子
及肉苁蓉等 tu味中药制成 o用于治疗男性不育症 o
其君药为何首乌 ∀曾有文献报道 °≤ 法测定何
首乌中大黄素的含量≈t ou o但应用到乐得胶囊的含
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≥ ³¨qousss
量测定并不合适 ∀本文建立 °≤ 法测定乐得胶
囊中总大黄素的含量 o为该制剂的质量控制提供了
快速准确的测定方法 ∀
1 仪器及试药
≥°{{ss液相色谱仪 o ∂2usss检测器 o≥°wwss
积分仪k美国光谱物理公司l ~甲醇为色谱纯 o磷酸 !
氯仿 !硫酸等为分析纯 o大黄素对照品k中国药品生
物制品检定所提供 o经归一化法计算平均含量为
|| q{v h l ∀
2 方法与结果
211 色谱条件
固定相 ∞≤ ≥°∞ ∞ ≤{kw qy °° ¬§≅ uxs
°° ox Λ°l o流动相甲醇2水2磷酸kzssΒvssΒs1vl o流
速 t1u °¯ #°¬±p t o检测波长 wvz ±° ∀理论塔板数按
大黄素峰计算 o应不低于 usss ∀
212 对照品溶液及供试品溶液的制备
对照品溶液的制备 }精密称取大黄素对照品
ts°ªo置 xs °¯ 量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 ~
精密量取 u °¯ o置 xs °¯ 量瓶中 o加甲醇稀释至刻
度 o摇匀 o即得k每 t °¯ 中含大黄素 { Λªl ∀
供试品溶液的制备 }取本品内容物约 s1x ªo精
密称定 o置具塞锥形瓶中 o精密加入甲醇 xs °¯ o密
塞 o称定重量 o超声处理 vs °¬±o放冷 o称定重量 o用
甲醇补足减失的重量 o摇匀 o滤过 o弃去初滤液 o精密
量取续滤液 ts °¯ o置 tss °¯ 圆底烧瓶中 o挥去甲
醇 o加 u1x °²¯#pt硫酸溶液 us °¯ o连接冷凝管 o置
沸水浴中回流 t «o稍冷 o加氯仿 vs °¯ o继续回流 u
«o冷却 o转移至分液漏斗中 o分取氯仿层 o酸液继续
用氯仿振摇提取 u次 o每次 { °¯ o合并氯仿液 o蒸干 o
残渣加甲醇适量使溶解 o定量转移到 ts °¯ 量瓶内 o
并稀释至刻度 o摇匀 o即得 ∀
213 空白试验
按处方比例及生产制备方法 o制备不含制何首
乌的阴性样品 o再按供试品溶液制备方法制备阴性
溶液 ∀分别精密吸取供试品溶液 o阴性溶液与对照
品溶液各 ts Λ¯ o注入液相色谱仪 o结果空白无干扰 o
其色谱图见图 t ∀
214 线性关系考察
精密称取大黄素对照品 o用甲醇配制定容 o使成
每 t °¯ 含大黄素 {w Λª的甲醇溶液 ∀大黄素对照
品稀释成 s1{w ot1y{ oy1zu ots1s{ ous1ty ovs1uw Λª#
°¯ p t ots Λ¯ 进样 o按上述色谱条件测定峰面积 ~以峰
图 t 乐得胶囊样品 !对照品及阴性对照的
高效液相色谱图
1 样品
1 对照品 ≤1 阴性对照 t1 大黄素
面积积分值为纵坐标 o对照品进样量为横坐标绘制
标准曲线 o其回归方程为 } Ψ wvsyt{{1|| Ξ p
z|tz1w| , ρ s1|||| o线性范围为 s1ss{w ∗ s1vsuw
Λª∀
215 精密度试验
取样品测定项下对照品溶液 o重复进样 x次 o每
次 ts Λ¯ o对照品峰面积积分值的 ΡΣ∆ s1yx%( ν
xl ∀
216 稳定性试验
取对照品溶液在 s os1x ot ou ov «分别进样 ts
Λ¯ o记录峰面积 o结果 x次进样大黄素峰面积积分值
的 ΡΣ∆ s1yy h o可见对照品溶液在 v «内较稳定 ∀
217 重复性试验
取同批样品k批号为 |zsvttl o按含量测定项下
方法测定 x次 o结果其总大黄素的平均含量为 t1su
°ª#ªp t oΡΣ∆ t1xv( ν xl ∀
218 加样回收率试验
取已知含量的样品k批号为 |zsvttls1ux ªo分
别添加大黄素对照品溶液适量 o挥干 o按含量测定项
下方法测定 o结果见表 t ∀
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表 t 样品中大黄素加样回收率测定结果
样品量
r°ª
添加量
r°ª
测出量
r°ª
回收率
r°ª
平均回收率
r°ª
ΡΣ∆
r°ª
s quwuu s qs|uu s qvvsy |x q{{
s quxsu s qtuu| s qvy{u |y qst
s quxsw s qtxvy s qv|zv |x qyw |y q|s
t quxs quy{w s qt{wv s qwwzz |z qu|
s quzzs s qutxs s qw{{u |{ quv
s quwtx s quwx{ s qw{vu |{ qvv
注 }ν y
219 提取方法的研究
制备供试品溶液时 o提取条件的选定是参考
t||x年版5中国药典6一部虎杖含量测定项下的提
取方法 o我们曾考察了不同酸度ku1x ov1s °²¯#pt
及不同酸水解时间kt ot1x «l对含量测定结果的影
响 o结果 u1x °²¯#pt硫酸溶液水解 t1s «能够使结
合型大黄素完全水解 ∀
2110 含量测定
分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液 ts Λ¯ o
按上述色谱条件测定 o外标一点法计算含量 o结果见
表 u ∀采用了与成品制剂相同的测定方法对制何首
乌中的大黄素进行含量测定 o结果见表 v ∀
表 u ts批乐得胶囊中大黄素含量测定结果
批号 含量r°ª#ªp t ΡΣ∆r h
|zsvtt t qsust t qxv
|zsws{ s qwztu t q|{
|zswty s qxtyy u qv{
|zswuv s qw|{x u qtz
|zszs{ s qz{xs t qsy
|{ttsw s q{|vx t qzz
|{ttt| s qtxw| v q{u
|{tutu s qw|{y u qx{
|{tut| s qxs|{ t qzy
|{tuuz s qxvwu t q|v
注 }ν v
表 v 制何首乌药材中总大黄素含量测定结果
批号 来源 含量r°ª#ªp t ΡΣ∆r h
|zst 四川 t qx|w t qxw
|zsu 重庆 s qzwu t qz{
|zsv 贵州 t qtzv t q{x
|{st 成都 t qvzx t qz|
|{su 云南 s qtx| t q|u
|{sv 四川 s qy|{ t qyy
注 }ν v
3 讨论
311 何首乌含大黄素 !大黄酚 !大黄酸 !大黄素甲醚
等多种蒽醌类化合物等 o我们曾用薄层扫描法对原
药材制何首乌及成品制剂中游离蒽醌中大黄素进行
含量测定 o虽经反复试验 o均未获得理想结果 ∀之
后 o采用高效液相色谱法测定样品所含总大黄素的
含量方法 o取得满意效果 ∀该法灵敏 !可靠 o可作为
该样品的含量测定方法 ∀
312 流动相的 ³ 值对实验有较大的影响 o因为蒽
醌类化合物呈弱酸性 o在酸性条件下色谱行为得到
明显改善 o采用 s1t h磷酸代替水取得了较好的分
离效果 o与文献报道一致≈t ou ∀在选择检测波长时 o
通常蒽醌类的检测波长选用 uxw ±° o但用于成品检
测不够理想 o尚未达到基线分离 o而选用 wvz ±°
时 o蒽醌吸收良好 o可排除共存药材及杂质的干扰 o
分离度好 ∀
≈参考文献
≈t 大岛俊幸 o平山总良 o王 柯 o等 1 高效液相色谱法测定何首
乌和夜交藤中蒽醌类成分的含量 1 药物分析杂志 ot||y oty
kwl }ut| q
≈u 吴振洁 o王丹平 o顾以振 o等 1 反相高效液相色谱法测定首乌
喘息灵胶囊中大黄素的含量 1 中国药科大学学报 ot||z ou{
kul }tuv q
≈责任编缉 李 禾
k上接第 xuz页l
º¬·« Π. λοβατα ¯¨ ¤√ ¶¨¬± ∏¬·µ²qΡεσυλτσ: ¤¬µ¼µ²²·¶²©µ¤³¬§ªµ²º·«o«¬ª«¥µ¤±¦«¨¶¤±§³¯¤ª¬²·µ²³¬¶° §¨ √¨¯²³¨ §
√¬ª²µ²∏¶¯¼ ²±·«¨ ¶∏µ©¤¦¨ ²©¯¨ ¤√ ¶¨o ¬¨«¬¥¬·¬±ªµ¤³¬§ªµ²º·«¤±§µ¨¶¬¶·¤±¦¨ ·²®¤±¤°¼¦¬±¬± «²µ2°²±¨ 2©µ¨¨ ° §¨¬2
∏°¬± √¬·µ²qΧονχλυσιον : ° ·¨«²§²©«¤¬µ¼ µ²²·¬±§∏¦·¬²± º¬·« Α . ρηιζογενεσ ¤¶º¨¯¯¤¶¤¶¼¶·¨° «¤¬µ¼ µ²²·
¬¯´∏¬§¦∏¯·¬√¤·¬²±¬± ∏¬·µ²©²µΠ.λοβατα «¤√¨¥¨ ±¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §q
[ Κεψ ωορδσ] Πυεραρια λοβατα ~«¤¬µ¼ µ²²·~¦∏¯·¬√¤·¬²±¬± √¬·µ²
≈责任编辑 王康正
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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