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Studies on Anamorph of Cordyceps sinensis(Berk) from Naqu Tibet

西藏那曲冬虫夏草无形型的研究



全 文 :西藏那曲冬虫夏草无形型的研究
陈仕江t o尹定华t o李 黎t o周秀琳u o扎 西u
kt q重庆市中药研究院 o重庆 wsssyx ~u q西藏那曲地区科学技术委员会 o西藏 那曲 {xusssl
≈摘要  目的 }分离鉴定西藏那曲冬虫夏草无性型真菌 ∀方法 }采用子囊孢子 !织 !僵虫 !体液分离的方法从巴
青 !索县 !比如 v县分离冬虫夏草无性型菌株 ∀结果 }采用 w种方法获得了性状特证与中国被毛孢相同的无性型菌
株 ∀结论 }中国被毛孢是西藏那曲冬虫夏草的无性型 ∀
≈关键词  冬虫夏草 ~无性型 ~西藏那曲
≈中图分类号  • u{u qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsz2swxv2su
冬虫夏草系我国特产名贵中药 o仅产于西藏 !四
川 !云南 !青海等省区 o是中华虫草菌 Χορδψχεπσ
σινενσισk…¨ µ®l≥¤¦¦q寄生于蝠蛾属 Ηειαλυσ昆虫体内
形成的菌虫复合体 o具有/秘精益气 o保肺益肾 o止血
化痰 o治诸虚百损0等功效 ∀
中华虫草菌 Χ. σινενσισ是一种复型真菌 ∀近
us年来 o有关其无性型的研究 !争论一直是国内中
药界 !真菌界的一个热点 ∀自沈南英等率先从青海
虫草子实体上分离出一种丝孢菌 o并在固体培养基
上多次形成子座 o其形态与自然状态下长出的子座
近似 o该菌被认为是一种头孢霉 Χεπηαλοσποριυ µ σπ .
以来 o陈庆涛 !李兆兰 !戴如琴 !刘锡 !印象初 !梁宗
琦等分别从四川 !云南 !青海不同产地的冬虫夏草中
采用不同手段和方法分离得到了中华拟青霉 Παε2
χιλοµ ψχεσ σινενσισ ≤«¨ ± o÷¬¤² ·¨≥«¬!蝙蝠蛾柱孢霉
Σχψταλιδιυ µ Ηεπιλ鏬 ·¨≥«¨ ±≈t  !中国弯颈孢霉
Λψποχλαδιυ µ σινενσισ ¬ ·¨≥«¨ ±等 ts属 ty种与冬
虫夏草无性型有关的真菌 ∀这种现象在其它真菌中
并不多见 o以致于造成目前有些学者认为冬虫夏草
只有一种无性型 o另一些学者认为冬虫夏草有可能
是由两种或两种以上的无性型菌种在同一寄主上共
生而成 ∀我们在从事国家/九五0攻关项目和自然科
学基金项目kv|{zs|xxl过程中对西藏冬虫夏草主产
地那曲地区k包括比如县 !巴青县 !索县l的虫草进行
了不同部位 !方法的分离 !鉴定 o现报告如下 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
≈收稿日期  usss2ts2uw
≈基金项目  国家自然科学基金资助课题kv{|zs|xxl
1 q1 q1 冬虫夏草 Χ. σινενσισ 采自比如县恰则乡
曲仲山 !吾龙山 o索县亚安乡瓦尔卡山 !亚拉镇的强
龙寨 o巴青县翁冲山 !盘龙山 o寄主昆虫为比如蝠蛾
Η . βιρυενσισ等 ∀
1 q1 q2 培养基 °⁄„培养基 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 子实体 !僵虫 !子囊孢子分离 子实体 !僵
虫 !子囊孢子分离参照刘锡 等的方法进行≈u  ∀
选择新鲜完整的冬虫夏草 o从土壤中采挖到的
感菌僵虫 o经酒精表面灭菌后 o用无菌刀片取子实体
可孕部 !僵虫体作为接种体 o接种于 °⁄°培养基上 o
置 us ε 温箱中培育 ∀取野外自然生态条件下含子
囊孢子的子实体进行灭菌 o在无菌条件下将整个子
座的两端使悬于培养皿上 o或将子座用细线栓其柄
部悬吊于 °⁄„斜面试管内 o待子囊孢子萌发后挑取
移殖于斜面试管中 o置 us ε 温箱中让其生长 ∀
1 q2 q2 带菌活幼虫分离 镜检野外采挖到的蝠蛾
幼虫体液 o感虫草菌的幼虫经体表灭菌 o无菌剪剪去
幼虫腹足 o将体液挤出盛于 °⁄„ 的培养皿中 o置 us
ε 温箱内培养 ∀
2 结果
特征和鉴定k表 tl o由表 t可见 o从冬虫夏草实
体 !僵虫 !带菌活幼虫 !子囊孢子 w种途径分离 o均获
得了形态特征完全一致的菌株 ∀经过对该菌的培养
观察 o发现其生长十分缓慢 o在 tx ∗ us ε 条件下培
养 o{ §左右才从接种体表面长出菌苔 otx §左右接
种体才稍有膨大 o其上有稀浅的菌丝体 ozs §后才形
成直径 z ∗ { °°的褐色菌落 o并伴有褐色色素渗入
培养基中 otss§后菌落直径仅t ∗ t qx¦° o在菌落
#vxw#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qz
∏¯ qousst
表 t 西藏那曲冬虫夏草无性阶段分离来源
采集地点 菌株代号 分离部位 分离方法 分离结果
巴青翁冲山 ⁄2t 虫草虫体 组织 获得菌种
比如曲仲山 ⁄2u 虫草子实体 组织 获得菌种
索县强龙寨 ⁄2v 虫草可孕部 子囊孢子 获得菌种
巴青盘龙山 ⁄2w 僵虫 组织 获得菌种
巴青盘龙山 ⁄2x 僵虫 组织 获得菌种
比如吾龙山 ⁄2y 虫草子实体 组织 获得菌种
索县瓦卡山 ⁄2z 虫草可孕部 子囊孢子 获得菌种
索县强龙塞 ⁄2{ 虫草可孕部 子囊孢子 获得菌种
边青翁冲山 ⁄2| 幼虫体液 体液 获得菌种
比如吾龙山 ⁄2| 幼虫体液 体液 获得菌种
中心产生极为稀疏的灰白色菌丝丛及很少的分生孢
子 ∀菌丝无色 o有隔膜 !分枝 !平滑或具疣 o宽 u ∗ x
Λ° o分生孢子梗单生在菌丝上或簇生在由无色细胞
组成的小子座上 o无色 o不分枝或分枝 o分枝呈轮状 o
直立或剧烈弯曲 owx ∗ tss Λ° ow qx ∗ { qx Λ° ∀产孢
细胞瓶形 o基部膨大 o颈部尖细 o无色 o平滑或具疣 o
tx ∗ wx Λ° ov ∗ x Λ° ∀分生孢子肾形至长椭圆形 o
单胞 o无色 o平滑 ox ∗ tw Λ° ov ∗ x Λ° ou ∗ wkyl个被
一粘膜包围 o粘被膜柠檬形 oy ∗ t| qx Λ° ow ∗ x Λ° o
与刘锡 <报道的中国被毛孢 Ηιρσυτελλα Σινενσισ
¬∏oŠ∏²o≠∏ ·¨ ±¨ª新种形态特征相同 ∀
3 讨论
3 q1 迄今为止 o全国除西藏外的 v个主要虫草产区
k四川 !云南 !青海l的冬虫夏草无性型均有分离鉴定
结果报告 o我们对藏虫草主要产地那曲冬虫夏草k东
三县l无性型是中国被毛孢 Η .σινενσισ∀
3 q2 尽管目前国内已发表了 ts属 ty种与冬虫夏
草无性型有关的真菌 o但愈来愈多的研究表明中国
被尖孢 Η .σινενσισ是冬虫夏草的正确无性型 o沈南
英等未合格发表的中国头孢霉和晚发表的中华束丝
孢 Σψννε µ ατιαµ σινενσισ均为其异名 ∀
确定虫草无性型的最可靠方法是在实验条件
下 o将用各种途径分离获得的假定无型人工感染寄
主昆虫 o诱发形成具有成熟子囊壳的虫草子实体 ∀
重庆市中药研究院利用从冬虫夏草中分离的中国被
毛孢 Η . σινενσισ接种蝠蛾幼虫获得成功 o并将感菌
幼虫在人工饲养条件下培殖出与天然冬虫夏草在生
药 !化学成分等方面一致的冬虫夏草k详细另文发
表l o这就基本从本质上揭示了中国被毛孢是冬虫夏
草真正无性型 ∀
≈致谢  中华虫草菌无性型由中国科学院微生物研究
所郭英兰研究员鉴定 ∀
≈参考文献 
≈t  方焕谋 q虫草菌无性型确证方法的思考 q中国虫草真菌研究与
应用 ot||s okul }yz q
≈u  刘锡 o郭英兰 o喻永信 o等 q冬虫夏草无性阶段的分离和鉴定 q
真菌学报 ot|{| o{ktl }vx q
≈v  李增智 o黄 勃 o李春如 o等 q确证冬虫夏草无性型的分子生物
学证据k中国被毛孢与冬虫夏草之间的关系l q菌物系统 ousss o
t|ktl }ys q
≈w  梁宗琦 q虫草及其人工培养 q贵州农学院丛刊 ot||w ouyk增刊l }
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Στυδιεσ ον Αναµ ορπη οφ Χορδψχεπσσινενσισ(Βερκ) φροµ Ναθυ Τιβετ
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[ Κεψ ωορδσ] Χορδψχεπσσινενσισ~¤±¤°²µ³«~‘¤´ ∏ ׬¥¨·
≈责任编辑 王康正 
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第 uy卷第 z期
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中 国 中 药 杂 志
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