全 文 ：参考文献 :
[ 1 ] 　乐长高 , 林永成 , 姜广策 , 等1 J ulella avicenniae 两个代谢产
物结构的测定 [J ]1 华东地质学院学报 , 1998 , 21 (12) : 3402
3951
[ 2 ] 　Levy J V1 Method in Pharmacology [ M ]1 New York : Ap2
pleton2Century2Croft s Educational Divition , 19711
[ 3 ] 　Shaffer J E1 Inot ropic and chronot ropic activity of berberine
on isolated guinea pig at ria [J ]1 J Cardiovasc Pharmcol , 1985 , 7 : 3071[ 4 ] 　Katz A M1 Physiology of t he Heart [ M]1 New York : Ra2ven Press , 19771[ 5 ] 　Fleckenstein A1 Ex perimental Facts and Therapeutic Pros2pects [ M]1 New York : Wiley2Interscience , 19831[ 6 ] 　Pu H L , Wang Z L , Huang Q J , et al . Effect s of biat rac2tylolide on isolated guinea pig myocardium [J ]1 Chin Phar2macol B ull , 2000 , 16 (1) : 602631
加味丹参饮对家兔应激性胃溃疡的影响
刘纳文 ,李志军 3
(天津市第一中心医院 ,天津 　300192)
摘　要 :目的 　研究加味丹参饮对家兔应激性胃溃疡的影响并探讨其作用机制。方法 　选用健康大耳白兔 24 只 ,
随机分为对照组、模型组及给药组 ,每组 8 只。以浸水法复制家兔应激性胃溃疡动物模型 ,分别于应激后 0、1、2、3
h 取血 ,检测血浆中内皮素 ( ET) 、一氧化氮合酶 (NOS) 活性 ,并对胃黏膜病变的情况进行观察。结果 　浸水应激
后家兔血浆 ET 及 NOS 活性均明显升高 ,加味丹参饮可抑制应激导致的 ET 水平及 NOS 活性的升高 ,并可抑制
浸水应激家兔胃液的过量分泌而对胃液的 p H 值无显著影响 ;加味丹参饮能抑制应激所致的胃溃疡的形成 ,其溃
疡抑制率达 49194 %。结论 　加味丹参饮有抗家兔浸水应激性胃溃疡的作用 ,其机制与抑制胃液的过量分泌及抑
制 ET 及 NOS 的异常升高有关 ,而对胃液的 p H 值无影响。
关键词 :加味丹参饮 ; 应激 ; 胃溃疡 ; 内皮素 ; 一氧化氮合酶
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721112204
　　随着社会的发展及各方面竞争压力的增加 ,环
境因素和心理因素作为两大常见应激因素对人体健
康的影响越来越强烈。应激可以引起胃溃疡或出血
性黏膜糜烂 ,被称为应激性溃疡 ,亦称“急性黏膜病
变”,是人和各种动物受创伤后所发生的最具特征的
应激表现。应激性胃溃疡也是临床上的常见病症 ,
多伴见于严重烧伤、重度感染、缺氧、大手术等 ,其临
床表现为大便潜血阳性、甚者呕血、便血 , 更为
严重者可导致胃穿孔 ,以致威胁患者生命 ,死亡率
很高。
丹参饮方出自《时方歌括》,由丹参、檀香、砂仁
3 味药组成 ,具有行气化瘀、止痛的功效 ,在临床上
被广泛用于心腹诸痛的治疗。应激性胃溃疡的中医
病理机制为气血郁滞 ,因此以丹参饮为基础 ,加以具
中和胃酸、保护溃疡面作用的乌贝散 (乌贼骨、浙贝
母)及具活血定痛作用的三七粉 ,而合为加味丹参
饮 ,观察其对家兔应激性胃溃疡的影响并探讨其作
用机制 ,以期为寻找临床治疗应激性胃溃疡的有效
方药提供参考。
1 　材料
111 　实验动物 :健康大耳白兔 24 只 ,均为雄性 ,体
质量 211～215 g ,4～5 月龄 ,单笼饲养 ,由天津中医
药大学动物室提供。
112 　实验用药 :加味丹参饮由丹参 30 g、檀香 5 g、
砂仁 5 g、乌贼骨 30 g、浙贝母 12 g、三七粉 3 g ,常
规水煎后 ,浓缩为 115 g/ mL 的药液 (含生药量为
85105 g/ L) ,以上所用生药由天津市第一中心医院
中药房提供。
113 　仪器与试剂 :高精度数字显示酸度计、721 分
光光度计、γ 计数仪、离心机。一氧化氮合酶
(NOS) 试剂盒 ,南京建成生物工程研究所产品 ;内
皮素 ( ET) 放射免疫分析药盒 ,北京北免东雅生物
技术研究所产品 ,以上药盒均购自天津市联星生物
技术有限公司。
2 　方法
211 　动物分组及应激前处理 :将 24 只家兔随机分
为 3 组 ,即对照组、模型组及给药组 ,每组各 8 只。
给药组于每日 ig 给药 2 次 ,每次 25 mL (根据丹参
·2111· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008212203　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :刘纳文 (1970 —) ,天津市人 ,副主任医师 ,硕士 ,博士在读。Tel : (020) 89938584 　E2mail : nn1747 @sina. com. cn3 通讯作者　李志军　Tel : (022) 23626600
饮临床常用剂量换算所得) ,对照及模型组于相同时
间 ig 相同剂量的生理盐水 ,连续 5 d ,其间常规饲料
喂养 ,自由饮水 ,活动不受限。
212 　模型制备 :造模前 1 d 开始禁食 ,不禁水。于
末次给药后禁水 ,并于末次给药后 1 h 开始造模。
用 3 % 戊巴比妥钠 (30 mg/ kg) 耳缘静脉 iv 麻醉 ,
将家兔绑缚于应激架上 ,取右侧颈外静脉行静脉插
管 ,插管成功后以 011 % 肝素钠 1 mL 封管 ,以备采
血。待家兔清醒后 ,将其置于应激池内 (水温 20～
25 ℃) ,水面与剑突平齐 (对照组同样绑缚、插管 ,
但不浸水应激) 。
213 　指标检测
21311 　血浆中 ET 水平测定 :分别于应激后 0、1、
2、3 h 各取血 4 mL ,且每次取血后立即静脉推注等
量的生理盐水 ,然后肝素钠封管。将血标本 2 mL
置于预冷的含 715 % ED TA 二钠 30μL 和抑肽酶
20μL 的试管中 ,混均 ,4 ℃,3 000 r/ min 离心 10
min ,吸取上清液移入另一试管中 ,置 - 20 ℃冰箱
中冻存待测。按 ET 放免试剂盒说明书操作 ,用γ
计数仪测定沉淀中125 I 的放射性活度 ,再根据标准
曲线测出样品中 ET 水平。
21312 　血浆中 NOS 活性检测 :采血方法同上。血
标本 2 mL 置于普通试管中 ,4 ℃,3 000 r/ min 离心
10 min ,吸取上清液移入另一试管中 ,置 - 20 ℃冰
箱中冻存待测。分光光度法测定血浆 NOS 活性 ,
按 NOS 试剂盒说明书操作 ,721 分光光度计在 530
nm 波长处 ,蒸馏水调零后 ,测各管的吸光度值 ,然
后按公式计算出各管的 NOS 活性。
21313 　胃黏膜病变的观察指标 :应激 3 h 后将家兔
从应激池中取出 ,3 % 戊巴比妥钠 (30 mg/ kg) 耳缘
静脉 iv 麻醉后 ,沿腹白线切开腹壁 ,游离胃体 ,结扎
幽门口 ,以止血钳扎住贲门口 ,然后将整个胃取下 ,
在蒸馏水中漂洗干净后用定性滤纸吸干 ,沿胃大弯
切开引出胃液 ,用定性滤纸滤过后收集入试管中 ,测
定胃液的量 ,然后离心 10 min (3 000 r/ min) ,取上
清液 5 mL ,用高精度数字显示酸度计检测胃液标本
的 p H 值。
用生理盐水将胃内容物冲洗干净 ,将胃置于
10 % 甲醛液中固定 10 min ,取出 ,用棉签拭去胃壁
血丝 ,然后将整个胃展开 ,平铺于玻璃片上 ,直视下
观察胃黏膜皱襞的改变、胃壁的厚薄、胃黏膜表面的
溃疡、糜烂、出血点等 ,并注意其发生的部位、大小及
形状。胃黏膜损伤程度采用溃疡指数 (损伤分数)
表示 ,判定参考 Gut h 的方法[ 1 ] ,即以黏膜损伤长度
(mm) 计算 : < 1 mm 为 1 分 ; ≥1 mm 且 < 2 mm 为
2 分 ; ≥2 mm 且 < 3 mm 为 3 分 ,以此类推 ;损伤宽
度超过 2 mm ,分数加倍。
在胃黏膜损伤明显处切取 015 cm ×1. 0 cm 组
织块 ,置于 10 % 甲醛液中固定 24 h ,石蜡包埋 ,行 4
μm 切片 ,苏木精2伊红 ( H E) 染色 ,观察黏膜组织
学改变。
214 　统计学方法 :应用 SPSS 1010 统计软件分
析 , 数 据以 x ±s 表示 ,组间显著性检验采用 t
检验。
3 　结果
311 　加味丹参饮对应激家兔血浆 ET 水平和 NOS
活性的影响 :应激 1 h 后给药组及模型组的家兔血
浆 ET 的量即明显升高 ,与对照组比较均有显著性
差异 ,而给药组的 ET 水平明显低于模型组 ,差异显
著 ,结果见表 1。应激处理后家兔血浆 NOS 活性显
著升高 ,而给药组的 NOS 活性升高幅度明显低于
模型组 ,组间比较差异有显著性。
表 1 　加味丹参饮对应激家兔血浆 ET 水平和 NOS 活性的影响 ( x ±s , n = 8)
Table 1 　Effect of Jia wei Danshen Yin on ET level and NOS activity in plasma of stress rabbits ( x ±s , n = 8)
组别
ET/ (pg ·mL - 1)
0 h 1 h 2 h 3 h
NOS/ (U ·mL - 1)
0 h 1 h 2 h 3 h
对照 4318 ±31 7 421 9 ±318 4314 ±315 451 1 ±21 9 131 38 ±5137 12169 ±6168 121 44 ±71 56 141 01 ±5119
模型 4316 ±31 4 1371 8 ±815 3 10710 ±912 3 1231 4 ±71 6 3 121 61 ±3194 39108 ±7145 3 571 04 ±61 92 3 831 24 ±7164 3
给药 4317 ±31 2 771 3 ±515 3 △ 7816 ±610 3 △ 911 9 ±51 3 3 △ 131 67 ±5112 28193 ±4159 3 △461 35 ±51 81 3 △601 07 ±4147 3 △
　　与对照组比较 : 3 P < 0105 ; 　与模型组比较 : △P < 01 05
　　3 P < 01 05 vs cont rol group ; 　△P < 01 05 vs model group
312 　加味丹参饮对应激家兔胃液分泌和胃液 p H 值
的影响 :与对照组相比 ,应激后模型组的胃液分泌量
显著增高 ,给药组的胃液分泌量增加不明显。模型组
及给药组胃液 p H 值无显著变化。结果见表 2。
313 　加味丹参饮对应激家兔胃溃疡的影响 :家兔浸 水应激 3 h 后均有溃疡形成 ,模型组溃疡指数为(40165 ±3162) 分 ,而加味丹参饮能明显抑制家兔应激性胃溃疡的形成 ,其溃疡指数为 ( 20139 ±2163) 分 ,溃疡抑制率高达 49194 % ( P < 0105) 。314 　胃黏膜病理形态学观察
·3111·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
31411 　大体标本观察 :模型组中 5 例可见胃黏膜表
面有散在的出血点 ,部分呈暗红色、瘀血状 ; 3 例可
见整个胃黏膜颜色较苍白 ,黏膜表面呈弥慢性水肿 ,
表 2 　加味丹参饮对应激家兔胃液分泌量和胃液 pH值的
影响 ( x ±s , n = 8)
Table 2 　Effect of Jia wei Danshen Yin on secretion and pH
value of gastric juice of stress rabbits ( x ±s , n = 8)
组　别 胃液分泌量/ mL p H 值
对照 1215 ±01 7 11 45 ±0113
模型 2013 ±01 4 3 11 37 ±0117
给药 1514 ±01 5 11 41 ±0118
　　与对照组比较 : 3 P < 0105
　　3 P < 01 05 vs cont rol group 胃窦部黏膜皱襞变浅、紊乱 ,可见到糜烂和点状溃疡形成 ,上述病变以胃体及幽门部分布最多。给药组6 例胃黏膜表面皱襞完整、光滑 ,呈粉红色、有光泽 ,走向及排列规整 ,并有较多黏液覆盖 ,胃肌张力较强 ;2 例胃黏膜呈淡红色 ,黏膜皱襞较浅 ,可见少量点状出血点 ,胃窦部分呈暗红色。31412 　光镜下观察 :模型组标本部分可见胃黏膜表面上皮变性、坏死和剥脱 ,黏膜充血水肿 ,多数可见黏膜间灶性或点状出血 (图 1) ;给药组标本见黏膜水肿充血 ,仅见极少部分上皮细胞剥脱 ,未见黏膜出血 (图 1) ;对照组胃黏膜上皮细胞、腺体排列规整 ,大小形态一致 ,无病理变化 (图 1) 。
图 1 　加味丹参饮对应激家兔胃黏膜病理形态的影响
Fig. 1 　Effect of Jia wei Danshen Yin on pathological morphology of gastric mucosa of stress rabbits
4 　讨论
　　应激是机体处于不利的内外环境下 ,为保持自
身“稳态”而作出的一系列反应。由于在危急情况
下 ,机体要保证脑、心、肾等重要脏器的供血 ,所以 ,
胃肠道就成为应激状态下首先被累及的器官 ,因而 ,
应激性胃溃疡则是各种危重疾病最常见的临床并发
症之一。应激性胃溃疡的主要临床表现为胃脘疼
痛、黑便 ,甚或呕血。应激性胃溃疡的产生是因为各
种内外因素的强烈刺激 ,首先引起胃部气机的逆乱 ,
进而影响血液的正常运行 ,最终导致络损血溢 ,离经
之血留存体内 ,一方面导致气机的郁滞 ,另一方面则
成为再次出血的原因所在 ,所以 ,气滞与血瘀并存是
应激性胃溃疡的病机关键。以理气化瘀立法的中药
复方对实验性胃溃疡大鼠具有明显保护作用[2 ] 。因
此 ,本研究从行气活血、祛瘀止痛的角度出发 ,以化
瘀行气的代表方剂丹参饮为主方 ,辅以三七粉及具
有吸附胃蛋白酶、中和胃酸、保护溃疡面作用的乌贝
散 ,组成加味丹参饮对应激性胃溃疡进行干预。方
中丹参味苦性寒 ,直走血分 ,活血行瘀 ,通脉络而不
伤血 ;檀香辛温 ,调气和胃通络 ;砂仁味辛性温 ,行气
和胃畅中 ;三七粉素有“止血神药”之说 ,现代药理研
究证明其具有促进凝血过程 ,缩短出凝血时间 ,抑制
溃疡出血 ,促进溃疡愈合作用[3 ] 。可见 ,加味丹参饮
是从改善气血运行以治本 ,抑酸止血以治标两个方
面考虑来组方。
现代医学研究认为应激性胃溃疡形成的主要原
因有胃酸分泌的增加和胃黏膜屏障的破坏[ 4 ] 。ET
和 NO 是近年发现的一对相互拮抗的血管活性物
质 ,众多研究发现它们通过对胃黏膜微循环血流量
( GMBF)的调节作用 ,在胃黏膜保护和损伤中起决
定性作用[5 ] 。在生理情况下内皮细胞释放的 NO
可抵销 ET 的缩血管作用 , ET 升高可使 NO 合成
增多 ,后者增多又可抑制 ET 的合成 ,两者相互制
约 ,维持着动态平衡 ,以保护包括胃肠道在内的各脏
器功能的正常功能 ,而在应激状态下 ,这种制约关系
被打破 ,两者的无节制增高 ,从而导致应激性胃溃疡
的发生。因此 ,本研究选择胃液分泌、血浆 NOS 活
性及 ET 水平变化与胃黏膜损伤指数、胃黏膜病理
改变作为观察指标 ,探讨加味丹参饮对应激性胃溃
疡的保护作用 ,从而为临床治疗应激性胃溃疡提供
依据。本研究结果表明 :在应激情况下 , ET 持续增
高 ,其增高的水平与胃黏膜损伤程度呈正相关 ,因
此 ,推测 ET 的增高导致胃黏膜血流量急剧下降 ,血
管及平滑肌收缩 ,诱发或加重了胃黏膜的损伤。由
·4111· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
于给药组的 ET 增高幅度明显低于模型组 ,其胃溃
疡的发生率和严重程度也明显低于模型组 ,所以 ,推
测加味丹参饮通过降低血浆 ET 水平 ,改善胃黏膜
血流量 ,缓解平滑肌痉挛性收缩而起到保护胃黏膜
的作用。通过检测血中 NOS 活性可以间接反应
NO 水平 ,本实验结果表明模型组 NOS 活性明显升
高 ,且其升高水平亦与胃黏膜损伤程度呈正相关 ,而
给药组的 NOS 活性明显低于模型组。提示加味丹
参饮通过降低血浆 ET 水平 ,进而降低了 iNOS 表
达 ,而表现为总的 NOS 水平的下降。
胃酸是应激性胃溃疡形成中另一不容忽视的因
素 ,胃酸即盐酸 ,它是局部最强的攻击因子 ,其强酸
性对胃黏膜具有很强的腐蚀性[6 ] ,本研究结果还显
示应激对胃液 p H 值无影响 ,但可使胃液分泌量显
著增加 ,服用加味丹参饮的家兔胃液 p H 值亦变化
不大 ,而胃液分泌量显著增加 ,服用加味丹参饮的家
兔胃液 p H 值亦变化不大 ,而胃液分泌量则增加不明
显 ,由此推测 ,抑制胃液的过量分泌也是加味丹参饮
发挥抗应激性胃溃疡的机制之一。
总之 ,加味丹参饮通过减少胃液分泌 ,降低应激
家兔血浆 ET 和 NOS 水平 ,从而改善胃黏膜血流量、
保护胃黏膜 ,对应激性胃溃疡有显著的抑制作用。
参考文献 :
[ 1 ] 　Gut h P H1 Topical aspirin plus HCl gast ric lesion in t he rat
cyto2protective effect of prostaglandin cimctidine and proban2
Thine [J ]1 Gast roenterlogy , 1987 , 57 (6) : 852871
[ 2 ] 　陈　虹 , 孙　红 , 王维亚1 五磨饮子对大鼠胃溃疡的治疗作
用 [J ]1 中草药 , 2008 , 39 (3) : 41524161
[ 3 ] 　王本祥1 现代中药药理学 [ M ]1 天津 :天津科学技术出版社 ,
19971
[ 4 ] 　胡伏莲1 消化性溃疡发病机制的现代理念 [J ]1 中华消化杂
志 , 2005 , 25 (3) : 18921901
[ 5 ] 　张国锋 , 陈易人 , 张明璈 , 等1 一氧化氮、内皮素与胃粘膜损
伤 [J ]1 胃肠病学和肝病学杂志 , 1999 , 8 (4) : 29322961
[ 6 ] 　曹　霞 , 余良主 , 赵小玉1 复方丹参注射液对大鼠运动应激
性溃疡的影响 [J ]1 咸宁学院学报 (医学版) , 2003 , 17 (5) :
31823211
乌苏瑞宁对家兔血液流变学和血凝时间及小鼠出血和凝血时间的影响
邓伟峰1 ,2 ,赵伟杰3 ,吕 　莉2 ,王世盛3 ,潘 　平2 ,韩国柱2 3
(11 怀化医学高等专科学校 ,湖南 怀化 　418000 ; 21 大连医科大学 临床药理教研室 ,辽宁 大连 　116044 ;
31 大连理工大学 ,辽宁 大连 　116024)
摘　要 :目的 　研究乌苏瑞宁 (verussurinine , VSRN) 对家兔血液流变学和血凝时间参数及小鼠出血、凝血时间的
影响 ,以查明乌苏瑞宁是否为乌苏里藜芦总碱的抗栓活性成分。方法 　应用血液流变仪测定低切和高切全血比黏
度、血浆比黏度 ;应用血凝仪测定凝血酶时间 ( T T) 和复钙时间 ( RT) ;应用鼠尾横切法和毛细玻璃管法分别测定
出血、凝血时间。结果 　家兔和小鼠 iv 4 种不同剂量的乌苏瑞宁导致家兔全血比黏度及血浆比黏度呈剂量依赖性
降低 ; TT 和 RT 显著延长 ;小鼠出血、凝血时间明显延长。结论 　乌苏瑞宁能够显著降低家兔血液黏度 ,延长家兔
TT 和 RT 以及小鼠出血、凝血时间。
关键词 :乌苏瑞宁 ; 血液流变学 ; 血凝时间 ; 出血时间 ; 凝血时间
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721115203
　　乌苏里藜芦 V erat rum ni g rum L . var . ussu2
riense Nakai 系百合科藜芦属植物 ,为中药藜芦的一
种 ,主要分布于我国东北地区。以往国内外对藜芦
的研究均集中于其降压作用方面[1 ,2 ] 。本研究组近
年发现乌苏里藜芦总生物碱 (V erat urm ni g rum L .
var . ussuriense Nakai alkaloids , VnA) 具有强大的
抗血栓作用[3 ] ,并应用生物效应法 ,研究了 VnA 在
小鼠和大鼠体内的药动学特点 ,表明 VnA 毒效成
分在小鼠体内消除极快 ( t1/ 2 ED为 2117 min) ,无明显
蓄积毒性 ,其抗栓效应成分自大鼠体内消除颇快
( t1/ 2 ED为 160 min) ,但较毒效半衰期长[3 ,4 ] 。为查明
VnA 的确切抗血栓活性成分 ,本研究组采用现代植
化和分析技术 ,从 VnA 中分离出数种酯型异甾体
类生物碱[5 ,6 ] ,并对其抗栓药理活性及其机制分别
进行研究。笔者曾对其中一种单体生物碱乌苏瑞宁
(verussurinine , VSRN) 的抗血栓作用、抗血小板
·5111·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008212202　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (NSFC20372014)
作者简介 :邓伟峰 (1962 —) ,男 ,湖南省怀化人 ,副教授 ,硕士 ,主要从事生药和民族药学研究。
Tel : 13874439688 　E2mail : shenyaojys @126. com3 通讯作者　韩国柱　Tel : (0411) 86110415 　E2mail : hgzhx2236 @sina. com. cn