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芝麻素对肝癌H22细胞增殖及H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响



全 文 :·1222· 中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8,El
caspase一3和caspase一9活性均逐渐提高,但
caspase一8活性并不随时间的延长而提高。该结果说
明,冬凌草甲素可能是经fas/fasL一线粒体途径诱发
MB49细胞凋亡的。
上述实验结果表明,冬凌草甲素有明显的抑制
膀胱癌MB49细胞株生长作用,主要作用机制为促
进MB49细胞凋亡,可能是经fas/fasL一线粒体途径
诱发MB49细胞凋亡的。本研究为冬凌草甲素I临床
预防和治疗膀胱肿瘤提供了实验依据。
参考文献:
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芝麻素对肝癌H22细胞增殖及H2:荷瘤小鼠肿瘤生长的影响
魏艳静1,卞红磊2,余文静1,王建华1
(1.河北医科大学,河北石家庄050017;2.河北医科大学第三医院,河北石家庄050051)
摘 要:目的 观察芝麻提取物芝麻素对小鼠肝癌H。z细胞增殖的影响及其对H。。荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。
方法用MTT法检测不同质量浓度的芝麻素对小鼠肝癌H。:细胞体外增殖的影响;同时将移植H::瘤株的昆明种
小鼠分成:模型组(生理盐水)、环磷酰胺(30mg/kg)组、芝麻素高、低剂量(150、15mg/kg)组、观察芝麻素对荷
瘤小鼠的抑瘤作用。结果芝麻素在体外对H2z肝癌细胞的增殖有显著的抑制作用,以8、16、32pg/mL组在48h
的抑制率最显著;芝麻素在体内对H::肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用,芝麻素低剂量组的小鼠皮下瘤质量较模
型组低(尸0.05)。结论
芝麻素有明显抑制肝癌H:。细胞增殖的作用。
关键词:芝麻素IH。:肝癌细胞}细胞增殖
中图分类号:R286.91 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)07—1222—03
芝麻素是从芝麻SesamumindicumLinn.中提
取的一种木脂素类化合物,是芝麻中的主要活性成
分,具有抗高血压、保护肝脏、抗氧化、降低胆固醇等
功效[1]。日本东京大学医学院研究证实芝麻素能抑
制DEN诱导的前期肝癌病变,认为低浓度的芝麻
素饮食可能抑制肝癌的形成[z]。但我国对芝麻的利
用仅处于其保健作用,作为药物使用的研究极少,所
以本研究观察了芝麻素对小鼠肝癌H::细胞体外增
殖的影响,同时观察了芝麻素对H::荷瘤小鼠的抗
肿瘤作用,为其药用功效的开发提供依据。
1材料
1.1动物和细胞株:健康昆明种小鼠,雌雄各半,体
质量18~22g,由河北医科大学实验动物中心提
供,一级动物,合格证号编号604192。小鼠肝癌H:。
细胞椽由河北医科大学实验动物中心提供。
1.2药物与试剂:芝麻素(开鲁兴利制药有限责任
公司提供,质量分数99%);环磷酸胺(江苏恒瑞医
药股份有限公司生产,批号06011221);MTT
(Sigma公司);DMSO(上海化学试剂厂);RPMI一
1640培养基(Hyclone公司)。
2 方法
2.1 芝麻素对体外H。:细胞增殖的抑制作用:实验
组芝麻素在RPMI一1640培养基中的质量浓度分别
为8、16、32、64、128gg/mL,设对照组(不加芝麻素
的RPMI一1640培养基)。取对数生长期的H。。细胞,
用含有10%小牛血清的RPMI一1640培养液配成
收稿日期:2007—1卜16
基金项目:河北省科技厅技术研究与发展基金资助项目(07276173)
作者简介:魏艳静(1966一),女,河北石家庄人.副教授.硕士学位,河北省临床免疫学会委员,主要从事肿瘤中药药理研究。
Tel:13932116607E—mail:weiyj559@sohu.tom
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1223·
单细胞悬液,细胞计数后,将细胞浓度调整至5×
10‘/mL。取200肛L细胞悬液接种于96孔细胞培养
板(每孔1x104个细胞),移人CO:孵箱培养。待细
胞生长良好,达孔底面积的2/3时,吸去原培养液,
按实验分组加入相应的含不同质量浓度芝麻素
RPMI一1640培养液,每组设6个复孔。在继续培养后
的24、48h两个时间点,于每孔中加入MTT溶液
(5mg/mL)20tLL,继续孵育4h,小心吸弃孔内培
养上清液,每孔加入150弘LDMSO,震荡10min,使
结晶物充分溶解。选择490nm波长,以对照孔调零,
在全自动酶标仪上测定各孔吸光度(A)值,计算各
组6个复孔A值的平均值,计算细胞生长抑制率。
细胞生长抑制率=(对照组A值一实验组A值)/对照
组A值X100%
2.2芝麻素对皮下H::荷瘤小鼠的抗肿瘤作用
2.2.1肿瘤接种:无菌条件下抽取6~8d传代接
种的H。:肝癌小鼠腹水,用生理盐水稀释细胞悬液,
将细胞浓度调整为1.0X107/mL,每只小鼠右腋皮
下接种0.2mL,共接种64只(雌雄各32只)。
2.2.2动物分组及给药:动物接种后24h,按随机
数字表分成4组:模型组、环磷酰胺组、芝麻素高、低
剂量组,每组16只,雌雄各半且分笼饲养,同时,取
正常的16只(雌雄各8只)小鼠作为对照组。其中对
照组、模型组每天ig0.2mL生理盐水;环磷酰胺组
每日ip环磷酰胺生理盐水溶液30mg/kg;芝麻素
高、低剂量组每日ig150、15mg/kg芝麻素甲基纤
维素悬浊液,连续10d。
2.2.3检测指标:末次给药24h后,取小鼠尾血,
计数白细胞。颈椎脱臼处死小鼠,剥瘤称定质量,计
算抑瘤率。
抑瘤率一(模型组平均瘤质量一给药组平均瘤质量)/模
型组平均瘤质量X100%
2.3统计学处理:计量资料用z士s表示,组间均数
比较采用SAS8.0软件中的单因素方差分析。
3 结果
3.1 对H。。肝癌细胞体外生长的抑制作用:MTT
法检测结果显示,芝麻素对H:。细胞生长具有抑制
作用(表1)。8、16、32t-g/mL芝麻素在作用24h后
即表现出抑制H。。细胞生长的作用,48h后抑制作
用更强,此3个剂量在两个时间点对H::细胞的抑制
作用均无显著差异。64、128/-g/mL芝麻素在24、48
h均未表现出抑制作用。
3.2芝麻素对H。。肝癌荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用
及对荷瘤小鼠外周血白细胞的影响:接种H::肝癌
细胞后,经2~3d的潜伏期,肿瘤迅速增长,芝麻素
高剂量组瘤质量与模型组差异无统计学意义(尸>
0.05);芝麻素低剂量组瘤质量较模型组、芝麻素高
剂量组均低(P0.05)。芝麻素低剂量组抑瘤率为41.96%,高于高
剂量组(4.18%),但仍低于环磷酰胺(67.25%)
组。结果见表2。模型组小鼠白细胞较对照组高(P<
0.05);环磷酰胺组较对照组低(P<0.05);芝麻素
高、低剂量组均与对照组无差异(P>0.05),但均比
环磷酸胺组白细胞高(P表1 芝麻素对H::肝癌细胞的生长抑制作用(;士l,n=6)
Table1 InhibitionofsesaminongrowthofH22
hepatocarcinomacellsG+s,辟一6)
组别
p/ 24h 48h
(腿·mL一1) A 生长抑制宰/% A 生长抑制率/%
与对照组比较:’P<0.05
。P<0.057.15controlgroup
表2芝麻素对H::荷瘤小鼠瘤质量及外周血
白细胞的影响。士s,露=16)
Table2 Effectofsesaminontumorweightandperipheral
whitebloodcellsofH,ztumor—bearingmice
(;士s,一一16)
组别 #t!t/(mg·kg一1)白细胞教/(×109·L-Z)tllJlll/g 抑瘤宰/,;
与对照组比较:。P。P<0.05t,jcontrolgroup;z、p<0.05wmodelgroup
4讨论
芝麻素是芝麻油中所含的一种木脂素类化合
物,是芝麻中的主要活性成分,其质量分数虽然仅为
0.5%左右,但其在生物体内呈现较强的抗氧化作
用[3],因此芝麻素主要被用于抗高血压及心血管疾
病、保肝、抗氧化、降低胆固醇、抗癌等保健领域。近
几年有关芝麻素的保肝作用广泛引起关注,发现芝
麻素能够使乙醇所致亚急性肝损伤大鼠血清丙氨酸
转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)明显减
低,肝匀浆丙二醛(MDA)量显著降低,谷胱甘肽
(GSH)的量显著增高;并且能显著降低CCI.对肝
脏的慢性损伤,抑制或延缓肝脏的纤维化H]。因此芝
万方数据
·1224· 中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
麻素作为一种新型的肝细胞保护药物,其抗肝癌作
用也受到人们的关注,日本东京大学石川隆俊研究
证实芝麻素能抑制前期肝癌病变。采用二乙基亚硝
胺对大鼠进行诱发肝癌试验,同时在癌细胞形成期、
生长期饲料中投入芝麻素,喂养大鼠17周,结果发
现食用芝麻素的大鼠癌症发病率降到对照组的
50%以下,且大鼠的体质量、肝脏质量均无变化[z]。
这一研究结果首次证实了芝麻素的抗癌功效。
本研究采用MTT法检测了芝麻素对体外培养
的肝癌H::细胞的杀伤作用,结果表明8、16、32vgl
mL芝麻素在作用24h后即表现出抑制H:。细胞生
长的作用,48h后抑制作用更强,此3个剂量在两个
时间点对H。。细胞的杀伤作用均无显著差异。64、
128/-g/mL芝麻素组在24、48h均未表现出抑制作
用。证实了较低质量浓度的芝麻素对H:。肝癌细胞
有较好的抑制作用。本研究还观察了芝麻素对H。:
肝癌荷瘤小鼠的抑癌作用以及对荷瘤小鼠白细胞的
影响,结果表明小剂量的芝麻素对H::肝癌细胞的
生长有一定的抑制作用,小鼠瘤质量明显低于模型
组,但其作用不及传统抗癌药物环磷酰胺,较高剂量
芝麻素对肿瘤的抑制作用较小,但芝麻素对人体正常
免疫细胞(白细胞)的杀伤作用较环磷酰胺小。本实
验结果提示芝麻素有望成为治疗肿瘤的一种新药。
芝麻作为天然植物在我国资源丰富,但我国对
芝麻素的利用仅处于其保健作用,作为药物使用的
研究极少。目前芝麻素的提供纯度已高达99%,所
以芝麻素有可能成为一种新型的肝细胞保护药物,
其抑制肝癌细胞生长的机制有待研究和深入。
参考文献:
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咳喘灵对实验性哮喘模型豚鼠支气管肺泡灌洗液嗜酸性
粒细胞凋亡的影响
朱振刚,刘贵颖,乔亚珍
(天津中医药大学第一附属医院呼吸科,天津300193)
支气管哮喘是一种以嗜酸性粒细胞(EOS)浸
润为主,多种细胞(肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细
胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性
炎症性疾患[1],无论是急性期还是缓解期,肺组织内
均有明显的EOS浸润,并与病情的严重程度相平
行。EOS释放的各种介质可发挥其炎症效应,并可
以在气道重塑中起一定作用。近年来,中药治疗哮喘
的实验研究日渐增多,但着眼点在支气管肺泡灌洗
液EOS的并不多。咳喘灵是本院多年临床经验积
累的院内制剂,已应用多年,临床疗效显著,多年的
临床观察未发现不良反应,临床治疗哮喘有效率达
86%。为进一步探讨咳喘灵的作用机制,本实验进行
了咳喘灵对实验性哮喘模型豚鼠支气管肺泡灌洗液
EOS凋亡的影响,从分子水平上阐明咳喘灵治疗哮
喘是通过诱导EOS凋亡实现的。
收稿日期:2008-01—17
I 材料
1.1 主要试剂和仪器:强的松(天津氨基酸公司)
用生理盐水配成10%混悬液备用;卵白蛋白(华美
生物工程公司,批号990218)实验前用生理盐水配
成1%和lO%的卵白蛋白溶液;EOS分离液、细胞
凋亡检测试剂盒均购自武汉博士德生物工程公司;
PAl8067雾化器,美国;Leitz切片机,德国;
OlympusCH显微镜,日本;Olympus,VanoxPM一
10AD摄影显微镜,日本;HPIAS一100病理图文分
析系统,同济医科大学千屏影像工程公司。
1.2咳喘灵制备:黄芩、地龙、当归、蝉衣、细辛、半
夏、五味子等,水提取,浓缩至含生药1、2、3g/L,本
院药厂自制。
2方法
按Barnes[23和吕宝璋‘-3方法略加改良造模。豚
万方数据
芝麻素对肝癌H22细胞增殖及H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响
作者: 魏艳静, 卞红磊, 余文静, 王建华
作者单位: 魏艳静,余文静,王建华(河北医科大学,河北石家庄,050017), 卞红磊(河北医科大学第三医
院,河北石家庄,050051)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(8)
被引用次数: 4次

参考文献(4条)
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3.白金权.车成日 芝麻素的提取及药理作用研究现状[期刊论文]-延边大学医学学报 2012(3)
4.张文娟.张琰.王庆伟 芝麻素的药理学研究进展[期刊论文]-中国药业 2011(8)


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