全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1059·
红花注射液和金纳多注射液对兔肺缺血一再灌注损伤的保护作用比较
芦青1，赵光树1，金启辉2。
(1．浙江大学医学院附属第一医院中药房，浙江杭州310003；2．浙江大学医学院附属第二医院，浙江杭州310003)
摘要：目的 比较红花注射液和金纳多注射液(银杏提取物)对肺缺血一再灌注损伤的保护作用及其机制。方法
复制在体兔肺缺血一再灌注损伤模型。40只日本大耳兔，随机分为4组：假手术组、模型组、红花注射液组(SI组)和
银杏提取物组(EGB组)。实验结束时，自颈动脉抽血检测丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SoD)和黄嘌呤
氧化酶(XO)活性；取肺组织测湿干质量比(W／D)，髓过氧化物酶(MPO)活性；电镜观察肺组织超微结构改变；
免疫组化法检测肺组织细胞间黏附分子一1(ICAM一1)蛋白表达。结果模型组血清MDA水平、x0活性均显著高
于假手术组(P<0．01)，SOD活性明显低于假手术组(P<0．01)；w／D值与MPO活性模型组、EGB组和sl组均
高于假手术组(P<0．05、0．01)，但EGB组和SI组显著低于模型组(P<0．01)；免疫组化发现模型组肺组织
ICAM一1蛋白表达显著高于SI组和EGB组(尸<0．01)。与SI组相比，EGB组MDA水平、XO、MPO活性更低，
SOD活性更高(P
杏提取物对兔肺缺血一再灌注损伤均具有明显的保护作用，虽然这两种药物可能都是通过抗氧化、抑制中性粒细胞
聚集和下调ICAM一1蛋白的表达而减轻肺缺血一再灌注损伤，但银杏提取物的抗氧化作用更显著，而红花对于调节
ICAM一1蛋白的表达作用更显著。
关键词：红花注射液；银杏提取物；肺；缺血一再灌注损伤；细胞间黏附分子一1
中图分类号：R286．4 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)07—1059—03
肺缺血一再灌注损伤(1ungischemia—reperfu—
sioninjury，LIRI)常见于肺移植、肺动脉袖状切
除、体外循环等手术，是患者出现肺动脉高压、肺水
肿及呼吸衰竭的主要原因，目前尚缺乏理想的治疗
措施。LIRI的确切发生机制尚不十分清楚，涉及包
括大量氧自由基的产生、钙超载、内皮细胞受损、血
小板聚集、炎症因子释放等多方面。红花等传统活血
化瘀中药对LIRI有拮抗作用，而银杏提取物
(ginkgobilobaextraction，EGB)对LIRI具有保
护作用[1~3]，这两种中药的保护作用可能与清除自
由基和抗脂质过氧化有关。本研究建立在体兔LIRI
模型，检测肺损伤相关指标，采用免疫组化检测肺组
织细胞间黏附分子一1(ICAM一1)蛋白表达的变化，比
较红花注射液和金纳多注射液(银杏提取物)对LIRI
的保护作用，以为临床防治LIRI提供理论依据。
1材料与方法
1．1动物与试剂：健康日本大耳兔40只，雌雄不
拘，体质量1．7～2．3kg，由浙江大学医学院实验动
物中心提供。红花注射液(湖北宜昌民康制药厂，批
号010904，10mL／支)，金纳多注射液(德国威玛舒
培博士药厂，每支含EGB17．5mg，其中银杏黄酮
苷(4．2mg)，丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶
(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XO)、髓过氧化物酶
(MPO)测试盒(南京建成生物工程研究所)。
ICAM一1抗体检测试剂盒(武汉博士德生物工程有
限公司)。
1．2模型制备：参照文献方法“3复制在体兔LIRI
模型，im阿托品(0．1mg)、iv25％乌拉坦(5mE／
kg)麻醉，气管切开插管接动物呼吸机辅助呼吸，呼
吸频率20～30次／min，潮气量10mL／kg，吸人气
氧浓度100％，电热器维持体温；左颈内静脉插管，
生理盐水0．5～1．5mL／min静滴维持；沿胸骨左缘
切断第3、4和5肋骨，游离左肺门后留置阻断带，在
肺呼气末于左肺门处用阻断带结扎左侧肺动脉、肺
静脉及左主支气管，为左肺缺血；开放恢复供血和通
气为左肺再灌注。
1．3实验分组与标本采集：实验随机分为4组，即
假手术组、模型组、红花注射液组(SI)、金纳多注射
液组(EGB)。假手术组开胸后机械通气4h，除左肺
门过阻断带，不作结扎外，未给予其他处理。模型组
开胸后左肺门阻断1h，开放再灌注3h。药物组缺
血前20miniv红花注射液(2．0mL／kg)或金纳多
注射液(200mg／L)，其余步骤同模型组。4组实验
兔在实验结束后颈动脉采血5mL，部分肺组织以待
收稿日期：2007—11—11 ·
作者简介：芦青(1970一)，男，浙江杭州人，主管中药师。Tel：(0571)87236746E—mail；qq7068qq@163．conl
*通讯作者金启辉E—mail：jinqihuil228@sina．com
万方数据
·1060· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月
实验使用。
1．4 血清MDA量及SOD、X0活性的测定：MDA
测定采用巴比妥酸法，SOD活性测定采用黄嘌呤氧
化酶法，Xo活性测定采用化学比色法，按试剂盒说
明书进行操作。
1．5 肺湿于质量比及髓过氧化物酶(MPO)活性
测定：取部分肺组织生理盐水充分漂洗，滤纸吸干多
余水分，称湿质量。在恒温电热鼓风干燥箱70℃、
24h烘干称质量，两者之比为肺湿干质量比值
(wet／dryratio，W／D)。取肺组织匀浆，采用分光光
度法测定MPO活性，按说明书操作。
1．6 免疫组化检测肺组织ICAM一1蛋白：实验步
骤参照试剂盒推荐方法进行(常规SABC法，DAB
染色)，染色呈棕黄色为阳性表达。应用华东理工大
学研制的吸光度分析软件读取吸光度(A)值作为
含ICAM一1蛋白的相对量。
1．7统计学处理：计量资料采用z±s表示，采用
SPSS11．0统计软件进行分析，多组比较采用方差
分析，组问两两比较采用q检验；各组与假手术组
比较采用Dunnett—t检验。
2 结果
2．1 血清MDA量及SOD、X0活性的变化：与假
手术组比较，模型组血清SOD明显降低，MDA和
XO活性显著升高(P
显著降低(P<0．01)；与SI组比较，EGB组SOD
活性明显升高，MDA和X0活性显著降低(P<
0．05)，结果见表1。
表1 红花注射液和金纳多注射液对肺缺血再灌注兔血清
MDA水平，SOD、XO活性的影响(工土s，n一10)
Table1 EffectofSafflorInjectionandJlnnaduoInjection
onSODandXOactivitiesandMDAlevelin
serumoflungischemia—reperfusion
。rabbits(；±5，n—10)
组*0MDA／(nmol·mL一1)SOD／(NU·mL一1)xo／(u·L～1)
模型 9．13士0．64’’ 270．41士15．35’。6．98±0．72。。
SI 7．80士0．87。’△△307．95士15．46。。△△5．44士0．56’’△△
EGB 6．34±0．52。+△△▲342．34士12．52’’△△▲5．13±0．22’’△△▲
与假手术组比较：一P
▲P
表达的变化：与假手术组相比较，模型组、EGB组和
SI组肺组织的W／D值和MPO活性均明显升高
(尸<0．05，0．01)；与SI组相比，EGB组肺组织W／
D值更低，但差异无统计学意义(P>0．05)，MP0
活性也明显降低(P<0．05)。模型组、EGB组和SI
组肺组织ICAM一1蛋白表达皆显著高于假手术组
(P<0．05，0．01)；与模型组比较，SI组和EGB组下
降非常显著(P<0．01)；与SI组相比，EGB组肺组
织ICAM一1蛋白表达明显增高(P<0．05)，结果见
表2。
表2红花注射液和金纳多注射液对兔肺组织W／D、MPO
活性和ICAM一1表达的影响(工±s，n一10)
Table2 EffectofSafflorInjectionandJinnaduoInjection
onW／D，myeIoperoxidaseactivity，andICAM一1
expressionintissueoflungischemia—reperfusion
rabbits(；士s，撑=10)
与假手术组比较：。P
’P<0．05。’P<0．015Shamgroup
△△P
红花为常用活血化瘀中药之一，用于治疗心脑
血管疾病已有数千年的历史。红花注射液是由红花
提取精制而成，主要成分有红花苷、红花素、黄花素
和总黄酮等[1~3j。红花的热水萃取物对血液凝固有
明显的抑制作用，其有效成分为腺苷，可延长凝血酶
原的生成时问和活化时间，抑制二磷酸腺苷(ADP)
和胶原引起的血小板聚集，加强尿激酶和纤维蛋白
溶酶的活性，降低全血比黏度。红花还可通过抑制
TXA。合酶的活性，使TXB：的生成减少，进而使前
列腺素内过氧化物(PGH)蓄积，导致6一fc—PGF，。生
成增多，改善微循环o“]。银杏提取物(EGB)主要
的药理作用为抗氧化作用，有很强的抗氧自由基、增
强抗氧化酶活性的作用¨]，在心、脑血管疾病中研究
较多。EGB还可抑制血小板抑制因子，改善微循环
等，对心、脑血管缺血性损伤有明显的保护作用口’8]。
EGB还能明显地减少氧自由基对ATP酶的攻击，
增强中枢神经系统功能、调节神经递质和激素的水
平等。另外，EGB能减轻肺间质纤维化凹]。
1CAM一1属于免疫球蛋白超家族，分布于各种
上皮细胞、血管内皮细胞、单核巨噬细胞和淋巴细胞
表面，在免疫反应时细胞与细胞接触过程，促进自细
胞进一步黏附、激活及浸润中发挥作用[1⋯。血管内
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1061·
皮细胞过量表达ICAM一1等黏附分子是中性细胞
与血管内皮细胞黏附的分子基础[11‘，ICAM一1是淋
巴细胞功能相关抗原一1(LFA一1)的配体，其与免疫
细胞表面的LFA一1结合，使免疫细胞与受损细胞、
血管内皮细胞表面的ICAM一1结合，发挥细胞毒性
作用，造成细胞损伤n2。。
本实验显示，模型组血清MDA水平、XO活性
与假手术组比较均明显升高，而SOD活性明显下
降，表明LIRI时组织抗氧化应激的能力减弱，导致
脂质过氧化损伤，提示已可靠地复制了在体兔LIRI
模型，这与文献报道的结果相一致E13]。而与假手术
组比较，SI组和EGB组血清MDA水平、XO活性
虽均有明显升高，但较模型组有明显降低(P<
0．01)；而与模型组相比，SI组和EGB组SOD活性
也有明显升高(P<0．01)；与SI组相比，EGB组中
血清MDA水平、XO活性更低(P
注时氧自由基的产生，减轻组织的脂质过氧化反应
发挥作用，且后者的抗氧化作用更强。在LIRI中，
激活的中性粒细胞是氧自由基的重要来源，而
MPO活性是中性粒细胞的氧化作用的决定因素，
肺组织MPO活性可定量地反应中性粒细胞扣押与
聚集程度[13“引。本研究发现，模型组MPO活性、w／
D和ICAM一1表达较假手术组均升高且差异非常
显著(P<0．01)。而EGB组和SI组尽管该3项指
标亦较假手术组明显升高，但差异显著水平与模型
组相比降低(P<0．05)；SI组和EGB组相比，两组
的W／D差异不显著(P>0．05)，但EGB组中
ICAM一1表达更高(P<0．05)。ICAM一1的高表达
可反应LIRI的严重程度，可能通过引起内皮细胞一
白细胞相互作用，造成白细胞的浸润，并不断加重肺
损伤C14,15]。由此提示红花和银杏提取物可能通过抑
制ICAM一1在肺组织中的表达，减少LIRI时肺组
织微血管通透性，减轻肺组织的过度炎症反应，降低
肺泡Ⅱ型上皮细胞受损程度，起到对LIRI的保护
作用，就这点而言，红花的保护作用比银杏提取物效
果更明显，但其详细作用尚待进一步深入研究。
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万方数据
红花注射液和金纳多注射液对兔肺缺血-再灌注损伤的保护作
用比较
作者： 芦青， 赵光树， 金启辉
作者单位： 芦青,赵光树(浙江大学医学院附属第一医院,中药房,浙江,杭州,310003)， 金启辉(浙江大
学医学院附属第二医院,浙江,杭州,310003)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(7)
被引用次数： 2次
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