全 文 ：研究了 Glide 对接得分中的非特异性成分 ,通过对
阴性配体的对接得分的研究 ,发现配体的分子特征
描述符与非特异性得分具有高度相关性 ,建立了相
关性方程 ,并以去除非特异成分后的分级评价作用
作为选择性评价指标 ,在少量的阳性分子中得到了
较好的验证 ,由于配体和受体的相互作用是非常复
杂的 ,本研究结果的适用面还需要经过更大系统的
验证。本研究以去除非特异性得分来提高虚拟筛选
结果的可靠性 ,是非常有效的尝试[ 5 ,11 ] 。
本研究的另一个目的是利用理论方法研究植物
成分的可能的作用机制。随着越来越多的植物成分
结构的明确及受体结构的测定 ,以分子对接法进行
研究具有很强的可行性[3 ,11 ] ,不仅可以弥补动物药
理实验方法的缺陷 ,也减少了人力和物力的投入 ,更
重要的是可以帮助阐明中药作用的物质基础。
本研究选择抗炎的方向研究环烯醚萜可能的作
用机制 ,得到了一些有意义的结果 ,环烯醚萜还具有
多种生物活性 ,其广泛的作用还需要深入的研究。
由于环烯醚萜结构比较简单 ,是一个非常有价值的
片段结构 ,对于新药的研发具有重要的意义[12 ] 。
致谢 :上海超算中心和华南理工大学网络计算
中心提供支持。
参考文献 :
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川芎嗪在小鼠血、脑和肝中的药动学研究
王利胜 ,郭 　琦 ,韩 　坚 ,张英丰 ,陈秀娟 3
(广州中医药大学中药学院 ,广东 广州 　510006)
摘 　要 :目的 　研究川芎嗪在小鼠体内血、脑、肝中的药动学 ,比较川芎嗪微乳和水溶液在小鼠体内药动学特征。
方法 　川芎嗪微乳与其水溶液分别尾 iv 给药 ,用 HPLC 法测定不同时间点小鼠血、脑、肝中的川芎嗪质量浓度 ,用
药动学软件对药时曲线数据进行拟合。结果 　微乳组的主要药动学参数分别为血浆 : tmax 2150 min、Cmax 4179μg/
mL 、AUC 115170 min ·μg/ mL 、MRT 20188 min ;脑 tmax 5100 min、Cmax 7181μg/ mL 、AUC 259151 min ·μg/ mL 、
MRT 23109 min ;肝 tmax 5100 min、Cmax 10166μg/ mL 、AUC 305181 min ·μg/ mL 、MRT 21188 min。水溶液组的主
要药动学参数分别为血浆 : tmax 2150 min、Cmax 4142μg/ mL 、AUC 72174 min ·μg/ mL 、MRT 12154 min ;脑 tmax 5100
min、Cmax 4114 μg/ mL 、AUC 130119 min ·μg/ mL 、MRT 25190 min ;肝 tmax 2150 min、Cmax 6133 μg/ mL 、AUC
182151 min ·μg/ mL 、MRT 23103 min。结论 　微乳改变了川芎嗪在小鼠血浆、脑、肝中药动学行为 ,提高了川芎嗪
在脑、血、肝 ,特别是脑中的分布。
关键词 :川芎嗪 ; 微乳 ; 药动学 ; HPLC
中图分类号 :R28515 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0620935204
·539·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
3 收稿日期 :2008211207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30873443) ; 广东省中医药局科研课题 (2007337) ; 广州中医药大学创新基金资助
作者简介 :王利胜 (1968 —) ,男 ,副教授 ,博士 ,研究方向为中药制剂新剂型与新技术研究、中药药剂学、生物药剂学与药动学。
Tel : (020) 39358043 　E2mail : wlis68 @126. com
Pharmacokinetics of ligustrazine in blood , brain , and liver of mice
WAN G Li2sheng , GUO Qi , HAN Jian , ZHAN G Ying2feng , CH EN Xiu2juan
(College of Chinese Materia Medica , Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine , Guangzhou 510006 , China)
Abstract : Objective 　To study t he p harmacokinetics of ligust razine in blood , brain , and liver of mice.
Methods 　Ligust razine solution and microemulsion were iv administ rated to caudal vein of mice. Ligus2
t razine concent ration in plasma , brain , and liver was determined by HPL C met hod. The data were p ro2
cessed wit h the sof tware. Results 　The main p harmacokinetic parameters of ligust razine microemulsion
were : plasma tmax 2150 min , Cmax 4179μg/ mL , AUC 115170 min ·μg/ mL , MR T 20188 min ; brain : tmax
5100 min , Cmax 7181μg/ mL , AUC 259151 min ·μg/ mL , MR T 23109 min ; liver : tmax 5100 min , Cmax 10166
μg/ mL , AUC 305181 min ·μg/ mL , MR T 21188 min. The main p harmacokinetic parameters of ligus2
t razine solution were : plasma tmax 2150 min , Cmax 4142μg/ mL , AUC 72174 min ·μg/ mL , MR T 12154
min ; brain : tmax 5100 min , Cmax 4114μg/ mL , AUC 130119 min ·μg/ mL , MR T 25190 min ; liver : tmax 2150
min , Cmax 6133 μg/ mL , AUC 182151 min ·μg/ mL , MR T 23103 min. Conclusion 　The microemulsion
could alter t he ligust razine dist ribution in plasma , brain , and liver of mice , especially in brain.
Key words : ligust razine ; microemulsion ; p harmacokinetics ; H PL C
　　川芎嗪化学名为四甲基吡嗪 ,药理研究显示其
有改善微循环、抑制血小板聚集、防止血栓形成、改
善肾脏缺血及保护肾功能等作用[1 ] ,已成为临床中
治疗缺血性脑中风备受推崇的药物之一。但川芎嗪
在脑内的分布并不高 ,为进一步提高川芎嗪对脑血
管类疾病的治疗 ,现选用新的剂型2微乳作为其载
体。微乳通常是由乳化剂、助乳化剂、油相和水相组
成的澄明或带乳光的液体 ,是一种新型药物载体 ,可
作为速释、缓释及靶向给药系统 ,提高药物的生物利
用度[ 2 ] 。国内外文献未见川芎嗪微乳制剂的研究报
道 ,本实验制备川芎嗪微乳并以川芎嗪水溶液作为
对照 ,采用高效液相色谱法测定小鼠血、脑、肝中川
芎嗪的浓度 ,分别考察自制川芎嗪微乳在小鼠血、
脑、肝中的药动学行为 ,为进一步研究川芎嗪微乳打
下基础。
1 　材料与方法
111 　药品与试剂 :川芎嗪 (南京苏朗医药科技开发
有限公司 ,批号 080220) ;盐酸川芎嗪、阿司匹林内
标物对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批号分别
为 1108172200305、1001132200302) ;川芎嗪微乳、川
芎嗪水溶液 (自制) ;甲醇、乙腈均为色谱纯。
112 　仪器与色谱条件 :
11211 　仪器 : KQ5200D E 型数控超声波清洗器 (昆
山市超声仪器有限公司) ; XW —80A 微型旋涡混合
仪 (上海沪西分析仪器厂) ;AU Y220 电子天平 (广
州湘仪机电设备有限公司) ; T GL —16B 型台式离心
机 (上海安亭科学仪器厂) ;微量移液器 (上海求精
生化试剂仪器有限公司 ) ; H PL C 仪 : Summit
P680A 泵 ,Summit PDA —100 二级管阵列检测器 ;
Chromeleon 色谱工作站 (美国 Dionex 公司) 。
11212 　色谱条件 : Hypersil ODS —C18色谱柱 (250
mm ×4. 6 mm , 5 μm) ; 甲醇2115 % 冰醋酸溶液
(45 ∶55) 为流动相 ;内标物为阿司匹林对照品 ;柱
温 :室温 ;体积流量 :1 mL/ min ;紫外检测波长 :279
nm ;进样量 :20μL 。
113 　动物 : N IH 小鼠 ,雌雄不限 ,体质量 (20 ±2)
g ,由广州中医药大学动物中心提供 (动物许可证
号 :粤监证字 2007A013) 。
114 　生物样品的处理方法
11411 　血浆样品的处理 :取血浆于具塞塑料试管中
离心 ,取上清 012 mL ,定量加入 014 mL 混有内标
物 (3μg/ mL) 的乙腈液提取 ,涡旋 2 min ,15 000 r/
min 离心 10 min ,移取上清液 (内标物质量浓度为
2μg/ mL) ,即得。
11412 　脑、肝组织样品处理 :取小鼠全脑 (剥离软脑
膜)及一叶肝脏 (每次均在同一位置) ,用吸水纸蘸净
残余血迹 ,分别精密称质量后加 5 倍量生理盐水 ,用
玻璃匀浆器匀浆 ,得脑匀浆和肝匀浆。离心 30 min
后取上清液 012 mL ,加 014 mL 混有内标物 (3μg/
mL) 的乙腈 ,涡旋 2 min ,15 000 r/ min 离心 30 min ,
取上清液 (内标物质量分数为 2μg/ mL) ,即得。
115 　小鼠体内药动学研究 :取小鼠 84 只 ,随机分
为川芎嗪微乳组和川芎嗪水溶液组各 42 只 ,每组
各随机分为 7 个小组 (每小组 6 只) ,每个小组分别
对应 1 个时间点。小鼠 1 次性尾 iv 给药 (川芎嗪给
药剂量为 36 mg/ kg) ,分别于给药后 215、5、10、20、
45、60、90 min 取血。取血时先用肝素润湿小烧杯 ,
摘除眼球取血。取血后立刻取出小鼠脑和肝组织样
·639· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
品。并按照 114 中方法处理样品 ,得到供试品溶液 ,
并进行测定 ,将测得的峰面积以内标法计算血浆、
脑、肝中川芎嗪的质量浓度。
116 　体内分析方法的建立
11611 　标准曲线的制备 :精密称量 1215 mg 盐酸
川芎嗪对照品 ,置于 100 mL 量瓶中 ,加乙腈溶解 ,
稀释至刻度 ,摇匀 ,即得对照品溶液。取空白小鼠血
浆、脑匀浆和肝匀浆上清液各 2 mL ,加入盐酸川芎
嗪对照品溶液适量 ,按 114 项下方法处理 ,制成
01006 25、01031 2、01156、01781、31906、71813μg/
mL 的溶液 (内标物质量浓度为 2μg/ mL ) ,进样。
以对照品与内标物峰面积比 ( Y) 为纵坐标 ,对照品
质量浓度 ( X) 为横坐标进行线性回归 ,川芎嗪在血
浆、脑和肝中的回归方程见表 1。结果表明 ,生物样
品中川芎嗪质量浓度在 01006 25～71813μg/ mL
与峰面积积分值呈良好线性关系。
表 1 　川芎嗪在血浆、脑和肝中的回归方程
Table 1 　Regresson equation of ligustrazine in plasma ,
brain , and liver of mice
样品 回归方程 r
血浆 Y = 61 456 2 X + 11 530 3 01998 5
脑 Y = 61 637 2 X + 01 509 8 01997 3
肝 Y = 81 038 0 X - 01 712 1 01996 4
11612 　方法学考察 :本课题组前期研究结果证明该
测定方法稳定可行[3 ] 。
117 　数据处理 :采用 P Kanalyst 药代动力学处理软
件处理 ,以 A IC ( Akaike criteria) 、SIC ( Schwartz
criteria) 最小准则 ,结合拟合度、相关系数等指标进
行最佳房室模型的判别 ,同时进行非房室模型分析 ,
并将微乳组与水溶液组在血、脑、肝中的各个药动学
参数进行对比。
2 　结果
　　小鼠体内药动学实验结果见图 1～3 及表 2。
从尾 iv 2. 5 min 后 ,开始取血检测血浆中川芎嗪的
质量浓度。此时微乳组的血药浓度为 4179 μg/
mL ,水溶液组的血药浓度为 4142μg/ mL ,最大血
药浓度无显著差别。随着给药时间的延长 ,血药浓
度逐渐下降 ,特别是在前 20 min 内下降速度最快 ,
但是每个时间点的血药浓度微乳组均大于水溶液
组。从统计距参数看 ,微乳组与水溶液组的 AUC
分别为 115170、72174 min ·μg/ mL ,微乳组大于水
溶液组 ,说明微乳提高了川芎嗪在血中的浓度。
　　与血药浓度测定结果不同 ,脑药浓度高峰出现
在 5 min ,较血中慢 ,提示药物从静脉注射到透过血
脑屏障到达脑部需要一定时间。其中水溶液组的脑
表 2 　川芎嗪微乳和川芎嗪水溶液在小鼠体内主要
药动学参数 ( n = 6)
Table 2 　Main pharmacokinetic parameters
of ligustrazine microemulsion and
solution in mice in vivo ( n = 6)
药动学参数
血
微乳 　　　水溶液
脑
微乳　　　水溶液
肝
微乳 　　　水溶液
tmax / min 2150 215 5100 5100 5100 2150
Cmax / (μg ·mL - 1 ) 4179 4142 　7181 　4114 10166 　6133
AUC/ (min ·μg ·mL - 1 )115170 72174 259151 130119 305181 182151
MRT/ min 20188 12154 23109 25190 21188 23103
房室模型 二房室 一房室 一房室 一房室 一房室 一房室
药浓度 Cmax 为 4114 μg/ mL ,微乳组可达到 7181
μg/ mL ,较水溶液组明显增加 ,并且各个时间点微乳
的脑药浓度均大于水溶液组 ,从曲线下面积看 ,微乳
·739·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
组的 AUC 为 259151 min ·μg/ mL ,水溶液组的
AUC 为 130119 min ·μg/ mL ,微乳组较水溶液组
显著增加 ,说明微乳组可以显著提高川芎嗪在脑部
的分布 ,增加脑药量。
肝药浓度微乳组经时变化与脑药浓度类似 ,药
物浓度峰出现在 5 min ,水溶液组肝药浓度在 215
min ,水溶液达峰时间较微乳组快 ,说明微乳在肝中
有一定的缓释作用。比较肝药峰浓度 ,微乳组为
10166μg/ mL ,水溶液只有 6133μg/ mL ,并且微乳
组的 AUC 大于水溶液组 ,提示微乳亦改变了川芎
嗪药物在肝中的药动学 ,增加了肝中的分布。
3 　讨论
　　黄志力等[4 ]通过对川芎嗪静注后大鼠组织中药
物浓度经时变化的观察 ,川芎嗪的肝脏摄取率最高 ,
其他依次为心脏、脾、脑、睾丸、肺、肾、肌肉、血浆 ,其
主要分布于血流丰富的大循环和组织 ,脑内的分布
不高。而本实验川芎嗪微乳与水溶液的比较证明
了 :微乳可以改变川芎嗪在血、脑、肝的药动学行为 ,
分布均有所增加 ,并且脑药分布提高明显。微乳增
加了川芎嗪在血浆、脑、肝内浓集的倾向 ,血浆中药
物浓度增加说明周围组织中药物浓度会相对减少 ,
此时脑药浓度的显著提高可能是由于微乳中的油相
组分增强了药物与脑组织的亲和性 ,同时微乳属于
纳米微粒载药体系 ,可使微乳携带包裹于内相 (油
相)的药物迅速通过血脑屏障 ,提高药物在脑内的分
布[5 ] 。由以上结果预测 ,川芎嗪微乳具有脑靶向性。
川芎嗪常用于脑血管类疾病的治疗 ,但脑内的分布
并不高 ,所以今后对川芎嗪微乳脑靶向性研究具有
十分重要的意义。
实验过程中 ,由于小鼠的个体差异以及繁琐的
样品前处理过程 ,实验数据难免产生误差。而与传
统的样品采集和处理技术相比 ,微透析则较有优
势[6 ] : ①微透析对取样部位的伤害很小 ,几乎不影响
组织中的生理过程 ,得到的样品更能反映物质进入
人体后的实际变化 ; ②不改变组织细胞外液中的液体
平衡 ,既可以对同一组织进行长时间连续采样 ,也可
以对同一动物进行多个部位采样 ,用较少的实验动物
就可以得到足够的数据 ,避免了由于动物的个体差异
所造成的实验误差 ; ③其所得样品干净 ,可以直接进
行样品分析 ,省去了繁琐的样品前处理步骤。所以在
今后对川芎嗪微乳脑靶向的研究中可以利用微透析
采样技术 ,避免不必要的误差 ,使实验结果更加可靠。
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丹参酮ⅡA对大鼠细胞色素 P450 酶的诱导作用
和 　凡1 ,2 ,钟国平2 ,赵立子2 ,毕惠嫦2 ,黄 　民2 3
(11 广州市妇女儿童医疗中心 ,广东 广州 　510120 ; 21 中山大学药学院 ,广东 广州 　510080)
摘 　要 :目的 　研究丹参酮 ⅡA 对大鼠细胞色素 P450 酶的诱导作用。方法 　丹参酮 ⅡA 7、20、60、180 mg/ (kg ·d)
4 个剂量组 ,雄性 SD 大鼠连续 ig 7 d ,取肝脏组织 ,应用体外“cocktail”方法 ,反转录2聚合酶链反应 ,免疫印迹杂交
方法分别检测 CYP450 酶活性、基因表达和蛋白表达的变化。结果 　丹参酮 ⅡA 能显著诱导 CYP1A2 及 CYP2 E1
的活性以及基因、蛋白表达 ,且呈剂量依赖性 ;高剂量组能增强 CYP2C19 的活性 ,但对基因、蛋白表达没有影响 ;对
包括 CYP3A1 在内的其他亚型没有影响。结论 　丹参酮 ⅡA 对大鼠多种 CYP450 亚型有诱导作用。
关键词 :丹参酮 ⅡA ; 细胞色素 P450 酶 ; 诱导
中图分类号 :R28515 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0620938205
·839· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
3 收稿日期 :2008208211　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :广东省高等学校中药有效性与安全性重点实验室开放基金 (kf07007)
作者简介 :和　凡 (1978 —) ,男 ,广东省广州市人 ,主管药师 ,博士研究生 ,至今已在国内外发表论文 10 余篇 ,主要从事药物代谢酶和临
床药理学研究。Tel : (020) 81330652 　E2mail : hefan_yh @tom. com3 通讯作者　黄　民　E2mail : huangmin @mail . sysu. edu. cn