全 文 ：中草葛ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1255-
105，r=0．9989}山柰素A=1．19×105C一3．52×
10‘，r=0．9991；金丝桃苷、槲皮素和山柰素的线性
范围分别为0．0654～0．3924 pg，0．06534～
0．39204肛g，0．06552～O·39312pg。
2．5 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液30
pL，连续进样5次，测定峰面积，计算得金丝桃苷、槲
皮素和山柰素峰面积的RSD分别为1．4％、0．8％、
1．3％，表明精密度良好。
2．6稳定性试验：精密吸取供试品溶液30pL，分
别于0、1、2、4、8、12h进样，测定峰面积，计算得3
种成分的RSD分别为1．3％、0．9％、1．5％，表明样
品在12h内稳定。
2．7重现性试验：取同一产地药材粉末(盱眙)样
品5份，按2．3项下方法制成供试品溶液，测定，金丝
桃苷、槲皮素和山柰素平均质量分数分别为0．662、
0．191、0．259mg／g，RSD分别为1．2％、1．4％、
1．1％。
2．8加样回收试验：取药材粉末约0．5g，精密称
定6份，分别精密加入金丝桃苷、槲皮素和山柰素对
照品高、中、低3个质量浓度，按2．3项下方法制成供
试品溶液，进样测定，计算回收率，结果金丝桃苷平
均回收率97．01％，RSD为1．2％(，l=6)；槲皮素
平均回收率96．61％，RSD为1．1％(，l=6)；山柰
素平均回收率96．77％，RSD为0．8％(挖=6)。
2．9样品测定：取不同产地的野马追药材，按2．3项
下方法制备供试品溶液，依法测定，计算药材中金丝
桃苷、槲皮素和山柰素的平均质量分数，结果见表1。
3讨论
3．1 流动相的选择：本实验曾经选用甲醇一0．5％
磷酸水溶液、甲醇一1％冰醋酸溶液、乙腈一甲醇一
0．5％磷酸水溶液等体系进行等度和梯度洗脱，结
表1样品测定结果(撑一3)
Table1 DeterminationofflavonoidsinHerba
EupatoriiLindleyaniQ=3)
果表明采用等度洗脱，色谱峰分离度达不到要求，选
择乙腈一甲醇一0．5％磷酸水溶液梯度洗脱，得到的
色谱峰形较好，且较稳定。为确保下次分析时色谱峰
的峰形及分离度，每次运行梯度后，柱平衡至少需要
5minE纠。
3．2检测波长的选择：经二极管阵列检测器检测，在
上述色谱条件下于波长200～400nm绘出三维图
谱。从三维图谱中可以看出在370nm波长检测时，
其HPLC色谱响应较大，同时各色谱峰分离度较好，
且基线平稳，故确定波长370rim为检测波长。
3．3研究过程中曾采用盐酸水解法测定了野马追
中的槲皮素和山柰素的量，方法较繁琐；本实验所建
立的HPLC—DAD法，简便快速、分离度好、测定结
果可靠，能同时测定黄酮类化合物中金丝桃苷、槲皮
素和山柰素的量，为野马追药材的品质鉴别以及黄
酮类化合物产品的质量控制等提供依据。野马追为
江苏省道地药材，为提高野马追及其制剂质量，在本
研究工作之上将通过对野马追药材的指纹图谱研究
进一步达到全面控制药材质量的目的，实施地道野
马追药材的规范化管理种植。
参考文献：
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桃苷的含量测定[J]．药物分析杂志，2003，23(6)：414—
416．
RP—HPLC法测定东北地区不同产地满山红中齐墩果酸与熊果酸
粱泰刚，梁塘，赵承孝，李青山。
(山西医科大学药学院，山西太原030001)
摘 要：目的建立同时测定满山红中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱方法。方法 采用HyporsilC。s色谱柱
(250mm×4．6mm，5pm)，以0．03mol／L磷酸盐缓冲液(pH=3．0，含6mmol／L的p环糊精)一甲醇(13：87)
为流动相，体积流量1．0mL／min；检测波长210nm。结果齐墩果酸和熊果酸分别在0．026o～o．130mg／mL和
收稿日期：2007—12-10
基金项目：山西省科技攻关项目(No．2006031201．01)、山西医科大学校青年基金资助项目(No．2006011)
作者简介：粱泰刚，男，在读博士。E—mail；liangt978@sohu．com
-通讯作者李青山Tel：(0351)4690322E—mail：qingshanl@yahoo．tom
万方数据
·1256· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
0．0872～O．436mg／mL线性关系良好，平均回收率分别为99．2％(RSD=1．1％)和98．6％(RSD=1．2％)。结论
该方法简便快速，结果准确可靠，各产地满山红中熊果酸的量均高于齐墩果酸。
关键词：高效液相色谱法I满山红I齐墩果酸；熊果酸
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1255—03
满山红为杜鹃花科植物兴安杜鹃
RhododendrondauricumL．的干燥叶，具有止咳、
祛痰、抗菌的作用，用于治疗急、慢性支气管炎，哮
喘。满山红的化学成分有黄酮类、萜类、挥发油类
等[1]，而其中的齐墩果酸和熊果酸作为三萜类代表
性化合物，具有抑菌、保肝、免疫增强等多种生物活
性[2]，属于满山红活性成分。目前对满山红及其制剂
的质量研究主要集中在对黄酮化合物进行定量控
制，尚未见对三萜类化合物测定的相关报道。为科学
有效控制其产品质量，本实验首次对主要分布在我
国东北地区的不同满山红中齐墩果酸与熊果酸的量
进行测定。
1仪器与试药
LC一10AVP高效液相色谱仪(日本岛津)；
UV一260紫外可见分光光度计(日本岛津)；齐墩
果酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号0773—
99100)；熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所，
批号742—200111)；甲醇为色谱纯；水为重蒸水，其
余试剂均为分析纯；
满山红药材采自黑龙江、吉林、辽宁等东北地
区，经山西医科大学药学院高建平教授鉴定为杜鹃
花科植物兴安杜鹃Rhododendrondau icumL．的
干燥叶。
2方法与结果
2．1 色谱条件[3’4]：HyporsilC18色谱柱(250mm×
4．6mm，5肛m)；流动相：0．03mol／L磷酸盐缓冲液
(含6mmol／L的p环糊精，pH=3．0)一甲醇(13：
87)；柱温：室温；体积流量1．0mL／min；检测波长
210nm；进样量：20弘L。在此色谱条件下待测组分
可达到基线分离，见图l。
、2．2对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸、熊果
酸对照品适量，置25mL量瓶中，加甲醇配制成分
别为0．260、0．872mg／mL的混合对照品储备液，
摇匀。
2．3供试品溶液的制备[5’6]：精密称取干燥至恒重
的药材粉末(40目)2g，加50mL石油醚，索氏提
取1h，弃石油醚液，挥干药材粉末，再加100mL氯
仿索氏提取5h，提取液蒸干，残渣加甲醇适量使溶
解，转移至25mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，0．45
pm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
0 5 10 15 20
25，／min
0 5 10 15 20 25
l一齐墩果酸2一熊果酸
1．ursolicacid2-oleanolicacid
图1混合对照品(A)与样品(B)色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsfmixedreference
substances(A)andsample(B)
2．4线性关系考察：精密吸取对照品储备液1、2、
3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀。各吸取20pL注入液相色谱仪，测定峰面积，以
对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回
归，得回归方程：y齐墩果矗=4．211×106X一7．707×
102，r=0．9999，线性范围0．0260～0．130rag／
mL；y焦果簟=3．035X106X一2．511×103，r=
0．9995，线性范围0．0872～O．436mg／mL。
2．5精密度试验：取对照品溶液20pL，按上述色
谱条件，连续进样6次，测得齐墩果酸与熊果酸峰面
积的RSD分别为0．30％和0．68％。
2．6稳定性试验：取同一样品溶液，分别于配制后
0、2、4、8、12、24h精密吸取20弘L进样测定，齐墩
果酸峰面积RSD为1．O％，熊果酸峰面积RSD为
1．9％，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
2．7重现性试验：取齐齐哈尔药材6份，按供试品
溶液制备方法制备供试品溶液，测定齐墩果酸、熊果
酸质量分数分别为0．0469％、0．538％，RSD分别
为0．94％、0．87％。
2．8加样回收率试验：精密称取6份已知质量分数
的齐齐哈尔满山红样品1．0g，分别加入齐墩果酸、
熊果酸对照品适量，按供试品溶液的制备项下操作，
测定齐墩果酸、熊果酸的质量分数，齐墩果酸与熊果
酸的平均回收率分别为99．2％、98．6％，RSD分别
为1．1％、1．2％。
2．9样品测定：精密吸取供试品溶液20pL，注入
液相色谱仪，依上述色谱条件进行测定，结果见表1。
3讨论
3。1 流动相的选择：因齐墩果酸与熊果酸为同分异
构体，性质相近，分离难度较大，一般流动相的简单
配比难以使二者完全分离，而在磷酸盐缓冲液中加
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1257·
表1东北不同产地满山红中齐墩果酸与熊果酸的
测定结果(H=3)
Table1 Determinationofurs licacidandoleanolic
acidinleavesof足．dauricumfromdifferent
habitatsinnortheastChina“=3)
人手性添加剂p环糊精能够有效提高分离度，经试
验，当流动相为0．03mol／L磷酸盐缓冲液(含6
mmol／L的p环糊精，pH=3．O)一甲醇(13：87)时
二者分离完全，可以满足测定要求。
3．2供试品溶液的制备：本实验曾比较采用甲醇、
氯仿为溶剂进行超声提取、回流提取和索氏提取等
不同方法，结果发现采用石油醚脱脂后氯仿索氏提
取，具有提取率高，干扰小等特点，便于分析测定。
3．3东北作为满山红药材主产区，不同地域齐墩果
酸与熊果酸量差异较大，以黑龙江质量分数最高，测
定结果表明，熊果酸量均高于齐墩果酸。
参考文献：
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学院硕士毕业论文[D]．山西：山西医科大学。2006．
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齐墩果酸和熊果酸的含量D]．沈阳药科大学学报，2004，
Zl(5)：358—362．
酸性染料比色法测定延胡索总生物碱的量
周教玲
(杭州市第三人民医院，杭州浙江310009)
延胡索为罂粟科植物延胡索Coryclag
yanhusuoW．Twang的干燥块茎，亦名元胡，其味
辛、苦，性温；归肝、脾经。具有活血、利气、止痛之功
效，临床上主要用于各种疼痛、心血管及痛经等。产
于浙江省东阳、磐安、缙云等地，为道地药材。浙八
味”之一，其主要药效物质是延胡索总生物碱[1矗]。本
实验采用紫外分光光度法对延胡索中总生物碱的量
进行测定。
1仪器、试剂与材料
TU一1800型紫外可见分光光度仪(北京普析
通用仪器公司)，SartoriusBP211D电子天平(德
国)，CQ一250型超声波清洗器(中船总公司726
研究所)。
醋酸一醋酸钠缓冲液(pH4．5)。酸性染料溴甲
酚绿溶液的配制：取溴甲酚绿50mg与邻苯二甲酸
氢钾1．201g，加0．2mol／L盐酸溶液1．6mL使溶
解后，加水稀释成100mL，摇匀，用0．2mol／L盐
酸溶液或氢氧化钾试液调pH值至4．5[3]。盐酸脱
氢延胡索碱对照品(纯度99．5％，浙江省药品检验
所惠赠)。延胡索药材(批号20051204、200607006、
20061207)购自杭州中药饮片厂。其余试剂均为分
析纯。
2方法与结果
2．1 对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的盐酸
脱氢延胡索碱2．56mg，置于lOmL量瓶中，加醋酸一
醋酸钠缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶
液(每毫升含脱氢延胡索碱0．256rag)[3]。
2．2供试品溶液的制备：精密称取药材约1．0g置
于50mL量瓶中，加0．1mol／L盐酸80％甲醇溶
解适量超声30min，冷却至室温，定容至刻度，摇
匀，滤过，取续滤液10mL置圆底烧瓶中，抽干，残
渣用醋酸一醋酸钠缓冲液溶解转移并定容至25mL
收稿日期：2007—12—10
作者简介：周毅玲(一)，女，汉族，浙江桐庐人，学士学位，现任职于杭州市第三人民医院中药房．Telt13396561111
万方数据
RP-HPLC法测定东北地区不同产地满山红中齐墩果酸与熊果酸
作者： 梁泰刚， 梁垿， 赵承孝， 李青山
作者单位： 山西医科大学药学院,山西太原,030001
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)
被引用次数： 5次

参考文献(6条)
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2004
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5.张前军;赵超;杨小生 高效液相色谱法测定连钱草中熊果酸的含量[期刊论文]-中国中药杂志 2006(18)
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3. 黄齐林.高小茵.曹秋娥.杨光宇.尹家元.HUANG Qi-lin.GAO Xiao-yin.CAO Qiu-e.YANG Guang-yu.YIN Jia-yuan
高效液相色谱法快速测定满山红中槲皮素和杜鹃素的研究[期刊论文]-分析科学学报2006,22(2)
4. 邹纯才.鄢海燕.方芳.方洪壮.ZOU Chun-cai.YAN Hai-yan.FANG Fang.FANG Hong-zhuang 满山红油的高效液相
特征色谱考察[期刊论文]-中国医院药学杂志2008,28(19)
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红油的GC-MS分析[期刊论文]-中国实验方剂学杂志2010,16(8)
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