全 文 ：HPLC法测定黄杞叶中落新妇苷和黄杞苷
曲 　佳1 ,周 　军1 ,侯文彬2 ,寿国香1 3 3
(11 天津市药品检验所 ,天津 　300070 ; 21 天津药物研究院 ,天津 　300193)
摘 　要 :目的 　建立黄杞叶中落新妇苷及黄杞苷定量测定方法。方法 　采用 HPLC 法 , Phenomenex L una C18色谱
柱 ,乙腈2水2冰醋酸 (22 ∶78 ∶011)为流动相 ,检测波长 290 nm ,体积流量 018 mL/ min。结果 　平均回收率 :落新妇
苷为 10116 %(RSD = 018 %) ;黄杞苷为 9811 % ( RSD = 114 %) 。线性范围 :落新妇苷为01041 48～81296μg ( r =
01999 8) ;黄杞苷为01022 04～81816μg ( r = 01999 9) 。结论 　该方法简便、快速、重现性好。
关键词 :黄杞叶 ;落新妇苷 ;黄杞苷 ; HPLC
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0220306202
　　黄杞叶是胡桃科植物黄杞 Engel hardti a rox2
burg hi ana Wall1 的干燥叶 ,我国广东、广西、海南、
湖南、贵州等南方各省均有分布。广西等地已将黄
杞叶代茶饮 ,名为罗汉茶。《广西中药材标准》1996
年版收载 ,罗汉茶具有清热解毒 ,生津止渴 ,解暑利
湿的作用 ,可用于脾胃湿滞 ,胸腹胀闷 ,感冒发烧等
症状。原标准无定量测定项 ,本实验建立了 HPL C
法测定黄杞叶中落新妇苷和黄杞苷 ,能够有效地控
制该制剂的质量。此外 ,同时测定了黄杞细枝中落
新妇苷和黄杞苷 ,对发现该药材新的药用部位 ,扩大
药源提供了一定的实验参考。
1 　材料
本实验用黄杞叶产地为广西 ,经天津市药品检
验所中药室吴贵华主任药师鉴定。
日本 Shimadzu L C —2010CH T 高效液相色谱
仪 ,L C2solution 工作站。Mettler A E 260 万分之一
电子天平及 Mettler Toledo A G 135 十万分之一电
子天平 (梅特勒2托利多仪器上海有限公司) ; Sibata
超声波清洗器 ;乙腈为色谱纯 ,冰醋酸为分析纯 ,水
为去离子蒸馏水 ;落新妇苷、黄杞苷对照品由天津市
药品检验所中药室自制 (经 UV、IR、MS、NMR 波谱
鉴定) ,经 HPL C 色谱归一化法计算 ,落新妇苷、黄
杞苷质量分数均达 9815 %以上。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 :流动相为乙腈2水2冰醋酸 (22 ∶78 ∶
011) ; 色谱柱为 Phenomenex Luna C18 ( 250 mm ×
416 mm ,5μm) ;体积流量 :018 mL/ min ;检测波长 :
290 nm ;柱温 :30 ℃,进样量 10μL。色谱图见图 1。
t/ min
12落新妇苷　22黄杞苷
12astilbin 　22engeletin
图 1 　对照品( A)和黄杞叶( B)的 HPLC图谱
Fig11 　HPLC Chromatograms of reference substances
( A) and E1 roxburghiana leaves ( B)
212 　对照品溶液 :取经减压干燥 12 h 的落新妇苷
和黄杞苷对照品适量 ,精密称定 ,加甲醇制成含落新
妇苷 0108 mg/ mL 、黄杞苷 0102 mg/ mL 的混合溶
液 ,即得。
213 　供试品溶液 :取第一批样品粗粉约 0125 g ,精
密称定 ,精密加入甲醇 50 mL ,称定质量 ,超声 (功率
为 500 W ,频率为 40 k Hz) 处理 45 min ,放冷 ,再称
定质量 ,用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,3 000 r/ min
离心 5 min ,取上清液 5 mL ,置 50 mL 量瓶中 ,加甲
醇至刻度 ,摇匀 ,即得。
214 　线性关系考察 :精密称取经减压干燥 12 h 的
落新妇苷对照品适量 ,用甲醇分别制成质量浓度为
41148、82196、41148、82196、41418、82916 μg/ mL
的溶液 ,分别精密吸取上述溶液各 10μL ,进样 ,按
上述色谱条件测定峰面积。以进样质量对峰面积值
进行线性回归 ,得回归方程 Y = 2 816 4761 08 X +
·603· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008206212
作者简介 :曲　佳 (1981 —) ,女 ,药师 ,天津大学药物分析学硕士在读 ,研究方向为药物分析与质量控制。E2mail :qj4599 @sina. com. cn3 通讯作者　寿国香　Tel : (022) 23374076
55 5831 75 , r = 01 999 8。结果表明落新妇苷在
01041 48～81296 μg 与峰面积具有良好的线性
关系。
精密称取经减压干燥 12 h 的落新妇苷对照品
适量 ,用甲醇分别制成质量浓度为21204、41408、
22014、44018、88116μg/ mL 的溶液 ,分别精密吸取
上述溶液各 10μL ,进样 ,按上述色谱条件测定峰面
积。以进样质量对峰面积进行线性回归 ,得回归方
程 Y = 2 430 1781 91 X + 23 6231 34 , r = 01 999 9。
结果表明黄杞苷在01022 04～81816μg 与峰面积具
有良好的线性关系。
215 　重现性试验 :采用第一批样品 ,按供试品制备
方法制备样品共 6 份 ,在上述色谱条件下分别进样
测定 ,计算 ,结果样品中落新妇苷平均质量分数为
8517 mg/ g ,RSD 为 119 % ;黄杞苷平均质量分数为
2018 mg/ g ,RSD 为 116 %。
216 　精密度试验 :取同一份供试品溶液 ,连续进样
6 次 ,以落新妇苷及黄杞苷峰面积为考察对象 ,计算
6 次分析所得落新妇苷与黄杞苷峰面积的 RSD 值
均小于 013 %。
217 　稳定性试验 :取同一供试品溶液分别在 0、4、
8、12、16、20、24 h 进样测定 ,结果落新妇苷峰面积
的 RSD 值为 114 % ,黄杞苷 RSD 值为 116 %。表明
供试品溶液中落新妇苷与黄杞苷在 24 h 内均稳定。
218 　加样回收率试验 :采用第一批样品 ,取其粗粉
约 01125 g ,共 6 份 ,精密称定 ,分别精密加入含落新
妇苷215104μg/ mL 和黄杞苷44108μg/ mL 的对照
品溶液 50 mL ,按供试品制备方法制备样品共 6 份 ,
在上述色谱条件下测定 ,计算回收率。结果落新妇
苷平均回收率为 10116 %( RSD = 018 %) ;黄杞苷为
9811 %( RSD = 114 %) 。
219 　样品测定 :取 4 个不同批次的样品及第一批中
黄杞细枝 ,制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下测
定 ,记录峰面积 ,按外标法计算质量分数。结果见表
1。黄杞细枝中落新妇苷和黄杞苷的量明显低于黄
杞叶中二者的量 ;且不同批次黄杞叶中落新妇苷与
黄杞苷的量比值也不尽相同。
表 1 　不同批次黄杞叶样品测定结果( n = 2)
Table 1 　Determination of E1 rcwburghiana leaves
in various batches ( n = 2)
批　次 落新妇苷/ (mg ·g - 1) 黄杞苷/ (mg ·g - 1)
第 1 批 851 7 2018
第 2 批 391 2 419
第 3 批 521 9 511
第 4 批 861 7 711
　黄杞细枝 201 0 110
3 　讨论
本实验比较了不同提取方式对样品提取效率的
影响 ,结果显示超声提取与回流提取差别不大 ,故采
用操作相对简单的超声提取方法 ;此外 ,还比较了不
同超声提取时间 (30、45、60、90 min) 对提取效率的
影响 ,4 种提取时间所测得的量与时间成正比 ,但 45
min 与 90 min 相差不大 ,故选择 45 min 提取 ,节省
时间。比较了不同提取溶液 (甲醇 ,75 %甲醇 ,50 %
甲醇 ;乙醇 ,75 %乙醇 ,50 %乙醇) 对提取效率的影
响 ,在相同条件下提取 ,甲醇提取所测得的量最高 ,
故选择甲醇作为提取溶剂。
RP2HPLC法测定黄荆子中牡荆脂素 A
唐莹翠1 ,2 ,曾光尧1 3 ,谭健兵1 ,李妍岚1 ,谭桂山1 ,周应军1 3
(11 中南大学药学院 ,湖南 长沙 　410013 ; 21 湖南省医药学校 ,湖南 长沙 　410014)
摘 　要 :目的 　建立黄荆子中抗肿瘤活性成分 62羟基242(42羟基232甲氧基苯基)232羟甲基272甲氧基23 ,42二氢 ( 3R ,
4S )222醛基萘 (牡荆脂素 A , VBE21) 的定量测定方法。方法 　采用反相高效液相色谱法。Kromasil ODS (250
mm ×416 mm ,5μm)色谱柱 ,乙腈2011 %冰醋酸梯度洗脱 (0 min ,15 ∶85 ;10 min ,15 ∶85 ;40 min ,28 ∶72) ,检测波
长为 255 nm ,柱温为 25 ℃,体积流量为 1 mL/ min。结果 　黄荆子中牡荆脂素 A 在该条件下有较好的线性关系。
结论 　测定方法简便、准确 ,建立了黄荆子药材的牡荆脂素 A 的定量测定方法 ,为黄荆子质量控制及综合利用提供
了可靠的依据。
关键词 :黄荆子 ;62羟基242(42羟基232甲氧基苯基)232羟甲基272甲氧基23 ,42二氢 ( 3R , 4S )222醛基萘 ;高效液相色谱
·703·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008205205
作者简介 :唐莹翠 ,女 ,高级讲师 ,中南大学药学院在职研究生 ,从事天然药物研究与开发。3 通讯作者　曾光尧　Tel : (0731) 2650372 　E2mail :zenggy2005 @1261com