全 文 ：3 　讨论
以流动相作溶剂 ,在 200～400 nm 波长测定了
咖啡酸四聚体及其异构体紫外光谱图 ,结果均在
252 nm 处有最大吸收 ,确定 252 nm 为测定波长。
本实验比较了咖啡酸四聚体异构体在甲醇、水
中的稳定性[3 ] ,结果均在 8 h 内稳定 ,而因水价廉易
得 ,故选用水为溶剂。
实验中曾用甲醇2水2甲酸 (29 ∶71 ∶011) 为流
动相 ,结果主峰与邻峰分离不佳。经摸索筛选采用
甲醇20. 5 %磷酸水 (40 ∶60)分离效果理想。
参考文献 :
[ 1 ] 　Robinson W E J , Reinecke M G. Inhibitors of HIV21 replica2
tion t hat inhibit HIV integrase [ J ] . Proc N atl A cai d Sci
US A , 1996 , 61 (5) : 2682270.
[ 2 ] 　Kashiwada Y , Nishizawa M , Yamaagishi T , et al . Anti2
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N at Prod , 1995 , 58 (3) : 3922400.
[ 3 ] 　贺金华 ,买尔旦. HPL C 法测定新疆软紫草中咖啡酸四聚体
的含量[J ] . 新疆医科大学学报 ,2005 ,28 (5) :4292430.
HPLC法测定裸花紫珠片中木犀草素
李 　伟 ,徐向平 ,关 　怀 ,张艳娜 3　
(海南九芝堂药业有限公司 ,海南 海口 　570311)
摘 　要 :目的 　建立 HPL C 法测定裸花紫珠片中木犀草素的方法。方法 　将裸花紫珠片用酸水解。采用 HPLC
法测定。色谱柱为 Eurospher2100 C18 (250 mm ×4 mm , 5μm) ;流动相 :甲醇2水2磷酸 (50 ∶50 ∶012) ;柱温 :室温 ;
检测波长 :350 nm ;体积流量 :110 mL/ min ;进样量 :10μL 。结果 　木犀草素在 01029 4～01147μg 与峰面积呈良好
的线性关系 , r = 01999 8。平均回收率为 10014 % ,RSD 为 1192 % ( n = 6) 。结论 　本方法准确 ,重复性好 ,专属性
高 ,可用于裸花紫珠片的定量控制。
关键词 :裸花紫珠片 ;木犀草素 ;高效液相色谱
中图分类号 :R284. 2 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0420578203
　　裸花紫珠片为裸花紫珠经提取加工制成的单味
药制剂 ,具有消炎、解毒、收敛、止血的功效 ,主要用
于细菌感染引起的炎症 ,急性传染肝炎 ,呼吸道和消
化道出血的治疗。裸花紫珠片原为糖衣片 ,收载于
《中华人民共和国卫生部药品标准》中成药成方制剂
第 6 册 ,缺乏定量控制项。目前有文献报道采用分
光光度法测定裸花紫珠片中总黄酮[1 ] ,但该法干扰
多 ,专属性差。裸花紫珠地上部分中含有木犀草素
苷和木犀草素[2 ] 。因此本实验选择木犀草素为指标
成分 ,对裸花紫珠片中的木犀草素的测定方法进行
了研究 ,以控制裸花紫珠片的质量。
1 　仪器与试药
德国 Knauer 液相色谱仪 ,包括 K—1001 泵、
K—2501 紫外检测器 ; Cary 50 紫外分光光度计 ;
CQ —10 超声波清洗器。
甲醇 (色谱纯) 、磷酸 (分析纯) 、纯化水 ;木犀草
素对照品由中国药品生物制品检定所提供 ,批号
1115202200201 ;裸花紫珠片由海南九芝堂药业有限
公司提供 ,规格为 015 g/ 片。
2 　方法与结果
211 　方法的选择 :经预试验 ,裸花紫珠片可见一个
很小的游离木犀草素峰 ,而裸花紫珠片酸水解物中 ,
与木犀草素对照品相同保留时间处有较大的游离木
犀草素峰 ,可以用酸来水解木犀草素的苷类 ,采用高
效液相色谱法来测定木犀草素 ,间接控制裸花紫珠
片的质量。
212 　色谱条件的选择
21211 　检测波长的选择 :取木犀草素甲醇溶液进行
紫外扫描 ,其最大吸收波长在 350 nm 附近 ,选用
350 nm 作为本品测定的检测波长。
21212 　流动相的选择 :以甲醇和水作流动相 ,磷酸
调 p H 值 ,进行流动相配比试验。甲醇2水的比例依
·875· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
3 收稿日期 :2008207204　　　
作者简介 :李　伟 (1966 —) ,男 (彝族) ,云南永仁县人 ,制药工程师 ,1988 年毕业于上海医科大学药学院 (现复旦大学药学院) 药学专业 ,
主要从事药物制剂生产管理、质量管理和研究。Tel : (0898) 6863160828212 　E2mail :greatleo @21cn. com
次改变为 60 ∶40、55 ∶45、50 ∶50 ,磷酸的比例为
012 不变。当甲醇2水比例相同时色谱峰分离情况
良好 ,因此选择甲醇2水2磷酸 (50 ∶50 ∶012) 为流动
相。结果待测组分木犀草素与其他组分能够完全分
离 ,理论塔板数在 2 000 以上 ,分离效果较好。
21213 　色谱条件 : 色谱柱为 Eurosp her2100 C18
(250 mm ×4 mm , 5 μm) ;流动相 :甲醇2水2磷酸
(50 ∶50 ∶012) ;柱温 :室温 ;检测波长 : 350 nm ;体
积流量 :110 mL/ min ;进样量 :10μL 。理论塔板数
按木犀草素峰计算应不低于 2 000。
213 　样品处理方法的选择
21311 　盐酸甲醇溶液浓度的选择 :取裸花紫珠片
10 片 ,除去膜衣 ,精密称定 ,研细 ,取若干份 ,每份约
012 g ,精密称定 ,置 25 mL 量瓶中 ,分别加 110、
115、210、215 mol/ L 盐酸甲醇 20 mL ,超声 (功率
100 W ,频率 25 k Hz) 30 min ,放冷 ,加相应浓度的盐
酸甲醇溶液至刻度 ,摇匀 ,滤过。精密吸取续滤液
10 mL ,置 50 mL 圆底烧瓶中 , 90 ℃水浴回流 45
min ,放冷 ,转移至 25 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇
匀 ,精密吸取 10μL ,注入液相色谱仪 ,测定 ,结果所
得木犀草素的质量分数分别为 11097 9、11277 2、
11379 3、11397 9 mg/ 片。根据实验结果 ,选择盐酸
甲醇浓度为 215 mol/ L 。
21312 　超声时间的选择 :取裸花紫珠片 10 片 ,除去
膜衣 ,精密称定 ,研细 ,取若干份 ,每份约 012 g ,精密
称定 ,置 25 mL 量瓶中 ,加 215 mol/ L 盐酸甲醇 20
mL ,分别超声 (功率 100W ,频率 25 k Hz) 15、25、30
min ,放冷 ,加 215 mol/ L 盐酸甲醇溶液至刻度 ,摇
匀 ,滤过 ,精密吸取续滤液 10 mL ,置 50 mL 圆底烧
瓶中 ,90 ℃水浴回流 45 min ,放冷 ,转移至 25 mL
量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀。精密吸取 10μL ,注
入液相色谱仪 ,测定 ,结果所得木犀草素的质量分数
分别为 11261 8、11296 8、11321 8 mg/ 片。根据实
验结果 ,选择超声处理时间为 30 min。
21313 　水解时间的选择 :取裸花紫珠片 10 片 ,除去
膜衣 ,精密称定 ,研细 ,取若干份 ,每份约 012 g ,精密
称定 ,置 25 mL 量瓶中 ,加 215 mol/ L 盐酸甲醇 20
mL ,超声 (功率 100 W ,频率 25 k Hz) 30 min ,放冷 ,
加 215 mol/ L 盐酸甲醇溶液至刻度 ,摇匀 ,滤过。精
密吸取续滤液 10 mL ,置 50 mL 圆底烧瓶中 ,90 ℃
水浴分别回流 15、30、45、60 min ,放冷 ,转移至 25
mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,精密吸取 10μL ,
注入液相色谱仪 ,测定 ,所得木犀草素的质量分数分
别为 11097 9、11 277 2、11379 3、11397 9 mg/ 片。根
据实验结果 ,选择回流提取时间为 45 min。
214 　溶液的制备
21411 　对照品溶液的制备 :取木犀草素对照品适
量 ,精密称定 ,加甲醇制成 10μg/ mL 的溶液 ,即得。
21412 　供试品溶液的制备 :取样品 10 片 ,除去膜
衣 ,精密称定 ,研细 ,取约 012 g ,精密称定 ,置 25 mL
量瓶中 ,加 215 mol/ L 盐酸甲醇溶液 20 mL ,超声
(功率 100 W ,频率 25 k Hz) 30 min ,放冷 ,加 215
mol/ L 盐酸甲醇溶液至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,精密吸取
续滤液 10 mL ,置圆底烧瓶中 , 90 ℃水浴回流 45
min ,放冷 ,转移至 25 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇
匀 ,即得。
215 　空白试验 :按处方中裸花紫珠干浸膏与辅料的
比例 ,配制不含裸花紫珠的空白制剂 ,按供试品溶液
的制备方法制备空白溶液。按以上色谱条件取对照
品、供试品和空白对照进样分析 ,色谱图见图 1。
t/ h3 2木犀草素3 2luteolin
图 1 　木犀草素对照品( A) 、裸花紫珠片( B)和空白
制剂( C)的 HPLC图谱
Fig. 1 　HPLC Chromatograms of luteolin reference substance
( A) , Luohua Zizhu Tablets ( B) , negative sample ( C)
216 　线性关系考察 :称取木犀草素对照品约 15
mg ,精密称定 ,置 50 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀
释至刻度 ,摇匀。精密吸取 1、2、3、4、5 mL 分别置
100 mL 棕色量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,分别
精密吸取 10μL ,注入高效液相色谱仪 ,记录峰面
积。以质量浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标
准曲线 ,其回归方程为 Y = 11095 278 783 X -
01079 937 09 , r = 01999 8。结果表明木犀草素的
进样量在 01029 4～01147μg 线性关系良好。
217 　稳定性试验 :精密吸取批号 700040 裸花紫珠
片供试品溶液 10μL ,分别于配制后 0、2、4、6、8、10、
12 h ,依法测定木犀草素的峰面积值 ,求得 RSD 为
·975·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
1144 %。表明供试品溶液在室温用量瓶密闭放置 ,
在 12 h 内基本稳定。
218 　精密度试验 :精密吸取批号 700040 裸花紫珠
片供试品溶液 ,进样 10μL ,重复进样 6 次 ,测定木
犀草素的峰面积值 ,求得 RSD 为 1134 %。
219 　重现性试验 :取批号 700700 裸花紫珠片 6 份 ,
制备供试品溶液 , 测定质量分数 , 求得 RSD 为
1193 %。
2110 　回收率试验 :取批号 700700 裸花紫珠片 (含
木犀草素 21843 1 mg/ g) 012 g ,分别称取 6 份 ,精密
称定 ,分别精密加入 0151 mg/ mL 木犀草素对照品
溶液 1 mL ,制备供试品溶液 ,测定 ,计算 ,结果平均
加样回收率为 10013 % , RSD 为 1192 %。
2111 　样品测定 :取 3 批样品 ,依法制备供试品溶
液。精密吸取供试品溶液和木犀草素对照品溶液
10μL ,注入液相色谱仪 ,依照上述色谱条件测定峰
面积 ,按标准曲线法计算木犀草素的质量分数 ,结果
见表 1。
表 1 　裸花紫珠片中木犀草素的测定结果( n = 3)
Table 1 　Determination of luteolin in Luohua
Zizhu Tablets ( n = 3)
批号 木犀草素/ (mg ·片 - 1)
700060 1. 466 7
700070 1. 527 0
700080 1. 578 6
3 　讨论
裸花紫珠片糖衣片的原质量标准均没有定量测
定项。本实验选择裸花紫珠中的有效成分之一木犀
草素作为指标性成分 ,采用 HPL C 法测定其质量分
数 ,从而控制裸花紫珠片的质量 ,为裸花紫珠片的质
量控制提供了一个可行的测定方法。同时该法还可
以供制定裸花紫珠药材质量标准时参考。
参考文献 :
[ 1 ] 　宋永强 ,谌乐刚. 分光光度法测定裸花紫珠片中总黄酮含量
[J ] . 海南医学 ,2005 ,16 (6) :152.
[2 ] 　王祝年 ,韩　壮 ,崔海滨 ,等. 裸花紫珠的化学成分[J ] . 热带亚
热带植物学报 ,2007 ,15 (04) :3592362.
RP2HPLC法测定麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱
祝 　婧 ,钟凌云 3 ,龚千锋 ,张的凤
(江西中医学院药学院 ,江西 南昌 　330004)
摘 　要 :目的 　确定盐酸麻黄碱测定方法 ,以检测麻黄不同炮制品中麻黄碱成分的变化。方法 　采用 RP2HPLC
法。色谱柱为 Dikma Diamonsil C18 (250 mm ×416 mm , 5μm) ;流动相 :乙腈20. 1 %磷酸 (含 011 %三乙胺) 水溶液
(4 ∶96) ;体积流量 : 110 mL/ min ;检测波长 : 210 nm ;柱温 : 30 ℃。结果 　盐酸麻黄碱线性回归方程为 Y =
291939 X + 014095 , r = 0. 999 5 ,盐酸麻黄碱进样量在 0106～ 118 μg 与峰面积线性良好。加样回收率为
103178 % ,RSD 为 1189 %。麻黄碱的量为生品 > 沸水泡麻黄 > 蜜炙麻黄 > 炒麻黄。结论 　建立的高效液相色谱测
定盐酸麻黄碱方法提取步骤简便 ,重现性高 ,可以作为盐酸麻黄碱测定方法。
关键词 :麻黄 ;炮制 ;盐酸麻黄碱 ;高效液相色谱
中图分类号 :R286. 02 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0420580203
　　麻黄为麻黄科多年生草本状小灌木植物草麻黄
Ep hed ra si nica Stapf 、中 麻 黄 E. i ntermedi a
Schrenk et C. A. Mey. 或木贼麻黄 E. equiset i na
Bge. 的干燥草质茎 ,具有发汗散寒、宣肺平喘、利水
消肿等功效。麻黄中含有生物碱、黄酮、黄烷、鞣质、
挥发油、有机酸、多糖等多种成分 ,目前对其药理毒
理作用研究较明确的只有生物碱类 ,其中盐酸麻黄
碱被认为是麻黄宣肺平喘的药效成分之一。麻黄通
过炮制可以缓和其发汗作用 ,并增强止咳平喘功效 ,
目前临床使用和文献记载麻黄的炮制方法主要有蜜
炙法、炒黄法及沸水泡法。《中国药典》2005 年版对
麻黄药材以盐酸麻黄碱作为质控指标 ,但样品的前
·085· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
3 收稿日期 :2008207217　　　
基金项目 :国家“十一五”科技攻关项目 (2006BAI09B06208205)
作者简介 :祝　婧 (1985 —) ,女 ,江西中医学院 2006 级硕士研究生。3 通讯作者　钟凌云　Tel : (0791) 7118995 　E2mail : ly1638163 @163. com