全 文 ：HPLC 法测定短柱肖菝葜药材中丁香酸葡萄糖苷
秦文杰1 ,2 ,陈艾琨1 ,王钢力2 ,林瑞超2 3
(11 中药复方新药开发国家工程研究中心 ,北京 　100075 ; 21 中国药品生物制品检定所 ,北京 　100050)
摘 　要 :目的 　建立 HPLC 法测定短柱肖菝葜药材中丁香酸葡萄糖苷量的方法。方法 　采用 C18色谱柱。乙腈2
015 % 冰醋酸溶液 (5 ∶95) 为流动相 ;体积流量 1 mL/ min ;柱温 25 ℃;检测波长 255 nm。结果 　丁香酸葡萄糖苷
在 01049 4～01592 8μg 与峰面积积分值呈良好的线性关系。平均回收率为 100107 % ;RSD 为 1174 %。结论 　该
法简便、准确 ,可作为短柱肖菝葜药材的定量测定方法。
关键词 :短柱肖菝葜 ; 高效液相色谱法 ; 丁香酸葡萄糖苷
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821320202
　　短柱肖菝葜为百合科肖菝葜属植物 ,具有清热、
除湿、解毒之功效。用于湿热淋浊 ,带下 ,痈肿 ,瘰
疬 ,梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛 ,筋骨疼痛。民间
习称“白土苓”[ 1 ] ,与《中国药典》收载的土茯苓不仅
药名相近 ,且历代本草常以同药名土茯苓记载。目
前 ,土茯苓及其所属的菝葜属植物的化学成分研究
较多 ,但肖菝葜属植物的基础研究非常薄弱[2～3 ] ,短
柱肖菝葜的化学成分、质量控制等研究未见报道。
经初步活性筛选试验结果表明 ,短柱肖菝葜具有较
好的抗肿瘤作用 ,所以选择短柱肖菝葜为研究对象 ,
从化学成分、药理活性和质量控制等方面对其进行
了较为深入的研究[4 ,5 ] 。实验报道了短柱肖菝葜中
丁香酸葡萄糖苷的定量测定方法。
1 　仪器与试药
　　高效液相色谱仪 (日本岛津 CLASS2V P 10
AV P) , Hydro2RP80A C18 色谱柱 (250 mm ×4. 6
mm , 4μm , Phenomenex 公司) ,试剂 :乙腈 (色谱
纯) ,其他试剂均为分析纯 ,纯净水 (自制) 。
丁香酸葡萄糖苷对照品 (为从短柱肖菝葜中提
取分离制备纯化所得 ,并经理化分析和波谱鉴定 ,
H PL C 面积归一化法计算 ,质量分数大于 98 %) 。
短柱肖菝葜药材分别于 2005 年 6 月、2005 年 7 月、
2006 年 8 月、2006 年 10 月采集于贵州遵义金顶山
镇莲花池片区黄中村印山 (按采集时间先后 ,批号
分别为 1～4) ,经张继副主任药师鉴定为短柱肖菝
葜 Heterosmi l a x y unnanensis Gagnep . 的干燥根
茎 ,标本存于中国药品生物制品检定所标本馆。
2 　方法与结果
211 　色谱条件与系统适用性试验 : Hydro2RP80A
C18色谱柱 (250 mm ×4. 6 mm , 4 μm) ;以乙腈2
015 % 冰醋酸溶液 (5 ∶95) 为流动相 ;检测波长 :
255 nm ;体积流量 :110 mL/ min ;柱温 :25 ℃;进样
量 10μL 。理论板数按丁香酸葡萄糖苷计算 ,应不
低于 3 000。色谱图见图 1。
图 1 　丁香酸葡萄糖苷 ( A) 和短柱肖菝葜
样品 ( B) 的 HPLC 图谱
Fig. 1 　HPLC Chromatogram of glucosyringic acid ( A)
and sample of H. yunnanensis ( B)
212 　对照品溶液的制备 :精密称取丁香酸葡萄糖苷
对照品适量 ,加甲醇制成 20μg/ mL 的对照品溶液 ,
即得。
213 　供试品溶液的制备 :取短柱肖菝葜药材粉末 4
g ,精密称定 ,置索氏提取器中 ,加甲醇适量 ,加热回
流至提取液无色 ,用甲醇少量洗涤容器 ,洗液并入提
取液 ,蒸发浓缩并转移至 10 mL 量瓶中 ,定容 ,
即得。
214 　线性关系考察 :精密称取丁香酸葡萄糖苷对照
品 ,加甲醇溶解 ,制成 9818μg/ mL 的对照品溶液 ,
·0231· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008210212　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :北京市科技计划项目 (课题编号 : D0206001043491)
作者简介 :秦文杰 (1971 —) ,女 ,博士 ,主要研究方向为中药化学成分及质量控制。
Tel : (010) 87632624 　E2mail : zzwenjieqin @yahoo. com. cn3 通讯作者　林瑞超 ,男 ,教授 ,博士生导师。Tel : (010) 67095307 　E2mail : Linrch307 @sina. com
分别精密吸取 015、1、2、3、4、6 mL 置 10 mL 量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,得质量浓度分别为
4194、9188、19176、29124、39152、59128 μg/ mL 的
对照品溶液。分别进样 10μL ,按上述色谱条件 ,测
定丁香酸葡萄糖苷峰面积积分值 ,结果表明 ,在
4194～59128μg/ mL 丁香酸葡萄糖苷的质量浓度
与峰面积积分值呈良好的线性关系 ,回归方程为
Y = 19 518 X - 42 355 , r = 01999 7。
215 　稳定性试验 :照上述色谱条件 ,每隔 2 h 时进
样一次 ,进样 10μL ,记录峰面积 ,结果表明 ,供试品
溶液在 8 h 内基本稳定 ,峰面积 RSD 为 0112 %。
216 　精密度试验 :按 212 方法制备对照品溶液 ,重
复进样测定 5 次 ,记录峰面积 ,结果表明峰面积
RSD 为 1105 %。
217 　重现性试验 :取同一批样品 (批号 :1) ,按 213
方法平行制备 5 份供试液 ,进样 10μL ,分别进行定
量测定 ,5 份供试液质量分数 RSD 为 1164 %。
218 　加样回收率试验 :精密取已测定的同一批样品
2 g ,共 6 份 (批号 :1 ,质量分数 38191μg/ g) ,分别
精密加入丁香酸葡萄糖苷对照品溶液 (9818 μg/
mL) 1 mL ,按 213 方法制备供试品溶液 ,进样 10
μL ,测定 ,计算回收率。结果丁香酸葡萄糖苷的平
均回收率为 100107 % ,RSD 为 1174 %。
219 　样品测定 :按 213 方法制备供试品溶液 ,取供
试品溶液和对照品溶液 ,分别进样 ,测定 4 批药材样
品中丁香酸葡萄糖苷的量 ,测定结果见表 1。
表 1 　样品中丁香酸葡萄糖苷测定结果
Table 1 　Determination of glucosyringic acid in samples
批号 丁香酸葡萄糖苷/ (μg ·g - 1 ) 批号 丁香酸葡萄糖苷/ (μg ·g - 1 )
1 38191 2 33141
3 29194 4 22173
3 　讨论
311 　测定成分的选择 :化学成分系统提取分离结果
表明 ,短柱肖菝葜中含有许多酚苷类成分 ,其中丁香
酸葡萄糖苷的得量相对比较大 ,且单体化合物体外
抗肿瘤细胞筛选结果表明 ,包括丁香酸葡萄糖苷在
内的酚苷类化合物对人白血病细胞 ( U2937) 有一
定的抑制作用 ,因此选择丁香酸葡萄糖苷作为指标
性成分 ,采用 RP2H PL C 法对其进行了定量分析。
312 　检测波长的选择 :精密称取丁香酸葡萄糖苷对
照品 3 mg ,置 25 mL 量瓶中 ,加甲醇适量 ,超声使
溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ;精密吸取 1 mL 置 10
mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,以甲醇为空
白 ,照紫外2可见分光光度法 (《中国药典》2005 年版
一部附录 V A) ,在 200～400 nm 波长进行光谱扫
描 ,根据扫描结果确定本品测定波长为 255 nm。
参考文献 :
[1 ] 　肖培根1 新编中药志 [ M ]1 北京 :化学工业出版社 , 20021
[2 ] 　Chen C T , Chang S M1 Studies in nature product s (7) . A
study on t he constituent s of Heterosmi lax j aponica Kunt h
[J ]1 B ull I nst Chem , 1976 , 23 : 91
[3 ] 　于江泳 , 张思巨 , 刘　丽 , 肖菝葜化学成分的研究1 [J ]1 中
国药学杂志 , 2005 , 40 (1) : 192201
[4 ] 　秦文杰 , 王钢力 , 林瑞超1 短柱肖菝葜化学成分的研究 [J ]1
中药材 , 2007 , 30 (8) : 95929611
[5 ] 　秦文杰 , 王钢力 , 林瑞超 1 短柱肖菝葜化学成分的研究 Ⅱ
[J ]1 中草药 , 2007 , 38 (10) : 1466214681
HPLC 法测定苦木药材中铁屎米酮生物碱
吕武清 ,黄卫东 ,宋友昕 3
(江西省中医药研究院 , 江西 南昌 　330077)
摘 　要 :目的 　建立苦木药材中 42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 ,52二甲氧基2铁屎米酮 HPLC 测定方法 ,为苦木质量
分析和评价提供依据。方法 　用 Agilent Hypersil C18色谱柱 ,以乙腈2011 % 磷酸 (35 ∶65) 为流动相 ,210 nm 为
检测波长。结果 　42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 , 52二甲氧基2铁屎米酮与其他生物碱获得较好分离 ,42甲氧基252羟
基2铁屎米酮质量浓度在 1516～156μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系 ( r = 01999 7) ,加样回收率为 98117 % ,
RSD = 11 98 % ;4 , 52二甲氧基2铁屎米酮在 3145～5512μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系 ( r = 01999 8) ,加样回
收率为 98140 % ,RSD = 1190 %。结论 　方法简便、稳定、可靠 ,为控制和评价苦木质量提供了科学依据。
关键词 :苦木 ; HPLC ; 铁屎米酮生物碱 ; 42甲氧基252羟基2铁屎米酮 ; 4 , 52二甲氧基2铁屎米酮
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821321203
·1231·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008211207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家“十一五”支撑计划项目 (2006BAI06A01201)
作者简介 :吕武清 (1957 —) ,男 ,硕士研究生导师 ,研究员 ,从事中药质量控制技术研究及新药开发。
Tel : (0791) 8512906 　E2mail : jxzyyjs @163. com