全 文 ：洛糖醛酸的 pK a= 315, 甘露糖醛酸的 pK a= 410。
所以, 当 pH 112 时壳聚糖与氢离子结合成为聚阳
离子, 开始溶解, 海藻酸与钙离子交联解离和H + 结
合但不溶解。当 pH 618 时海藻酸电离成为海藻酸
根并开始溶解, 微囊解体。总之, 在 pH 112 的释放
介质中外层的壳聚糖质子化并溶解, 部分药物随之
溶出, 但是此层中的药物的量低。在pH 618 的释放
介质中, 中间层的壳聚糖不溶, 形成网状膜骨架结
构, 海藻酸及其钙盐透过膜慢慢渗出溶解, 同时药物
也随之渗出, 从而达到脉冲释放的效果。
　　当微囊在体内从胃部向小肠转移时, 随 pH 值
的变化, 药物释放将呈现脉冲型释放特征, 其脉冲释
药时滞为胃内的滞留时间。但由于此时滞时间太短,
壳聚糖2海藻酸钠微囊作为脉冲给药系统并不完善。
由于时滞是脉冲技术的关键, 如果制剂在胃肠道不
能有效地滞留, 在未发挥作用前就达到小肠远端或
被排出体外, 则不能达到预期的治疗目的, 而通过向
微囊中加入起泡剂, 则可以使制剂漂浮于胃液中, 延
长胃排空时间。同时因为时滞时间是由微囊在胃肠
道中的漂浮时间决定的, 因此可以通过改变起泡剂
的用量来控制时滞时间。本研究中对该制剂进行优
化设计, 通过在微囊中加入起泡剂制成胃内漂浮系
统来调整释药时滞, 达到延长时滞的目的, 经优化后
的微囊的释药时滞可达到 6 h。
　　脉冲给药系统是基于时辰药理学的理论, 以制
剂手段控制药物释放, 配合生理节律的变化, 达到最
佳疗效的智能化给药系统。本实验采用芦丁作为模
型药物, 制备漂浮型的脉冲给药系统, 取得了理想的
效果, 对脉冲释药系统应用于中药, 实现中药制剂现
代化具有一定的意义。
参考文献:
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HPLC 法测定络通胶囊中绿原酸、阿魏酸、甘草苷、
甘草素、肉桂酸和哈巴俄苷①
赵晓莉, 陈晓燕, 狄留庆3 , 吴　皓
(南京中医药大学中医药研究院, 江苏 南京　210029)
摘　要: 目的　建立H PL C 双波长法同时测定络通胶囊中绿原酸、阿魏酸、甘草苷、甘草素、肉桂酸、哈巴俄苷 6 个
成分的方法。方法　采用 YM C2C18柱, 以乙腈2015% 磷酸水为流动相, 梯度洗脱, 双波长检测 (Κ1= 276 nm , Κ2= 327
nm ) , 体积流量为 110 mL öm in, 柱温 30 ℃。结果　6 个成分均能达到基线分离, 各成分的平均回收率在 9411%～
9818%。结论　本检测方法简便、准确、重现性好, 可作为络通胶囊质量控制的方法。
关键词: 络通胶囊; 绿原酸; 阿魏酸; 甘草苷; 甘草素; 肉桂酸; 哈巴俄苷; 高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0212- 04
　　络通胶囊是由金银花、当归、玄参、甘草等组成
的复方制剂, 具有清热养阴、活血化瘀的功效, 临床
用于血栓闭塞性脉管炎、脑血栓形成及其后遗症等
症的治疗[1 ]。目前对其质量控制主要采用分别测定
·212· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007206230
基金项目: 国家科技部 863 计划资助项目 (2003AA 2Z3247) ; 江苏省自然科学基金资助项目 (BK2005150)
作者简介: 赵晓莉 (1976—) , 女, 江苏南京人, 实验师, 博士, 主要从事中药药剂学及中药制剂分析研究。
T el: (025) 86798226　E2m ail: x lee- zhao@ 1631com3 通讯作者　狄留庆
其中黄芪甲苷、甘草苷和甘草酸。本实验参考相关文
献报道[2, 3 ] , 建立了以 H PL C 双波长法一次进样同
时检测络通胶囊中绿原酸、阿魏酸、甘草苷、甘草素、
肉桂酸、哈巴俄苷 6 个成分的方法, 所测 6 个成分的
色谱峰与相邻色谱峰均能得到良好的分离, 因此本
法可以更加全面、有效地控制本品的质量。
1　仪器与试药
　　A gilen t1100 液相色谱仪 (美国A gilen t 公司) ;
BP211D 型电子分析天平 (德国 Satro riu s 公司) ;
KQ —250 型超声波清洗器 (昆山超声仪器有限
公司)。
　　乙腈 (美国 T edia 公司, 色谱纯) ; 重蒸去离子水
(实验室制备) ; 乙醇 (上海化学试剂有限公司, 分析
纯 ) ; 磷酸 (上海化学试剂有限公司, 分析纯) ; 甲醇
(上海化学试剂有限公司, 分析纯)。
　　金银花为忍冬科植物忍冬L on icera jap on ica
T hunb1 干燥花蕾或带初开的花, 当归为伞形科植
物当归A ng elica sinensis (O liv1) D iels 的干燥根,
玄参为玄参科植物玄参 S crop hu la ria n ingp oensis
H em sl1 的 干 燥 根, 甘 草 为 豆 科 植 物 甘 草
C ly cy rrh iz a u ra lensis F isch1 干燥根及根茎。以上药
材均购自江苏省药材公司, 由本校中药鉴定教研室
吴德康教授鉴定。
　　绿原酸 (批号 1107532200212)、阿魏酸 (批号
077329910)、甘草苷 (批号 1116102200604)、肉桂酸
(批号 078629801) 对照品均由中国药品生物制品检
定所提供, 甘草素对照品 (自制, 质量分数为 9915%
以上) , 哈巴俄苷对照品 (Ch rom adex1 Inc1 公司, 批
号 08056)。络通胶囊由本院自制。
2　方法与结果
211　色谱条件与系统实用性试验: 色谱柱为 YM C
Pack OD S 柱 (250 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: A
(乙腈) 2B (015% 磷酸水溶液) , 梯度洗脱: 0～ 10 m in
(B: 90% → 86% ) , 10～ 18 m in (B: 86% → 84% ) ,
18～ 30 m in (B: 84% ) , 30～ 60 m in (B: 84% →70% ) ,
60～ 75 m in (B: 70% →40% ) , 75～ 78 m in (B: 40% ) ,
78～ 82m in (B: 40% →90% ) ; 体积流量: 110 mL ö
m in; 双波长检测, Κ1= 276 nm (检测甘草苷、甘草素、
肉桂酸、哈巴俄苷) , Κ2= 327 nm (检测绿原酸、阿魏
酸) ; 柱温: 30 ℃; 进样量: 10 ΛL。理论塔板数按绿原
酸计算不低于 4 000, 按甘草苷计算不低于 3 000, 6
个成分与相邻色谱峰的分离度均大于 115。
212　供试品溶液的制备: 取装量差异项下的络通胶囊
内容物, 混匀, 研细, 取 015 g, 精密称定, 置 50 mL 具
塞锥形瓶中, 精密加入 50% 甲醇 50 mL , 称定质量, 超
声处理 30 m in, 冷却后称定质量, 用 50% 甲醇补足减
失的质量, 摇匀, 0145 Λm 微孔滤膜滤过, 即得。
213　对照品溶液的制备: 精密称取绿原酸、阿魏酸、
甘草苷、甘草素、肉桂酸、哈巴俄苷对照品各适量, 置
50 mL 量瓶中, 加乙腈稀释至刻度, 摇匀, 即得含绿
原酸 268 ΛgömL、阿魏酸 17112 ΛgömL、甘草苷 502ΛgömL、甘草素 6213 ΛgömL、肉桂酸 6010 ΛgömL、
哈巴俄苷 8116 ΛgömL 的混合对照品溶液。
214　阴性供试品溶液的制备: 绿原酸、阿魏酸、甘草
苷、甘草素、肉桂酸、哈巴俄苷分别来源于金银花、当
归、甘草、玄参 4 味药材, 按络通胶囊的生产工艺制
备缺金银花、当归、玄参、甘草的阴性制剂, 并按照供
试品溶液的制备方法制备各阴性供试品溶液。
215　方法学考察
21511　空白干扰试验: 取阴性供试品溶液进样 10ΛL , 测定, 得H PL C 图谱, 见图 1、2。结果阴性制剂对
所测组分无干扰。
21512　线性关系考察: 分别精密吸取混合对照品溶
液 210、410、610、810、1010 mL 各置 10 mL 量瓶中,
töm in
12绿原酸　22阿魏酸　32甘草苷　42甘草素　52肉桂酸　62哈巴俄苷
12ch lo rogen ic acid　22feru lic acid　32liqu irit in　42liqu irit igen in　52cin inam ic acid　62harpago side
图 1　混合对照品 (A)、络通胶囊 (B)、缺玄参的阴性制剂 (C)和缺甘草的阴性制剂 (D )在 276 nm 处 HPLC 色谱图
F ig11　HPLC Chromatogram of reference substances (A) , L uotong Capsula (B) , negative sample without Rad ix
Scrop hu la r iae (C) , and negative sample without Rad ix G lycyr rh izae (D ) at 276 nm
·312·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
töm in
12绿原酸　22阿魏酸
12ch lo rogen ic acid　22feru lic acid
图 2　混合对照品 (A)、络通胶囊 (B)、缺金银花的阴性 (C)和缺当归的阴性 (D )在 327 nm 处 HPLC 色谱图
F ig12　HPLC Chromatogram of reference substances (A) , L uotong Capsula (B) , negative sample lack ing
without F los L on icerae (C) , and negative sample without Rad ix A ngelicae S inens is (D ) at 327 nm
加乙腈稀释至刻度, 摇匀。各取 10 ΛL 进样, 测定峰
面积值。以质量浓度对峰面积平均值作图, 结果经回
归分析, 得 6 个成分的回归方程、相关系数及线性范
围 (表 1)。
表 1　各成分的回归方程和相关系数
Table 1　Regression equation and correction
coeff ic ien ts of componen ts
组　分 回归方程 r
线性范围ö
(m g·mL - 1)
绿原酸　 Y = 271734 C - 136116 01999 9 5316～ 268
阿魏酸　 Y = 451324 C - 92158 01999 8 3412～ 17112
甘草苷　 Y = 161500 C - 184139 01999 7 10014～ 502
甘草素　 Y = 341395 C - 1197 01999 7 1215～ 6213
肉桂酸　 Y = 891432 C - 5139 01999 7 1210～ 6010
哈巴俄苷 Y = 371763 C - 3146 01999 7 1613～ 8116
21513　精密度试验: 精密吸取混合对照品溶液 610
mL 于 10 mL 量瓶中, 加乙腈稀释至刻度, 摇匀。取
10 ΛL 进样, 测定各成分的峰面积, 重复 6 次, 分别
计算其R SD , 结果绿原酸、阿魏酸、甘草苷、甘草素、
肉桂酸和哈巴俄苷的R SD 分别为 0174%、0191%、
1103%、1121%、1107%、1141%。
21514　重现性试验: 取批号为 051016 的样品 6 份,
分别制备供试品溶液, 各取 10 ΛL 进样, 测定峰面
积, 计算各成分的质量分数和 R SD , 结果绿原酸:
121270 m gög、1167% ; 阿 魏 酸: 21978 m gög、
1169% ; 甘草苷: 271242 m gög、1118% ; 甘草素:
21394 m gög、0193% , 肉桂酸: 01745 m gög、1110% ;
巴俄苷: 11853 m gög、1119%。
21515　稳定性试验: 取批号为 051016 的样品, 制备
供试品溶液, 分别于 0、2、4、6、8、10 h 各取 10 ΛL 进
样测定各成分的峰面积, 分别计算R SD , 结果绿原
酸 2111%、阿魏酸 1189%、甘草苷 1121%、甘草素
1128%、肉桂酸 1154%、哈巴俄苷 1171% , 表明供试
品溶液在室温条件下 10 h 内稳定。
21516　回收率试验: 取批号为 051016 的络通胶囊
内容物, 混匀, 研细, 取 0125 g, 精密称定, 置 50 mL
具塞锥形瓶中, 加入含绿原酸 115 m gömL、阿魏酸
014 m gömL、甘草苷 314 m gömL、甘草素 013 m gö
mL、肉桂酸 011 m gömL、哈巴俄苷 0125 m gömL 的
混合对照品溶液 2 mL , 制备供试品溶液, 取 10 ΛL
进样, 测定, 计算回收率。平行 6 份。结果得到各成
分的平均回收率和 R SD , 绿原酸: 9411%、3152% ;
阿魏酸: 9518%、2163% ; 甘草苷: 9818%、2104% ; 甘
草素: 9713%、2137% ; 肉桂酸: 9517%、2188% ; 哈巴
俄苷: 9616%、2116% 。
21517　样品的测定 : 各取 3 个批号的装量差异项
下的络通胶囊内容物, 制备供试品溶液, 每批平行 3
份, 每份进样 2 次, 以回归方程计算各成分的质量分
数, 结果见表 2。
表 2　络通胶囊中有效成分的测定结果 (n= 3)
Table 2　D eterm ination of active componen ts in L uotong Capsula (n= 3)
批　号
绿原酸
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
阿魏酸
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
甘草苷
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
甘草素
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
肉桂酸
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
哈巴俄苷
质量分数ö
(m g·g- 1)
RSD ö
%
051006 111334 0190 31168 2151 281301 1177 21649 2134 01820 2112 21137 2115
051016 121340 1148 21963 1114 271263 2178 21408 2137 01729 1154 11869 2162
051026 111790 1176 21919 2183 271212 2177 21656 2164 01727 0186 21032 0135
·412· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
3　讨论
络通胶囊是一复方中药制剂, 所含成分复杂, 本
研究曾选用不同溶剂系统, 如乙腈2水、甲醇2水、乙
腈2011% 磷酸水、乙腈2015% 磷酸水作为流动相进
行试验。首先进行的是等度洗脱, 但所需检测的几个
峰的分离度不理想, 故改用梯度洗脱。经多次试验,
反复调整洗脱程序, 最终以本研究中的梯度洗脱程
序来分离样品, 所检测的 6 个峰均能达到基线
分离。　　　
通过分别对本研究中的 6 个对照品溶液的紫外
波长扫描, 发现绿原酸、阿魏酸、甘草苷、甘草素、肉
桂酸、哈巴俄苷的最大吸收波长分别为 327、320、
276、276、271、278 nm , 因此本研究采用双波长检
测, 于 276 nm 波长处检测甘草苷、甘草素、肉桂酸、
哈巴俄苷; 于 327 nm 波长处检测绿原酸和阿魏酸。
在此条件下, 所需检测的各峰分离度及峰形均佳, 灵
敏度也较高。
为了尽可能全面反映药材的化学信息, 实验对
供试品溶液的制备方法进行考察。选择甲醇、75% 甲
醇、50% 甲醇、25% 甲醇、水进行提取, 结果 50% 甲
醇提取的样品信息量较多, 峰面积较大; 选择回流、
超声提取方法进行了比较, 结果超声法所得峰面积
为回流法的 95% 以上, 考虑到操作的方便性, 确定
选择超声法; 选择不同超声提取次数, 结果 1 次超声
30 m in 即能提取完全。
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正交试验法研究柴胡挥发油的提取工艺①
李秀琴, 孙秀燕, 陈晓辉, 王　玺, 毕开顺3
(沈阳药科大学药学院, 辽宁 沈阳　110016)
摘　要: 目的　优化柴胡挥发油提取工艺。方法　采用正交设计对柴胡挥发油的提取方法进行优化, 以不同工艺所
提挥发油的吸光度以及其中己醛、庚醛和 2, 42癸二烯醛的量为监测指标。结果　最佳工艺为用 pH 1, 011 gömL
N aC l 水溶液浸泡 10 h, 提取时间为 6 h。结论　该方法可用于确定柴胡挥发油的提取条件。
关键词: 柴胡; 挥发油; 己醛; 庚醛; 2, 42癸二烯醛; 正交试验
中图分类号: R 28412; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0215- 04
　　柴胡具有疏肝解郁、和解表里, 升举阳气之功
效。其主要有效成分为挥发油、皂苷以及多糖。以水
蒸气蒸馏法制成挥发油注射液, 临床用于感冒、流行
性感冒及疟疾等症疗效甚好。多年来柴胡挥发油的
提取工艺都是仅以其蒸馏液的紫外吸光度值为监测
指标对其工艺进行优化[1 ] , 而忽略了对其内在有效
成分的监控。本课题组通过 GC2M S 法分析柴胡挥
发油, 发现其含有大量脂肪族的醛类物质如己醛、庚
醛、辛醛、壬烯醛、2, 42癸二烯醛等。挥发油中低分子
醛酮为解热的有效成分[2 ] , 故本研究采用正交试验
法, 以挥发油吸光度值和己醛、庚醛、2, 42癸二烯醛
的量为指标, 考察了不同浸泡时间、水的 pH 值、
N aC l浓度及不同提取时间对柴胡挥发油质量的影
响, 更加科学的对柴胡挥发油的提取工艺进行优化。
1　仪器与药品
　　岛津 GC2010 毛细管气相色谱仪, 氢火焰离子化
检测器 (F ID ) , 岛津UV 265FW 紫外分光光度仪; 己
醛、庚醛对照品 (质量浓度≥9910% )购于天津光复精
细化工研究所, 2, 42癸二烯醛对照品 (反式, 质量浓
度≥9910% ) 购于北京百灵威化学技术有限公司; 柴
胡药材由沈阳药科大学江泽荣教授进行形态学鉴定,
为辽宁产北柴胡B up leu rum ch inense DC1。
2　方法与结果
211　因素水平的确定: 对浸泡时间 (A )、浸泡用水
的酸度 (B )和N aC l 浓度 (C)、提取时间 (D ) 4 个因素
进行考察, 选用L 9 (34) 正交试验表进行重复试验
·512·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007205215
作者简介: 李秀琴 (1979—) , 女, 山西人, 博士, 主要研究方向为中药质量控制方法。3 通讯作者　毕开顺　T el: (024) 2384371123380　E2m ail: b ikaishun@yahoo. com