全 文 ：·1024· 中草芮 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
此保留时间无干扰(图1)。
A
—怛—o一
0 5
√虻L
*一缆午儿削
。一germacrone
图1枕牛儿酮对照品(A)、清肌瘤胶囊(B)和阴性
对照(C)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsf er acronereference
substance(A)，QingjiliuCapsules(B)，and
negativesample(C)
2．6 线性关系考察：精密吸取上述栊牛儿酮对照品
贮备液(质量浓度为760弘g／mL)，用乙醇稀释含栊
牛儿酮76弘g／mL，精密吸取稀释液一定量，用流动
相稀释得到1．9、3．8、7．6、15．2、22．8肛g／mL的系
列溶液。按上述色谱条件分别进样，测定峰面积。以
峰面积为纵坐标，以质量浓度为横坐标进行线性回
归，得回归方程Y一529．44+32393．50X，r一
0．999，表明拢牛儿酮进样量在1．9～22．8弘g与
峰面积有良好线性关系。
2．7精密度试验：取同一供试品溶液20肛L，按上
述色谱条件进行测定，重复进样5次，测定拢牛儿酮
峰面积，结果RSD为0．18％。
2．8 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液20
“L，按上述色谱条件测定，每隔2h进样一次，测定
峰面积，连续测定6次，结果RSD为0．81％(以一
6)，表明样品在10h内稳定。
2．9重现性试验：取同一批样品内容物，精密称取
5份，分别按供试品溶液制备方法平行制备，各精密
吸取20弘L，按上述色谱条件测定，该样品中栊牛儿
酮平均质量分数为70肛g／g，RSD为2．26％(咒一5)。
2．10加样回收率试验：精密称取含栊牛儿酮
70．02弘g／g的样品内容物6份，各约1．5g，分别精
密加入760>g／mL的栊牛儿酮对照品贮备液约
0．14mL，按供试品溶液制备方法制备，并按上述色
谱条件测定，计算回收率。结果平均回收率为
96．9％，RSD为1．09％。
2．11样品测定：精密称取样品内容物按供试品溶
液制备方法制备，分别精密吸取对照品溶液和供试
品溶液各20肛L，按上述色谱条件测定峰面积，计算
样品中栊牛儿酮的质量分数，结果见表1。
表1 清肌瘤胶囊中栊牛儿酮的测定结果(万一3)
Table1 DetermiantionofgermacroneinQingjiliu
Capsule(万一3)
3讨论
对中药制剂中莪术的有效成分栊牛儿酮的测定
方法鲜有报道，本法是参考了《中国药典》2005年版
一部莪术油项下的方法经改进后建立的。
比较不同流动相系统，如采用乙腈一水(35：
65)，但栊牛儿酮对照品保留时间过长且峰形不理
想；采用文献报道的甲醇一水(80：20)EH，由于样品
成分复杂，各组分分离效果均不佳。结果表明，以乙
腈 水(40：60)为流动相不仅保留时间缩短，且分离
也最为理想。
Reference：
[1]YouJ，YuYW，LiQP，et“．Determinationofzedoary
turmericoilmicrosphereEJ]．ChinTraditPatMed(中成药)，
2005．27(】)：25—28．
HPLC法测定黄金菊含片和胶囊中荭草苷
尹秀莉，张贵君+
(北京中医药大学中药学院，北京100102)
黄金菊含片及胶囊系采用毛茛科植物金莲花
TrolliuschinensisBunge的干燥花为君药，配伍另外
两种清热解毒的中药制成的制剂，临床上主要用于
治疗上呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎等。金莲花具有
很好的抗菌、抗病毒作用口~33，其所含的黄酮类化合
物荭草苷(orientin)为主要活性成分。本研究采用高
收稿日期：2005—11-10
作者简介：尹秀莉(1972一)，女，黑龙江人，硕士，主管药师，1995年毕业于黑龙江中医学院，工作于黑龙江海员总医院，研究方向为中药
鉴定方法学。E—mail：xiuliyin@163．com
*通讯作者张贵君E—mail：guijunzhang@163．corn
、氅厂I}生。
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1025·
效液相色谱法测定黄金菊含片及其胶囊中的荭革苷，
结果满意，为其制剂的质量控制提供了科学依据。
l仪器与材料
Agilent1100型高效液相色谱仪，四元泵
DEll401967(UV检测器)，在线脱气机。
荭草苷对照品为自制，TLC及HPLC检测均为
单峰，经过UV、IR、测试鉴定为荭草苷，经DAD—
HPLC检测，纯度因子为999．964，说明此荭草苷峰
为纯峰。
黄金菊胶囊、黄金菊含片均为北京宏泰康达医
药科技有限公司提供。乙腈为色谱纯，磷酸为分析
纯，水为娃哈哈纯净水。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：HypersilODS2C。。柱(250
mm×4．6mm，5弘m)；流动相：0．1％磷酸水溶液一
乙腈(83：17)；体积流量：1．0mL／min；检测波长
345nm；进样量：10,uL；柱温：室温。
2．2线性关系考察：用80％甲醇制成荭草苷对照
品溶液(19．6p．g／mL)。分别精密吸取4、6、8、10、12
弘L，注入液相色谱仪，测定。以色谱峰面积值对荭草
苷溶液的质量浓度进行回归，得回归方程为：Y一
25．5220X+4．6064，，．一1．000。结果表明：荭草苷
在0．0784～O．2352,ug与峰面积呈良好线性关系。
2．3供试品溶液的处理方法选择
2．3．1溶剂的考察：精密称取样品180mg，分别用
水、50％甲醇、80％甲醇、甲醇定容至25mL，超声5
min，滤过，测定，结果以荭草苷峰面积计50％甲醇
和80％甲醇的溶出率无显著差异，而比水和甲醇的
溶出率高，差异显著。故选用80％甲醇为试验溶剂。
A
2．3．2超声时间的考察：精密称取供试品180mg，
于25mL80％甲醇中，分别超声5、10、20min，滤
过，测定，结果5、10、20min的荭草苷峰面积平均值
无显著性差异，故提取超声时间确定为5min。
2．4供试品溶液及阴性对照溶液的制备：分取含片
细粉约180mg、胶囊细粉约90mg，精密称定，分别
加80％甲醇25mL，密闭超声5min，滤过，滤液作
为供试品溶液。同法制备缺金莲花阴性对照溶液。
2．5 精密度试验：取同一对照品溶液10弘L，连续
进样5次，测荭草苷峰面积，其RSD为0．27％。
2．6稳定性试验：精密吸取于室温下放置的同一份
供试品溶液10弘L，分别于0、2、4、6、8h进样，测定。
结果含片中荭草苷峰面积的RSD为1．17％。胶囊
中荭草苷峰面积的RSD为0．95％。结果表明供试
品溶液均在8h内稳定。
2．7重现性试验：取同一批样品，5份，制备供试品
溶液，进样测定。结果含片中荭草苷峰面积的RSD
为0．80％；胶囊中荭草苷峰面积的RSD为1．06％。
2．8 回收率试验：采用加样回收法。分别精密称取
样品适量(约相当于荭草苷250ug)，共5份，分别精
密加入12mL(19．6ug／mL)荭草苷对照品溶液，作
为供试品溶液，进样，测定。结果含片的平均回收率
为99．97％，RSD为0．82％；胶囊的平均回收率为
100．87o／6，RSD为1．47％。
2．9样品的测定：分别吸取荭草苷对照品溶液和供
试品溶液各10弘L，按上述荭草苷色谱条件分别进
样测定。荭草苷的保留时间为9．374min，供试品溶
液在该保留时间有特征吸收峰，阴性对照在此无吸
收，测定结果见图1，表1。
一血一：丛L△Ⅱ二＆厶、二L～一
r／rain
*一荭草苷
*一orientin
图1 荭草苷对照品(A)、黄金菊含片(B)，黄金菊胶囊(c)和金莲花阴性对照(D)
Fig．1HPLCChromatogramsfo ientinreferencesubstance(A)，HuangjinjuBuccalTablets(B)，
HuangjinjuCapsules(C)，andnegativesample(D)
表1 黄金菊含片和胶囊中荭草苷的测定结果(辟一3)
TableOrientininHuangjinjuBucealTablets
andCapsules(一一3)
批号 ]lgff／(mg·g-1)RSD／g批号 荭草苷／(mg·g-1)RSD／g
含片040101 2．7 2．1l胶囊040101 5．3 2．30
040102 2．7 2．81 040102 5．4 3．09
040103 2．6 2．69 040103 5．3 2．51
3讨论
笔者是根据制剂的HPLC图谱(图2)制定这一
质量标准的。从图2可以看出绿原酸峰、荭草苷峰和
黄芩苷峰是面积较大的峰，其中荭草苷峰相邻在其
之前的峰是一不纯的“馒头”峰，是金莲花中量比荭
草苷略少的未知峰，本实验室对其单体的分离测定
和药效研究尚在进行中，如果可能它将是进一步控
制金莲花质量的另一指标。
万方数据
·1026· 中草蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
黄芩苷
绿原酸
l
8 鳋草苷
^ 肌 ^l一．。．^
0 25 5 75 10 125 15 175
，／min
图2黄金菊含片的HPLC图谱
Fig·2HPLCChromatogramofHuangjinju
BuccalTablets
References：
[1]LinQF，FengSQ，LiYL，eta1．Studyontheantibacterial
andantiviralactivitycompositionsofTrolliuschinensisBunge
[J]．JZhejiangU iv：Sci(浙江大学：科学版)，2004，31
(4)：412—415．
E23WenYH，LinYS，HuangH，eta1．Studyontheantiviral
activityof hesolutionextractedfromTrolliuschinensisBunge
withwater[J]．ChinJMicrobiollmmunol(中华微生物学和
免疫学杂志)，1999，19(1)：21．
[33LiYL．Antiviralactivitiesofflavonoidsanorganicacidfrom
TrolliuschinensisBunge[J]．JEthnopharmacol，2002，79：
356．
大孔吸附树脂分离纯化侧柏叶中槲皮苷的研究
杨庆胜，张京健，张龙海，贾春华，樊小勇
(河南仲景保健药业有限公司，河南郑州450001)
侧柏叶是柏科植物侧柏Platycladusorientalis
(L．)Franco的干燥嫩枝及叶，具有凉血止血、生发
乌发之功效，用于吐血衄血、咯血、便血、崩漏下血、
血热脱发、须发早白等症[1]。所含主要成分为黄酮类
化合物、鞣质和挥发油类等，其中镇咳祛痰和止血主
要有效成分为黄酮类化合物中的槲皮苷类[2’3]。
大孑L吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂，具有
吸附快、解附快、吸附容量大、易于再生等特点，已广
泛应用于天然产物的分离和富集。侧柏叶中黄酮类
成分结构比较复杂，一般方法较难将它们分开，目前
侧柏叶总黄酮提取物常用的分析方法多为以芦丁为
对照品采用紫外分光光度法测定总黄酮[43，因芸香
苷(芦丁)与侧柏叶中槲皮苷的结构上有所不同，在
吸收波长上也有所差异，不能正确地反映出侧柏叶
总黄酮提取物的内在质量。本实验选用高效液相色
谱法，以槲皮苷为指标，对用大孑L树脂分离纯化侧柏
叶总黄酮进行测定，以确定大孔树脂分离纯化的工
艺条件。实验表明，该法准确、灵敏、快速简便，所选
指标槲皮苷能够准确地反映侧柏叶总黄酮提取物的
内在质量，所优选的工艺条件具有实际意义。
1仪器与试剂
美国Agilent1100型高效液相色谱仪，
HPl050／3D化学工作站；玻璃色谱柱(280mm×2
mm)；吸附树脂均购自南开大学化工厂；槲皮苷对
照品(中国药品生物制品检定所提供，批号111538—
200301)；色谱分析用甲醇为色谱纯，其他试剂均为
分析纯，水为重蒸馏水(自制)，侧柏叶药材购自河南
省药材公司，经鉴定符合《中国药典92005年版一部
侧柏叶项下规定。
2方法与结果
2．1树脂的预处理：各吸附树脂经筛选后，用乙醇
浸泡12h，倾倒掉上层乙醇，然后加入吸附柱中，待
树脂装好后，用乙醇3BV／h通过树脂层，至流出液
加水不呈白色浑浊为止，并用水以同样速度洗涤乙
醇，然后用2BV2％HCI溶液以2．6mL／min通过
树脂层，并浸泡4h后用水以同样速度洗至流出液
pH值呈中性，最后用2BV2％NaOH溶液以2．6
mL／min通过树脂层，并浸泡4h后，用水以同样速
度洗至流出液pH值呈中性，滤取，室温晾干，即得。
以95％乙醇湿法装柱，继续用乙醇在柱上流动清洗
至流出液乙醇一水(1：5)不呈白色为止，然后用蒸馏
水洗至无醇味，备用。
2．2 上柱液的制备：取侧柏叶药材粗粉，用10倍
70％乙醇提取2次，每次2h，药液滤过，合并，减压
浓缩(每毫升药液相当于生药1g)。
2．3槲皮苷的HPLC法测定[1]
2．3．t 色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅
烷键合硅胶为填充剂，以甲醇一0．01mol／L磷酸二
收稿日期：2005—10-25
作者简介：杨摩胜(1969一)，男!郑州人，主管中药师，执业药师，1993年毕业于河南中医学院中药系，一直主要从事中药的新产品开发，
发表科研论文10余篇。
万方数据
HPLC法测定黄金菊含片和胶囊中荭草苷
作者： 尹秀莉， 张贵君
作者单位： 北京中医药大学中药学院,北京,100102
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 1次

参考文献(3条)
1.Lin Q F;Feng S Q;Li Y L Study on the antibacterial and antiviral activity compositions of Trollius
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2.Wen Y H;Lin Y S;Huang H Study on the antiviral activity of the solution extracted from Trollius
chinensis Bunge with water[期刊论文]-中华微生物学和免疫学杂志 1999(01)
3.Li Y L Antiviral activities of flavonoids and organicacid from Trollius chinensis Bunge[外文期刊]
2002(3)

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9. 图雅.张贵君.刘志强.王淑敏 传统蒙药草乌炮制原理的电喷雾质谱研究[期刊论文]-中药材2008,31(2)
10. 马琳.王永林.王爱民.兰燕宇.李勇军.何迅.黄勇.MA Lin.WANG Yong-lin.WANG Ai-min.LAN Yan-yu.LI Yong-
jun.HE Xun.HUANG Yong 荭叶心通软胶囊中主要活性成分的大孔吸附树脂分离纯化工艺研究[期刊论文]-中国中药
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引证文献(1条)
1.曲彩红.韩颖.田嘉铭.颜娟.王书华.安芳 HPLC测定金莲花中牡荆苷和荭草苷的含量[期刊论文]-河北北方学院学
报（自然科学版） 2009(6)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200607026.aspx