全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
得两种成分的量已无差别，说明已提取完全。故确定
最佳提取条件为：95％EtOH索氏提取10h。
3．4试验结果表明，不同产地丹皮中丹皮酚和去甲
丹皮酚的量存在较大差异。丹皮酚的量以安徽毫州
丹皮最高，而去甲丹皮酚的量以湖南邵东的丹皮最
高。去甲丹皮酚亦为苯乙酮类化合物，其药理活性研
究尚未见文献详细报道，但从结构考虑，应与丹皮酚
具有相似的药效作用，因此，同时对丹皮中丹皮酚和
去甲丹皮酚进行定量测定，有益于完善丹皮药材的
质量评价体系。
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RP—HPLC．法测定薯蓣属植物中原薯蓣皂苷
刘中博1，王铁杰2，文琪琚3，陈晓辉1，李军2，毕开顺H
(1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016；2．深圳市药品检验所，深圳 518029；
3．广东药学院，广东广州 510000)
薯蓣属DioscoreaL．是薯蓣科中最大的一属，
分布于全球的热带和温带，我国和墨西哥为主产国。
其中穿山龙D．，z?缈onicaMak．，黄山药D．pan—
thaicaPrainetBurk．和山药D．oppositaThunb．
均收载于《中国药典》2005年版一部，均以根茎入
药。穿山龙和黄山药有祛湿、清热解毒的功效。穿山
龙用于治疗风湿性关节炎，腰腿疼痛、麻木，大骨节
病，跌打损伤，闪腰岔气，慢性支气管炎，咳嗽气
喘[1]。黄山药可治胃病、风湿性心脏病、风湿性关节
炎、跌打损伤、牛马炭疽等病[2]。山药可补脾养胃，生
津益肺，补。肾涩精。用于脾虚食少，久泻不止，肺虚喘
咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴[1]。
薯蓣属植物有效成分主要为甾体皂苷类。其中
原薯蓣皂苷对人类白细胞HL一60的DNA、RNA和
蛋白质的合成及细胞生长有抑制作用[3]。同时，胡柯
等n1也发现白血病、结肠癌和前列腺癌细胞株对原
薯蓣皂苷最敏感，而卵巢癌细胞株最不敏感。经
COMPARE程序分析发现，在美国国家癌症研究所
(NCI)抗癌药筛选数据库中，没有化合物的细胞毒
作用与该成分相似，表明该化合物可能有新的抗癌
机制。原薯蓣皂苷属于呋喃甾烷型皂苷，这类皂苷含
糖量高、极性大、结构复杂，难以分离和纯化。目前为
止，对其的研究多停留在药理活性方面，没有对这一
类皂苷的定量测定方法，因此建立其测定方法是非
常必要的。本实验首次对原薯蓣皂苷(protodioscin)
进行定量测定，该方法不仅灵敏度高、专属性强、操
作简单易行，而且将质量控制与活性成分相结合，为
该属植物的质量控制提供了新思路、新尝试。
1仪器与试药
美国Waters2695型高效液相色谱仪，2996型
二级管阵列检测器和Empower工作站。
原薯蓣皂苷对照品自制，经IR、MS、1H—NMR、
13C—NMR确定结构为原薯蓣皂苷[5]。质量分数为
99．5％。乙腈为色谱醇，水为重蒸水(自制)，乙醇为
分析醇。
3种药材分别购自沈阳天益堂药店、内蒙古万
民药店、深圳市海王星辰连锁药店、辽宁省铁岭市药
材有限公司、辽宁省清原县龙胆草研究所、吉林靖宁
县综艺土特产购销中心及不同产地的药业公司，经
沈阳药科大学孙启时教授鉴定。产地见表1。药材经
40℃干燥后，粉碎过24目筛，备用。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为XterraTMODS(250mm×
4．6mm，5um)，以乙腈一水(27：73)为流动相，体积
收稿日期：200510-05
基金项目：深圳市无偿资助科技项目(S04055)
作者简介：刘中博(1980)，女，辽宁铁岭人，在读硕士研究生，从事药物分析研究。
*通讯作者毕开顺Tel：(024)23928487Fax：(024)21896050E—mail：bikaishun@yahoo．corn
万方数据
·1098· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
流量1．0mL／min，柱温35℃，检测波长203am。理
论塔板数以原薯蓣皂苷峰计算，不低于1800。原薯
蓣皂苷峰与相邻峰之间分离度大于1．5，对称因子
0．95～1．05。
2．2对照品溶液的制备：精密称取10mg原薯蓣
皂苷对照品，置于10mL量瓶中，用水溶解并稀释
至刻度，摇匀，即得。
2．3供试品溶液的制备：称取药材粉末约0．5g，置
具塞100mL锥形瓶中，加入10倍量35％乙醇，密
塞，称质量，超声处理30rain，放冷再称质量，用
35％乙醇补足减失的质量。提取液滤过后蒸干，残渣
用20mL水溶解，定量转移至125mL分液漏斗中，
加入醋酸乙酯萃取2次，每次20mL，收集水层，加
入水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，收集正丁醇
层，挥干，残渣加水溶解并定容至25mL量瓶中，摇
匀，微孑L滤膜滤过，取续滤液备用，即可。
2．4标准曲线的绘制：精密吸取2．2项下的对照品
溶液0．2、0．5、1．0、2．0、3．0、4．5mL置于10mL量
瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，按上述色谱
条件测定峰面积。以对照品峰面积为纵坐标，进样量
(／lg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=
2．231×105X一1．428×104，r一0．9999。结果表明
原薯蓣皂苷在0．4～9．0／lg与峰面积线性关系良好。
2．5 精密度试验：精密吸取上述对照品溶液20
肛L，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积，
RSD为0．2％(咒一6)。
2．6重现性试验：取同一批样品，精密称取6份，按
2．3项下操作，依上述色谱条件测定原薯蓣皂苷的
量，RSD为2．4％(咒一6)。
2．7稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，在室
温下放置，分别于0、2、4、6、8、10、12、24、48、72h测
定原薯蓣皂苷的量，It内RSD为0．3％(行一6)，日
间RSD为1．0％(，z一4)，样品溶液在72h内稳定。
2．8 回收率试验：精密称取9份已知含原薯蓣皂苷
A
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量的药材粉末0．25g，依次加入低、中、高3种质量
浓度原薯蓣皂苷对照品溶液，按2．3项下操作。在上
述色谱条件下测定，计算平均回收率为100．1％，
RSD为1．1％(咒一9)。
2．9样品测定：分别取供试品溶液和对照品溶液，
在上述色谱条件下测定，以外标法计算各样品中原
薯蓣皂苷的量，结果见表1。代表性色谱图见图1。
3讨论
3．1 呋喃甾烷型皂苷是螺旋甾烷型皂苷的合成前
体，所以也被称为原皂苷(protosaponin)[6]。呋喃甾
烷型皂苷很容易在酸、酶或受热的作用下水解。失去
表1薯蓣属3种植物中原薯蓣皂苷(开一3)
Table1 Protodioscininthreespecies
ofDioscoreaL．(n一3)
il
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⋯且是
15 0 5 10
A一对照品B一穿山龙
㈨
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；；；；!L—．—．．二譬=二二—z：f：：一．
A—referencesubstanceB—D．nipponicaC—D．panthaicaD—D．opposita1-protodioscin
图1对照品及样品色谱图
Fig．1Chromatogramsfreferencesubstancedsamples
万方数据
中草芮ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1099·
26一位葡萄糖基，F一环自动环合得到相应的次级皂
苷，所以应避免加热。而且C一22一OH易被甲基化，不
能用甲醇提取、溶解。因此本研究选择超声提取，重
蒸水溶解，乙腈为流动相。
3．2采用超声提取法，考察了水，35％、65％、95％
乙醇作为提取溶剂的提取效果，发现以35％乙醇作
为溶剂，原薯蓣皂苷提取效率高，干扰峰较少，分离
度较好，故采用35％乙醇作为提取溶剂。样品经溶
剂提取后，考察了直接进样、正丁醇一步萃取后进
样、醋酸乙酯一正丁醇两步萃取后进样，发现醋酸乙
酯一正丁醇两步萃取后进样，杂质干扰少，重现性好。
3．3该属植物中所含甾体皂苷类成分种类繁多，结
构相似，在紫外区处于末端吸收，分离难度较大。对
于液相色谱条件，曾考察了不同填料的色谱柱，不同
比例的甲醇一水、乙腈一水、乙腈一醋酸水溶液、乙腈一甲
醇一水等流动相，结果表明以XterraTM0DS为固定
相，乙腈一水(27：73)为流动相，分离效果最好，灵敏
度高。通过二极管阵列检测器检测，色谱峰纯度良
好，分析方法具有专属性。
3．4 首次采用RP—HPLC方法测定穿山龙及其同
属植物中原薯蓣皂苷，结果显示穿山龙富含原薯蓣
皂苷，质量分数为11．24～27．05mg／g，黄山药次
之，山药较少。该方法简便、快速，可用于该生药、提
取物及其制剂的质量控制。
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浙产猕猴桃属植物根、茎、叶中多糖的比较
吴瑾瑾1，石森林2，张小寅2，魏颖慧2
(1．杭州第四医院，浙江杭州 310003；2．浙江中医学院，浙江杭州310053)
近年来，猕猴桃属(ActinidiaLindl．)药用植物
资源种类及药理作用日益受到国内外医药界的重视，
其中浙江产的主要有中华猕猴桃A．chinensis
Planch．、镊合猕猴桃A．valvataDunn、大籽猕猴桃
A．macrospermaC．F．Liang、毛花猕猴桃AP一一
anthaBenth．、软枣猕猴桃A．arguta(Sieb．et
Zucc．)Planch．etMiq 、长叶猕猴桃A．hemsleyana
Dunn、葛枣猕猴桃A．polygama(Sieb．etZucc．)
Maxim．、异色猕猴桃A．callosaLindl．var．discolor
C．F．Liang等，其中前4种在浙江资源相对较丰富，
药材主要有藤梨根(中华猕猴桃的根)和猫人参(镊合
猕猴桃、大籽猕猴桃的根)。现代药理研究发现猕猴桃
属多糖成分具有抗肿瘤、增强免疫机能、消除活性氧自
由基等作用，且无副作用。随着其药用价值的凸现，猕
猴桃属药材利用率增加，由于药用部位为根，造成其自
然资源人为破坏严重，为了科学合理地利用药材资源，
收稿日期：2005—12—11
基金项目：浙江省自然科学基金(课题编号300431)
笔者对浙江主产的猕猴桃属植物中华猕猴桃、镊合猕
猴桃、毛花猕猴桃和大籽猕猴桃的根、茎、叶含多糖的
量进行比较，以寻找新的药用部位。
1仪器、材料和试剂
1．1 仪器：万能粉碎机(河北黄骅齐家务科学仪器
厂)；CQ250超声清洗器(上海船舶电子设备研究
所)；国家统一标准筛(浙江上虞华康化验仪器厂)；
电子天平ARll40／C(奥豪斯)；751一GW分光光度
计(安捷伦科技上海分析仪器有限公司)；DKS一24
型电热恒温水浴锅(沈阳中新电器厂)。
1．2材料和试剂：药材来自猕猴桃科猕猴桃属的镊
合猕猴桃、大籽猕猴桃、毛花猕猴桃、中华猕猴桃，均
产自浙江，由罗国海副教授鉴定；D(+)葡萄糖购自
中国生物制品检定所。硫酸(中国浙江衢州巨化试剂
有限公司)、碳酸氢钠(中国上海虹光化工厂)、苯酚
(浙江杭州双林化工厂)，以上均为分析纯；铝片
万方数据
RP-HPLC法测定薯蓣属植物中原薯蓣皂苷
作者： 刘中博， 王铁杰， 文琪珺， 陈晓辉， 李军， 毕开顺
作者单位： 刘中博,陈晓辉,毕开顺(沈阳药科大学,药学院,辽宁,沈阳,110016)， 王铁杰,李军(深圳市
药品检验所,深圳,518029)， 文琪珺(广东药学院,广东,广州,510000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 3次

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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200607056.aspx