全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1723·
质量的最佳培养基是1／2M8(20％香蕉提取物)+
LaCl320mg／L+SmCl310mg／L+YbCl30mg／L。3
种稀土元素对叶绿素a的量的影响都不显著。但
La3+对叶绿素b的影响却极其显著，能显著提高它
的量；Yb3+对叶绿素b的影响显著，也能显著提高
它的量，这与杨永刚等口41报道的Yb3+能提高西蒙
洛托中叶绿素b的量相一致。因此笔者推测：稀土元
素镧(I。a3+)之所以能促进铁皮石斛试管苗增质量
与镧(La3+)从一定的角度影响了铁皮石斛的光合
作用的效率是分不开的。试验中发现，高质量浓度的
SmCl。和YbCl。的配比试验号，如3、4、7、8、10、12号
植株长得相对较矮小，叶片也窄小，可见高质量浓度
的SmCl。和YbCl。的组合会抑制石斛的增高。胡勤
海等口1报道稀土对植株叶绿素的量和光合速率有明
显的促进作用，并以单一稀土元素及喷施方法增效
作用较好。稀土元素对光合作用影响的机制尚无明
确的报道。
试验表明：提高铁皮石斛试管苗多糖量的最优
培养基是l／2MS(20％香蕉提取物)+LaCl。10
mg／L+SmCl320mg／I。+YbCl320mg／L。稀土元
素镧(La计)对石斛多糖的量有显著的影响。据报
道，Hoagland等用含有LaCl。的营养液栽培黄瓜植
物，黄瓜植物根系中稀土量逐渐增加，同时引起根系
伤流液的溢泌量也随之增加。镧有促进NO。叫还
原、氮素同化和氨基酸的合成与代谢的作用[15|。因
此，笔者推测稀土能够提高石斛多糖的量可能与稀
土增加了石斛根系的伤流量从而提高了对有机碳源
的吸收和转化有关。稀土元素对石斛的生理效应的
分子机制还有待于进一步研究。
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蓬子菜药材HPLC指纹图谱研究
马英丽，卢卫红，崔明宇，杨 帆，史国玉，于晓敏
(黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨150040)
摘要：目的建立蓬子菜药材的HPLC指纹图谱。方法以香叶木苷为内标物，采用高效液相色谱法分析不同产
地10个蓬子菜样品，并进行相似度计算。色谱条件：HypersilODS2柱(200mm×4．6aim，5肛m)；流动相为甲醇一
收稿日期：2006—01—12
基金项目：黑龙江省科技攻关计划项目(20031101)
作者筒介：马英丽，女，教授，博士生导师，研究方向为中药活性成分及质量标准化研究。
Tel：(0451)82196178E—mail：mylt666@sina．eom
万方数据
·1724· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11,El
0．4％醋酸溶液梯度洗脱；体积流量为1．0mL／mini检测波长340nmI柱温：26℃。结果本研究建立了具有19
个共有峰的蓬子菜药材指纹图谱，各色谱峰分离较好，达到指纹图谱要求。结论本方法重现性好，可用于不同产
地蓬子菜药材的指纹图谱的测定和质量评价。
关键词：蓬子菜药材；高效液相色谱；指纹图谱
中盈分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)11—1723—04
HPLCFingerprintofHerbaGaliiVeri
MAYing—li，LUWei—hong，CUIMing—yu，YANGFan，SHIGuo—yu，YUXiao—min
(CollegeofPharmacy，HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine，Harbin150040·China)
Abstract：ObjectiveToestablishtheHPLC—FPCof风rbaGaliiVeri．MethodsT analyzeten
samplesfromvarioushabitatsbyHPLCmethod．Thesimilaritydegreewascalculated，takingdiosminas
theinternalstandard．Conditions：Column，HypersilODS2(200mm×4．6mm，5pm)；mobilephas ：
mixtureliquidofCH30H一0．4％CH3CoOHinagradientmode；flowingrate，1．0mL／min；wavelength：
340nm；columntemperature，26‘C．ResultsTheHPLC—FPCofHerbaG liiVeri．wassetupby
establishing19commonpeaks．Thepeaksinthespectrumwereallseparatedperfectly，whichmethe
regulationofHPLC—FPC．ConclusionThemethodhasgoodreproducibility，andcanbeusedinsettingup
HPLC—FPCandqualitycontrolofHerbaGaliive矗．fromvarioushabitats．
Keywords：HerbaGaliiVeri．；HPLC；fingerprint
蓬子菜系茜草科猪殃殃属植物蓬子菜Galium
verurnL．的干燥全草，别名黄花米、疔毒蒿、鸡肠
草。国内外分布广泛，民间用药历史悠久。近年来，
经临床实践发现，蓬子菜及其复方制剂对治疗血栓
闭塞性脉管炎具有独特的疗效[1~3]。以往文献报道
仅以绿原酸的量作为蓬子菜的质量控制指标，经本
课题的药效学研究结果表明，蓬子菜治疗血栓有效
部位为黄酮类成分，因此仅以绿原酸作为指标不能
全面评价蓬子菜的药材质量。同时，由于受产地、气
候和生态环境的影响，不同来源蓬子菜所含成分有
一定的差异。目前，指纹图谱已经成为国际公认的控
制中药与天然药物质量的有效手段，能从整体上控
制质量，因此本实验采用HPLC指纹图谱技术对蓬
子菜药材进行了研究，以期对蓬子菜药材的质量控
制提供有效的方法。
1仪器与试药
Waters600E一2487高效液相色谱仪；甲醇(色
谱纯，DIMA公司)；醋酸(分析纯，天津市化学试剂
六厂)；自制重蒸水。
蓬子菜10个样品采自黑龙江省不同地区及其
他省区(见表1)，经黑龙江中医药大学于加宾教授
鉴定为蓬子菜GaliumverumL．
对照品：香叶木苷(自制经HPLC分析，质量
分数为98．85％)。
2方法与结果
2．1对照品溶液的制备：精密称取香叶木苷对照品
适量，加甲醇溶解，配成0．2mg／mL溶液，即得。
2．2 供试品溶液的制备：取蓬子菜药材粉末(20
目)20g，70％乙醇回流提取2次，减压浓缩，浸膏
加水溶解，过大孔树脂柱纯化，洗脱液减压浓缩，加
适量甲醇溶解，稀释至100mL量瓶中，精密吸取5
mL，稀释于25mL量瓶中，作为供试品溶液备用
(相当于原药材40g／L)，临用前过0．45肛m的微孔
滤膜。
2．3色谱条件：色谱柱：HypersilODS2(200mm×
4．6mm，5肛m)；检测波长340nm，柱温为26℃，体
积流量1．0mL／min时，用甲醇一0．4％醋酸系统梯
度洗脱，各色谱峰分离度好，保留时间适中。
2．4方法学考察
2．4．1精密度试验：同一供试品溶液连续进样5
次，其相对保留时间RSD小于3％，主要共有峰面
积的RSD不超过5％，表明仪器精密度良好。
2．4．2重现性试验：同一产地蓬子菜样品5份，分
别按供试品溶液制备项下操作并测定，其相对保留
时间RSD小于3％，主要共有峰面积的RSD不超
过5％，表明重现性良好。
2．4．3稳定性试验：供试品溶液，分别在0、2、4、6、
8、12h检测，其相对保留时间RSD小于3％，主要
共有峰面积的RSD不超过5％，说明供试品溶液至
少在12h内稳定。
2．5蓬子菜样品测定
2．5．1标准峰位的标定；分别取对照品溶液与供试
品溶液各20弘L，注入液相色谱仪，通过与对照品色
谱比较，对样品图中色谱峰进行标定。见图1。
万方数据
中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1725·
2．5．2共有峰确定：将10批蓬子菜样品的供试品
溶液按以上色谱条件进样分析，记录色谱图得到具
有19个共有峰的指纹图谱。见图2。
r，mm
圈1 香叶木苷(A)和样品(B)HPLC指纹圈谱
Fig．1HPLCFingerprintofdiosmin(A)andsample(B)
扩—1F—1矿—夏r—丽—■万—■万—]o
r／min
圈2 10个不同产地样品HPLC指纹圈谱
Fig．2HPLCFingerprintoftensamples
fromvarioushabitats
2．5．3共有峰的峰号(相对保留时间)见表2。
10
2．5．4相对峰面积值：1、2、3、4号峰未达完全基线
分离，用四者峰面积之和计算相对峰面积，同样6与
7号，9与10号，18与19号峰未达完全基线分离，也
用峰面积之和计算相对峰面积。
(1+2+3+4)、5、(6+7)、8、(9+10)、11、12、
13、s、15、16、17、(18+19)峰相对峰面积为(4．29～
26．79)、(0．12～0．43)、(1．13～4．20)、(1．44～
3．90)、(6．67～11．60)、(0．63～4．44)、(0．97～
1．92)、(0．45～1．88)、(41．77～56．07)、(1．09～
5．10)、(0．93～8．36)、(1．86～7．73)、(0．77～
2．79)。
2．5．5指纹图谱相似度的计算：应用大连物化所王
龙星的中药指纹图谱相似度计算软件(夹角余弦
法)，选用样品5为标准(产地：哈尔滨郊区，本课题
前期药效学、化学研究中选用该产地的蓬子菜)。对
蓬子菜的指纹图谱进行相似度评价，结果见表1、2。
表1 不同产地lO个样品的指纹图谱相似度
Table1 Similaritydegreesoftensamples
fromvarioushabitats
样品号 产地 相似度／％ 样品号 产地 相似度／％
1 大兴安岭88．8 6 千山 85．7
2 本校药圃 95．6 7 赤峰 85．7
3 宾县80．2 8 泰安81．3
4 镜泊湖 91．4 9 长春 75．4
5 哈尔滨 i00．0 10 二龙山 92．7
衰2 10批蓬子菜药材共有指纹峰的相对保留时间
Table2 RelativeretentionmeofcommonpeaksforfingerprintoftebatchesofHerbaGaliiVeri
共有峰 相对保留时间 RSD／
峰号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
⋯’4
％
l 0·0968 0．0977 0．0967 0．0866 0．0914 0．0974 0．0949 0．0937 0．0934 0．0942 0．0943 3．58
2 0·1297 0．1330 0．1296 0．1254 0．1297 0．131 0．1288 0．1264 0．1268 0．1270 0．1287 1．83
3 0·1772 0．1880 0．1770 0．1730 0．1771 0．1802 0．176 0．1736 0．1745 0．1743 0．177Z 2．47
4 0·2543 0．2746 0．2541 0．2496 0．2561 0．2616 0．2557 0．2491 0．2549 0．2524 0．2562 2．87
5 0·4912 0．4990 0．4905 0．4659 0．4910 0．5038 0．4831 0．4768 0．4691 0．4869 0．4857 2．51
6 0·6191 0．6217 0．6182 0．5894 0．6182 0．6215 0．6413 0．6133 0．5695 0．6144 0．609 2．79
7 0-6413 0．6539 0．6403 0．6125 0．6399 0．6364 0．6413 0．6341 0．6343 0．6359 0．6374 1．66
8 0·6891 0-7002 0．6956 0．6328 0．6888 0．6825 0．6906 0．6783 0．6852 0．6840 0．6827 2．73
9 0·7777 0．7541 0．7807 0．7142 0．7778 0．767l 0．7672 0．7468 0．7409 0．7420 0．7569 2．81
10 0·8184 0．8375 0．8172 0．7733 0．8184 0．8026 0．8074 0．7767 0．7756 0．7761 0．8003 2．90
11 0·8469 0·8568 0．8457 0．8174 0．8473 0．8458 0．8364 0．8145 0．8337 0．8113 0．8356 1．91
12 0·8901 0．8990 0．8888 0．841 0．8908 0．8700 0．9029 0．8460 0．8440 0．8437 0．8710 2．80
13 0·9486 0．9425 0．9471 0．8914 0．9486 0．9400 0．933 0．9130 0．8924 0．8926 0．9250 2．69
14 I·000 1·0000 1．000 1．0000 1．000 I．0000 1．000 1．000 1．000 1．000 1．000
15 1·0846 1·0970 1．0831 1．0575 1．0849 1．1172 1．0959 1．0894 1．0758 1．0721 1．0858 1．48
16 l·1636 1·1623 1．1631 1．1150 1．1625 1．1955 1．161 1．139 I，1576 1．1593 1．1580 1．75
17 1-3190 1·3074 1．318 1．2700 1．295 1．3387 1．3072 1．2868 1．2887 1．2897 1．302 1．54
18 1·9396 1·927 1-9403 1．8324 1．9426 1．9501 1．8979 1．8712 1．8662 1．8780 1．9046 2．15
19 2·1174 2·0283 2．1143 2．0427 2．1462 2．1320 2．078 2．0460 2．0698 2．0719 2．0847 1．95
万方数据
·1726· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
3讨论
3．1经紫外光谱扫描，该样品甲醇溶液在253、269、
340Nm处有较高吸收，通过指纹图谱对照，在340
nm处所包含的吸收峰最多，且各色谱峰分离较好。
3．2 色谱指纹图的建立，比较所有测定和记录的指
纹图谱，确定19个共有峰组成指纹图谱(见图l、
2)。整个指纹图谱按保留时间可分为3个区段，即I
区(1～4号峰)，保留时间在2．198～6．658min；Ⅱ
区(5～17号峰)，保留时间在11．742～31．697min；
Ⅲ区(18～19号峰)，保留时间在46．701～51．806
rain。3个区段中“表观丰度”最强的是第Ⅱ区，其次
是第1区、第nl区。其中14号峰是峰强度最强的色
谱峰，也是整个指纹图谱中峰高最高、积分面积最
大、相对峰面积值比较稳定的色谱峰，其色谱峰面积
占总峰面积的比例为41．77％～56．07％，且经对照
品标定14号峰为香叶木营，这与前期的药效学研究
结果相符。
3．3通过10个样品的测定，统计共有峰面积、非共
有峰总面积与总峰面积的百分比，其结果，共有峰面
积占总峰面积百分比为93．02％～98．96％，非共有
峰总面积只占1％～7％。符合指纹图谱研究的非共
有峰总面积百分LL
归为一类，为优质品(I)，相似度在70％～90％可
归为一般品(Ⅱ)，见表3。
衰3不同产地蓬子菜药材评价
Table3 EvaluationofHerbaG liiVeri
fromvaroushabitats
通过计算可以看出，不同来源样品的相似度有
所不同，虽然共有峰较多，但各共有峰的丰度不尽相
同，表现出各样品的差异性，通过指纹图谱的建立，
获取了对蓬子菜样品统一的评价依据，正确反映了
其他样品与标准样品之间的相似程度与偏离程度，
使药材质量评价更为客观。
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万方数据
蓬子菜药材HPLC指纹图谱研究
作者： 马英丽， 卢卫红， 崔明宇， 杨帆， 史国玉， 于晓敏， MA Ying-li， LU Wei-hong，
CUI Ming-yu， YANG Fan， SHI Guo-yu， YU Xiao-min
作者单位： 黑龙江中医药大学药学院,黑龙江,哈尔滨,150040
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(11)
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产物研究与开发2006,18(6)
7. 陈妍.乌莉娅·沙依提.李茜.阿吉艾克拜尔·艾萨 维药芹菜根化学成份的研究[期刊论文]-新疆中医药
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8. 冯伟.韩华迎.FENG Wei.HAN Hua-ying 五味子水溶性成分的HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中成药2006,28(4)
9. 黄月纯.张素中.魏刚.尹雪 广藿香HPLC指纹图谱共有模式的初步研究[期刊论文]-中药材2008,31(3)
10. 马英丽.胡冰.田振坤.苏连杰.MA Ying-li.HU Bing.TIAN Zhen-kun.SU Lian-jie 金莲花药材HPLC指纹图谱研
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引证文献(2条)
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2.崔明宇.冀有良.苏连杰.卢卫红.马英丽 109蓬子菜的化学成分与药理作用[期刊论文]-国外医药（植物药分册）
2008(3)
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